2025版高考生物一輪總復(fù)習(xí)素養(yǎng)提升選擇性必修3第10單元生物技術(shù)與工程第4講動物細(xì)胞工程

第4講動物細(xì)胞工程構(gòu)|建|網(wǎng)|絡(luò)真|題|再|(zhì)現(xiàn)1．(2024·北京卷)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。探討者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是(D)A．須要運用動物細(xì)胞培育技術(shù)B．須要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D．篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細(xì)胞解析：單克隆抗體制備過程中須要對骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培育，即須要運用動物細(xì)胞培育技術(shù)，A正確；該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，故應(yīng)用PTH刺激小鼠，使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，B正確；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，可利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞，C正確；由于一種B淋巴細(xì)胞經(jīng)分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選出的單個雜交瘤細(xì)胞無法分泌多種抗體，D錯誤。故選D。2．(2024·湖北卷)某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害特別嚴(yán)峻。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術(shù)路途如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)不須要(填“須要”或“不須要”)通過原代培育擴大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對細(xì)胞膜的作用是使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常運用特定的選擇培育基(如HAT培育基)，該培育基對未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒須要運用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是④。解析：(1)漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能增殖，所以不須要通過原代培育擴大細(xì)胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，用特定的選擇培育基進(jìn)行篩選。在該培育基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，是運用了抗原—抗體雜交技術(shù)，抗體檢測呈陽性的細(xì)胞，即為所需的雜交瘤細(xì)胞。(4)DNA連接酶能連接DNA片段，催化合成磷酸二酯鍵，即將一條脫氧核苷酸5′端的磷酸基團(tuán)與另一條脫氧核苷酸鏈的3′端的—OH相連，④符合題意。故選④。3．(2024·湖南卷)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計試驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培育和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培育時，須要定期更換培育液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，緣由是動物胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原其全能性相對簡潔，動物體細(xì)胞分化程度高，復(fù)原其全能性特別困難。(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的試驗思路取動物A和克隆動物A的肝細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交。解析：(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)。限制性內(nèi)切核酸酶是作用于其所識別序列中兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培育時，須要定期更換培育液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。(3)由于動物胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原其全能性相對簡潔，動物體細(xì)胞分化程度高，復(fù)原其全能性特別困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。(4)先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲得已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體；若要利用此抗體確定克隆動