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課時(shí)2微生物的培育與應(yīng)用一、選擇題1.[2024惠州一調(diào)]微生物的純培育既須要相宜的培育基,又要防止雜菌污染。下列相關(guān)敘述正確的是(A)A.消毒和滅菌的殺菌程度存在差異B.培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度越高,對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利C.微生物的純培育物就是不含有代謝廢物的微生物培育物D.操作者要對(duì)操作的空間、自己的衣服和手進(jìn)行滅菌解析消毒是指運(yùn)用較為和順的物理、化學(xué)或者生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,滅菌是指運(yùn)用猛烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物,包括芽孢和孢子,二者的殺菌程度存在差異,A正確;培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度過(guò)高,有可能使培育的微生物脫水死亡,對(duì)微生物的生長(zhǎng)不利,B錯(cuò)誤;由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培育物,其中含有代謝廢物,C錯(cuò)誤;操作者要對(duì)操作的空間、自己的衣服和手進(jìn)行清潔和消毒,將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等進(jìn)行滅菌,D錯(cuò)誤。2.[2024廣東七校第一次聯(lián)考]下列關(guān)于微生物選擇培育的敘述,錯(cuò)誤的是(D)A.用纖維素作為唯一碳源的選擇培育基分別獲得纖維素分解菌B.用尿素作為唯一氮源的選擇培育基分別獲得尿素分解菌C.用缺少有機(jī)碳源的選擇培育基分別獲得自養(yǎng)型微生物D.用含有青霉素的選擇培育基分別獲得酵母菌和細(xì)菌解析篩選纖維素分解菌時(shí),需用以纖維素作為唯一碳源的培育基,A正確;篩選尿素分解菌時(shí),需用以尿素作為唯一氮源的培育基,B正確;自養(yǎng)型微生物可以自身合成有機(jī)物,培育分別自養(yǎng)型微生物時(shí),培育基中可以不加有機(jī)碳源,C正確;青霉素是一種抗生素,可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖,但對(duì)真核生物不起作用,故用含有青霉素的選擇培育基可分別獲得酵母菌,但分別不出細(xì)菌,D錯(cuò)誤。3.[2024綏化檢測(cè)]如圖為用平板劃線法接種微生物的示意圖,下列說(shuō)法正確的是(B)A.視察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是①B.圖中所示的4次劃線后,都應(yīng)將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒C.圖中所示的4次劃線前在酒精燈上灼燒的目的相同D.圖中④區(qū)域最可能出現(xiàn)單菌落,①區(qū)域不行能出現(xiàn)單菌落解析由圖可知,劃線應(yīng)當(dāng)是從區(qū)域①起先的,隨著在平板上連續(xù)劃線,菌體數(shù)目越來(lái)越少,因此,視察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是④,A錯(cuò)誤;圖中所示的4次劃線后,都應(yīng)將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒,其中前三次灼燒的目的是保證接種環(huán)上的菌種來(lái)自上次劃線的末端,而最終一次灼燒的目的是防止菌種污染環(huán)境和操作者,B正確;圖中所示4次劃線前在酒精燈上灼燒的目的相同,都是滅菌,C錯(cuò)誤;當(dāng)菌體稀釋到確定程度后,圖中④區(qū)域最可能出現(xiàn)單菌落,而菌液中菌體數(shù)目較少時(shí),①區(qū)域也可能出現(xiàn)單菌落,D錯(cuò)誤。4.[結(jié)合生活實(shí)際/2024成都樹(shù)德中學(xué)檢測(cè)]為檢測(cè)自制冰激凌是否符合國(guó)家食品平安標(biāo)準(zhǔn),樹(shù)德中學(xué)學(xué)生進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)檢測(cè)自制冰激凌中的大腸桿菌含量。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是(B)A.培育大腸桿菌時(shí),須要將培育基的pH調(diào)至弱酸性B.在伊紅美藍(lán)培育基上大腸桿菌的菌落將呈現(xiàn)黑色C.將冰激凌溶化后進(jìn)行梯度稀釋,用平板劃線法進(jìn)行接種D.培育結(jié)束統(tǒng)計(jì)到的大腸桿菌的菌落數(shù)即為大腸桿菌的活菌數(shù)解析大腸桿菌屬于細(xì)菌,培育細(xì)菌時(shí)一般需將培育基的pH調(diào)至中性或弱堿性,A錯(cuò)誤;伊紅美藍(lán)培育基通常用于鑒別大腸桿菌,其原理是大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被伊紅(酸性染料)染成紅色,再與美藍(lán)(堿性染料)結(jié)合呈現(xiàn)黑色,B正確;由題干信息可知,試驗(yàn)要檢測(cè)自制冰激凌中的大腸桿菌含量,則須要將冰激凌溶化后進(jìn)行梯度稀釋,用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,C錯(cuò)誤;菌落計(jì)數(shù)時(shí),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí),視察到的只是一個(gè)菌落,故培育結(jié)束統(tǒng)計(jì)到的大腸桿菌的菌落數(shù)并不愿定是大腸桿菌的活菌數(shù),D錯(cuò)誤。5.[2024山東聯(lián)考]某生物愛(ài)好小組進(jìn)行了“探究不同濃度鏈霉素(一種抗生素)對(duì)細(xì)菌的作用”的試驗(yàn)。下列說(shuō)法正確的是(D)A.試驗(yàn)起從前需用鏈霉素處理細(xì)菌,使其產(chǎn)生耐藥性突變B.試驗(yàn)中所用培育皿和培育基均可接受干熱滅菌法滅菌C.試驗(yàn)中抑菌圈直徑越大,說(shuō)明細(xì)菌的耐藥性越強(qiáng)D.細(xì)菌耐藥性的增加,與細(xì)菌不斷適應(yīng)抗生素環(huán)境有關(guān)解析細(xì)菌的耐藥性突變發(fā)生在運(yùn)用鏈霉素之前,用鏈霉素處理細(xì)菌,是為了篩選出耐藥性的細(xì)菌,A錯(cuò)誤;試驗(yàn)中所用培育皿可用干熱滅菌法滅菌,而培育基接受高壓蒸汽滅菌法滅菌(濕熱滅菌法),B錯(cuò)誤;試驗(yàn)中抑菌圈直徑越小,說(shuō)明細(xì)菌的耐藥性越強(qiáng),C錯(cuò)誤;生物進(jìn)化是生物與生物、生物與無(wú)機(jī)環(huán)境相互作用的結(jié)果,細(xì)菌耐藥性的增加,與細(xì)菌不斷適應(yīng)抗生素環(huán)境有關(guān),D正確。6.[2024贛州模擬]甲、乙、丙是三種微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來(lái)培育微生物的三種培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖,甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是(D)粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ++++-+++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B.甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C.甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物D.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物解析Ⅰ培育基缺少氮源,而甲能在此培育基中正常生長(zhǎng)繁殖,說(shuō)明甲能固氮,屬于固氮微生物;Ⅱ培育基中缺少碳源,而乙能在此培育基中正常生長(zhǎng)繁殖,說(shuō)明乙能合成有機(jī)物,屬于自養(yǎng)微生物;Ⅲ是完全培育基,丙在此培育基上才能正常生長(zhǎng)繁殖,在Ⅰ、Ⅱ培育基中不能正常生長(zhǎng)繁殖,說(shuō)明丙是異養(yǎng)微生物,D正確。7.[2024福州一測(cè)]某探討小組用馬鈴薯瓊脂培育基對(duì)新釀米酒中的酵母菌進(jìn)行初步分別,結(jié)果如圖所示,相關(guān)敘述正確的是(C)A.圖a中下一次劃線總是從上一次劃線的首端起先B.配制馬鈴薯瓊脂培育基時(shí),其pH須要調(diào)整到中性C.浸泡在酒精中消毒的涂布器運(yùn)用前須要在火焰上灼燒D.圖a、圖b的方法都可以實(shí)現(xiàn)對(duì)酵母菌的分別和計(jì)數(shù)解析用平板劃線法分別微生物時(shí),下一次劃線應(yīng)當(dāng)從上一次劃線的末端起先,A錯(cuò)誤;酵母菌適合生長(zhǎng)在偏酸性的環(huán)境中,對(duì)酵母菌進(jìn)行分別時(shí),配制的馬鈴薯瓊脂培育基的pH須要調(diào)整到酸性,B錯(cuò)誤;將涂布器從酒精中取出時(shí),要讓多余的酒精在燒杯中滴盡,然后放在火焰上灼燒,再接著進(jìn)行后續(xù)規(guī)范操作,C正確;圖a為用平板劃線法分別微生物得到的結(jié)果,平板劃線法能用于微生物的分別,但不能用于微生物的計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。8.[2024鎮(zhèn)江檢測(cè)]下列關(guān)于微生物的培育與計(jì)數(shù)的描述正確的是(A)①分別能分解尿素的細(xì)菌要運(yùn)用以尿素為唯一氮源的選擇培育基②對(duì)微生物計(jì)數(shù)可以運(yùn)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種微生物③鑒定纖維素分解菌時(shí),在培育基中加入酚紅指示劑,假如指示劑變紅則能初步鑒定④在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大,且符合計(jì)數(shù)要求,則以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果⑤進(jìn)行微生物培育時(shí)可每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落的數(shù)目⑥獲得菌落數(shù)目為30~300的平板就說(shuō)明試驗(yàn)操作勝利A.①④⑤B.②③⑥C.②④⑤D.③⑤⑥解析分別能分解尿素的細(xì)菌要運(yùn)用以尿素為唯一氮源的選擇培育基,①正確;對(duì)微生物計(jì)數(shù)可以運(yùn)用稀釋涂布平板法接種微生物,平板劃線法接種微生物無(wú)法計(jì)數(shù),②錯(cuò)誤;鑒定纖維素分解菌時(shí),在培育基中加入剛果紅染色劑,而不是酚紅指示劑,③錯(cuò)誤;在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大,且符合計(jì)數(shù)要求,則以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果,④正確;進(jìn)行微生物培育時(shí)可每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落的數(shù)目,⑤正確;獲得2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目為30~300的平板,說(shuō)明試驗(yàn)操作比較勝利,⑥錯(cuò)誤。綜上,A符合題意。9.[2024廣東六校聯(lián)考]某愛(ài)好小組按如圖所示方法對(duì)沒(méi)有加工的鮮奶進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)。有關(guān)敘述正確的是(C)A.鮮奶常接受濕熱滅菌法進(jìn)行滅菌B.若培育基須要調(diào)整pH,應(yīng)當(dāng)在滅菌后、培育基凝固前進(jìn)行C.若3個(gè)培育皿中的菌落數(shù)分別為35、33、34,則1mL鮮奶中的細(xì)菌數(shù)為3.4×106個(gè)D.對(duì)鮮奶中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),常接受稀釋涂布平板法,用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比實(shí)際值偏大解析常接受巴氏消毒法對(duì)鮮奶進(jìn)行消毒,這種消毒方法可以殺死鮮奶中的絕大多數(shù)微生物,并且不破壞鮮奶的養(yǎng)分成分,A錯(cuò)誤;若培育基須要調(diào)整pH,應(yīng)當(dāng)在滅菌前進(jìn)行,B錯(cuò)誤;從圖中可以看出,涂布時(shí)吸取0.1mL稀釋液,稀釋倍數(shù)為104,若3個(gè)培育皿中的菌落數(shù)分別為35、33、34,則1mL鮮奶中的細(xì)菌數(shù)為(35+33+34)÷3÷0.1×104=3.4×106(個(gè)),C正確;運(yùn)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比實(shí)際值偏小,緣由是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個(gè)菌落,D錯(cuò)誤。10.[2024漳州檢測(cè)]土壤中的解磷菌能分泌磷酸酶或有機(jī)酸,溶解并吸取利用磷酸鈣。某企業(yè)從土壤中分別純化并發(fā)酵生產(chǎn)解磷菌菌肥,發(fā)酵液中解磷菌濃度達(dá)到2×108個(gè)/mL時(shí)發(fā)酵結(jié)束,分裝入庫(kù),投放市場(chǎng)前應(yīng)抽檢活菌濃度。下列敘述正確的是(A)A.從土壤中分別的解磷菌的培育基以磷酸鈣為唯一磷源B.可挑取發(fā)酵液中的單菌落進(jìn)行純化培育C.解磷菌菌肥發(fā)酵生產(chǎn)的中心環(huán)節(jié)是接種及分別提純產(chǎn)物D.抽檢活菌濃度時(shí),取0.1mL發(fā)酵液稀釋104倍后用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)解析由題干信息可知,土壤中的解磷菌能分泌磷酸酶或有機(jī)酸,溶解并吸取利用磷酸鈣,若要從土壤中分別純化并發(fā)酵生產(chǎn)解磷菌菌肥,應(yīng)制作以磷酸鈣為唯一磷源的培育基,A正確;固體培育基上能形成菌落,液體培育基不能形成菌落,其能夠用于對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培育,B錯(cuò)誤;發(fā)酵生產(chǎn)一般包括菌種的選育,擴(kuò)大培育,培育基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產(chǎn)物的分別、提純等方面,其中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵,C錯(cuò)誤;由題干信息可知,投放市場(chǎng)前需抽檢發(fā)酵液中活菌濃度,而發(fā)酵結(jié)束時(shí),發(fā)酵液中解磷菌濃度達(dá)到2×108個(gè)/mL,取0.1mL發(fā)酵液稀釋104倍后,稀釋液中解磷菌的濃度為0.2×104個(gè)/mL,用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)會(huì)因?yàn)榻饬拙粔蚍稚ⅲ绊懢鋽?shù)目的統(tǒng)計(jì),D錯(cuò)誤。二、非選擇題11.[結(jié)合生活實(shí)際/2024河南模擬,14分]幽門(mén)螺桿菌是一種微厭氧菌,它的侵染是引發(fā)胃炎的主要緣由。胃總是在不停蠕動(dòng),里面還有胃酸(pH在1.5左右),絕大部分的細(xì)菌都適應(yīng)不了。幽門(mén)螺桿菌能產(chǎn)生脲酶,脲酶可將尿素分解成氨和二氧化碳,氨可以中和胃酸疼惜幽門(mén)螺桿菌。請(qǐng)回答以下問(wèn)題:(1)人體的胃可以為幽門(mén)螺桿菌的生長(zhǎng)繁殖供應(yīng)水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等養(yǎng)分物質(zhì),按功能分類,人體胃中的內(nèi)容物相當(dāng)于選擇培育基。(2)依據(jù)題干信息可知,若要在體外培育幽門(mén)螺桿菌,培育溫度要求是37℃左右,氧氣條件是無(wú)氧。可在添加了尿素的培育基中加入酚紅指示劑視察菌落四周是否變紅,對(duì)幽門(mén)螺桿菌進(jìn)行初步鑒定。(3)有人提取了某胃炎患者家庭的100g剩菜,加入無(wú)菌水稀釋至1000mL。取0.1mL上述稀釋液分別接種到3個(gè)相宜的培育基中置于相宜的條件下進(jìn)行培育,三個(gè)平板上幽門(mén)螺桿菌菌落數(shù)均為30~300且相差不大,求平均值得到菌落數(shù)為A。試驗(yàn)過(guò)程中,接種方法一般為稀釋涂布平板法,由試驗(yàn)可知,每克剩菜中幽門(mén)螺桿菌的數(shù)量為A×102個(gè)。解析(1)幽門(mén)螺桿菌是異養(yǎng)型微生物,其生長(zhǎng)繁殖須要人體的胃供應(yīng)水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等;在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長(zhǎng)的培育基,稱為選擇培育基。胃里面含有胃酸,絕大部分的細(xì)菌都適應(yīng)不了,所以依據(jù)功能分類,人體胃中的內(nèi)容物相當(dāng)于選擇培育基。(2)人體體溫為37℃左右,幽門(mén)螺桿菌是一種微厭氧菌,因此若要在體外培育幽門(mén)螺桿菌,培育溫度應(yīng)為37℃左右、氧氣條件應(yīng)為無(wú)氧;在添加尿素的培育基中添加酚紅指示劑,當(dāng)幽門(mén)螺桿菌將尿素分解成氨后,氨能使酚紅指示劑變紅,若菌落四周變紅,則可初步鑒定幽門(mén)螺桿菌。(3)由題意可知,該試驗(yàn)接受的接種方法是稀釋涂布平板法;將100g剩菜加入無(wú)菌水稀釋至1000mL,則稀釋倍數(shù)為10,涂布所用的稀釋液的體積為0.1mL,因此每克剩菜中幽門(mén)螺桿菌的數(shù)量為A/0.1×10=A×102(個(gè))。一、選擇題12.[結(jié)合日常生活/2024遼寧]細(xì)菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細(xì)菌形成的。利用空氣微生物采樣器對(duì)某市人員密集型公共場(chǎng)所采樣并檢測(cè)細(xì)菌氣溶膠的濃度(菌落數(shù)/m3)。下列敘述錯(cuò)誤的是(D)A.采樣前需對(duì)空氣微生物采樣器進(jìn)行無(wú)菌處理B.細(xì)菌氣溶膠樣品恒溫培育時(shí)需將平板倒置C.同一稀釋度下至少對(duì)3個(gè)平板計(jì)數(shù)并取平均值D.稀釋涂布平板法檢測(cè)的細(xì)菌氣溶膠濃度比實(shí)際值高解析為防止雜菌污染,接種前須要對(duì)培育基、培育皿、微生物采樣器進(jìn)行滅菌,對(duì)試驗(yàn)操作者的雙手進(jìn)行消毒,A正確;純化培育時(shí),為防止污染培育基和水分蒸發(fā),培育皿應(yīng)倒置放在恒溫培育箱內(nèi)培育,B正確;微生物計(jì)數(shù)時(shí)在同一稀釋度下,應(yīng)至少須要對(duì)3個(gè)菌落數(shù)目在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)結(jié)果取平均值,以確保試驗(yàn)的精確性,C正確;運(yùn)用稀釋涂布平板法對(duì)微生物計(jì)數(shù)時(shí),結(jié)果往往偏小,緣由是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),在平板上只能視察到一個(gè)菌落,D錯(cuò)誤。13.[2024菏澤模擬]北京冬奧會(huì)的食堂讓各國(guó)運(yùn)動(dòng)健兒愛(ài)上中國(guó)味道,其餐余垃圾在垃圾集中點(diǎn)接受生化+霧化+膜過(guò)濾技術(shù)處理后,可以達(dá)到無(wú)二次污染的標(biāo)準(zhǔn)。為篩選對(duì)抗生素有抗性且能高效降解淀粉的微生物,提高“生化”處理的效率,探討人員將餐余垃圾機(jī)械化處理后加入裝有無(wú)菌水的錐形瓶中制備餐余垃圾浸出液,然后進(jìn)行如圖所示操作,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(A)A.在接種前通常須要對(duì)餐余垃圾浸出液進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培育基上C.X培育基含有淀粉和抗生素,Y培育基是不含瓊脂的液體培育基D.圖中降解淀粉最高效的微生物是⑤,可依據(jù)菌落特征初步推斷微生物類型解析在接種前對(duì)餐余垃圾浸出液進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,會(huì)將其中的微生物殺死,而不能獲得目標(biāo)微生物,A錯(cuò)誤。依據(jù)圖示分析,應(yīng)接受稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培育基上,以獲得單菌落,B正確。該試驗(yàn)的目的是篩選對(duì)抗生素有抗性且能高效降解淀粉的微生物,故圖中X培育基應(yīng)當(dāng)是以淀粉為唯一碳源且添加抗生素的選擇培育基;Y培育基是用于擴(kuò)大培育的液體培育基,其不含瓊脂,C正確。淀粉遇碘變藍(lán),加入碘液后,培育基上能夠降解淀粉的菌落四周出現(xiàn)透亮圈,圖中透亮圈最大的菌落是⑤,說(shuō)明其降解淀粉的效果最好;不同微生物形成的菌落特征不同,可依據(jù)菌落特征初步推斷微生物類型,D正確。14.[2024貴陽(yáng)模擬]某探討小組進(jìn)行了土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計(jì)數(shù)試驗(yàn),操作流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(D)A.須要配制以尿素為唯一氮源的培育基并用濕熱滅菌法滅菌B.甲平板上的一個(gè)單菌落一般來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌C.上述試驗(yàn)中制備3個(gè)平板可避開(kāi)偶然因素導(dǎo)致的試驗(yàn)誤差D.5號(hào)試管的計(jì)數(shù)結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)約為1.7×107個(gè)解析分別土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí),應(yīng)選用以尿素為唯一氮源的選擇培育基,并接受高壓蒸汽滅菌法(濕熱滅菌法)滅菌,A正確;當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培育基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,B正確;進(jìn)行多個(gè)重復(fù)試驗(yàn)的目的是避開(kāi)偶然因素導(dǎo)致的試驗(yàn)誤差,C正確;由題圖可知,稀釋倍數(shù)為106,涂布液的體積為0.1mL,平均菌落數(shù)為(168+175+167)÷3=170(個(gè)),故5號(hào)試管的計(jì)數(shù)結(jié)果表明,每克土壤中的活菌數(shù)約為170÷0.1×106=1.7×109(個(gè)),D錯(cuò)誤。15.[2024成都模擬]如圖所示,科研人員利用誘變方式選育可高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉氏霉菌。未突變菌不能在含有β-紫羅酮的培育基上生長(zhǎng)。隨β-胡蘿卜素含量增加,菌體顏色從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育菌種及獲得β-胡蘿卜素的流程,以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(B)A.要得到圖乙所示的菌落,可用稀釋涂布平板法進(jìn)行②操作,然后將培育皿倒置培育B.經(jīng)過(guò)程①紫外線照耀的三孢布拉氏霉菌都能在含β-紫羅酮的鑒別培育基上生長(zhǎng)C.進(jìn)行③操作時(shí),應(yīng)選擇較大的橙紅色菌落中的菌株接著接種培育,目的是純化菌株D.在進(jìn)行試驗(yàn)前,須要對(duì)試管、培育皿、錐形瓶等進(jìn)行干熱滅菌解析圖乙中的菌落勻整分布于平板上,說(shuō)明②操作(接種)的方法是稀釋涂布平板法,A正確;過(guò)程①紫外線照耀的作用是利用物理因素誘導(dǎo)三孢布拉氏霉菌發(fā)生基因突變,由于突變具有不定向性和低頻性,因此被照耀的三孢布拉氏霉菌不愿定都能在含β-紫羅酮的鑒別培育基上生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;橙紅色的菌體為β-胡蘿卜素高產(chǎn)菌,進(jìn)行③操作時(shí),應(yīng)選擇較大的橙紅色菌落中的菌株接著接種培育,C正確;在進(jìn)行試驗(yàn)前,須要對(duì)試管、培育皿、錐形瓶等進(jìn)行干熱滅菌,D正確。16.[2024邢臺(tái)檢測(cè),多選]為測(cè)定某種大腸桿菌對(duì)糖類的需求狀況,某愛(ài)好小組配制了如下培育基:成分NaClKH2PO4K2HPO4(NH4)2SO4MgSO4·7H2O瓊脂質(zhì)量(g)10.50.520.220同時(shí)配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖溶液。試驗(yàn)操作流程如下:將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培育基混勻,倒平板;通過(guò)無(wú)菌操作分別向平板中加入蘸有不同糖類溶液的無(wú)菌濾紙片,待平板吸取干燥后倒置培育,視察大腸桿菌菌落的生長(zhǎng)狀況。下列敘述正確的是(BD)A.題表中的培育基屬于固體培育基且不含碳源,說(shuō)明大腸桿菌是自養(yǎng)型微生物B.若加入蘸有葡萄糖溶液的無(wú)菌濾紙片的平板上有菌落產(chǎn)生,說(shuō)明大腸桿菌能利用葡萄糖作為碳源C.若加入蘸有不同糖類溶液的無(wú)菌濾紙片的平板上有大小不同的菌落圈產(chǎn)生,說(shuō)明大腸桿菌對(duì)四種糖類的利用程度相同D.該試驗(yàn)須要保留若干個(gè)只加入蘸有等量無(wú)菌水的無(wú)菌濾紙片的平板,待平板吸取干燥后倒置培育作為比照解析題表所示培育基的配方中含有瓊脂,屬于固體培育基,依據(jù)題意,培育基中還添加了糖類溶液,即該培育基含有碳源,大腸桿菌是異養(yǎng)型微生物,A錯(cuò)誤;若加入蘸有葡萄糖溶液的無(wú)菌濾紙片的平板上有菌落產(chǎn)生,說(shuō)明大腸桿菌能在該培育基上生長(zhǎng),其利用的碳源為葡萄糖,B正確;若加入蘸有不同糖類溶液的無(wú)菌濾紙片的平板上有大小不同的菌落圈產(chǎn)生,說(shuō)明大腸桿菌對(duì)四種糖類的利用程度是不同的,菌落圈越大,說(shuō)明其對(duì)相應(yīng)糖類的利用程度越高,C錯(cuò)誤;該試驗(yàn)須要保留若干個(gè)只加入蘸有等量無(wú)菌水的無(wú)菌濾紙片的平板作為比照,從而說(shuō)明平板上出現(xiàn)菌落或菌落圈是大腸桿菌利用培育基中添加的糖類作碳源的結(jié)果,D正確。二、非選擇題17.[結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐/2024惠州一調(diào),12分]辣椒疫病是由辣椒疫霉菌侵染引起的一種毀滅性土傳病害。某試驗(yàn)小組從辣椒疫病發(fā)病嚴(yán)峻田塊的辣椒植株根際土壤中分別篩選出兩株具有廣譜抗性并可在貧瘠養(yǎng)分條件下生長(zhǎng)良好的高效拮抗辣椒疫霉菌的菌株HL-3,回答下列問(wèn)題。(1)采集能拮抗辣椒疫霉菌的菌株HL-3時(shí),應(yīng)采集辣椒疫病發(fā)病嚴(yán)峻田塊的健康(填“健康”或“患病”)辣椒植株根際的土壤,緣由是健康辣椒植株的根際土壤中含有較為豐富的拮抗辣椒疫霉菌的菌株。(2)采集的土壤樣本先用無(wú)菌水稀釋,隨后將樣液置于培育基中進(jìn)行搖床培育,目的是增加培育液中氧氣濃度、使培育基與菌體充分接觸,快速增加拮抗菌的濃度。從物理性質(zhì)上來(lái)看,搖床培育基叫液體培育基,并且含有適量的碳源、氮源、水及無(wú)機(jī)鹽等養(yǎng)分成分。(3)測(cè)定篩選到的不同菌株的拮抗效果時(shí),應(yīng)先在平板的中心位置接種辣椒疫霉菌,培育1d后再在距離原菌落2cm處接種拮抗菌,并置于恒溫培育箱中培育,一段時(shí)間后通過(guò)比較抑菌圈的直徑與菌落直徑的比值(填“抑菌圈的直徑”“菌落直徑”或“抑菌圈的直徑與菌落直徑的比值”),從而推斷菌株的拮抗實(shí)力。解析(1)采集能拮抗辣椒疫霉菌的菌株HL-3時(shí),應(yīng)采集辣椒疫病發(fā)病嚴(yán)峻田塊的健康辣椒植株根際的土壤,這是因?yàn)樵诶苯芬卟“l(fā)病嚴(yán)峻的田塊中,健康辣椒植株根際土壤中含有較為豐富的拮抗辣椒疫霉菌的菌株。(2)從物理性質(zhì)上來(lái)看,搖床培育基為液體培育基,該培育基中應(yīng)包含適量的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等養(yǎng)分成分。(3)測(cè)定篩選到的不同菌株的拮抗效果時(shí),應(yīng)先在平板的中心位置接種辣椒疫霉菌,培育1d后再在距離原菌落2cm處接種拮抗菌,并置于恒溫培育箱(確保菌株在較相宜的溫度下生長(zhǎng))中培育,一段時(shí)間后通過(guò)比較抑菌圈的直徑與菌落直徑的比值,從而推斷菌株的拮抗實(shí)力。18.[2024豫北名校聯(lián)考,12分]污泥堆肥過(guò)程中大量釋放的含硫臭氣不僅會(huì)污染四周環(huán)境,也會(huì)降低堆肥質(zhì)量。探討人員依據(jù)如圖所示流程從污泥堆肥物料中篩選、純化出一株耐高溫硫氧化菌LYH-1。(1)試驗(yàn)中用到的培育基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌,該方法能滅菌的原理是高溫破壞了構(gòu)成菌體的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性失活。(2)③過(guò)程需配制一系列不同濃度的菌液,如何確定樣品的稀釋操作勝利?平板上的菌落數(shù)為30~300。(3)涂布平板后每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止培育時(shí)間不足導(dǎo)致部分菌落未被統(tǒng)計(jì)(或培育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致菌落連在一起影響計(jì)數(shù)、培育基表面干燥脫水、微生物衰敗菌落特征不易視察等)。(4)⑤過(guò)程發(fā)覺(jué)以葡萄糖為碳源時(shí),LYH-1菌株硫氧化產(chǎn)物硫酸鹽產(chǎn)量最高,葡萄糖在LYH-1菌株生長(zhǎng)代謝過(guò)程中的作用是供應(yīng)能量、為其他有機(jī)物的合成供應(yīng)原料(答出兩點(diǎn)即可)。(5)將篩選出的LYH-1菌株連續(xù)培育多代,將每一代都接種在相宜培育基上,在55℃高溫條件下培育,比較硫酸鹽的產(chǎn)量。若每一代菌體的硫酸鹽的產(chǎn)量基本一樣,說(shuō)明其能穩(wěn)定遺傳。解析(1)高壓蒸汽滅菌法主要是利用高溫破壞構(gòu)成菌體的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性失活,從而達(dá)到殺死細(xì)菌的目的。(2)樣品的稀釋程度將會(huì)干脆影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目,一般認(rèn)為,平板上的菌落數(shù)為30~300時(shí),樣品的稀釋操作勝利。(3)涂布平板后,每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止培育時(shí)間不足導(dǎo)致部分菌落未被統(tǒng)計(jì)(或培育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致菌落連在一起影響計(jì)數(shù)、培育基表面干燥脫水、微生物衰敗菌落特征不易視察等)。(4)葡萄糖是細(xì)胞內(nèi)的
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