土壤 氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定 氯化鉀溶液提取-分光光度法(HJ 634-2012)

目次

前言···········································································································································II

1適用范圍·······························································································································1

2規(guī)范性引用文件···················································································································1

3方法原理·······························································································································1

4試劑和材料···························································································································1

5儀器和設(shè)備···························································································································4

6樣品·······································································································································5

7分析步驟·······························································································································5

8結(jié)果計(jì)算與表示···················································································································7

9精密度和準(zhǔn)確度···················································································································8

10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制········································································································9

附錄A（資料性附錄）本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的章條編號對照·····················10

附錄B（資料性附錄）本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的技術(shù)性差異及其原因·········12

附錄C（資料性附錄）還原柱的制備······················································································13

I

前言

為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》，保護(hù)環(huán)境，保障人體健康，規(guī)范土壤中氨氮、

亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定方法，制訂本標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的氯化鉀溶液提?。止夤舛确ā?/p>

本標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)內(nèi)容為修改采用《土壤質(zhì)量硝酸鹽氮、亞硝酸鹽氮、氨氮的測定氯化鉀

溶液提取法》（ISO/TS14256-1:2003（E））。附錄A給出了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）

章條編號對照一覽表，附錄B給出了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的技術(shù)性差異及其

原因。

本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

本標(biāo)準(zhǔn)附錄A~附錄C為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部科技標(biāo)準(zhǔn)司組織制訂。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：鞍山市環(huán)境監(jiān)測中心站。

本標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境保護(hù)部2012年2月29日批準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)自2012年6月1日起實(shí)施。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部解釋。

II

土壤氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定

氯化鉀溶液提取-分光光度法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的氯化鉀溶液提?。止夤舛确?。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定。

當(dāng)樣品量為40.0g時，本方法測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的檢出限分別為

0.10mg/kg、0.15mg/kg、0.25mg/kg，測定下限分別0.40mg/kg、0.60mg/kg、1.00mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本

標(biāo)準(zhǔn)

HJ168環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則

HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法

HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

ISO/TS14256-1土壤質(zhì)量硝酸鹽氮、亞硝酸鹽氮、氨氮的測定氯化鉀溶液提取

法（Soilquality-Determinationofnitrate,nitriteandammoniuminfield-moistsoilsbyextraction

withpotassiumchloridesolution）

3方法原理

3.1氨氮

氯化鉀溶液提取土壤中的氨氮，在堿性條件下，提取液中的氨離子在有次氯酸根離子存

在時與苯酚反應(yīng)生成藍(lán)色靛酚染料，在630nm波長具有最大吸收。在一定濃度范圍內(nèi)，氨

氮濃度與吸光度值符合朗伯-比爾定律。

3.2亞硝酸鹽氮

氯化鉀溶液提取土壤中的亞硝酸鹽氮，在酸性條件下，提取液中的亞硝酸鹽氮與磺胺反

應(yīng)生成重氮鹽，再與鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料，在波長543nm波長具有

最大吸收。在一定濃度范圍內(nèi)，亞硝酸鹽氮濃度與吸光度值符合朗伯-比爾定律。

3.3硝酸鹽氮

氯化鉀溶液提取土壤中的硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮，提取液通過還原柱，將硝酸鹽氮還原

為亞硝酸鹽氮，在酸性條件下，亞硝酸鹽氮與磺胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與鹽酸N-（1-萘基）

-乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料，在波長543nm處具有最大吸收，測定硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮總

量。硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮總量與亞硝酸鹽氮含量之差即為硝酸鹽氮含量。

4試劑和材料

1

除非另有注明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑，實(shí)驗(yàn)用水為電導(dǎo)率小于0.2

mS/m（25℃時測定）的去離子水。

4.1氨氮

4.1.1濃硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml。

4.1.2二水檸檬酸鈉（C6H5Na3O7·2H2O）。

4.1.3氫氧化鈉（NaOH）。

4.1.4二氯異氰尿酸鈉（C3Cl2N3NaO3·H2O）。

4.1.5氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.1.6氯化銨（NH4Cl）：優(yōu)級純

于105℃下烘干2h。

4.1.7氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

稱取74.55g氯化鉀（4.1.5），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.1.8氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NH4Cl）=200mg/L

稱取0.764g氯化銨（4.1.6），用適量水溶解，加入0.30ml濃硫酸（4.1.1），冷卻后，

移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。該溶液在避光、4℃下可保存一個月?；蛑苯淤?/p>

買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.1.9氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ（NH4Cl）=10.0mg/L

量取5.0ml氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.1.8）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現(xiàn)

配。

4.1.10苯酚溶液

稱取70g苯酚（C6H5OH）溶于1000ml水中。該溶液貯存于棕色玻璃瓶中，在室溫條

件下可保存一年。

注：配制苯酚溶液時應(yīng)避免接觸皮膚和衣物。

4.1.11二水硝普酸鈉溶液

稱取0.8g二水硝普酸鈉{Na2[Fe（CN）5NO]·2H2O}溶于1000ml水中。該溶液貯存于

棕色玻璃瓶中，在室溫條件下可保存三個月。

4.1.12緩沖溶液

稱取280g二水檸檬酸鈉（4.1.2）及22.0g氫氧化鈉（4.1.3），溶于500ml水中，移入

1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.1.13硝普酸鈉-苯酚顯色劑

量取15ml二水硝普酸鈉溶液（4.1.11）及15ml苯酚溶液（4.1.10）和750ml水，混勻。

該溶液用時現(xiàn)配。

4.1.14二氯異氰尿酸鈉顯色劑

稱取5.0g二氯異氰尿酸鈉（4.1.4）溶于1000ml緩沖溶液（4.1.12）中，4℃下可保存

一個月。

4.2亞硝酸鹽氮

4.2.1濃磷酸：ρ（H3PO4）=1.71g/ml。

2

4.2.2氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.2.3亞硝酸鈉（NaNO2）：優(yōu)級純

干燥器中干燥24h。

4.2.4氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

同4.1.7。

4.2.5亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO2-N）=1000mg/L

稱取4.926g亞硝酸鈉（4.2.3），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混

勻。該溶液貯存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月。或直接購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.2.6亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ（NO2-N）=100mg/L

量取10.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.2.5）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.2.7亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ（NO2-N）=10.0mg/L

量取10.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.2.6）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。

用時現(xiàn)配。

4.2.8磺胺溶液（C6H8N2O2S）

向1000ml容量瓶中加入600ml水，再加入200ml濃磷酸（4.2.1），然后加入80g磺胺。

用水定容，混勻。該溶液于4℃下可保存一年。

4.2.9鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液

稱取0.40g鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺（C12H14N2·2HCl）溶于100ml水中。4℃下保存，

當(dāng)溶液顏色變深時應(yīng)停止使用。

4.2.10顯色劑

分別量取20ml磺胺溶液（4.2.8）、20ml鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液（4.2.9）、20ml

濃磷酸（4.2.1）于100ml棕色試劑瓶中，混合。4℃下保存，當(dāng)溶液變黑時應(yīng)停止使用。

4.3硝酸鹽氮

4.3.1濃磷酸：ρ（H3PO4）=1.71g/ml。

4.3.2濃鹽酸：ρ（HCl）=1.12g/ml。

4.3.3鎘粉：粒徑0.3mm~0.8mm。

4.3.4氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.3.5硝酸鈉（NaNO3）：優(yōu)級純

干燥器中干燥24h。

4.3.6亞硝酸鈉（NaNO2）：優(yōu)級純

同4.2.3。

4.3.7氯化銨（NH4Cl）。

4.3.8硫酸銅（CuSO4.5H2O）。

4.3.9氨水（NH4OH）：優(yōu)級純。

4.3.10氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

同4.1.7。

4.3.11硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO3-N）=1000mg/L

3

稱取6.068g硝酸鈉（4.3.5），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

該溶液貯存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月?；蛑苯淤徺I市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.3.12硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ（NO3-N）=100mg/L

量取10.0ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.3.11）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.3.13硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ（NO3-N）=10.0mg/L

量取10.0ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。

用時現(xiàn)配。

4.3.14硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ：ρ（NO3-N）=6.0mg/L

量取6.0ml標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現(xiàn)配。

4.3.15亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO2-N）=1000mg/L

同4.2.5。

4.3.16亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液：ρ（NO2-N）=100mg/L

同4.2.6。

4.3.17亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ：ρ（NO2-N）=6.0mg/L

量取6.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液（4.3.16）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.3.18氨水溶液：（1+3）。

4.3.19氯化銨緩沖溶液貯備液：ρ（NH4Cl）=100g/L

將100g氯化銨（4.3.7）溶于1000ml容量瓶中，加入約800ml水，用氨水溶液（4.3.18）

調(diào)節(jié)pH值為8.7~8.8，用水定容，混勻。

4.3.20氯化銨緩沖溶液使用液：ρ（NH4Cl）=10g/L

量取100ml氯化銨緩沖溶液貯備液（4.3.19）于1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.3.21磺胺溶液

同4.2.8。

4.3.22鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液

同4.2.9。

4.3.23顯色劑

同4.2.10。

5儀器和設(shè)備

5.1分光光度計(jì)：具10mm比色皿。

5.2pH計(jì)：配有玻璃電極和參比電極。

5.3恒溫水浴震蕩器：振蕩頻率可達(dá)40次/分鐘。

5.4還原柱：用于將硝酸鹽氮還原為亞硝酸鹽氮，具體制備方法見附錄C。

5.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速可達(dá)3000r/min，具100ml聚乙烯離心管。

5.6天平：精度為0.001g。

5.7聚乙烯瓶：500ml，具螺旋蓋?；虿捎眉炔晃找膊幌蛉芤褐嗅尫潘鶞y組分的其他容器。

4

5.8具塞比色管：20ml、50ml、100ml。

5.9樣品篩：5mm。

5.10一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

6樣品

6.1樣品的采集

按照HJ/T166的相關(guān)規(guī)定采集樣品。

6.2樣品的保存

樣品采集后應(yīng)于4℃下運(yùn)輸和保存，并在3日內(nèi)分析完畢。否則，應(yīng)于-20℃（深度冷

凍）下保存，樣品中硝酸鹽氮和氨氮可以保存數(shù)周。

當(dāng)測定深度冷凍的硝酸鹽氮和氨氮含量時，應(yīng)控制解凍的溫度和時間。室溫環(huán)境下解凍

時，需在4h內(nèi)完成樣品解凍、勻質(zhì)化和提??；如果在4℃下解凍，解凍時間不應(yīng)超過48h。

注1：為了縮短樣品的解凍時間，應(yīng)在樣品被冷凍前，將其敲碎成小顆粒狀。

6.3試樣的制備

將采集后的土壤樣品去除雜物，手工或儀器混勻，過樣品篩。在進(jìn)行手工混合時應(yīng)戴橡

膠手套。過篩后樣品分成兩份，一份用于測定干物質(zhì)含量，測定方法參見HJ613；另一份

用于測定待測組分含量。

6.4試料的制備

稱取40.0g試樣（6.3），放入500ml聚乙烯瓶中，加入200ml氯化鉀溶液（4.1.7），在

20±2℃的恒溫水浴震蕩器中震蕩提取1h。轉(zhuǎn)移約60ml提取液于100ml聚乙烯離心管中，

在3000r/min的條件下離心分離10min。然后將約50ml上清液轉(zhuǎn)移至100ml比色管中，

制得試料，待測。

注2：提取液也可以在4℃下，以靜置4h的方式代替離心分離，制得試料。

6.5空白試料的制備

加入200ml氯化鉀溶液于500ml聚乙烯瓶中，按照與試料的制備（6.4）相同步驟制備

空白試料。

注3：試料需要在一天之內(nèi)分析完畢，否則應(yīng)在4℃下保存，保存時間不超過一周。

7分析步驟

7.1氨氮

7.1.1校準(zhǔn)

分別量取0、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、3.50ml氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.1.9）于一組

100ml具塞比色管中，加水至10.0ml，制備標(biāo)準(zhǔn)系列。氨氮含量分別為0、1.0、2.0、5.0、

10.0、20.0、35.0μg。

向標(biāo)準(zhǔn)系列中加入40ml硝普酸鈉-苯酚顯色劑（4.1.13），充分混合，靜置15min。然

后分別加入1.00ml二氯異氰尿酸鈉顯色劑（4.1.14），充分混合，在15℃～35℃條件下至少

靜置5h。于630nm波長處，以水為參比，測量吸光度。以扣除零濃度的校正吸光度為縱坐

標(biāo)，氨氮含量（μg）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。

5

7.1.2測定

量取10.0ml試料（6.4）至100ml具塞比色管中，按照校準(zhǔn)曲線（7.1.1）比色步驟測

量吸光度。

注4：當(dāng)試料中氨氮濃度超過校準(zhǔn)曲線的最高點(diǎn)時，應(yīng)用氯化鉀溶液（4.1.7）稀釋試料，重新測定。

7.1.3空白試驗(yàn)

量取10.0ml空白試料（6.5）至100ml具塞比色管中，按照校準(zhǔn)曲線（7.1.1）比色步

驟測量吸光度。

7.2亞硝酸鹽氮

7.2.1校準(zhǔn)

分別量取0、1.00、5.00ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ（4.2.7）和1.00、3.00、6.00ml

亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.2.6）于一組100ml容量瓶，加水稀釋至標(biāo)線，混勻，制備標(biāo)

準(zhǔn)系列，亞硝酸鹽氮含量分別為0、10.0、50.0、100、300、600μg。

分別量取1.00ml上述標(biāo)準(zhǔn)系列于一組25ml具塞比色管中，加入20ml水，搖勻。向每

個比色管中加入0.20ml顯色劑（4.2.10），充分混合，靜置60min至90min，在室溫下顯色。

于543nm波長處，以水為參比，測量吸光度。以扣除零濃度的校正吸光度為縱坐標(biāo)，亞硝

酸鹽氮含量（μg）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。

7.2.2測定

量取1.00ml試料（6.4）至25ml比色管中，按照校準(zhǔn)曲線（7.2.1）比色步驟測量吸光

度。

注5：當(dāng)試料中的亞硝酸鹽氮含量超過校準(zhǔn)曲線的最高點(diǎn)時，應(yīng)用氯化鉀溶液（4.1.7）稀釋試料，重

新測定。

7.2.3空白試驗(yàn)

量取1.00ml空白試料（6.5）至25ml比色管中，按照校準(zhǔn)曲線（7.2.1）比色步驟測量

吸光度。

7.3硝酸鹽氮

7.3.1還原柱使用前的準(zhǔn)備

打開活塞，讓氯化銨緩沖溶液全部流出還原柱。必要時，用水清洗掉表面所形成的鹽。

再分別用20ml氯化銨緩沖溶液使用液（4.3.20）、20ml氯化銨緩沖溶液貯備液（4.3.19）和

20ml氯化銨緩沖溶液使用液（4.3.20）濾過還原柱，待用。

7.3.2校準(zhǔn)

分別量取0、1.00、5.00ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ（4.3.13）和1.00、3.00、6.00ml硝

酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.3.12）于一組100ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻，制備標(biāo)準(zhǔn)

系列，硝酸鹽氮含量分別為0、10.0、50.0、100、300、600μg。

關(guān)閉活塞，分別量取1.00ml校準(zhǔn)系列于還原柱中。向還原柱中加入10ml氯化銨緩沖

溶液使用液（4.3.20），然后打開活塞，以1ml/min的流速通過還原柱，用50ml具塞比色管

收集洗脫液。當(dāng)液面達(dá)到頂部棉花時再加入20ml氯化銨緩沖溶液使用液（4.3.20），收集所

有流出液，移開比色管。最后用10ml氯化銨緩沖溶液使用液（4.3.20）清洗還原柱。

6

向上述比色管中加入0.20ml顯色劑（4.3.23），充分混合，在室溫下靜置60min至90min。

于543nm波長處，以水為參比，測量吸光度。以扣除零濃度的校正吸光度為縱坐標(biāo)，硝酸

鹽氮含量（μg）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。

7.3.3測定

量取1.00ml試料（6.4）至還原柱中，按照校準(zhǔn)曲線（7.3.2）步驟測量吸光度。

注：當(dāng)試料中硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮的總量超過校準(zhǔn)曲線的最高點(diǎn)時，應(yīng)用氯化鉀溶液（4.1.7）稀釋

試料，重新測定。

7.3.4空白試驗(yàn)

量取1.00ml空白試料（6.5）至還原柱中，按照校準(zhǔn)曲線（7.3.2）步驟測量吸光度。

8結(jié)果計(jì)算與表示

8.1結(jié)果計(jì)算

8.1.1氨氮

樣品中的氨氮含量ω（mg/kg），按照公式（1）進(jìn)行計(jì)算。

m?m

ω=10?f?R（1）

V

ω——樣品中氨氮的含量，mg/kg；

m1——從校準(zhǔn)曲線上查得的試料中氨氮的含量，μg；

m0——從校準(zhǔn)曲線上查得的空白試料中氨氮的含量，μg；

V——測定時的試料體積，10.0ml；

f——試料的稀釋倍數(shù)；

R——試樣體積（包括提取液體積與土壤中水分的體積）與干土的比例系數(shù)，ml/g；

按照公式（2）進(jìn)行計(jì)算。

[VES+ms?(1?wdm)/dHO]

R=2（2）

ms?wdm

VES——提取液的體積，200ml；

ms——試樣量，40.0g；

d——水的密度，1.0g/ml；

H2O

wdm——土壤中的干物質(zhì)含量，%。

8.1.2亞硝酸鹽氮

樣品中亞硝酸鹽氮含量ω（mg/kg），按照公式（3）進(jìn)行計(jì)算。

m?m

ω=10?f?R（3）

V

ω——樣品中亞硝酸鹽氮的含量，mg/kg；

m1——從校準(zhǔn)曲線上查得的試料中亞硝酸鹽氮的含量，μg；

m0——從校準(zhǔn)曲線上查得的空白試料中亞硝酸鹽氮的含量，μg；

7

V——測定時的試料體積，1.00ml；

f——試料的稀釋倍數(shù)；

R——試樣體積（包括提取液體積與土壤中水分的體積）與干土的比例系數(shù)，ml/g；

按照公式（2）進(jìn)行計(jì)算。

8.1.3硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量

樣品中硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量的含量ω（mg/kg），按照公式（4）進(jìn)行計(jì)算。

m?m

ω=10?f?R（4）

V

ω——樣品中硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量的含量，mg/kg；

m1——從校準(zhǔn)曲線上查得的試料中硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量的含量，μg；

m0——從校準(zhǔn)曲線上查得的空白試料中硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量的含量，μg；

V——測定時的試料體積，1.00ml；

f——試料的稀釋倍數(shù)；

R——試樣體積（包括提取液體積與土壤中水分的體積）與干土的比例系數(shù)，ml/g；

按照公式（2）進(jìn)行計(jì)算。

8.1.4硝酸鹽氮

樣品中硝酸鹽氮含量ω硝酸鹽氮（mg/kg），按照公式（5）進(jìn)行計(jì)算：

ω硝酸鹽氮=ω硝酸鹽氮與亞硝酸鹽氮總量－ω亞硝酸鹽氮（5）

8.2結(jié)果表示

當(dāng)測定結(jié)果小于1mg/kg時，保留兩位小數(shù)；當(dāng)測定結(jié)果大于等于1mg/kg時，保留三

位有效數(shù)字。

9精密度和準(zhǔn)確度

9.1氨氮

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對氨氮含量分別為0.73mg/kg、1.59mg/kg、5.69mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了測

定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為8.41%、4.77%、4.63%。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對氨氮含量為1.62mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量分別為40μg

和100μg；對氨氮含量為5.76mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量為200μg，實(shí)

際樣品加標(biāo)回收率為80.9%~105%。

9.2亞硝酸鹽氮

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對亞硝酸鹽氮含量分別為2.46mg/kg、4.09mg/kg、8.64mg/kg的土壤樣品進(jìn)

行了測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.72%、1.66%、1.25%。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對亞硝酸鹽含量為2.46mg/kg的實(shí)際土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量為

400μg；對亞硝酸鹽氮含量為4.07mg/kg的實(shí)際土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量分別

為100μg和360μg；對亞硝酸鹽氮含量為9.04mg/kg的實(shí)際土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，

8

加標(biāo)量分別為200μg和600μg，實(shí)際樣品加標(biāo)回收率為70.8%~91.7%。

9.3硝酸鹽氮

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對硝酸鹽氮含量分別為1.84mg/kg、16.2mg/kg、21.9mg/kg的土壤樣品進(jìn)行

了測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.07%、3.26%、4.18%。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對硝酸鹽氮含量為1.85mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量分別為

40μg、80μg；對硝酸鹽氮含量為16.9mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量分別為

300μg、500μg，對硝酸鹽氮含量為21.5mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了加標(biāo)分析測定，加標(biāo)量分別

為400μg、600μg，實(shí)際樣品加標(biāo)回收率為81%~114%。

10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

10.1每批樣品至少做一個空白試驗(yàn)，測試結(jié)果應(yīng)低于方法檢出限。

10.2每批樣品應(yīng)測定10%的平行樣品。平行雙樣測定結(jié)果>10.0mg/kg時，相對偏差應(yīng)在

10%以內(nèi)，平行雙樣測定結(jié)果≤10.0mg/kg時，相對偏差應(yīng)在20%以內(nèi)。

10.3每批樣品應(yīng)測定10%的加標(biāo)樣品。氨氮加標(biāo)回收率應(yīng)在80%~120%之間；亞硝酸鹽氮

加標(biāo)回收率應(yīng)在70%~120%之間；硝酸鹽氮加標(biāo)回收率應(yīng)在80%~120%之間。

10.4校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.999。

10.5每批樣品應(yīng)分析一個校準(zhǔn)曲線的中間點(diǎn)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，其測定結(jié)果與校準(zhǔn)曲線該點(diǎn)濃

度的相對偏差應(yīng)≤10%。否則，需重新繪制校準(zhǔn)曲線。

10.6硝酸鹽氮還原效率

量取1.00ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ（4.3.14）和亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ（4.3.17），分

別按照7.3.2步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)化并測定吸光度。測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)在5%以內(nèi)，否則，應(yīng)對

還原柱中的鎘粉進(jìn)行重新處理。

9

附錄A

（資料性附錄）

本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的章條編號對照

附表A.1給出了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的章條編號對照一覽表。

附表A.1本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的章條編號對照

本標(biāo)準(zhǔn)章條編號對應(yīng)的ISO/TS14256-1:2003（E）章條編號

11

22

3.16.4.1

3.26.3.1

3.36.2.1

4.1.16.4.3.2

4.1.26.4.3.6

4.1.36.4.3.7

4.1.46.4.3.9

4.1.56.1.2.2

4.1.66.4.3.3

4.1.76.1.2.2

4.1.86.4.3.3.1

4.1.9—

4.1.106.4.3.4.1

4.1.116.4.3.5.1

4.1.126.4.3.8

4.1.13～4.1.146.4.3.10～6.4.3.11

4.2.16.3.3.4

4.2.2和4.2.46.1.2.2

4.2.36.3.3.2

4.2.5~4.2.7—

4.2.86.3.3.6

4.2.96.2.3.12.1

4.2.106.3.3.8

4.3.1～4.3.26.2.3.8～6.2.3.9

4.3.36.2.3.7

4.3.4和4.3.106.1.2.2

4.3.5～4.3.76.2.3.2、6.2.3.3和6.2.3.4

4.3.86.2.3.14

4.3.9—

4.3.11~4.3.13—

4.3.146.2.3.2.2

4.3.15、4.3.16—

4.3.176.2.3.3.2

10

本標(biāo)準(zhǔn)章條編號對應(yīng)的ISO/TS14256-1:2003（E）章條編號

4.3.186.2.3.5

—6.2.3.6

4.3.19～4.3.206.2.3.6.1～6.2.3.6.2

4.3.216.2.3.11

4.3.226.2.3.12.1

4.3.236.2.3.13

5.16.2.2.2

5.26.2.2.4

5.36.1.3.3

5.46.2.2.1

5.56.1.3.4

5.66.1.3.1

5.76.1.3.2

5.86.1.3.6

5.9和5.10

6.1—

6.24

6.35的部分內(nèi)容

6.4和6.56.1.4的部分內(nèi)容

7.1.1、7.1.2和7.1.36.4.4的部分內(nèi)容

7.2.1、7.2.2、7.2.36.3.4的部分內(nèi)容

7.3.1、7.3.2、7.3.3、7.3.46.2.5.1～6.2.5.4

8.1.16.4.5

8.1.2—

8.1.36.3.5

8.1.4—

9—

10.1~10.5—

10.66.2.5.5

附錄A—

附錄B—

附錄C6.2.4

11

附錄B

（資料性附錄）

本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的技術(shù)性差異及其原因

附表B.1給出了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的技術(shù)性差異及其原因一覽表。

附表B.1本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003（E）的技術(shù)性差異及其原因

本標(biāo)準(zhǔn)條款技術(shù)性差異原因

依據(jù)HJ168的相關(guān)規(guī)定，給出了

1增加了檢出限和測定下限的內(nèi)容。

方法檢出限和測定下限。

盡量引用國內(nèi)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)

2修改了規(guī)范性文件內(nèi)容。

規(guī)范。

修改了標(biāo)準(zhǔn)貯備液和標(biāo)準(zhǔn)使用液的濃

4為了便于標(biāo)準(zhǔn)系列的制備。

度。

8.1.1~8.1.3計(jì)算公式的表達(dá)方式有差異。含量采用校準(zhǔn)曲線計(jì)算。

8.1.4增加了硝酸鹽氮的結(jié)果計(jì)算方法。用于計(jì)算土壤中硝酸鹽氮含量。

依據(jù)HJ168的相關(guān)規(guī)定，規(guī)定了

8.2增加了結(jié)果表示內(nèi)容。

測定結(jié)果的有效數(shù)字。

依據(jù)HJ168的相關(guān)規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室

9增加了精密度和準(zhǔn)確度內(nèi)容。內(nèi)進(jìn)行了精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn)，

并給出了試驗(yàn)結(jié)果。

按照HJ168的相關(guān)規(guī)定，增加本

10增加了質(zhì)量保證和質(zhì)量控制內(nèi)容。

條款。

增加了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003按照采用國際標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)則要求增

附錄A

（E）章節(jié)編號對照表。加相關(guān)內(nèi)容。

增加了本標(biāo)準(zhǔn)與ISO/TS14256-1:2003按照采用國際標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)則要求增

附錄B

（E）技術(shù)性差異及其原因。加相關(guān)內(nèi)容。

12

附錄C

（資料性附錄）

還原柱的制備

C.1鎘粉的處理

用濃鹽酸（4.3.2）浸泡約10g鎘粉（4.3.3）10min，然后用水沖洗至少五次。再用水（水

量蓋過鎘粉即可）浸泡（約10min），加入約0.5g硫酸銅，混合1min，然后用水沖洗至少

10次，直至黑色銅絮凝物消失。重復(fù)采用濃鹽酸（4.3.2）浸泡混合1min，然后用水沖洗至

少五次。處理好的鎘粉，用水浸泡，在1h內(nèi)裝柱。

C.2還原柱的準(zhǔn)備

向還原柱底端加入少許棉花，加水至漏斗三分之二處（L1），緩慢添加處理好的鎘粉至

L3處（約為100mm），添加鎘粉的同時，應(yīng)不斷敲打柱子使其填實(shí)，最后，在上端加入少

許棉花至L2處。

如果還原柱在1h內(nèi)不使用，應(yīng)加入氯化銨緩沖溶液貯備液（4.3.19）至L1處。蓋上漏

斗蓋子，防止蒸發(fā)和灰塵進(jìn)入。在這樣的條件下，還原柱可保存一個月。但是，每次使用前

要檢查還原柱的轉(zhuǎn)化效率。

還原柱示意圖，見附圖C.1。

13

1-還原柱蓋子2-填充的棉花3-處理后的鎘粉（顆粒直徑為0.3mm-0.8mm）4-填充的棉花

尺寸單位：mm。

附圖C.1還原柱示意圖

14

中華人民共和國國家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)

HJ634—2012

土壤氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測

定氯化鉀溶液提取-分光光度法

Soil-Determinationofammonium,nitriteandnitratebyextractionwith

potassiumchloridesolution-spectrophotometricmethods

（發(fā)布稿）

本電子版為發(fā)布稿。請以中國環(huán)境科學(xué)出版社出版的正式標(biāo)準(zhǔn)文本為準(zhǔn)。

土壤氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定

氯化鉀溶液提取-分光光度法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的氯化鉀溶液提?。止夤舛确ā?/p>

本標(biāo)準(zhǔn)適用于土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定。

當(dāng)樣品量為40.0g時，本方法測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的檢出限分別為

0.10mg/kg、0.15mg/kg、0.25mg/kg，測定下限分別0.40mg/kg、0.60mg/kg、1.00mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本

標(biāo)準(zhǔn)

HJ168環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則

HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法

HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

ISO/TS14256-1土壤質(zhì)量硝酸鹽氮、亞硝酸鹽氮、氨氮的測定氯化鉀溶液提取

法（Soilquality-Determinationofnitrate,nitriteandammoniuminfield-moistsoilsbyextraction

withpotassiumchloridesolution）

3方法原理

3.1氨氮

氯化鉀溶液提取土壤中的氨氮，在堿性條件下，提取液中的氨離子在有次氯酸根離子存

在時與苯酚反應(yīng)生成藍(lán)色靛酚染料，在630nm波長具有最大吸收。在一定濃度范圍內(nèi)，氨

氮濃度與吸光度值符合朗伯-比爾定律。

3.2亞硝酸鹽氮

氯化鉀溶液提取土壤中的亞硝酸鹽氮，在酸性條件下，提取液中的亞硝酸鹽氮與磺胺反

應(yīng)生成重氮鹽，再與鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料，在波長543nm波長具有

最大吸收。在一定濃度范圍內(nèi)，亞硝酸鹽氮濃度與吸光度值符合朗伯-比爾定律。

3.3硝酸鹽氮

氯化鉀溶液提取土壤中的硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮，提取液通過還原柱，將硝酸鹽氮還原

為亞硝酸鹽氮，在酸性條件下，亞硝酸鹽氮與磺胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與鹽酸N-（1-萘基）

-乙二胺偶聯(lián)生成紅色染料，在波長543nm處具有最大吸收，測定硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮總

量。硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮總量與亞硝酸鹽氮含量之差即為硝酸鹽氮含量。

4試劑和材料

1

除非另有注明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑，實(shí)驗(yàn)用水為電導(dǎo)率小于0.2

mS/m（25℃時測定）的去離子水。

4.1氨氮

4.1.1濃硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml。

4.1.2二水檸檬酸鈉（C6H5Na3O7·2H2O）。

4.1.3氫氧化鈉（NaOH）。

4.1.4二氯異氰尿酸鈉（C3Cl2N3NaO3·H2O）。

4.1.5氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.1.6氯化銨（NH4Cl）：優(yōu)級純

于105℃下烘干2h。

4.1.7氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

稱取74.55g氯化鉀（4.1.5），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.1.8氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NH4Cl）=200mg/L

稱取0.764g氯化銨（4.1.6），用適量水溶解，加入0.30ml濃硫酸（4.1.1），冷卻后，

移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。該溶液在避光、4℃下可保存一個月?；蛑苯淤?/p>

買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.1.9氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ（NH4Cl）=10.0mg/L

量取5.0ml氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.1.8）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現(xiàn)

配。

4.1.10苯酚溶液

稱取70g苯酚（C6H5OH）溶于1000ml水中。該溶液貯存于棕色玻璃瓶中，在室溫條

件下可保存一年。

注：配制苯酚溶液時應(yīng)避免接觸皮膚和衣物。

4.1.11二水硝普酸鈉溶液

稱取0.8g二水硝普酸鈉{Na2[Fe（CN）5NO]·2H2O}溶于1000ml水中。該溶液貯存于

棕色玻璃瓶中，在室溫條件下可保存三個月。

4.1.12緩沖溶液

稱取280g二水檸檬酸鈉（4.1.2）及22.0g氫氧化鈉（4.1.3），溶于500ml水中，移入

1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.1.13硝普酸鈉-苯酚顯色劑

量取15ml二水硝普酸鈉溶液（4.1.11）及15ml苯酚溶液（4.1.10）和750ml水，混勻。

該溶液用時現(xiàn)配。

4.1.14二氯異氰尿酸鈉顯色劑

稱取5.0g二氯異氰尿酸鈉（4.1.4）溶于1000ml緩沖溶液（4.1.12）中，4℃下可保存

一個月。

4.2亞硝酸鹽氮

4.2.1濃磷酸：ρ（H3PO4）=1.71g/ml。

2

4.2.2氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.2.3亞硝酸鈉（NaNO2）：優(yōu)級純

干燥器中干燥24h。

4.2.4氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

同4.1.7。

4.2.5亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO2-N）=1000mg/L

稱取4.926g亞硝酸鈉（4.2.3），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混

勻。該溶液貯存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月?；蛑苯淤徺I市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.2.6亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ（NO2-N）=100mg/L

量取10.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.2.5）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.2.7亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ（NO2-N）=10.0mg/L

量取10.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.2.6）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。

用時現(xiàn)配。

4.2.8磺胺溶液（C6H8N2O2S）

向1000ml容量瓶中加入600ml水，再加入200ml濃磷酸（4.2.1），然后加入80g磺胺。

用水定容，混勻。該溶液于4℃下可保存一年。

4.2.9鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液

稱取0.40g鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺（C12H14N2·2HCl）溶于100ml水中。4℃下保存，

當(dāng)溶液顏色變深時應(yīng)停止使用。

4.2.10顯色劑

分別量取20ml磺胺溶液（4.2.8）、20ml鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液（4.2.9）、20ml

濃磷酸（4.2.1）于100ml棕色試劑瓶中，混合。4℃下保存，當(dāng)溶液變黑時應(yīng)停止使用。

4.3硝酸鹽氮

4.3.1濃磷酸：ρ（H3PO4）=1.71g/ml。

4.3.2濃鹽酸：ρ（HCl）=1.12g/ml。

4.3.3鎘粉：粒徑0.3mm~0.8mm。

4.3.4氯化鉀（KCl）：優(yōu)級純。

4.3.5硝酸鈉（NaNO3）：優(yōu)級純

干燥器中干燥24h。

4.3.6亞硝酸鈉（NaNO2）：優(yōu)級純

同4.2.3。

4.3.7氯化銨（NH4Cl）。

4.3.8硫酸銅（CuSO4.5H2O）。

4.3.9氨水（NH4OH）：優(yōu)級純。

4.3.10氯化鉀溶液：c（KCl）=1mol/L

同4.1.7。

4.3.11硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO3-N）=1000mg/L

3

稱取6.068g硝酸鈉（4.3.5），用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

該溶液貯存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月。或直接購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.3.12硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ（NO3-N）=100mg/L

量取10.0ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.3.11）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.3.13硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ（NO3-N）=10.0mg/L

量取10.0ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。

用時現(xiàn)配。

4.3.14硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ：ρ（NO3-N）=6.0mg/L

量取6.0ml標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現(xiàn)配。

4.3.15亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ（NO2-N）=1000mg/L

同4.2.5。

4.3.16亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液：ρ（NO2-N）=100mg/L

同4.2.6。

4.3.17亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅲ：ρ（NO2-N）=6.0mg/L

量取6.0ml亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)中間液（4.3.16）于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用

時現(xiàn)配。

4.3.18氨水溶液：（1+3）。

4.3.19氯化銨緩沖溶液貯備液：ρ（NH4Cl）=100g/L

將100g氯化銨（4.3.7）溶于1000ml容量瓶中，加入約800ml水，用氨水溶液（4.3.18）

調(diào)節(jié)pH值為8.7~8.8，用水定容，混勻。

4.3.20氯化銨緩沖溶液使用液：ρ（NH4Cl）=10g/L

量取100ml氯化銨緩沖溶液貯備液（4.3.19）于1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。

4.3.21磺胺溶液

同4.2.8。

4.3.22鹽酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液

同4.2.9。

4.3.23顯色劑

同4.2.10。

5儀器和設(shè)備

5.1分光光度計(jì)：具10mm比色皿。

5.2pH計(jì)：配有玻璃電極和參比電極。

5.3恒溫水浴震蕩器：振蕩頻率可達(dá)40次/分鐘。

5.4還原柱：用于將硝酸鹽氮還原為亞硝酸鹽氮，具體制備方法見附錄C。

5.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速可達(dá)3000r/min，具100ml聚乙烯離心管。

5.6天平：精度為0.001g。

5.7聚乙烯瓶：500ml，具螺旋蓋。或采用既不吸收也不向溶液中釋放所測組分的其他容器。

4

5.8具塞比色管：20ml、50ml、100ml。

5.9樣品篩：5mm。

5.10一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

6樣品

6.1樣品的采集

按照HJ/T166的相關(guān)規(guī)定采集樣品。

6.2樣品的保存

樣品采集后應(yīng)于4℃下運(yùn)輸和保存，并在3日內(nèi)分析完畢。否則，應(yīng)于-20℃（深度冷

凍）下保存，樣品中硝酸鹽氮和氨氮可以保存數(shù)周。

當(dāng)測定深度冷凍的硝酸鹽氮和氨氮含量時，應(yīng)控制解凍的溫度和時間。室溫環(huán)境下解凍

時，需在4h內(nèi)完成樣品解凍、勻質(zhì)化和提取；如果在4℃下解凍，解凍時間不應(yīng)超過48h。

注1：為了縮短樣品的解凍時間，應(yīng)在樣品被冷凍前，將其敲碎成小顆粒狀。

6.3試樣的制備

將采集后的土壤樣品去除雜物，手工或儀器混勻，過樣品篩。在進(jìn)行手工混合時應(yīng)戴橡

膠手套。過篩后樣品分成兩份，一份用于測定干物質(zhì)含量，測定方法參見HJ613；另一份

用于測定待測組分含量。

6.4試料的制備

稱取40.0g試樣（6.3），放入500ml聚乙烯瓶中，加入200ml氯化鉀溶液（4.1.7），在

20±2℃的恒溫水浴震蕩器中震蕩提取1h。轉(zhuǎn)移約60ml提取液于100ml聚乙烯離心管中，

在3000r/min的條件下離心分離10min。然后將約50ml上清液轉(zhuǎn)移至100ml比色管中，

制得試料，待測。

注2：提取液也可以在4℃下，以靜置4h的方式代替離心分離，制得試料。

6.5空白試料的制備

加入200ml氯化鉀溶液于500ml聚乙烯瓶中，按照與試料的制備（6.4）相同步驟制備

空白試料。

注3：試料需要在一天之內(nèi)分析完畢，否則應(yīng)在4℃下保存，保存時間不超過一周。

7分析步驟

7.1氨氮

7.1.1校準(zhǔn)

分別量取0、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、3.50ml