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第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)
糞便檢查的主要目的是:①了解消化道有無(wú)感染、出血、惡性腫瘤等。②根據(jù)糞便的性狀與組成,了解胃腸道和肝膽系統(tǒng)的功能狀況。③檢查腸道致病菌,協(xié)助診斷腸道傳染病。④糞便隱血試驗(yàn)可作為消化道惡性腫瘤的篩檢試驗(yàn)。⑤根據(jù)糞便的顏色、糞膽素的檢查,有助于鑒別黃疸的類型。6第六章糞便檢驗(yàn)第一節(jié)糞便標(biāo)本采集和處理一、糞便標(biāo)本采集
1.常規(guī)檢查標(biāo)本常規(guī)檢查包括顏色和顯微鏡檢查,應(yīng)采集新鮮標(biāo)本,選擇含有異常成分的糞便,如黏液或膿血等部分;外觀顏色無(wú)異常的糞便則必須從其表面、深處及末端等多處采集。一般采集3~5g糞便送檢。
2.寄生蟲(chóng)檢查標(biāo)本寄生蟲(chóng)檢查采集糞便標(biāo)本的要求見(jiàn)表6-1。原蟲(chóng)和某些蠕蟲(chóng)有周期性排卵現(xiàn)象,未發(fā)現(xiàn)寄生蟲(chóng)或蟲(chóng)卵時(shí),應(yīng)連續(xù)送檢3d,以免漏診。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)
3.化學(xué)法隱血試驗(yàn)試驗(yàn)前3d禁食肉類、動(dòng)物血和某些蔬菜等,并禁服鐵劑及維生素C等。
4.脂肪定量試驗(yàn)先定量服食脂肪膳食,每天50~150g,連續(xù)6d,從第3天起開(kāi)始采集72h內(nèi)的糞便,將采集的標(biāo)本混合稱量,并采集60g送檢。如采用簡(jiǎn)易法,可在正常膳食情況下采集24h標(biāo)本,混合后稱量,采集60g糞便送檢。
5.糞膽原定量試驗(yàn)應(yīng)連續(xù)采集3d糞便標(biāo)本,每天混合稱重,取約20g送檢。
6.其他無(wú)糞便排出而又必須檢驗(yàn)時(shí),可經(jīng)直腸指診或采便管采集標(biāo)本。6第六章糞便檢驗(yàn)二、糞便標(biāo)本處理糞便檢驗(yàn)后應(yīng)將糞便和紙類或塑料等容器投入焚化爐中燒毀;搪瓷容器、載玻片等應(yīng)浸泡于消毒液中(如0.5%過(guò)氧化乙酸、新潔爾滅等)24h后棄消毒液,再加水煮沸、流水沖洗,晾干或烘干后備用。6第六章糞便檢驗(yàn)第二節(jié)糞便一般檢查一、糞便理學(xué)檢查
1.糞便量健康人糞便量與進(jìn)食食物種類、食量及消化器官的功能狀態(tài)有關(guān)。一般健康成人排便頻率可隔天1次至每天2次,多數(shù)為每天1次,每次排便量約為100~250g(干重25~50g)。當(dāng)胃腸道、胰腺有炎癥或功能紊亂時(shí),糞便量和排便次數(shù)均有不同程度增加。
2.顏色糞便顏色變化可能的原因見(jiàn)表6-2。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)3.性狀健康成人的糞便為成形、條帶狀,其性狀、硬度常與進(jìn)食的食物種類有關(guān)。病理情況下糞便性狀變化的臨床意義見(jiàn)表6-3。
4.寄生蟲(chóng)糞便中存在蟲(chóng)體較大的腸道寄生蟲(chóng),如蛔蟲(chóng)、蟯蟲(chóng)、絳蟲(chóng)等或其片段時(shí),肉眼即可分辨。鉤蟲(chóng)蟲(chóng)體需要糞便篩洗后才能發(fā)現(xiàn)。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)二、糞便化學(xué)檢查糞便的化學(xué)檢查有酸堿度反應(yīng)、隱血試驗(yàn)、糞膽素、糞膽原和脂肪測(cè)定等,其中隱血試驗(yàn)是最有意義的化學(xué)檢查。(一)糞便隱血試驗(yàn)上消化道出血量小于5ml,糞便中無(wú)可見(jiàn)的血液,且紅細(xì)胞被破壞,顯微鏡檢查也未見(jiàn)到紅細(xì)胞。需用化學(xué)法、免疫法等才能證實(shí)的出血,稱為隱血,檢查糞便隱血的試驗(yàn)稱為糞便隱血試驗(yàn)(FOBT)。6第六章糞便檢驗(yàn)【檢測(cè)原理】6第六章糞便檢驗(yàn)
【方法學(xué)評(píng)價(jià)】目前,國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)化方法。AGA推薦愈創(chuàng)木酯法或免疫學(xué)方法。
1.化學(xué)法為常用的方法。雖然,化學(xué)法有多種色原性反應(yīng)底物,但其基本檢測(cè)原理相似。常用的有鄰聯(lián)甲苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等,傳統(tǒng)使用的化學(xué)法已經(jīng)被目前的試帶法所替代,使檢測(cè)更加便捷。(1)靈敏度和特異性:靈敏度與試劑類型、糞便血紅蛋白濃度、過(guò)氧化物酶濃度及顯色物質(zhì)有關(guān)。FOBT化學(xué)法的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表6-4。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)
為了減少糞便隱血試驗(yàn)的假陽(yáng)性和假陰性,一般采用中度靈敏度的方法;但可聯(lián)合使用靈敏度高和靈敏度低的2種方法。鄰聯(lián)甲苯胺法為1983年中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)臨床檢驗(yàn)方法學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)推薦的方法。試帶法雖然使用方便,但試帶不穩(wěn)定、特異性較低。(2)干擾因素:FOBT化學(xué)法的干擾因素與評(píng)價(jià)見(jiàn)表6-5。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)
2.免疫學(xué)方法膠體金性質(zhì)穩(wěn)定,并能呈色;膠體金與單克隆抗體結(jié)合穩(wěn)定性好,可定性和半定量測(cè)定,判斷結(jié)果準(zhǔn)確;靈敏度高,檢測(cè)便捷、特異性好等。(1)靈敏度和特異性
1)靈敏度:ACS認(rèn)為免疫學(xué)方法的特異性和靈敏度相當(dāng)于或優(yōu)于愈創(chuàng)木酯法,且不受食物因素影響,無(wú)需禁食。
2)特異性:具有高度特異性,且不受動(dòng)物血紅蛋白和辣根過(guò)氧化酶等干擾,也不受新鮮蔬菜、鐵劑、維生素C的干擾。(2)干擾因素:FOBT免疫學(xué)方法的干擾因素與評(píng)價(jià)見(jiàn)表6-6。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)【參考區(qū)間】陰性。
【臨床意義】FOBT主要用于消化道出血、消化道腫瘤的篩檢和鑒別。
1.消化道出血的判斷FOBT陽(yáng)性見(jiàn)于消化道出血、藥物導(dǎo)致的胃黏膜損傷(如服用阿司匹林、消炎痛、糖皮質(zhì)激素等)、腸結(jié)核、Crohn病、胃潰瘍、各種胃炎、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲(chóng)病、消化道惡性腫瘤等。6第六章糞便檢驗(yàn)
2.消化性潰瘍與腫瘤出血的鑒別FOBT對(duì)消化性潰瘍的陽(yáng)性診斷率為40%~70%,呈間斷性陽(yáng)性;消化道惡性腫瘤陽(yáng)性率早期為20%,晚期可達(dá)95%,且呈持續(xù)性陽(yáng)性。目前,對(duì)消化道腫瘤早期診斷仍缺乏較好的手段,但消化道腫瘤FOBT陽(yáng)性率平均為87%。美國(guó)臨床生物化學(xué)學(xué)會(huì)(NACB)關(guān)于FOBT臨床應(yīng)用循證評(píng)價(jià)時(shí),建議對(duì)50歲以上的人群,進(jìn)行1年1次或2年1次愈創(chuàng)木酯法FOBT篩檢,因?yàn)镕OBT簡(jiǎn)便、價(jià)廉、無(wú)危害,且經(jīng)過(guò)大規(guī)模篩檢可及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理,可提高結(jié)直腸癌的檢出率。6第六章糞便檢驗(yàn)
(二)脂肪糞便脂肪檢查可作為了解消化道的消化功能和吸收功能的參考指標(biāo)。糞便脂肪檢查方法有顯微鏡檢查法、稱量法和滴定法等,或測(cè)定血清胡蘿卜素、維生素A,間接了解脂肪的吸收情況。
【檢測(cè)原理】糞便脂肪的檢測(cè)原理見(jiàn)表6-6-1。
【方法學(xué)評(píng)價(jià)】糞便脂肪檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表6-6-2。6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)【參考區(qū)間】成人糞便總脂量(以總脂肪酸計(jì)算):2~5g/24h,或?yàn)楦杉S便的7.3%~27.6%;成人進(jìn)食脂肪50~150g/24h,排出量<7g,脂肪吸收率>95%。
【臨床意義】當(dāng)脂肪消化吸收能力減退時(shí),糞便總脂肪量大量增加,若24h糞便總脂肪量超過(guò)6g,稱脂肪瀉。糞便脂肪增加可見(jiàn)于:①胰腺疾病:慢性胰腺炎、胰腺癌等。②肝膽疾?。耗懼俜e性黃疸、膽汁分泌不足、病毒性肝炎、肝硬化等。③小腸病變:乳糜瀉、Whipple病、蛋白丟失性胃腸病等。④其他:胃、十二指腸瘺,消化性潰瘍等。6第六章糞便檢驗(yàn)三、糞便顯微鏡檢查糞便顯微鏡檢查主要是檢查糞便中有無(wú)病理成分,如各種細(xì)胞、寄生蟲(chóng)及蟲(chóng)卵、致病細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)等。(一)細(xì)胞糞便中常見(jiàn)細(xì)胞為白細(xì)胞、紅細(xì)胞。檢查時(shí)應(yīng)選擇含黏液膿血部分的糞便檢查,或從成形便表面、深處及多處采集標(biāo)本,將糞便用生理鹽水混懸于載玻片上,于顯微鏡下檢查各種細(xì)胞,目前也可采用糞便分析工作站(染色后)檢查。6第六章糞便檢驗(yàn)1.白細(xì)胞(膿細(xì)胞)糞便中常見(jiàn)的白細(xì)胞為中性粒細(xì)胞,形態(tài)完整者與血液中的粒細(xì)胞無(wú)差別。病理情況下,中性粒細(xì)胞呈灰白色、胞體腫脹、壞死、破碎、結(jié)構(gòu)不完整、胞質(zhì)內(nèi)充滿細(xì)小的顆粒、胞核不清楚(即膿細(xì)胞),常成堆出現(xiàn)。6第六章糞便檢驗(yàn)
健康人糞便無(wú)或偶見(jiàn)白細(xì)胞。病理情況下,白細(xì)胞數(shù)量與炎癥程度及部位有關(guān)(表6-6-3)。6第六章糞便檢驗(yàn)2.紅細(xì)胞糞便中紅細(xì)胞呈草綠色、略有折光性的圓盤狀,有時(shí)可因糞便pH影響,而呈皺縮狀。健康人糞便無(wú)紅細(xì)胞。糞便中紅細(xì)胞變化見(jiàn)表6-6-4。6第六章糞便檢驗(yàn)3.大吞噬細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)大吞噬細(xì)胞來(lái)自血循環(huán)中的單核細(xì)胞。胞體大,可為中性粒細(xì)胞體積3倍或以上,呈圓形、卵圓形或不規(guī)則形;胞核l~2個(gè),大小不等,常偏于一側(cè);常含有吞噬的顆粒、細(xì)胞碎屑或較大的異物;可散在分布或成群出現(xiàn),細(xì)胞多有不同程度退化變性現(xiàn)象;有時(shí)與溶組織內(nèi)阿米巴滋養(yǎng)體相似,應(yīng)特別注意鑒別。健康人糞便無(wú)大吞噬細(xì)胞。糞便中出現(xiàn)大吞噬細(xì)胞見(jiàn)于急性細(xì)菌性痢疾、急性出血性腸炎,偶見(jiàn)于潰瘍性腸炎。6第六章糞便檢驗(yàn)
4.上皮細(xì)胞糞便中的上皮細(xì)胞為腸黏膜上皮細(xì)胞。除直腸段被覆復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞外,整個(gè)小腸、大腸黏膜上皮細(xì)胞均為柱狀上皮細(xì)胞;細(xì)胞呈卵圓形或短柱狀,兩端鈍圓,細(xì)胞較厚,結(jié)構(gòu)模糊,夾雜于白細(xì)胞之間。健康人糞便中很少見(jiàn)到柱狀上皮細(xì)胞(少量脫落柱狀上皮細(xì)胞已破壞)。柱狀上皮細(xì)胞增多見(jiàn)于結(jié)腸炎癥、偽膜性腸炎。6第六章糞便檢驗(yàn)
(二)食物殘?jiān)徒Y(jié)晶
1.食物殘?jiān)悾?)脂肪:蘇丹Ⅲ染色后,糞便中脂肪可分為中性脂肪、游離脂肪酸和結(jié)合脂肪酸3種(表6-7)。6第六章糞便檢驗(yàn)
(2)淀粉顆粒:外形為圓形、橢圓形或多角形顆粒,大小不等,在鹽水涂片中一般可見(jiàn)同心形的折光條紋,無(wú)色,具有一定折光性,滴加碘液后呈黑藍(lán)色,若部分水解為糊精者則呈棕紅色。(3)肌纖維:為淡黃色條狀、片狀、有纖細(xì)的橫紋,如加入伊紅可染成紅色。(4)植物細(xì)胞及植物纖維:呈螺旋小管或蜂窩狀,可見(jiàn)形態(tài)繁多的植物細(xì)胞。呈圓形、長(zhǎng)圓形、多角形,雙層細(xì)胞壁,細(xì)胞內(nèi)有葉綠素小體,需注意與寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵鑒別。6第六章糞便檢驗(yàn)2.結(jié)晶糞便內(nèi)可見(jiàn)多種結(jié)晶,如磷酸鹽、草酸鈣、碳酸鈣結(jié)晶,但量少、無(wú)臨床意義。但出現(xiàn)Charcot-Leyden結(jié)晶、血紅素結(jié)晶時(shí),則提示消化道出血。主要見(jiàn)于消化道出血、阿米巴痢疾、鉤蟲(chóng)病及過(guò)敏性腸炎,此時(shí)常伴有嗜酸性粒細(xì)胞增多。6第六章糞便檢驗(yàn)
(三)病原學(xué)檢查
1.寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵檢查方法有直接涂片法、厚涂片透明法、加藤法、濃集法(自然沉淀、離心沉淀法、甲醛-乙酸乙酯沉淀法)、浮聚法等??筛鶕?jù)不同蟲(chóng)卵特點(diǎn)選擇不同方法,其中甲醛-乙酸乙酯沉淀法、厚涂片透明法和加藤法為WHO推薦的方法。6第六章糞便檢驗(yàn)
糞便檢驗(yàn)是診斷腸道寄生蟲(chóng)感染最直接和最可靠的方法。糞便涂片中可見(jiàn)到寄生蟲(chóng)蟲(chóng)體或蟲(chóng)卵,如蛔蟲(chóng)卵、鞭蟲(chóng)卵、鉤蟲(chóng)卵、蟯蟲(chóng)卵、肺吸蟲(chóng)卵、肝吸蟲(chóng)卵、血吸蟲(chóng)卵、姜片蟲(chóng)卵等(圖6-1,圖6-2,圖6-3)。檢查時(shí)要注意蟲(chóng)卵的大小、色澤、形狀、卵殼厚薄及內(nèi)部結(jié)構(gòu)等,認(rèn)真觀察予以鑒別。6第六章糞便檢驗(yàn)圖6-1寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵-1A感染性蛔蟲(chóng)卵B受精型蛔蟲(chóng)卵C未受精型蛔蟲(chóng)卵圖6-2寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵-2A鞭蟲(chóng)卵B肺吸蟲(chóng)卵C肝吸蟲(chóng)卵D鉤蟲(chóng)卵圖6-3寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵-3A姜片蟲(chóng)卵B血吸蟲(chóng)卵6第六章糞便檢驗(yàn)2.腸道原蟲(chóng)(1)溶組織內(nèi)阿米巴:取新鮮糞便的膿血黏液部分進(jìn)行顯微鏡檢查可見(jiàn)到滋養(yǎng)體(圖6-4),或找到包囊(圖6-5)。圖6-4溶組織內(nèi)阿米巴滋養(yǎng)體圖6-5溶組織內(nèi)阿米巴包囊6第六章糞便檢驗(yàn)
(2)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng):滋養(yǎng)體的形態(tài)如縱切的半個(gè)去核的梨,前端鈍圓,后端尖細(xì),背面隆起而腹面凹陷,兩側(cè)對(duì)稱形似勺形,腹部前半部有吸盤,借此可吸附于腸黏膜上(圖6-6)。圖6-6藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)6第六章糞便檢驗(yàn)(3)隱孢子蟲(chóng):除糞便常規(guī)檢驗(yàn)外,常用改良抗酸染色法、金胺-酚-改良抗酸染色法等方法來(lái)提高陽(yáng)性檢出率(圖6-7)。圖6-7隱孢子蟲(chóng)6第六章糞便檢驗(yàn)
(4)人芽孢子蟲(chóng):為無(wú)色或淡黃色,圓形或卵圓形,大小不一,胞內(nèi)含一巨大透明體,其周邊繞以狹窄的細(xì)胞質(zhì),胞質(zhì)內(nèi)含有少數(shù)折光小體。人芽孢子蟲(chóng)與白細(xì)胞及原蟲(chóng)包囊形態(tài)十分相似,可借助破壞試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行鑒別,即用水代替生理鹽水迅速做顯微鏡檢查,人芽孢子蟲(chóng)遇水被破壞而消失,白細(xì)胞與原蟲(chóng)則因不易破壞而仍可看見(jiàn)。6第六章糞便檢驗(yàn)3.細(xì)菌健康人糞便中可見(jiàn)較多正常菌群,其菌量和菌譜處于相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài),保持著細(xì)菌與宿主間的生態(tài)平衡。但在某些病理情況下,如長(zhǎng)期應(yīng)用抗生素或免疫抑制劑,其菌量和菌譜發(fā)生改變而造成菌群失調(diào),即糞便中革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌比例大于1∶10,正常菌群減少甚至消失,而葡萄球菌或真菌(圖6-8)等明顯增多,臨床上稱為腸道菌群失調(diào)癥(表6-7-1)。圖6-8真菌6第六章糞便檢驗(yàn)6第六章糞便檢驗(yàn)第三節(jié)糞便分析工作站
【檢測(cè)原理】根據(jù)動(dòng)力管道產(chǎn)生吸力的原理,在微電腦控制臺(tái)的控制下自動(dòng)吸樣,在蠕動(dòng)泵作用下,自動(dòng)吸入沉淀物、染色、混勻、重懸浮,在光學(xué)流動(dòng)管標(biāo)準(zhǔn)流動(dòng)計(jì)數(shù)室內(nèi)計(jì)數(shù)。工作站每次吸入的標(biāo)本量和吸入時(shí)間是恒定的,并可對(duì)高濃度標(biāo)本自動(dòng)稀釋,觀察分析后自動(dòng)
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