生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座

優(yōu)異精品課件文檔資料生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第1頁生物技術(shù)藥品藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)廣州藍(lán)韻醫(yī)藥研究有限企業(yè)專注于中藥新藥臨床前研究，保健品研發(fā)生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第2頁CumulativeRevenuesofSelectedBiotechnologyCompanies(Amgen,Genentech,Chiron,GenzymeandBiogen)生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第3頁SelectedBlockbusterProteinPharmaceuticals生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第4頁生物技術(shù)藥品重組蛋白多肽類單克隆抗體及其片斷寡核苷酸疫苗制劑基因治療藥品（核酸制劑）干細(xì)胞藥品？生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第5頁蛋白肽類藥品藥代動(dòng)力學(xué)吸收分布代謝與排泄生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第6頁蛋白肽類藥品吸收小分子多肽：被動(dòng)吸收大分子多肽：水溶性：細(xì)胞間隙脂溶性：膜脂擴(kuò)散胞飲淋巴系統(tǒng)吸收：po干擾素；高度脂溶性？影響蛋白肽類藥品吸收原因藥品穩(wěn)定性；細(xì)胞滲透性：MW1000，鼻粘膜》腸粘膜生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第7頁CorrelationbetweenMWandthecumulativerecoveryofscrINFalpha-2a,cytochromec,inulinand5-fluoro-2-deoxyuridine(FUDR)intheefferentlymphinsheep生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第8頁蛋白肽類藥品吸收非腸道給藥(ParenteralRoute)：IV>M＝SC＝IP>鼻腔>肺>直腸>回腸>陰道>頰>口服鼻腔給藥(Intranasaladministration);Inhaleadministration;口服給藥(Oraladministration)Peroraladministration經(jīng)皮給藥(Transdermaladministration);其它給藥路徑:結(jié)腸、回腸、子宮、陰道、頰、眼睛等。生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第9頁IM和SC給藥生物利用度IMAdministrationDrugBioavailability(%)Alefacept63Interferonalpha-2a>80Triptorelin83SCAdministrationDrugBioavailability(%)Anakinra95Cetrorelix85Darbepoetin37Follitropin66Ganirelix91Interferonbeta-1b50Teriparatide95生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第10頁P(yáng)harmacokineticsofIMADI-SSPEG20,000mw

in

humanswithhepatocellular

carcinoma生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第11頁Intranasaladministration易給藥；鼻粘膜上皮細(xì)胞有大量微絨毛和廣泛分布血管淋巴管；無肝首過效應(yīng)；偽首過效應(yīng)(Pseudo－first－passeffect)；多肽、蛋白酶（主要是氨肽酶）；calcitonin,oxytoxin,LH-RH,growthhormone,interferone,vaccines；分子量upto2KDa:pharmacologicallyacitive；血腦屏障：IGF-1。生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第12頁InhalationadministrationEaseofadministrationlargesurfacearea(75m2)HighvascularityBypassoffirst-passmetabolismInsulinforTypeIIdiabetesDornase-alphaforcycticfibrosisProteasesinthelungLocaleffectsEffectofmolecularweight?生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第13頁P(yáng)lasmabioavailabilityoftherapeuticpeptidesversusMWafterpulmonaryadministration生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第14頁OraladministrationGenerallynottherapeuticallyactive;Factorsforlackofsystemicbioavailability:highgastrointestinalenzymeactivitygastrointestinalmucosaasanabsorptionbarrier;cytochromeP4503Aandp-glycoproteinactivityAvailableoralforms:cyclosporine(30%)anddesmopressin(0.16%);Absorptionenhancers;encapsulationinmicroparticlesornanoparticles.生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第15頁蛋白肽類藥品分布分布容積?。?.04-0.2L/kgvs.1-20L/kg(小分子);分子量大;水溶性大;蛋白結(jié)合率高？中央室（Vc):3-8L=plasmavolume和平衡室(Vss):14-20L<2x中央室;蛋白結(jié)合:reduceclearance;Site-specificandtarget-orientedreceptormediateduptake生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第16頁生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第17頁蛋白肽類藥品分布：血腦屏障血腦屏障：缺乏特異轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)；存在蛋白分解酶；外排作用泵提升血腦屏障對(duì)蛋白多肽類藥品攝取方法：脂質(zhì)體鼻腔給藥；脊髓管灌注或泵連續(xù)輸注。生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第18頁ZiconotidecerebrospinalCSFconcentrationasafunctionoftime生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第19頁CSFZiconotidePharmacokineticResultsbyDoseGroup生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第20頁小分子藥品代謝Drugbiotransformationisdividedintotwotypesofreactions:phaseI(hydrolysis,oxidation,andreduction)phaseIIreactions:conjugation((uridinediphosphoglucuronosyltransferase(UGT),N-acetyltransferase(NAT),glutathioneS-transferase(GST),andsulfotransferase(ST)).生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第21頁小分子藥品代謝生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第22頁蛋白肽類藥品代謝與排泄（消除：elimination)蛋白水解酶（溶酶體、蛋白酶、組織蛋白酶、氨肽酶、二肽酶）:throughoutbodyProteosesPeptisases受體介導(dǎo)去除(receptor-mediatedendocytosis):t-PA－liver－lowdensitylipoproteinreceptor-mannose-asialogglycoproteinreceptor;insulin蛋白水解酶穩(wěn)定：環(huán)孢菌素－P450?生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第23頁蛋白肽類藥品代謝與排泄腎臟腎小球：<30Kd,eg.,IFN,IL-2,腎小管近曲小管(proximaltubule)endocyticvesiclehydrolysisintopeptidefragments:IL-2,IL-11,growthhormone,insulinLuminalmembranes:hydrolysis:smalllinearpeptides:ANGI,ANGII,bradykinin,glucagon,LH-RHEndocytosedanddegradedinlysozymes:largerandmorecomplexproteinspeptidesPeritubularcapillaries:growthhormone肝臟:insulin,glucagon,epidermalgrowthfactor,antibodies,andt-PA膽道:血液:endo-oligopeptidase?腸道生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第24頁蛋白肽類藥品特點(diǎn)及其應(yīng)用顯著種族特異性：試驗(yàn)動(dòng)物選擇；免疫原性：ELISA;重復(fù)給藥產(chǎn)生抗被測(cè)試藥品抗體；體內(nèi)有大量蛋白肽類物質(zhì)包含結(jié)合蛋白：生物樣品前處理：LC-MS；被測(cè)試藥品尤其細(xì)胞因子給藥量極?。╪g-pg/ml):檢測(cè)靈敏度；存在被測(cè)試藥品內(nèi)源性物質(zhì)：本底效應(yīng)；同位素法;suppressionviaphysiologicalregulationorfeedback,eg,infusingglucosetosuppressendogenousinsulin生物活性不但取決于藥品一級(jí)結(jié)構(gòu),而且與其二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)相關(guān)：生物檢定法；生物PD-PK模型生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第25頁蛋白肽類藥品樣品檢測(cè)方法免疫測(cè)定法(Immunoassays)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(Enzyme-linkedimmunosobantassay,ELISA);放射免疫測(cè)定法(Radioimmunoassay,RIA);免疫放射定量法(IRMA);同位素標(biāo)識(shí)示蹤法(Isotopelabeltraceassay)生物檢定法(Bioassays);高效液相（HPLC）、液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法:comparablesensitivityhigherselectivity;eg,plasmabradykininpeptideantagonist;毛細(xì)血管電泳(CE)、高效毛細(xì)血管電泳(HPCE)和毛細(xì)血管電泳色普(CEC)；RealtimePCR、proteinchips生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第26頁ELISA法一抗（種族特異性）抗原（待測(cè)藥品）二抗（酶偶聯(lián)）顯色酶底物酶標(biāo)儀生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第27頁ELISA法優(yōu)點(diǎn)高度靈敏度:ng－pg/ml;較高特異性;易于操作、快速、不使用同位素、無輻射源,適合用于批處理;試劑使用壽命長(zhǎng)；當(dāng)前最慣用檢測(cè)方法。缺點(diǎn)待測(cè)蛋白多肽免疫活性而非生物活性;不能區(qū)分含有抗原決定族代謝物片斷；不能同時(shí)測(cè)定代謝物片斷;不一樣起源抗體結(jié)合性不一；受一些原因干擾生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第28頁ELISA法干擾原因含有抗原決定族代謝物片斷；被測(cè)試藥品內(nèi)源性物質(zhì)；基質(zhì)效應(yīng);被測(cè)試藥品可溶性受體結(jié)合蛋白;低親活力結(jié)合蛋白高親活力結(jié)合蛋白重復(fù)給藥產(chǎn)生抗被測(cè)試藥品抗體：中和性或非中和性長(zhǎng)久給藥；生物等量性試驗(yàn)生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第29頁ImmunogenicityofnativeADIandADI-SSPEGinmiceandrabbits

生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第30頁SC生長(zhǎng)激素（0.4IU/kg）后食蟹猴(n=7-8/組)血清生長(zhǎng)激素濃度生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第31頁普通ELISA、高靈敏度ELISA（additional增色放大系統(tǒng)）和化學(xué)發(fā)光ELISA法(luminol/過氧化氫底物)靈敏度和線性范圍比較

(From湯仲明，）生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第32頁放射免疫測(cè)定法和免疫放射定量法抗原，標(biāo)識(shí)抗原，抗體靈敏度高，尤其免疫放射定量法需同位素慣用于激素濃度測(cè)定生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第33頁同位素標(biāo)識(shí)示蹤法在目標(biāo)蛋白多肽分子上標(biāo)識(shí)同位素,從而判別目標(biāo)蛋白多肽與內(nèi)源性蛋白多肽該法需將目標(biāo)蛋白多肽進(jìn)行同位素標(biāo)識(shí),標(biāo)識(shí)方法有外標(biāo)法(化學(xué)聯(lián)接法)和內(nèi)標(biāo)法(摻入法)2種；外標(biāo)法：將標(biāo)識(shí)物如125I經(jīng)過化學(xué)方法偶聯(lián)至完整蛋白中如蛋白中酪氨酸或賴氨酸等，慣用化學(xué)方法有氯胺T或Iodogen法內(nèi)標(biāo)法：可用即將標(biāo)識(shí)以3H,14C或35S等同位素氨基酸加入生長(zhǎng)細(xì)胞或合成體系中,從而取得含同位素蛋白多肽分子,但因其操作復(fù)雜而少用；標(biāo)識(shí)后蛋白多肽表征：比放射性放射性純度標(biāo)識(shí)蛋白多肽生物活性。生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第34頁同位素標(biāo)識(shí)示蹤法優(yōu)點(diǎn)靈敏度高簡(jiǎn)便直觀檢測(cè)快速尤其適合用于蛋白肽類藥品組織分布缺點(diǎn)同位素標(biāo)識(shí)普通不能進(jìn)行人體藥品動(dòng)力學(xué)研究;可能引發(fā)藥品生物活性及代謝行為發(fā)生改變；因?yàn)榈鞍锥嚯倪M(jìn)入體內(nèi)會(huì)被降解代謝,或標(biāo)識(shí)氨基酸生物再利用，或與其它蛋白質(zhì)結(jié)合,總放射性不能代表藥品動(dòng)力學(xué)過程生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第35頁同位素標(biāo)識(shí)示蹤法與其它分析伎倆聯(lián)合應(yīng)用SDS三氯醋酸(TCA)沉淀法HPLC法生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及檢測(cè)專家講座第36頁生物檢定法利用被測(cè)蛋白多肽類藥品某種特異生物反應(yīng),經(jīng)過劑量(濃度)－效應(yīng)曲線對(duì)目標(biāo)蛋白多肽進(jìn)行定量測(cè)定一個(gè)分析方法；分為離體分析法和在體分析法；離體分析法通常采取細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù),以細(xì)胞增殖、分化或細(xì)胞毒性為基礎(chǔ),以細(xì)胞數(shù)目標(biāo)增減等為量效指標(biāo)，如水蛭素(hirudin)凝血酶時(shí)間測(cè)定；在體分析法則利用蛋白多肽類藥品在整體動(dòng)物中引發(fā)特異生物學(xué)反應(yīng)，如胰島素降底小鼠血糖。生物技術(shù)