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2012-12-07發(fā)布2013-03-01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布I本標準按照GB/T1.1給出的規(guī)則起草。本標準由農(nóng)業(yè)部農(nóng)墾局提出。芒果細菌性黑斑病原菌分子檢測技術(shù)規(guī)范本標準規(guī)定了芒果細菌性黑斑病原菌[Xanthomonascampestrispv.mangiferaeindicae(Patel,件。凡是不注日期的引其最本(包插所有的修改單)用于SN/T1193基檢測夾驗室芒果細菌pv.mangife疫性細菌病HrpB基病害模板基因序列好高遢變酶的作用下以四種脫氧和核酸(dN一循環(huán)，使欲擴增的基因片幾何倍數(shù)建短的I聚合酶作用和適宜的反應(yīng),根據(jù)模板序列設(shè)底物使物得以延伸，然后不魔復(fù)變性、退火和延伸這27.2PCR反應(yīng)緩沖液(Mg2+Plus)2.5μL,脫氧核糖核苷酸(dNTP)混合物2μL,特異性引物(見表1)各0.5μL,Taq引物名稱引物序列反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性3min,后30個循環(huán)為95℃變性30s至60s;58℃退火45s至60s;72℃見B.4.2。將整塊瓊脂糖凝膠置于紫外凝膠成像儀系統(tǒng)觀察窗內(nèi)，根據(jù)DNA分子量標準估計擴增條帶的大進行樣品的PCR檢測，具體操作按照7.2～73 2~3,5~6和8——陽性樣品；判斷該樣品為陽性。對初步判斷為陽性的原始樣品應(yīng)用甘藍黑腐黃單胞桿菌選擇性培養(yǎng)基(SX培養(yǎng)基)對病原菌進行分離純化，對純化的疑似病原細菌進行PCR檢測，4Xanthomonascampestrispv.mangiferaeindicae(Patel,Moniz&Kulkarni1948)Robbs,RibieroXanthomonascitripv.mangiferaeindicae。細菌域(DomainBacter52——葉片反面。圖A.1芒果葉片癥狀6B.2試劑B.2.31mol/LEDTA-Na?(p稱取372.2g乙二銨四乙酸二鈉(EDTA-Na?),加入70mL超純水中，再加入適量NaOH稱取81.9g氯化鈉(NaCl)溶解于800mL超純水中，緩慢加入20g十六烷基三甲基溴化銨在800mL超純水中加入酵母膏1g,牛肉浸膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,用NaOH溶液

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