動物實驗設(shè)計與數(shù)據(jù)處理

第八章

醫(yī)學(xué)研究中實驗設(shè)計動物的選擇及應(yīng)用第十一章醫(yī)學(xué)研 究中實驗動物的選擇及應(yīng)用1動物實驗設(shè)計與數(shù)據(jù)處理第一節(jié)

醫(yī)學(xué)實驗動物的選擇2一、選擇的基本原則（一）選擇與人的功能、代謝、結(jié)構(gòu)和疾病特點相似的實驗動物（二）選擇遺傳背景明確、體內(nèi)微生物得到控制或模型癥狀顯著的動物（三）選用解剖、生理特點符合實驗?zāi)康囊蟮膭游镒黾谞钆韵僬龑嶒灒瑧?yīng)選用家犬而不能選用家兔。但作甲狀腺旁腺摘除后，還欲保留甲狀旁腺的功能，則應(yīng)選用兔而不能選用家犬。大鼠沒有膽囊，不能做膽囊功能的研究，卻適合膽管插管，從而可收集膽汁，進行消化功能等方面的研究3（四）選擇對實驗因素最敏感的動物小鼠和大鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不適于選做發(fā)熱、解熱和檢查致熱原等實驗研究。鴿子、家犬、猴和貓嘔吐反應(yīng)敏感，適于作嘔吐實驗。家兔、豚鼠等草食動物嘔吐反應(yīng)不敏感，小鼠和大鼠無嘔吐反應(yīng)，就不宜選用。家兔、雞、鴿和猴食用高膽固醇、高脂肪飼料一定時間后容易形成動脈粥樣硬化病變，適于動脈粥樣硬化實驗研究，而小鼠、大鼠和犬就不容易形成動脈粥樣硬化病變。4（五）選擇與實驗?zāi)康南噙m應(yīng)的動物不同種類實驗動物對施加因素的反應(yīng)等方面存在著差異。DBA/2系及C3H系小鼠對雞新城疫病毒的反應(yīng)和DBA/1系小鼠完全不同，前者引起肺炎而后者引起腦炎。5（六）選擇要符合3R原則6替代（replacement）原則:盡可能采用低等實驗動物或非實驗動物，以替代高等實驗動物進行實驗。減少（reduction）原則：盡可能少用實驗動物。動物實驗設(shè)計應(yīng)權(quán)衡統(tǒng)計學(xué)滿意程度與倫理學(xué)及節(jié)約之間關(guān)系,一般設(shè)定檢驗效能力為80%。優(yōu)化（refinement）原則：應(yīng)優(yōu)化實驗設(shè)計和操作，以減輕動物的痛苦。（七）選擇要注意動物福利不要虐待動物。要注重動物保護、動物福利(animal

welfare)、和動物權(quán)力。動物權(quán)力(animal

right)是指動物和人一樣也有生的權(quán)利,逃離苦痛的權(quán)力。人有解救動物的義務(wù)。7二、

常見醫(yī)學(xué)實驗中實驗動物的選擇（一）藥物毒性實驗的動物選擇做毒性試驗時，選擇何種實驗動物取決于該動物對藥物的反應(yīng)以及藥物在該種動物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄與人類異同的程度。8如犬在毒理方面的反應(yīng)和人比較接近；大鼠血壓和血管阻力對藥物反應(yīng)敏感。在研究藥物對心臟作用時，可選擇青蛙和蟾蜍。對神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯影響的藥物研究時首選動物是貓。研究藥物對神經(jīng)肌肉接點的影響時，常用貓、兔、雞、小鼠和蛙。對影響副交感神經(jīng)效應(yīng)器接點的藥物進行研究時，首選大鼠。研究藥物對平滑肌的作用，要選犬和貓。9

注意以下幾點：(1)

動物的進化程度越高，對藥物毒性的敏感性越好。如兔和貓的中毒致死量比小鼠低數(shù)倍，犬和猴的中毒劑量又比兔和貓低，而人往往更為敏感。(2)

選用未成年的實驗動物較為合適。慢性毒性試驗開始選擇的小鼠年齡最好是2～3周，而大鼠不超過3周。當(dāng)然，避孕藥物的毒性試驗要求使用性成熟動物，如小鼠應(yīng)是60日齡以上，大鼠應(yīng)在120日齡以上。(3)

選擇做毒性試驗時，動物應(yīng)雌雄各半。(4)

實驗要求至少采用兩種不同種屬的動物：10（二）消化、呼吸系統(tǒng)實驗的動物選擇11不能選擇兔、羊、豚鼠等草食動物作為研究消化系統(tǒng)疾病的模型。犬有發(fā)達的消化系統(tǒng)和與人類極為相似的消化器官，可做消化系統(tǒng)的慢性實驗。對胰腺炎的研究，可選擇年輕雌性小鼠造成膽堿缺乏誘發(fā)出血性胰腺炎。貓、犬等中年以上肥胖動物常會自發(fā)慢性胰腺炎，由于犬的胰腺很小，適合做胰腺摘除手術(shù)。幼豬的呼吸、泌尿及血液學(xué)系統(tǒng)與人的新生兒相似，適于研究營養(yǎng)不良癥。大鼠的肝臟再生能力強，適于做肝切除術(shù)。甲型肝炎病毒的研究，可選擇紅面猴，因該病毒可在紅面猴中增殖。猴的氣管粘膜腺體數(shù)量較多，做慢性支氣管炎研究和祛痰平喘藥物療效實驗研究很合適。12（三）泌尿、生殖系統(tǒng)實驗的動物選擇1、糖尿病實驗糖尿病方面的研究，可選擇犬、大鼠、兔等實驗動物。。猴類的自發(fā)性糖尿病的臨床特征與人類的十分相似，是進一步研究異常糖類代謝的有價值的動物。132、生殖生理實驗雌激素能終止大鼠和小鼠妊?，卻不能終止人早期妊?，作終止妊?動物試驗觀察時，就不要選擇大鼠和小鼠。兔是刺激性排卵的動物，可進行生殖生理和避孕藥的研究。猴的月經(jīng)周期為28

d，生殖生理與人非常接近，是人類避孕藥物研究極為理想的實驗動物。14（四）心血管系統(tǒng)實驗的動物選擇1、微循環(huán)實驗犬適合做的血液循環(huán)系統(tǒng)的實驗研究，如失血性休克、實驗性彌散性血管內(nèi)凝血等。猴、豬有與人相似的循環(huán)系統(tǒng)，血壓穩(wěn)定，對藥物有一致的靈敏反應(yīng)，便于手術(shù)操作和適于分析藥物對循環(huán)系統(tǒng)的作用機制。貓有較強的心搏力，能描繪完好的血壓曲線，更適合藥物對循環(huán)系統(tǒng)作用機制分析。外周微循環(huán)實驗觀察常選用小鼠耳郭、金黃地鼠頰囊、兔眼球結(jié)膜。內(nèi)臟微循環(huán)實驗觀察，常選用青蛙、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、貓和犬的腸系膜、大網(wǎng)膜和腸壁；152、心血管疾病實驗16（1）動脈粥樣硬化癥

鴿具有與人類相似的自發(fā)性粥樣硬化癥，且在短期喂飼膽固醇后，可在主動脈的可預(yù)測區(qū)域發(fā)生病變，可用來研究與病變發(fā)生有關(guān)的早期代謝變化。小型豬可自發(fā)產(chǎn)生動脈粥樣硬化，也可用高脂飼料誘發(fā)并加速動脈粥樣硬化的形成。其病變特點及分布情況都與人類相似，是研究動脈粥樣硬化的理想實驗動物（2）高血壓

常選用的動物是犬和大鼠。通常選擇以刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)反射性引起實驗性高血壓，或注射加壓物質(zhì)以及分次手術(shù)結(jié)扎腎動脈來誘發(fā)腎源性高血壓。17已培育的高血壓大鼠：如遺傳性高血壓大鼠(GH)、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、易卒中自發(fā)性高血壓大鼠(SHRSP)、自發(fā)性血栓形成大鼠(STR)等。（五）神經(jīng)系統(tǒng)實驗的動物選擇研究腦梗死所呈現(xiàn)的卒中、術(shù)后腦缺血以及腦血流量時，沙鼠是較好的實驗物。結(jié)扎沙鼠的一側(cè)頸總動脈，數(shù)小時后，就有20%～65%的沙鼠出現(xiàn)腦梗死。另外，沙鼠還具有類似人類自發(fā)性癲癇發(fā)作的特點。DBA/2N小鼠在35日齡時，聽源性癲癇發(fā)生率為100%，是研究癲癇的良好模型。18（六）其他實驗的動物選擇1、放射實驗不同動物對射線敏感程度差異較大，常選用大鼠、小鼠、沙鼠、犬、豬、猴等實驗動物進行研究。故不能選用兔進行放射醫(yī)學(xué)的研究。2、微生物實驗常選用小鼠、大鼠、沙鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、猴、貓、裸鼠進行微生物實驗研究。裸鼠很容易感染細菌、病毒和寄生蟲，因此是研究這些感染免疫機制的理想動物模型。19三、動物樣本的確立及分組20（一）影響實驗動物樣本數(shù)量的因素實驗動物對受試品敏感度的高低。擬采取的措施（如藥物或手術(shù)）有效率的高低

。要求試驗精度的高低。要求實驗把握度（1-β）的大小。要求實驗組與對照組差異顯著性的程度。實驗動物個體差異大小。實驗動物分組的多少。擬采用雙側(cè)還是單側(cè)檢驗。（二）實驗動物樣本數(shù)量的確立國內(nèi)、外有關(guān)文獻報道資料自己所在科學(xué)研究小組的實踐經(jīng)驗預(yù)試驗的結(jié)果21第二節(jié)

動物實驗設(shè)計基本方法一、動物實驗設(shè)計的基本要素22處理因素、實驗動物的選擇和實驗效應(yīng)。指標(biāo)觀察時應(yīng)注意：(1)研究者的心理往往偏于陽性結(jié)果。(2)應(yīng)注意處理與效應(yīng)的關(guān)系如劑量反應(yīng)曲線

。二、動物實驗設(shè)計的基本原則對照原則、隨機原則和重復(fù)原則等。三、常用的動物實驗設(shè)計方案23（一）完全隨機設(shè)計（二）配對設(shè)計（三）配伍組設(shè)計（四）自身比較設(shè)計(五)交叉設(shè)計（六）拉丁方設(shè)計第三節(jié) 數(shù)據(jù)的搜集整理和統(tǒng)計描述一、數(shù)據(jù)的錄入和清理二、資料的分組三、資料的匯總四、統(tǒng)計描述24第四節(jié)

論文的撰寫及注意事項25論文分