第五章 配種與受精課件

第五章配種與受精ch05第五章配種與受精第一節(jié)自然交配第二節(jié)人工授精第三節(jié)受精本章內(nèi)容ch05第五章配種與受精配種(mating)是使雌性動物受孕的繁殖技術(shù)，包括自然交配與人工授精兩種類型。受精(fertilization)是指雌性動物的卵子與雄性動物的精子結(jié)合形成胚胎的生理過程或現(xiàn)象，是配種的目的，即配種成功后，可使卵子受精。ch05第五章配種與受精第一節(jié)自然交配一、定義直接將種公畜與發(fā)情母畜交配的配種方式稱為自然交配(naturalmating)。ch05第五章配種與受精二、自然交配的方式1.自由交配定義：在群牧條件下，公、母畜混群飼養(yǎng)，只要母畜發(fā)情，任一公畜均可與其交配。優(yōu)缺點：方便；難以進行配種記錄，易引起近親交配，使種群生產(chǎn)性能和遺傳性能發(fā)生退化。ch05第五章配種與受精2.分群交配

定義：將母畜分成若干小群，每群根據(jù)需要放入一頭或幾頭經(jīng)選擇的公畜，任其自由交配。優(yōu)缺點：可實現(xiàn)一定程度的選種選配，但仍然很難進行配種記錄。ch05第五章配種與受精3.圈欄交配定義：在公、母畜隔離飼養(yǎng)條件下，當(dāng)母畜發(fā)情時，放入特定公畜圈欄與公畜交配。優(yōu)缺點：既可控制與配母畜的受配次數(shù)，又可提高公畜利用率，同時可實現(xiàn)比較嚴(yán)格的選種選配。

ch05第五章配種與受精4.人工輔助交配

定義：在公、母畜隔離飼養(yǎng)條件下，只在母畜發(fā)情時，才按既定選種選配計劃，令其與特定的公畜交配。優(yōu)缺點：可完全實施嚴(yán)格的選種配。ch05第五章配種與受精第二節(jié)人工授精

發(fā)展概況人工授精的利弊方法與操作步驟ch05第五章配種與受精一、發(fā)展概況人工授精(artificialinsemination,AI)

是在人工條件下利用器械采集種公畜的精液，經(jīng)過品質(zhì)檢查，稀釋保存等適當(dāng)?shù)奶幚砗螅儆闷餍祵⒕狠斔偷桨l(fā)情母畜生殖道內(nèi)，使母畜受孕的配種方法。ch05第五章配種與受精1.試驗階段：1780年，意大利生理學(xué)家Spallanzani，狗人工授精。

2.實用階段：上世紀(jì)40-60年代，成為繁殖改良家畜的重要手段。

3.冷凍精液階段：50年代英國的Smith和Polge改進牛精液的冷凍保存方法，人工授精技術(shù)進入了一個新的發(fā)展階段。ch05第五章配種與受精二、人工授精的利弊1.優(yōu)越性：最大限度地提高優(yōu)秀種公畜的利用率一頭種公畜一次射精可配種的母畜數(shù)是自然交配的幾十倍，甚至幾百倍(表5-1)。加速品種改良AI特別是冷凍精液的運用，極大限度地提高了公畜的配種能力，使優(yōu)秀種公畜的遺傳基因迅速擴大，使其后代生產(chǎn)性能迅速提高，從而加速了品種改良。公豬好好一坡，母豬好好一窩。ch05第五章配種與受精

大幅度減少種公畜的頭數(shù)由于大大提高了種公畜的利用率，所以只需保留極少數(shù)的優(yōu)秀個體，即可滿足繁殖需要，從而可節(jié)省飼養(yǎng)大量公畜的飼料及管理費用。ch05第五章配種與受精克服公、母畜體型懸殊而出現(xiàn)的交配困難良種公畜一般體型較大。與本地小體型的母畜交配會有很多障礙，人工授精技術(shù)的運用可克服這方面的問題。控制疾病傳播由于避免了公、母畜的直接接觸，因此可以防止與性交有關(guān)的傳染性疾病及其他疾病的傳播。

ch05第五章配種與受精人工授精與自然交配的配種效率比較

（改自王元興等，動物繁殖學(xué).南京：江蘇科技出版社，1997，124）畜種自然交配每年每頭人工受精公畜可配母畜頭數(shù)每次采精可配母畜頭數(shù)每年每頭公畜可配母畜頭數(shù)豬20～305～15200～400牛20～4020～2550～200100～200（凍精）600～1200（凍精）羊30～5020～40700～1000馬30～505～12200～400ch05第五章配種與受精2.弊端需要有熟練的和嚴(yán)格遵守操作規(guī)范的技術(shù)員，才能發(fā)揮其巨大的優(yōu)越性。如果操作技術(shù)不規(guī)范，不僅會影響受胎率，甚至?xí)鞑ゼ膊?。ch05第五章配種與受精三、方法與操作步驟(一)采精(semencollection)1.采精前的準(zhǔn)備

(1)采精場固定的場地和環(huán)境，以便建立起鞏固的條件反射。同時也是保證人畜安全和防止精液污染的基本條件。場地應(yīng)寬敞、平坦、清潔、安靜。有供母畜保定用的采精架或供公畜爬跨的假臺畜。應(yīng)配備噴灑消毒和紫外線照射裝置。ch05第五章配種與受精(2)臺畜的準(zhǔn)備真臺畜(dummy)即活畜，是指用與公畜同種的母畜或閹畜作為臺畜。假臺畜是根據(jù)母畜體型大小，選用鋼管或木材做成的有支撐力的架子，然后在其表面包裹一層畜皮或麻袋、人造革等彈性柔軟物品(圖5-1)。

ch05第五章配種與受精真臺畜假臺畜ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精(3)公畜的調(diào)教利用假臺畜采精，要事先對種公畜進行調(diào)教，使其建立條件反射。a.在假臺畜的后軀涂抹發(fā)情母畜的陰道粘液或尿液；b.將待調(diào)教的公畜拴系在假臺畜附近，讓其目睹另一頭已調(diào)教好的公畜爬跨假臺畜，然后再誘其爬跨。ch05第五章配種與受精c.在假臺畜旁邊牽一發(fā)情母畜，誘使公畜進行爬跨，但不讓交配而把其拉下，反復(fù)多次，待公畜性沖動達到高峰時，迅速牽走母畜，令其爬跨假臺畜采精。ch05第五章配種與受精2.采精技術(shù)2.1采精方法及其應(yīng)用范圍：假陰道采精法：能收集到動物全部射出的精液，既不降低精液的品質(zhì)，又不影響雄性動物的生殖器官和性機能，所以應(yīng)用最廣泛。手握法和筒握法：豬按摩法：禽類和犬類電剌激法：野生動物

ch05第五章配種與受精2.2假陰道法

假陰道(artificialvagina)是模擬雌性陰道條件而仿制的人工陰道。ch05第五章配種與受精1)適宜溫度：2)適當(dāng)壓力：3)適當(dāng)潤滑度：4)無菌：5)無破損漏洞：假陰道應(yīng)具備條件ch05第五章配種與受精牛羊假陰道安裝充氣后理想的狀態(tài)充氣后的假陰道人工采精技術(shù)ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精2.3手握法（豬）將手握成空拳使公豬陰莖插入其中，讓其來回抽動片刻，當(dāng)螺旋狀陰莖龜頭己伸露于掌外時，應(yīng)由松到緊握住陰莖，并不再讓其轉(zhuǎn)動和滑脫;待陰莖充分勃起向前伸展時，應(yīng)順勢向前將其帶出(千萬不要拉出)，并在不讓其轉(zhuǎn)動和滑脫的情況下，手掌做有節(jié)律的一緊一松彈性刺激，直至射精。ch05第五章配種與受精射精過程中可停止彈性刺激，但由于公豬副性腺發(fā)達，射精量大，完成射精往往需要經(jīng)歷2－4個階段，而在各個射精階段的間隔期間要恢復(fù)彈性刺激，直至采完全部精液為止。特點:簡單、方便，能采集富含精子部分精液。分段采精：棄掉含副性腺分泌物多、精子較少、精液清亮白色的第一段和精液較稀、清亮、精子少的第三段，只收集精液濃、精子多、呈乳白色的第二段。ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精2.4筒握法是假陰道和手握法相結(jié)合的方法，具有假陰道和手握法雙重優(yōu)點。將假陰道截短后，連接一個橡膠漏斗制成采精筒。操作時，采精員以右手握住漏斗部成拳握狀，緊靠臺畜后部，當(dāng)陰莖伸入假陰道進入漏斗拳握部位時，就同手握法一樣采取精液。ch05第五章配種與受精2.5電刺激法是通過電流刺激腰椎有關(guān)神經(jīng)和壺腹部而引起公畜射精的方法。適用于育種價值高、因損傷或性反射慢等失去爬跨能力的公畜。不適宜用其他方法采精的動物（如野生動物），均可用此法采精。

ch05第五章配種與受精2.6按摩采精法（牛、犬和禽類）手指對生殖器官及副性腺進行按摩刺激，以引起性欲而出現(xiàn)射精。家禽的按摩采精法：助手保定，以防采精過程中撲打。然后采精者右手指間夾著集精容器，并有節(jié)奏地前后按摩禽體后軀及恥骨下部，引起射精反射。與此同時，左手將尾羽彎向頭部，輕輕壓迫尾脂區(qū)域。當(dāng)出現(xiàn)射精時，兩手拇指和食指同時做“擠乳”狀擠壓，接取精液，直至反射消失。ch05第五章配種與受精3.采精頻率3.1定義：每周對雄性動物的采精次數(shù)。為了既能最大限度地采集精液，又能維持其健康體況和正常生殖機能，必須合理安排采精頻率。ch05第五章配種與受精3.2各種動物的采精頻率：公牛每周采精2－3次，每天可連續(xù)采精兩次，兩次間隔時間可在20min左右。成年公豬適于隔日采精1次。羊在配種季節(jié)內(nèi)集中連續(xù)每日采精3－4次均可，但每周應(yīng)休息1d。ch05第五章配種與受精(二)精液品質(zhì)檢查精液品質(zhì)檢查的目的在于確定精液品質(zhì)的優(yōu)劣，以此作為精液稀釋、保存的依據(jù)。同時，也反映種公畜飼養(yǎng)管理水平和生殖器官的機能狀態(tài)，以及精液在稀釋、保存、冷凍和運輸過程中的品質(zhì)變化及處理效果。

ch05第五章配種與受精精液品質(zhì)檢測系統(tǒng)ch05第五章配種與受精精液質(zhì)量自動檢測系統(tǒng)ch05第五章配種與受精(三)精液的稀釋

1.定義精液稀釋(dilution)是在精液中加入一定量按特定配方配制、適宜于精子存活并保持受精能力的稀釋液。2.稀釋的目的：擴大精液容量，提高一次射精的可配母畜頭數(shù)，降低精液能量消耗，補充適量營養(yǎng)和抑制精液中微生物的活性，延長精子壽命，便于精子保存和運輸?shù)取?/p>

ch05第五章配種與受精(四)精液液態(tài)保存

1.精液保存的目的：延長精子的存活時間，擴大精液的使用范圍，便于長途運輸。2.精液保存的方法（按溫度）：常溫保存（15-25℃）低溫保存（0-5℃）冷凍保存（-79--196℃）ch05第五章配種與受精3.精液保存的方法（按精液的狀態(tài)）：液態(tài)保存：常溫保存和低溫保存溫度都在0℃以上，故稱液態(tài)精液保存。冷凍保存：超低溫保存精液以凍結(jié)形式作長期保存，故稱冷凍精液保存。ch05第五章配種與受精4.保存的兩種基本途徑：一是降低保存溫度，減少精子的運動和代謝，甚至使精子處于休眠狀態(tài)，但不喪失其生命力;二是控制精液的pH，使精子處于弱酸環(huán)境下，既不至于危害精子，又能有效的抑制精子運動。ch05第五章配種與受精

(五)精液冷凍保存

1.目的：冷凍解決了精液長期保存的問題，使精液不受時間、地域和種畜生命的限制，極大地提高了優(yōu)良公畜的利用率，加速了品種的育成和改良。對優(yōu)良種畜在短期進行后裔測定，保留和恢復(fù)某一品種或個體優(yōu)良遺傳特性，以及進行血統(tǒng)更新、引種、降低生產(chǎn)成本等方面都有重要意義。2.冷源：液氮(-196℃)或干冰(-79℃)。ch05第五章配種與受精液氮罐ch05第五章配種與受精3.冷凍精液的解凍

解凍溫度和方法以及解凍液的成分都會直接影響解凍后的精子活力。解凍過程應(yīng)像冷凍過程一樣，必須迅速通過精子的冰晶化溫度區(qū)，才不會損害精子。細管型冷凍精液，可直接將其投入到35－40℃的溫水中，待融化一半時，立即取出備用。ch05第五章配種與受精顆粒型冷凍精液的解凍，需用解凍液。干解凍濕解凍ch05第五章配種與受精(六)授精(insemination)1.輸精前的準(zhǔn)備

①輸精器械和接觸精液的器皿，在輸精前必須徹底洗滌和消毒。②接受輸精的母畜要進行保定，并對其外陰進行擦洗、消毒。③輸精前需檢查精液品質(zhì):液態(tài)保存的精液活力不低于0.6，冷凍保存的精液解凍后活力不低于0.3。

ch05第五章配種與受精輸精器械和器皿ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精④母畜的準(zhǔn)備牛:可在獸醫(yī)保定架、采精架、輸精架或奶牛頸夾內(nèi)保定，尾部拉向一側(cè)羊：可在升高的配種架內(nèi)保定，或降低配種員站立的位置，或兩人將母羊后肢提起。豬：在圈舍或定位欄內(nèi)保定各種家畜在輸精前可用高錳酸鉀水擦拭外陰及周圍并用紙巾擦干。豬只用干紙巾擦拭。ch05第五章配種與受精⑤人員準(zhǔn)備輸精員應(yīng)將指甲剪短磨光，將手洗凈擦干，必要時用75%酒精棉消毒。如果手臂伸入直腸或陰道內(nèi)，應(yīng)戴上長臂手套，并涂以石蠟油或稀釋液。冬季應(yīng)穿上棉坎保暖和方便操作。ch05第五章配種與受精2.輸精的基本技術(shù)要求

畜種輸精量ml有效精子數(shù)(億)適宜時間輸精次數(shù)間隔時間輸精部位牛0.2-10.1-0.2發(fā)情結(jié)束時1子宮體馬驢15-302-5發(fā)情第二天開始或在卵泡第4、5期2-324-48子宮內(nèi)豬50-10020-50靜立反射后12h2-312-24子宮內(nèi)羊0.05-0.20.2-0.5發(fā)情開始后12h1-26-12子宮外口兔0.2-0.50.15-0.2促排針后2-6h1-28-10陰道內(nèi)雞0.05-0.115-7天輸卵管口ch05第五章配種與受精2.1輸精量和輸入的活精子數(shù)對體型大、經(jīng)產(chǎn)、產(chǎn)后配種和子宮松弛的母畜可增加輸精量，而對于初次配種和當(dāng)年空懷的母畜則可減少輸精量。液態(tài)保存的精液其輸精量一般比冷凍精液多，細管精液則比顆粒精液少一些。ch05第五章配種與受精精液品質(zhì)較差時輸精量可適當(dāng)增加，以保證輸入的活精子數(shù)。在同種家畜中，輸精部位較深者的輸精量可比淺部輸精者適當(dāng)減少。ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精GIFTprocedure,gameteintrafal-lopiantransfer,laparoscopy

配子輸卵管內(nèi)移植（GIFT）ch05第五章配種與受精

2.2輸精時間根據(jù)排卵時間、精子和卵子的運行速度及到達受精部位的時間與精子獲能和保持受精能力的時間，確定適宜的輸精時間。各種動物都適宜在排卵前4－6h進行輸精。ch05第五章配種與受精在生產(chǎn)中，用發(fā)情鑒定來判定適宜的輸精時間：奶牛在發(fā)情后10－20h輸精水牛則在發(fā)情后第2d輸精。馬自發(fā)情后2－3d，隔日輸精一次，直至發(fā)情結(jié)束。豬是在接受“壓背”試驗或從發(fā)情開始后第2d輸精。ch05第五章配種與受精羊可根據(jù)試情程度來決定輸精時間，若每天試情一次，于發(fā)現(xiàn)發(fā)情當(dāng)天和隔12h各輸精一次;若每天試情兩次，則可在發(fā)現(xiàn)發(fā)情開始后半天輸精一次，間隔半天再輸精一次。兔、駱駝等誘發(fā)性排卵動物，應(yīng)在誘發(fā)排卵處理后即行輸精。ch05第五章配種與受精

2.3輸精次數(shù)和間隔時間輸精次數(shù)和間隔時間是依據(jù)輸精時間與母畜排卵時間的間距以反精子在母畜生殖道內(nèi)保持受精能力的時間長短決定。牛、羊、豬、兔等家畜在生產(chǎn)上常采用外部觀察法來鑒定發(fā)情，但不易確定排卵的時間。在一個發(fā)情期內(nèi)采用兩次輸精，兩次輸間隔8－10h(豬間隔12－18h)。ch05第五章配種與受精2.4輸精部位牛子宮頸深部輸精比子宮頸淺部受胎率高。豬、馬、驢以子宮內(nèi)輸精好，而采取子宮角內(nèi)輸精并不能提高受胎率。羊、兔在子宮頸內(nèi)淺部輸精即可。綿羊凍精應(yīng)盡可能采用深部輸精。兔則在陰道內(nèi)輸精。

ch05第五章配種與受精3.各種家畜的輸精方法

ch05第五章配種與受精3.1母牛①陰道開膣器輸精法：受胎率較低。ch05第五章配種與受精②直腸把握子宮頸輸精法操作：將手伸入直腸掏出宿糞后，握住子宮頸外端。另一只手持輸精管，借助進入直腸的一只手固定和協(xié)同動作，將輸精管插入子宮頸螺旋皺襞，再將精液輸入子宮內(nèi)或子宮頸5－6cm處。優(yōu)點:用具簡單，操作安全，不易感染;母牛無痛感刺激，處女牛也可使用;可同時檢查卵巢狀態(tài)，防止誤給孕牛輸精而引起流產(chǎn);輸精部位較深，受胎率較開膣器輸精法高10%－20%.ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精直腸把握子宮頸輸精法圖片ch05第五章配種與受精子宮頸口尿道口膀胱ch05第五章配種與受精3.2綿羊和山羊（開膣器輸精法）由于羊體型小，往往需蹲下輸精，或在輸精架后挖一凹坑方便輸精員操作也有采用轉(zhuǎn)盤式或輸精臺輸精，可提高效率。對于體型小的母羊，在助手配合下，也可采用倒立式輸精方法，即保定員用兩腿夾住母羊頭頸，抓住并抬起母羊兩后腿，輸精員借助開膣器將精液輸入子宮頸內(nèi)。

ch05第五章配種與受精目錄①羊輸精前準(zhǔn)備用試情公羊?qū)Πl(fā)情母羊進行發(fā)情鑒定，發(fā)現(xiàn)允許試情公羊爬跨的母羊應(yīng)進行標(biāo)記，并安排輸精時間在母羊允許公羊爬跨后的6-12小時第一次配種將母羊保定在保定架內(nèi)或兩手將其倒提，前肢著地消毒外陰部，開膣器上涂以石蠟油。ch05第五章配種與受精目錄②羊輸精操作將開膣器側(cè)扁方向與陰道呈同一方向，插入母羊陰道內(nèi)，向下轉(zhuǎn)動開膣器，并保持打開狀態(tài)將準(zhǔn)備好的輸精器前端對準(zhǔn)子宮頸外口，伸入1厘米或更深。將精液緩慢注入后抽出。注意：開膣器應(yīng)保持開張狀態(tài)，以免夾傷陰道粘膜。如果無法找到子宮頸口，應(yīng)撥動粘液，使子宮頸口暴露。如果仍無法確認(rèn)，可將精液注入顏色較深的區(qū)域。ch05第五章配種與受精目錄羊的輸精ch05第五章配種與受精3.3豬由于陰道與子宮頸接合處無明顯界限，所以輸精時不必用開膣器擴張陰道，可直接將輸精管插入陰道。ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精

將母兔仰臥或伏臥保定將輸精管沿背線緩慢插入陰道內(nèi)7-10cm慢慢注入精液

輸精后將母兔后軀抬高片刻，以防精液倒流3.4兔ch05第五章配種與受精3.5家禽一只手抓住母禽的兩只腳，另一只手按壓其腹部，使陰道翻出泄殖腔，將細管插入陰道的開口內(nèi)，輕輕推入精液。母禽腹部壓力消失后，陰道會自動縮回。ch05第五章配種與受精第三節(jié)受精一、受精概述二、精子在雌性生殖道內(nèi)的運行三、精子獲能四、頂體反應(yīng)五、受精的過程ch05第五章配種與受精受精是兩性配子(精子和卵子)相互作用，結(jié)合產(chǎn)生新的個體即合子(zygote)的過程。

通過受精，單倍體的雌、雄生殖細胞共同構(gòu)成雙倍體的合子(又稱受精卵)，合子是新生命發(fā)育的起點。1.定義一、受精概述ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精2.生物學(xué)意義在胚胎學(xué)方面，受精是卵子受到精子的激活。在遺傳學(xué)方面，受精是將父本的遺傳物質(zhì)引入母本的卵子，從而使父本與母體二者的遺傳性狀能在新個體中表現(xiàn)出來：

在自然選擇過程中可以促進物種的進化；可通過人為的選擇，培育出新的優(yōu)良品種。ch05第五章配種與受精3.受精部位輸卵管壺腹部ch05第五章配種與受精Pickupch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精①陰道型受精牛、羊：精液射在陰道前庭及子宮頸陰道部。4.受精類型②子宮型受精馬、豬：精液可直接射入子宮頸、子宮體內(nèi)。ch05第五章配種與受精大鼠二、精子在雌性生殖道內(nèi)的運行射精過程ch05第五章配種與受精射出的大量精子中僅有極少數(shù)到達輸卵管壺腹部。主要是由于精子從射精部位到達受精部位需要闖過三道關(guān)卡，即經(jīng)過三次篩選：第一道關(guān)卡——子宮頸第二道關(guān)卡——子宮內(nèi)膜腺第三道關(guān)卡——宮管結(jié)合部（輸卵管峽部）ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精1.定義：剛射出的精子不能穿入卵子，而只有在雌性生殖道內(nèi)度過一段時間之后，才獲得受精能力，稱為“獲能”(capacitation)。三、精子獲能ch05第五章配種與受精2.部位：獲能過程先在子宮內(nèi)進行，最后在輸卵管內(nèi)完成（精子體外獲能）。精子獲能后，能釋放出一系列水解酶，可將包圍在卵子周圍的細胞和生物大分子物質(zhì)(蛋白質(zhì)和黏多糖)溶解出一條通路，便于精子進入卵母細胞。ch05第五章配種與受精3.精子入卵的三道屏障：擴展的卵丘透明帶卵質(zhì)膜小鼠IVM卵母細胞ch05第五章配種與受精放射冠透明帶卵質(zhì)膜卵母細胞極體132ch05第五章配種與受精海膽卵子的結(jié)構(gòu)，示精子和卵子的大小比例。ch05第五章配種與受精頂體反應(yīng)(acrosomereaction)：包裹精子頭部的質(zhì)膜、頂體外膜融合和破裂，釋放頂體內(nèi)含物的過程。這一反應(yīng)是精子與卵子融合前必須經(jīng)歷的反應(yīng)之一，也是精子獲能后的必然結(jié)果。四、頂體反應(yīng)ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精高爾基復(fù)合體——頂體細胞核——頭部的主要部分中心小體——尾部，線粒體——尾部中段的線粒體鞘膜細胞質(zhì)大部分脫落ch05第五章配種與受精倉鼠精子的頂體反應(yīng)ch05第五章配種與受精D，精子與卵子質(zhì)膜的融合E，精子頂體與帶有微絨毛的卵子質(zhì)膜融合的示意圖（水平，受精錐）ch05第五章配種與受精受精過程始于精子與卵子相遇，兩性原核合并形成合子時結(jié)束，分為五個步驟：精子穿過放射冠精子穿過透明帶精子穿過卵質(zhì)膜原核形成配子配合

五、受精的過程ch05第五章配種與受精1.精子穿過放射冠卵子在透明帶外面往往還包圍著一堆顆粒細胞即卵丘細胞，而靠近透明帶的卵丘細胞呈放射狀排列，故稱放射冠，是精子入卵的第一道屏障。精子通過頂體反應(yīng)釋放透明質(zhì)酸酶和放射冠穿透酶溶解卵丘細胞和放射冠細胞間的基質(zhì)，使精子穿越放射冠與透明帶接觸。ch05第五章配種與受精2.精子穿過透明帶精子穿越放射冠后，以剛暴露的頂體內(nèi)膜附著于透明帶表面，這是精子穿過透明帶的先決條件。這種附著只有獲能和發(fā)生頂體反應(yīng)的精子才能發(fā)生。ch05第五章配種與受精精子與透明帶的附著具有非常明顯的種間特異性，異種動物的精子不能附著和穿過透明帶（混合精液實驗）。原因：透明帶表面的種屬特異性精子受體。ch05第五章配種與受精金色倉鼠精子入卵過程：

A，精卵融合的掃描電鏡照片B，精子與透明帶的結(jié)合

C，精子頭部穿過透明帶。ch05第五章配種與受精3.精子穿過卵質(zhì)膜精子進入透明帶后，到達卵周隙。此時精子仍能活動，不過活動時間很短。一旦接觸卵質(zhì)膜，活動即停止。精子與卵質(zhì)膜接觸后20min，即發(fā)生細胞融合，精子頭部入卵。ch05第五章配種與受精除極少數(shù)動物外，整個精子尾部不進入卵子。在精子頭與卵黃膜發(fā)生融合的同時，卵子激活，產(chǎn)生一系列反應(yīng)。

ch05第五章配種與受精3.1皮質(zhì)反應(yīng)(cortical

reaction,CR)一種防止質(zhì)膜再被其他精子穿透的防御性反應(yīng)當(dāng)精子與卵黃膜接觸時，在接觸點膜電荷發(fā)生改變并向周圍擴大，整個膜持續(xù)去極化數(shù)分鐘在卵黃膜下的皮質(zhì)顆粒向卵子表面移動，在Ca2+的作用下，皮質(zhì)顆粒與卵黃膜融合，以胞吐方式將其內(nèi)容物排入卵周隙。ch05第五章配種與受精精子與卵子接觸后5min就完成皮質(zhì)反應(yīng)。皮質(zhì)反應(yīng)與頂體反應(yīng)很相似。皮質(zhì)顆粒內(nèi)容物是一種有黏性的透明膜物質(zhì)，內(nèi)含黏多糖、類胰蛋白酶以及阻止頂體酶作用的物質(zhì)。這些內(nèi)容物的釋放引起卵黃膜和透明帶結(jié)構(gòu)的變化，即產(chǎn)生卵黃膜反應(yīng)和透明帶反應(yīng)。ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精海膽皮層顆粒反應(yīng)示意圖（微絨毛也被掩蓋）ch05第五章配種與受精未受精卵（左）和受精卵（右）的皮層ch05第五章配種與受精3.2卵黃膜反應(yīng)(vitellinereaction)皮質(zhì)反應(yīng)后，大部分原來的卵黃膜加入了皮質(zhì)顆粒膜而發(fā)生膜的改組，這種變化稱為卵黃膜反應(yīng)或卵黃膜封閉作用。此時，皮質(zhì)顆粒所釋放的黏多糖與卵黃膜表面緊密相連，在卵子周圍又形成一保護層，稱透明膜，從而改變卵子表面結(jié)構(gòu)，阻止第二個精子入卵，避免產(chǎn)生多精子受精現(xiàn)象ch05第五章配種與受精海膽受精膜的形成及多余精子的移除ch05第五章配種與受精3.3透明帶反應(yīng)(zonareaction,ZR)皮質(zhì)顆粒內(nèi)容物的釋放，改變了透明帶的性質(zhì)迅速、有效的阻止再有精子穿過透明帶。原因：皮質(zhì)顆粒內(nèi)容物中的類胰蛋白酶破壞了透明帶上的特異性精子受體。ch05第五章配種與受精4.原核形成精子入卵后不久，頭部開始膨大，核疏松，核膜消失，失去固有的形態(tài)，最后在疏松的染色質(zhì)外又形成新的核膜，這種重新形成的核叫雄原核。ch05第五章配種與受精同時卵母細胞減數(shù)分裂恢復(fù)，釋放第二極體。卵中的染色質(zhì)外又形成新的核膜，稱雌原核。兩性原核體積不斷增大，幾小時可達到原來的20倍(大鼠)。ch05第五章配種與受精很多畜種(包括豬和牛)雄性染色質(zhì)開始疏松增大的時間比雌性早，所以雄原核比雌原核大。豬的原核形成是在排卵后6－18h。ch05第五章配種與受精原核顯微注射法生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物

向受精卵雄（精）原核注入DNAch05第五章配種與受精5.配子配合雄原核和雌原核經(jīng)充分發(fā)育，逐漸相向移動。在卵子中央，核仁和核膜消失，兩原核緊密接觸，然后迅速收縮，染色體重新組合，并準(zhǔn)備進行第一次有絲分裂，形成一個稱為“合子”的單細胞胚胎。ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精ch05第五章配種與受精