液相色譜儀的操作與基線問題處理及維護(hù)和修理保養(yǎng)

第第頁液相色譜儀的操作與基線問題處理及維護(hù)和修理保養(yǎng)液相色譜儀的操作與基線問題處理高效液相色譜儀適合于分別、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì)，因而廣泛為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中針對(duì)這種精密而又運(yùn)用廣泛的科學(xué)儀器。下面我們來聊一聊基線。HPLC常見的基線問題緊要有基線漂移以及基線噪音。基線漂移線漂移基線漂移是色譜工普遍碰到的問題。一般說來，機(jī)器剛起動(dòng)時(shí)，基線簡(jiǎn)單漂移，大約要30min的平衡時(shí)間，假如用了緩沖溶液、緩沖鹽，或者在低波長(zhǎng)下（220nm）平衡時(shí)間相對(duì)會(huì)比較長(zhǎng)，仍舊發(fā)覺基線漂移，原因可能有以下幾種：1、柱溫波動(dòng)掌控好柱子和流動(dòng)相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。2、流通池被污染或有氣體用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池（盡量斷開柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）。3、紫外燈能量不足更換新的紫外燈4、流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。檢查流動(dòng)相的構(gòu)成，使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑?；€噪音對(duì)于紫外檢測(cè)器,氘燈光源打開后要預(yù)熱30min以上,基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測(cè)物無關(guān)的檢測(cè)器輸出信號(hào)的隨機(jī)擾動(dòng)變化,分短期噪聲和長(zhǎng)期噪聲兩種。基線噪音（規(guī)定的）產(chǎn)生基線噪音的原因有：在流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵中有空氣；漏液；流動(dòng)相混合不完全；溫度影響（柱溫過高,檢測(cè)器未加熱）；在同一條線上有其他電子設(shè)備；泵振動(dòng)。了避開基線噪音,在正式進(jìn)樣之前,需要對(duì)流動(dòng)相脫氣；沖洗系統(tǒng)以除去檢測(cè)器或泵中的空氣；檢查管路接頭是否松動(dòng)；泵是否漏液；是否有鹽析出和不正常的噪音,如有必要,更換泵密封；用手搖動(dòng)使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑削減差異或加上熱交換器；有其他電子設(shè)備時(shí)斷開LC、檢測(cè)器和記錄儀,檢查干擾是否來自于外部,加以更正；泵振動(dòng)時(shí)在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器?；€噪音（不規(guī)定的）（1）漏液：檢查接頭是否松動(dòng),泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換密封,檢查流通池是否漏液。（2）流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成：檢查流動(dòng)相的構(gòu)成。（3）流動(dòng)相各溶劑不相溶：選擇互溶的流動(dòng)相。（4）檢測(cè)器/記錄儀電子元件的問題：斷開檢測(cè)器和記錄儀的電源,檢查并更正。（5）系統(tǒng)內(nèi)有氣泡：用強(qiáng)極性溶液清洗系統(tǒng)；檢測(cè)器內(nèi)有氣泡,清洗檢測(cè)器,在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)整器。（6）流通池污染（即使是極少的污染物也會(huì)產(chǎn)生噪音）:用硝酸清洗流通池；（7）檢測(cè)器燈能量時(shí)不足更換燈；（8）色譜柱填料流失或堵塞:更換色譜柱。（9）流動(dòng)相混合不均勻或混合器工作不正常:維護(hù)和修理或更換混合器,在流動(dòng)相不走梯度時(shí),不建議使用泵的混合裝置。高效液相色譜儀操作步驟如下：1）過濾流動(dòng)相，依據(jù)需要選擇不同的濾膜.2）對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10—20分鐘。3）打開hplc工作站（包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道，連接檢測(cè)系統(tǒng)。4）進(jìn)入hplc掌控界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。5）有一段時(shí)間沒用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。6）調(diào)整流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000、7）設(shè)計(jì)走樣方法。8）進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。9）關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。10）填寫登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。11）流動(dòng)相均需色譜純度，水用20m的去離子水。12）柱子是特別脆弱的，第一次做的方法，先不要讓液體過柱子。13）全部過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。14）壓力不能太大，可以不要超過2000psi。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)緊要分支，以液體為流動(dòng)相，接受高壓輸