實(shí)驗(yàn)八-鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵

實(shí)驗(yàn)七鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆昭芯匡@色反應(yīng)的一般方法。掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定鐵的原理和方法。熟悉繪制吸收曲線(xiàn)的方法，正確選擇測(cè)定波長(zhǎng)。學(xué)會(huì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法。通過(guò)鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵在未知式樣中的含量，掌握721型，723型分光光度計(jì)的正確使用方法，并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、原理：可見(jiàn)分光光度法測(cè)定無(wú)機(jī)離子，通常要經(jīng)過(guò)兩個(gè)過(guò)程，一是顯色過(guò)程，二是測(cè)量過(guò)程。為了使測(cè)定結(jié)果有較高靈敏度和準(zhǔn)確度，必須選擇合適的顯色條件和測(cè)量條件，這些條件主要包括入射波長(zhǎng)，顯色劑用量，有色溶液穩(wěn)定性，溶液酸度干擾的排除。入射光波長(zhǎng)：一般情況下，應(yīng)選擇被測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)的光為入射光。顯色劑用量：顯色劑的合適用量可通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。溶液酸度：選擇適合的酸度，可以在不同PH緩沖溶液中加入等量的被測(cè)離子和顯色劑，測(cè)其吸光度，作DA-PH曲線(xiàn)，由曲線(xiàn)上選擇合適的PH范圍。有色配合物的穩(wěn)定性：有色配合物的顏色應(yīng)當(dāng)穩(wěn)定足夠的時(shí)間。干擾的排除：當(dāng)被測(cè)試液中有其他干擾組分共存時(shí)，必須爭(zhēng)取一定的措施排除干擾。鄰二氮菲與Fe2+在PH2.0-9.0溶液中形成穩(wěn)定橙紅色配合物。配合無(wú)的ε=1.1×104L·mol·cm-1。配合物配合比為3：1，PH在2-9（一般維持在PH5-6）之間。在還原劑存在下，顏色可保持幾個(gè)月不變。Fe3+與鄰二氮菲作用形成淡藍(lán)色配合物穩(wěn)定性教差，因此在實(shí)際應(yīng)用中加入還原劑使Fe3+還原為Fe2+與顯色劑鄰二菲作用，在加入顯色劑之前，用的還原劑是鹽酸羥胺。此方法選擇性高Br3+、Ca2+、Hg2+、Zn2+及Ag+等離子與鄰二氮菲作用生成沉淀，干擾測(cè)定，相當(dāng)于鐵量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等離子不干擾測(cè)定。三、儀器與試劑：儀器：721型723型分光光度計(jì)500ml容量瓶1個(gè)，50ml容量瓶7個(gè)，10ml移液管1支5ml移液管支，1ml移液管1支，滴定管1支，玻璃棒1支，燒杯2個(gè)，吸爾球1個(gè)，天平一臺(tái)。2﹑試劑：（1）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液100ug·ml-1,準(zhǔn)確稱(chēng)取0.43107g鐵鹽NH4Fe(SO4)2·12H2O置于燒杯中，加入0.5ml鹽酸羥胺溶液，定量轉(zhuǎn)依入500ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度充分搖勻。（2）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10ug·ml-1.用移液管移取上述鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度，充分搖勻。（3）鹽酸羥胺溶液100g·L-1(用時(shí)配制)（4）鄰二氮菲溶液1.5g·L-1先用少量乙醇溶液，再加蒸餾水稀釋至所需濃度。（5）醋酸鈉溶液1.0mol·L-1μ四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與操作步驟：1、準(zhǔn)備工作(1)清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。(2)配制鐵標(biāo)溶液和其他輔助試劑。(3)開(kāi)機(jī)并試至工作狀態(tài)，操作步驟見(jiàn)附錄。(4)檢查儀器波長(zhǎng)的正確性和吸收他的配套性。2、鐵標(biāo)溶液的配制準(zhǔn)確稱(chēng)取0.3417g鐵鹽NH4Fe(SO4)·12H2O置于燒杯中，加入10mlHCL加少量水。溶解入500ml容量瓶中加水稀釋到容量瓶刻度。3、繪制吸收曲線(xiàn)選擇測(cè)量波長(zhǎng)取兩支50ml干凈容量瓶，移取100μgml-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.50ml容量瓶中，然后在兩個(gè)容量瓶中各加入0.5ml鹽酸羥胺溶液，搖勻，放置2min后各加入1.0ml鄰二氮菲溶液，2.5ml醋酸鈉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度線(xiàn)搖勻，用2cm吸收池，試劑空白為參比，在440——540nm間，每隔10nm測(cè)量一次吸光度，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，確定最大吸收波長(zhǎng)（1）Λnm440450460470480490A0．290．380．440．4850．500．52Λnm500510520530540721型分光度計(jì)操作步驟開(kāi)機(jī)。定波長(zhǎng)入=700。打開(kāi)蓋子調(diào)零。關(guān)上蓋