TNAIA 0295-2024 枸杞中枸杞酸的測(cè)定 液相色譜法

ICS65.020.01CCSA017T/NAIA團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/NAIA0295—2024枸杞中枸杞酸的測(cè)定 液相色譜法2024-05-31發(fā)布 2024-06-10實(shí)施寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì) 發(fā)布T/NAIA0295-2024T/NAIA0295-2024II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)食品檢測(cè)研究院（國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)管重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（枸杞和葡萄酒質(zhì)量安全））、寧夏回族自治區(qū)標(biāo)準(zhǔn)化研究院、寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)、寧夏農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所。本文件主要起草人：李瑞雪、王澤嵐、劉繼輝、王紫昕、朱捷、謝芳、龔慧、路敏、王琛、陳盼盼、吳明、呂毅、馬桂娟、葛謙、張小飛。本文件為首次發(fā)布。T/NAIA0295-2024T/NAIA0295-2024PAGEPAGE1枸杞中枸杞酸的測(cè)定液相色譜法范圍本文件規(guī)定了枸杞中枸杞酸含量的液相色譜法。本文件適用于枸杞中枸杞酸的測(cè)定。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理樣品經(jīng)甲醇溶液提取，超聲離心，采用液相色譜儀測(cè)定，外標(biāo)法定量。試劑和材料除另有說明，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。試劑乙腈(CH3CN)：色譜純。甲醇(CH3OH)：色譜純。試劑配制50%500mL甲醇（5.1.2）1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。標(biāo)準(zhǔn)品枸杞酸（CAS純度≥95%準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)溶液制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1010mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液在-18℃及以下避光保存。標(biāo)準(zhǔn)中間液（1mg/mL）：移取適量混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液。標(biāo)準(zhǔn)工作液：移取適量標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.4.2）50%甲醇溶液（5.2.1）稀釋成濃度為1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。臨用現(xiàn)配。儀器和設(shè)備液相色譜儀：帶紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。6.2 0.00001g0.01g。高速離心機(jī)：15000r/min。10000r/min。超聲波振蕩器。0.45μm有機(jī)濾膜。分析步驟試樣制備干樣(枸杞)：實(shí)驗(yàn)時(shí)將-18℃冷凍保存的樣品取出，立即用高速萬能粉碎機(jī)(可加少量液氮)粉碎(30g20s)，置于樣品瓶中，-18℃冷凍備用。鮮樣(枸杞)：樣品用組織搗碎機(jī)制成勻漿(200g30s)，置于樣品瓶中，-18℃冷凍備用。試樣的提取稱取0.5g~2.0g（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入50mL50%甲醇溶液20min，15000r/min5min100mL40mL50%甲醇溶液（5.2.1），50%甲醇溶液0.45μm濾膜，濾液待上機(jī)測(cè)定。液相色譜參考條件a)色譜柱：SIL色譜柱（150mm×4.6mm，5μm），或同等性能色譜柱；b)柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm；進(jìn)樣量：20μL；流速：1.0mL/min；流動(dòng)相：水+乙腈（10+90）。測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定（AA.1）液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試樣溶液的測(cè)定將試樣測(cè)定液進(jìn)行色譜分析，根據(jù)試樣峰面積從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得相應(yīng)的枸杞酸濃度。分析結(jié)果的表述試樣中枸杞酸的含量按式（1）計(jì)算。X CVm

10001000

……（1）式中：—試樣中枸杞酸的含量，單位為克每千克（g/kg）；由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中枸杞酸的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升（μg/mL)；V—樣品測(cè)定液總體積，單位為毫升（mL）；m—試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性測(cè)定條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過其算術(shù)平均值的10%。其他當(dāng)取樣量為0.5g，定容100mL時(shí)，本方法檢出限為0.02g/kg，定量限為0.04g/kg。附錄A（資料性）枸杞酸標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖枸杞酸