QBT 2732-2005 水解膠原蛋白

中華人民共和國(guó)輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)2005-07-26發(fā)布12水分/%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))≤蛋白質(zhì)/%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))≥灰分/%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))≤ 二氧化硫/(mg/kg)≤過氧化物/(mg/kg)≤pH(1%溶液水不溶物/%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))≤ 鉻(Cr)/(mg/kg)≤重金屬(以Pb計(jì))/(mg/kg)≤注：“按水解膠原蛋白粉標(biāo)準(zhǔn)折算”指將水解膠原蛋白液烘干后，測(cè)定“水分”,換算得到“總固形“1-水分”]。折算時(shí)，將“水解膠原蛋白粉”指標(biāo)要求數(shù)值乘以“總固形物含量”,即得“水解膠原蛋白液”指4.5微生物指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。菌落總數(shù)/(cfu/g或mL)≤大腸菊群/(MPN/100g或mL)≤政病菌(沙門氏菌、金黃色葡萄球菌)不應(yīng)檢出5試驗(yàn)方法所需溶液除特別注明外均為水溶液，其濃度以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示。5.1水分5.2相對(duì)分子質(zhì)量(凝膠層析法)利用裝有多孔凝膠的層析柱(也稱為色譜柱)將試樣按其分子大小進(jìn)行分離，再用檢測(cè)器對(duì)層析分離物進(jìn)行檢測(cè)，最后用已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行標(biāo)定。35.2.2.1氯化鈉溶液(0.2mol/L)。5.2.2.2氯化鈉溶液(0.5mol/L)。5.2.2.3葡聚糖G50。5.2.3儀器5.2.3.1凝膠層析裝置(見圖1)。圖1凝膠層析裝置圖5.2.4.1配制水解膠原蛋白水溶液(4%),加熱處理后，隨即把溶液迅速冷卻至室溫，用0.25mL的5.2.4.2層析完畢后，對(duì)收集的洗脫級(jí)分，逐個(gè)測(cè)定230nm波長(zhǎng)下的吸光度。5.2.5.1選擇5～6個(gè)范圍合適、相對(duì)分子質(zhì)量M在500～20000的水解膠原蛋白標(biāo)樣，按常規(guī)操作條件上柱層析，測(cè)定各個(gè)試樣的洗脫曲線，并由洗脫峰求級(jí)分的洗脫體積V;然后以…系列V.對(duì)相應(yīng)5.2.5.2用相同條件上柱，層析未知相對(duì)分子質(zhì)量試樣，測(cè)出其洗脫在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立結(jié)果的絕對(duì)差值應(yīng)不大于算術(shù)平均值的5%。4按GB/T5009.5-2003中第一法測(cè)定。蛋白質(zhì)的換算系數(shù)為5.79。在45℃下，用分光光度法測(cè)定水解膠原蛋白水溶液在波長(zhǎng)450mm和620nm下的透射比。紫外可見光柵分光光度計(jì)。5.4.3.1對(duì)于水解膠原蛋白粉，配制水溶液(6.67%);對(duì)于水解膠原蛋白液，配制水溶液(1%);并恒溫至48℃。5.4.3.2將溶液倒入10mm比色皿，用蒸餾水作基準(zhǔn)。5.4.3.3將分光光度計(jì)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)到450nm。5.4.3.5將波長(zhǎng)調(diào)節(jié)至620nm,并重復(fù)5.4.3.4操作。直接以二個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)得的透射比來表示，單位為%。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立結(jié)果的絕對(duì)差值應(yīng)不大于1%。按GB/T5009.4-2003將水解膠原蛋白中的亞硫酸鹽轉(zhuǎn)變成硫酸，用堿滴定，通過所消耗的堿量計(jì)算出二氧化硫含量。5.6.2.1過氧化氫溶液(3%)。5.6.2.2溴酚藍(lán)-乙醇(體積分?jǐn)?shù)20%)溶液(1g/L)。5.6.2.3氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)。5.6.2.4稀鹽酸(2mol/L)。二氧化硫測(cè)定裝置見圖2。5.6.4.2在過氧化氫溶液10mL中加入溴酚藍(lán)-乙醇(體積分?jǐn)?shù)20%)溶液(1g/L)0.15mL,用氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)滴定直至出現(xiàn)藍(lán)紫色，不能滴過，并將此溶液加入到試管(D)中。5.6.4.3在不影響二氧化碳?xì)饬鞯那闆r下取下分液漏斗(B),往燒瓶中加入試樣25.0g和100mL水。5.6.4.4通過分液漏斗，往燒瓶中加入稀鹽酸80mL,煮沸1h。5.6.4.5打開分液漏斗活塞，停止通入二氧化碳，5.6.4.6在試管中加入少量水，并將試管內(nèi)溶液移至200mL的廣口錐形燒瓶中，然后將其在水浴中加熱15min,冷卻。5.6.4.7加入溴酚藍(lán)-乙醇(體積分?jǐn)?shù)20%)溶液(1g/L)0.1mL,然后用氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)滴定，直至顏色由黃色變?yōu)樗{(lán)紫色(消耗體積為V)。5.6.4.8進(jìn)行一次空白滴定(消耗體積為V)。5 5.7.1原理6 Y。 7