高考生物一輪復(fù)習(xí) 第一編 考點通關(guān) 考點42 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用練習(xí)（含解析）-人教版高三生物試題

考點42微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、基礎(chǔ)題組1．利用選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物，通過缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基，可從土壤中分離出的微生物依次是()A．硝化細(xì)菌、放線菌、根瘤菌B．根瘤菌、青霉菌、圓褐固氮菌C．圓褐固氮菌、放線菌、硝化細(xì)菌D．圓褐固氮菌、酵母菌、硝化細(xì)菌答案D解析缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基上能生長的生物依次是自生固氮微生物、真菌、硝化細(xì)菌。根瘤菌屬于共生固氮微生物，放線菌不屬于真菌，因此只有D項符合題意。2．下列關(guān)于制備固體培養(yǎng)基時倒平板的敘述，正確的是()A．倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理B．應(yīng)將打開的培養(yǎng)皿的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿的皿蓋上C．為了防止微生物落入培養(yǎng)基，要在火焰旁進(jìn)行操作D．倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，要立即將平板倒過來放置答案C解析培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿都應(yīng)該在倒平板之前進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)皿應(yīng)該進(jìn)行干熱滅菌，培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；倒平板時，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10～20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，等培養(yǎng)基冷卻凝固后，再將平板倒過來放置，D錯誤。3．在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種如圖甲、培養(yǎng)結(jié)果如圖乙。有關(guān)敘述錯誤的是()A．接種前應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落C．接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次D．圖甲中a區(qū)域為劃線的起始位置答案D解析由圖甲可知，平板共劃線4次，每次劃線前和劃線結(jié)束后均需灼燒接種環(huán)，所以至少需要對接種環(huán)灼燒5次，C正確；由圖乙可知，圖甲中d區(qū)域為劃線的起始位置，D錯誤。4．下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是()A．利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進(jìn)行計數(shù)B．接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少答案A解析用稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以對微生物進(jìn)行計數(shù)，A錯誤；接種劃線可以將菌體分散，經(jīng)過培養(yǎng)可以得到單菌落，B正確；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌，C正確；在泡菜腌制過程中，開始亞硝酸鹽含量增加，一般腌制10天后含量開始下降，D正確。5．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，篩選過程如下圖所示。(1)進(jìn)行②過程所用的接種方法是______________。微生物篩選培養(yǎng)過程，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行____________處理，整個過程中需要進(jìn)行____________操作。(2)培養(yǎng)基一般要含有細(xì)菌生存所需的水、無機(jī)鹽、碳源和________________。(3)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放____________分解培養(yǎng)基中的淀粉，在不同菌落周圍形成大小不同的透明圈，應(yīng)挑出______________的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上。(4)分離細(xì)胞時通常用固體培養(yǎng)基，原因是________________________________________________________。(5)培養(yǎng)微生物實驗中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過__________處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案(1)稀釋涂布平板法滅菌無菌(2)氮源(3)淀粉酶透明圈大(4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選(5)滅菌6．某實驗小組為了研究不同的碳源對纖維素分解菌分解纖維素能力的影響，以稻草粉、纖維素粉和濾紙漿為纖維素來源，研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌，實驗結(jié)果如表所示。請分析回答下列問題：菌株CMC酶活性[(mg·mL)/30min]稻草粉纖維素粉濾紙漿A0.270.240.56B0.680.340.63C0.830.330.78D0.180.300.53(1)實驗室培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分除了碳源還有________________，培養(yǎng)基滅菌的常用方法為________________。接種微生物的常用方法有________________________。(2)實驗室分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基一般要加入__________，該物質(zhì)能和纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素分解菌將纖維素分解后，紅色復(fù)合物消失，形成的________的大小可作為判斷纖維素酶活性大小的依據(jù)。(3)分析表格可知，該實驗的自變量是______________，若要分解稻草粉中的纖維素，則最好選擇________(填表格中的字母)菌株。(4)通過實驗數(shù)據(jù)可以得出的實驗結(jié)論是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)氮源、水和無機(jī)鹽高壓蒸汽滅菌法平板劃線法和稀釋涂布平板法(2)剛果紅透明圈(3)纖維素的來源、菌種C(4)不同菌株對同一碳源作用產(chǎn)生的酶活性不一樣，同一菌株對不同纖維素碳源的分解能力也不一樣解析(1)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，培養(yǎng)基滅菌常用的方法為高壓蒸汽滅菌法。平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物常用的方法。(2)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。透明圈越大，說明纖維素酶活性越大。(3)該實驗研究不同的碳源對纖維素分解菌分解纖維素能力的影響，并研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌，因此自變量為纖維素的來源、菌種。由表格可知，以稻草粉為纖維素來源時，纖維素分解菌C的CMC酶活性最高，因此要分解稻草粉中的纖維素，最好選擇C菌株。7．從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌，具有下列類似的操作過程，分析并回答下列問題：(1)在過程④的選擇培養(yǎng)基是________培養(yǎng)基，過程⑧的選擇培養(yǎng)基是________培養(yǎng)基(填“固體”或“液體”)。④的具體措施是______________________________；⑧的選擇措施是________________________________。(2)在過程③樣品梯度稀釋后，一般只將稀釋度為104～106倍的菌液分別接種到3個平板培養(yǎng)基上。接種的常用方法為____________________。(3)過程⑩采用______________________的鑒別方法較簡單。周圍出現(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落，原因是：________________________________________________________________。答案(1)固體液體以尿素為唯一氮源以纖維素為唯一碳源(2)稀釋涂布平板法(3)倒平板時加入剛果紅染液不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈解析(1)將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，才能形成菌落，可見，過程④的選擇培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。進(jìn)行梯度稀釋并接種前要進(jìn)行過程⑧所示的選擇培養(yǎng)，因此過程⑧的選擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。過程④選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌，所以具體的措施是應(yīng)以尿素為唯一氮源；過程⑧選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌，所以過程⑧的選擇措施是以纖維素為唯一碳源。(2)常采用稀釋涂布平板法，將稀釋度為104～106倍的菌液分別接種到3個平板培養(yǎng)基上。(3)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后，剛果紅—纖維素復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。過程⑩采用倒平板時加入剛果紅染液的鑒別方法較簡單。由于不分解纖維素(或分解剛果紅或淀粉)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈，所以周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，不能100%確定為纖維素分解菌。8．如圖表示分離、純化及保存枯草芽孢桿菌菌株的簡要過程，回答下列問題：(1)將土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍含有一些活的菌種，原因是____________________________。(2)圖中將菌種接種到平板1的方法是________；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用________法進(jìn)行滅菌。為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養(yǎng)類型都應(yīng)該屬于________培養(yǎng)基。對于頻繁使用的菌種可接種到題圖試管中的________培養(yǎng)基上臨時保藏。(3)用稀釋涂布平板法在5個平板上都接種稀釋倍數(shù)為104的樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板長出來的菌落數(shù)分別為182、160、168、175和190，據(jù)此推測，每毫升樣品液中的細(xì)菌數(shù)量為________個。稀釋涂布平板法能夠通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)目，原因是______________________________________________________________________________________________。答案(1)煮沸消毒法不能殺死細(xì)菌的全部芽孢和孢子(2)稀釋涂布平板法灼燒滅菌(或灼燒)選擇固體斜面(3)1.75×107當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌解析(1)煮沸消毒法不能殺死細(xì)菌的全部芽孢和孢子，因此土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍含有一些活的菌種。(2)分析題圖可知，圖示平板1利用涂布器進(jìn)行涂布，即題圖中將菌種接種到平板1的方法為稀釋涂布平板法；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用灼燒滅菌(或灼燒)法進(jìn)行滅菌。為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養(yǎng)類型都應(yīng)該屬于選擇培養(yǎng)基。對于頻繁使用的菌種可接種到題圖試管中的固體斜面培養(yǎng)基上臨時保藏。(3)每毫升樣品液中的細(xì)菌數(shù)量為(182＋160＋168＋175＋190)÷5÷0.1×104＝1.75×107(個)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此稀釋涂布平板法能夠通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)目。二、模擬題組9．(2019·成都一診)土壤中的苯酚(C6H5OH)對環(huán)境有極大的污染，實驗室希望能從土壤中分離出能專一性降解苯酚的微生物，下圖是部分實驗過程?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了分離純化目的菌種，①～④步驟的培養(yǎng)基中都加入了一定濃度的苯酚，該物質(zhì)能為微生物提供________，除此之外，培養(yǎng)基中一般都還需要水、______________等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)制備步驟④所需要的固體培養(yǎng)基，操作順序是：計算→稱量→________→________→倒平板。為了在步驟⑤的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養(yǎng)液進(jìn)行多次稀釋，原因是______________________________________________。(3)研究人員想通過比較試管甲和乙中微生物的生長情況，來證明分離出來的微生物只能以苯酚作為碳源，若甲試管中的液體培養(yǎng)基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙試管中培養(yǎng)基成分與甲相比，區(qū)別是______________________。研究人員對甲、乙兩只試管進(jìn)行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，這樣做的目的是__________________________。答案(1)碳源氮源和無機(jī)鹽(2)溶化滅菌在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細(xì)胞(3)用其他碳源替代苯酚保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的解析(3)甲、乙試管是對照實驗，如果甲加入的是苯酚，則乙試管加入的是可以替代苯酚的其他碳源。研究人員對甲、乙兩只試管進(jìn)行接種時，所選菌種都來自步驟⑤平板上的同一個單菌落，以保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的。10．(2019·山東模擬)科研人員從青藏高原祁連山地區(qū)的土壤中分離篩選出一株高效耐低溫原油降解菌YF28－1(8)，應(yīng)用該菌能夠提高高寒地區(qū)石油等烴類污染物的分解效率，為我國的環(huán)境保護(hù)事業(yè)做出貢獻(xiàn)。請回答相關(guān)問題：(1)選擇青藏高原祁連山地區(qū)進(jìn)行篩選，其原因是________________________________________。(2)篩選原油降解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為唯一碳源。從功能上看，該種培養(yǎng)基稱為________培養(yǎng)基。(3)用平板劃線法純化該細(xì)菌時，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是__________________________________________________。(4)研究人員設(shè)計實驗探究該菌降解原油的最適溫度。實驗分為5組，下圖A～E為各組培養(yǎng)一段時間后菌落的生長情況。本實驗所使用的接種方法是______________________，接種操作時應(yīng)特別注意控制的無關(guān)變量是________________。A～E組控制的不同條件是________。若要確定更準(zhǔn)確的最適溫度，應(yīng)該在________組和________組所對應(yīng)的溫度范圍內(nèi)設(shè)置更小的溫度梯度，進(jìn)一步實驗。答案(1)該地區(qū)的微生物更耐低溫(2)原油(或石油)選擇(3)將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落(4)稀釋涂布平板法接種的菌液量(或涂布器的滅菌情況)溫度BD解析(1)要篩選出耐低溫的原油降解菌，需從低溫環(huán)境去選擇。(2)要想篩選出能降解石油的細(xì)菌，培養(yǎng)基中只有一種碳源，即原油，這是一種選擇培養(yǎng)基。(3)第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落。(4)由圖示可知，該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法。接種時應(yīng)特別注意控制的無關(guān)變量是接種的菌液量、涂布器的滅菌情況等。A～E組控制的不同條件是溫度。從圖中可以看出C組的菌落數(shù)最多，因此要確定更準(zhǔn)確的最適溫度，應(yīng)該在B和D所對應(yīng)的溫度范圍內(nèi)設(shè)置更小的溫度梯度，進(jìn)一步實驗。11．(2019·山東高三期末)蚯蚓常以土壤中的秸稈和微生物為食，研究表明蚯蚓能通過分泌體液或者消化液影響微生物的生命活動。為探究蚯蚓腸液和體表分泌液對纖維素分解菌存活情況的影響，研究小組進(jìn)行如下實驗?；卮鹣铝袉栴}：(1)從土壤中篩選纖維素分解菌可以用________法。根據(jù)透明圈的大小可以鑒別纖維素分解菌分解纖維素的能力，其原理是________________________________________________________________________。________________________________________________________________________。(2)補充以下實驗步驟：①提取蚯蚓的腸液和體表分泌液，在－18℃環(huán)境中保存；②分別取等體積腸液和體表分泌液與1μL稀釋培養(yǎng)的________________________混合；③對照組應(yīng)設(shè)置為_____________________________________________________________________________________________________________________________；④在18～20℃培養(yǎng)2h后，采用________法在平板接種，將各組平板置于相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間；⑤________________________________________________________________________。答案(1)剛果紅染色剛果紅能與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基就會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，透明圈大則分解能力大，反之分解能力小(2)②纖維素分解菌③取等體積無菌水替代腸液和體表分泌液，其他與實驗組相同④稀釋涂布平板⑤觀察并記錄各組的菌落數(shù)，分析實驗結(jié)果解析(1)微生物培養(yǎng)過程中需要使用不同的鑒別方法。纖維素分解菌可使用剛果紅染色法進(jìn)行篩選。其原理是剛果紅能與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基就會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，透明圈大則分解能力大，透明圈小則分解能力小。以此作為鑒別纖維素分解菌分解纖維素的能力大小的依據(jù)。(2)探究蚯蚓腸液和體表分泌液對纖維素分解菌存活情況的影響，其中自變量是腸液和體表分泌液，因變量是纖維素分解菌的存活情況。實驗步驟如下：向等體積的腸液、體表分泌液和無菌水中分別加入1μL稀釋培養(yǎng)的纖維素分解菌混合培養(yǎng)；在18～20℃培養(yǎng)2h后，采用稀釋涂布平板法在平板接種，便于后期對菌落計數(shù)；將各組平板置于相同且適宜的條件下培養(yǎng)，觀察并記錄各組的菌落數(shù)，根據(jù)結(jié)果分析蚯蚓腸液和體表分泌液對纖維素分解菌存活情況的影響。12．(2019·河北高三模擬)下表是某研究小組配制的適合尿素分解菌生長的培養(yǎng)基，請回答下列問題：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL(1)上述培養(yǎng)基的成分中，為尿素分解菌提供碳源的是________，提供氮源的是________。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于________培養(yǎng)基；從功能上看，屬于________培養(yǎng)基。(2)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于________________________，此時平板上的菌落數(shù)較能準(zhǔn)確的反映樣品中的活菌數(shù)。(3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在________區(qū)間的平板統(tǒng)計計數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的真實數(shù)目低，原因是______________________________________________________________________。(4)尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長，添加某種維生素后才能正常生長，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)葡萄糖尿素固體選擇(2)樣品稀釋液中的一個活菌(3)30～300當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落(4)X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶三、高考題組13．(2019·全國卷Ⅰ)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5g/L)。Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(15g/L)。Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(45g/L)。回答下列問題。(1)在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是____________。(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細(xì)菌比例會________，其原因是__________________________________________。(3)Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是________________________________________________。(4)假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供________和__________________________________。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料解析(1)Ⅰ號培養(yǎng)基中含有牛肉膏、蛋白胨和有機(jī)物X等，其中X僅含有C、H兩種元素，故為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中除無機(jī)鹽外，還含有有機(jī)物X，故為微生物提供碳源的有機(jī)物是X。(2)因Ⅱ號液體培養(yǎng)基中只有X含有碳元素，故培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖，故不能降解X的細(xì)菌比例會下降。(3)對微生物分離的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，但其中只有稀釋涂布平板法能夠計數(shù)。(4)能高效降解X的細(xì)菌能將X代謝為丙酮酸，丙酮酸在有氧條件下被降解時能釋放出大量能量，故丙酮酸可為該細(xì)菌的生長提供能量。丙酮酸還可以為該細(xì)菌中其他物質(zhì)的合成提供原料。14．(2019·全國卷Ⅱ)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。回答下列問題。(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是________。(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是__________________________________________________________________________________________。(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即____________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加________，三處滴加量相同。②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明____________________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明________________________________________________________________________。答案(1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮氣作為氮源(4)①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近解析(1)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，要分離能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，需用以物質(zhì)W為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。(2)由題圖可知，甲菌落周圍沒有透明圈，說明甲菌不能降解物質(zhì)W，乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解物質(zhì)W，故要得到目標(biāo)菌，應(yīng)選擇乙菌落進(jìn)一步純化。(3)要鑒定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，則培養(yǎng)基中不能添加氮源，所以將甲、乙菌分別接種在無氮源的培養(yǎng)基上(其他條件相同且適宜)，若細(xì)菌能生長，則說明細(xì)菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。(4)實驗?zāi)康氖潜容^天然酶和酶E降解物質(zhì)W的能力，做實驗時要設(shè)計空白對照實驗，所以C處應(yīng)滴加緩沖液。C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明緩沖液不能降解物質(zhì)W，A、B處透明圈的出現(xiàn)說明物質(zhì)W被降解，若兩個透明圈直徑大小相近，則說明酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。15．(2019·全國卷Ⅲ)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時一般需要將平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________________________________________________________________________。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過________處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。答案(1)蛋白胨不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌解析(1)蛋白胨中含有碳元素和氮元素，可為細(xì)菌生長提供碳源和氮源，葡萄糖只能提供碳源，NaNO3只能提供氮源。不同細(xì)菌生