新冠病毒核酸檢測(cè)相關(guān)知識(shí)

新冠病毒核酸檢測(cè)相關(guān)知識(shí)新冠肺炎的確診標(biāo)準(zhǔn):(二)確診病例。疑似病例同時(shí)具備以下病原學(xué)或血清學(xué)證據(jù)之一者:1.實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)新型冠狀病毒核酸陽性；2.病毒基因測(cè)序，與已知的新型冠狀病毒高度同源；3.血清新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽性；血清新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性或恢復(fù)期較急性期4倍及以上升高。新冠核酸的檢測(cè)是確診證據(jù)之一背

景1:

病原學(xué)的采集2:

個(gè)人防護(hù)病毒顆粒示意圖MAan@digioenvelo)eeenegg

seeSedme

F背

景S0KeGlveoBO@S反推生物學(xué)特性:>嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生，嗜上皮細(xì)胞>屬于β屬冠狀包膜病毒，圓形或橢圓形>與SARS,MER基因同源>表面ACE12結(jié)合位點(diǎn)>適應(yīng)性免疫與固有免疫背

景抵抗力:>對(duì)熱、紫外線敏感>56℃30分鐘、乙醚、75%乙醇、含氯消毒劑、過氧乙酸等>氯己定不能有效滅活自我防護(hù):1.滅活病原菌2.切斷傳播途徑結(jié)論:1.呼吸道感染為主，最早侵犯呼吸道的上皮細(xì)胞組織2.臨床主要以呼吸道癥狀為主，伴隨其他器官損傷3.可產(chǎn)生對(duì)應(yīng)抗體7**f背

景上呼吸道富含上皮組織的有：軟腭、

雙側(cè)咽腭弓、雙側(cè)咽扁桃體、咽后壁、鼻咽部下呼吸道：肺泡灌洗液，支氣管灌

洗液，深咳痰、呼吸道吸取物咽(

鼻

)

拭

子采集部位：以口咽，及鼻

咽部為主傳播途徑：>以呼吸道感染為主

—

—

經(jīng)飛沫

及密切接觸傳播>日本“公主號(hào)”感染

—

—

氣溶

膠傳播ACE2

與多器官損傷圖

2人不同器官組織中ACE2

表達(dá)的免疫組織化學(xué)檢測(cè)(源自h

e胃、膽囊、結(jié)腸可被新冠病毒侵犯——

RNA檢測(cè)有陽性報(bào)道>糞便或尿液造成的環(huán)境污染，

導(dǎo)致的

間接感染血清中的特異性抗體IgM、IgG表達(dá)ACE12

的組織與器官背

景病原學(xué)檢查:血清學(xué)檢查:HumanPrucinAllas)醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)·一、技術(shù)人員基本要求·

二、標(biāo)本采集基本要求·

三、標(biāo)本管理基本要求·四、實(shí)驗(yàn)室管理基本要求·五、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理·六、核酸檢測(cè)結(jié)果反饋基本要求·七、核酸檢測(cè)安全管理·八、核酸檢測(cè)信息化管理·

九、標(biāo)本混采·十、其他要求一、技術(shù)人員基本要求·(一)采樣人員。從事新冠病毒核酸檢測(cè)標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)(培訓(xùn)合格),熟悉標(biāo)本種類和采集方法,熟練掌握標(biāo)本采集操作流程及注意事項(xiàng),做好標(biāo)本信息的記錄,確保標(biāo)本質(zhì)量符合要求、標(biāo)本及相關(guān)信息可追溯。·(二)檢測(cè)人員。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)具備相關(guān)專業(yè)的大專以上學(xué)歷或具有中級(jí)及以上專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格,并有2年以上的實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷和基因檢驗(yàn)相關(guān)培訓(xùn)合格證書。實(shí)驗(yàn)室配備的工作人員應(yīng)當(dāng)與所開展檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)本量相適宜,以保證及時(shí)、熟練地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和報(bào)告結(jié)果,保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。二、標(biāo)本采集基本要求·(一)基本原則。·1.各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢測(cè)能力應(yīng)當(dāng)與門急診就診人次、住院人次等診療量相匹配,并與采集的標(biāo)本量相適應(yīng),避免采集數(shù)量明顯超出檢測(cè)能力導(dǎo)致的標(biāo)本積壓、標(biāo)本失效、檢測(cè)結(jié)果反饋遲緩等問題。·3.標(biāo)本采集應(yīng)當(dāng)在滿足本機(jī)構(gòu)發(fā)熱門診、住院患者、陪護(hù)人員及院內(nèi)職工的檢測(cè)需求基礎(chǔ)上,進(jìn)一步保障其他重點(diǎn)人群“應(yīng)檢盡檢”和一般人群“愿檢盡檢”的要求?！?.各醫(yī)療機(jī)構(gòu)在采集標(biāo)本時(shí),要根據(jù)不同采集對(duì)象設(shè)置不同的采樣區(qū)域,將發(fā)熱患者與其他患者、“愿檢盡檢”人群分區(qū)采樣,避免交叉感染。二、標(biāo)本采集基本要求(二)采樣點(diǎn)設(shè)置。醫(yī)療機(jī)構(gòu)設(shè)置新冠病毒采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)遵循安全、科學(xué)、便民的原則。采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)為獨(dú)立空間,具備通風(fēng)條件,內(nèi)部劃分相應(yīng)的清潔區(qū)和污染區(qū),配備手衛(wèi)生設(shè)施或裝置。采樣點(diǎn)需設(shè)立清晰的指引標(biāo)識(shí),并明確采樣流程和注意事項(xiàng)。設(shè)立獨(dú)立的等候區(qū)域,盡可能保證人員單向流動(dòng),落實(shí)“1米線”間隔要求,嚴(yán)控人員密度?！?三)人員配置及防護(hù)要求。每個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)配備1-2名采樣人員。合理安排采樣人員輪替，原則上每2-4小時(shí)輪崗休息1次。采樣人員防護(hù)裝備要求:N95及以上防護(hù)口罩、護(hù)目鏡、防護(hù)服、乳膠手套、防水靴套；如果接觸患者血液、體液、分泌物或排泄物，戴雙層乳膠手套；手套被污染時(shí)，及時(shí)更換外層乳膠手套。每采一個(gè)人應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)格手消毒或更換手套。二、標(biāo)本采集基本要求·(四)采樣流程。各醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)建立新冠病毒核酸檢測(cè)采樣操作流程制度，根據(jù)采樣對(duì)象類別確定具體采樣流程，包括預(yù)約、繳費(fèi)、信息核對(duì)、采樣、送檢、報(bào)告發(fā)放等。應(yīng)當(dāng)利用條碼掃描等信息化手段采集受檢者信息。標(biāo)本采集前，采樣人員應(yīng)當(dāng)對(duì)受檢者身份信息進(jìn)行核對(duì)，并在公共區(qū)域以信息公告形式告知核酸檢測(cè)報(bào)告發(fā)放時(shí)限和發(fā)放方式。每個(gè)標(biāo)本應(yīng)當(dāng)至少記錄以下信息:1.受檢者(患者)姓名、身份證號(hào)、居住地址、聯(lián)系方式；2.采樣單位名稱、標(biāo)本編號(hào)，標(biāo)本采集的日期、時(shí)間、采集部位、類型、數(shù)量等?！?五)采樣管選擇。人群篩查應(yīng)選擇具有病毒滅活功能如含胍鹽(異硫氰酸胍或鹽酸胍等)或表面活性劑的采樣管。首選含胍鹽的采樣管。發(fā)熱門診或急診的快速檢測(cè),則根據(jù)所用的核酸檢測(cè)試劑的要求確定采樣管。是新型冠狀病毒的類型的采集

的送檢和保存是新型冠狀病毒的類型的采集的送檢和保存1.1什么是新型冠狀病毒●此次流行的冠狀病毒為一種新發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒,2020年1月12日,WHO正式命名為2019-nCoV,2月11日,國際病毒分類委員會(huì)在其官網(wǎng)上宣布,新型冠狀病毒的英文名為“SARS-CoV-2”。·與SARS冠狀病毒是同一類,但不是同一種。冠狀病毒結(jié)構(gòu)theauthenticSARS-CoV-2virusRNP

hexonthe"Eggs-in-a-nest-RNPtetrahedronthe

Pyramid”RNPPrefusionRBDdown

Sthe

"Flail"Membrane新型冠狀病毒超精細(xì)三維結(jié)構(gòu)PostfusionS

the"Needle"1.2傳播途徑·直接傳播噴嚏、咳嗽、飛沫,呼出的氣體近距離直接吸入；·氣溶膠傳播飛沫混合在空氣中,形成氣溶膠；·接觸傳播飛沫趁機(jī)在物體表面,接觸污染手后,再接觸口腔、鼻腔、眼睛瞪黏膜；·

母嬰傳播10月20日,山東青島市政府新聞辦召開疫情防控新聞發(fā)布會(huì)。青島市副市長欒新介紹,青島此次疫情防控工作在世界上首次找到了充分的證據(jù)鏈,表明新冠病毒可由物傳人、冷凍條件可長期存活?！と巳浩毡橐赘小和驮袐D也是新冠病毒的易感人群1.3易感人群1.4新型冠狀病毒怕什么·對(duì)冠狀病毒理化特性的認(rèn)知多來自對(duì)SARS-CoV和MERS-CoV的研究。病毒對(duì)紫外線和熱敏感,在56℃條件下,30分鐘就能殺滅病毒；含氯消毒劑、酒精、碘類、過氧化物類等多種消毒劑也可有效滅活該病毒?！めt(yī)院和家庭常用的幾種殺菌/消毒溶液,包括對(duì)氯二甲苯酚,苯扎氯銨和西曲溴銨/氯已定,已被證明對(duì)冠狀病毒無效。

是新型冠狀病毒的類型的采集的送檢和保存2.1標(biāo)本類型的選擇·首選采集下呼吸道樣本(深咳痰液、支氣管灌洗液等呼吸道標(biāo)本)·其次采集上呼吸道樣本(咽拭子、鼻拭子和鼻咽拭子、鼻咽抽取物)·血液·如有消化道癥狀時(shí),應(yīng)當(dāng)同時(shí)采集糞便樣本2.2標(biāo)本類型與陽性檢出率·標(biāo)本類型與陽性檢出率密切相關(guān)下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液標(biāo)本陽性率>上呼吸道的鼻咽拭子>口咽拭子如果首選采集的咽拭子核酸檢測(cè)是陰性的,應(yīng)當(dāng)立即采集下呼吸道樣本送檢。2.2標(biāo)本類型與陽性檢出率·為了提高檢測(cè)陽性率,建議采集同一病人多部位標(biāo)本,合并進(jìn)行檢測(cè)。比如,用口咽拭子、鼻咽拭子同時(shí)采集標(biāo)本,然后放到同一采集采集管中送檢。對(duì)于有消化道癥狀的疑似患者,同時(shí)采集糞便或肛拭子進(jìn)行檢測(cè)。

是新型冠狀病毒的類型的采集的送檢和保存標(biāo)本的采集者三級(jí)生物安全防護(hù)●咽拭子:盡可能采集患者發(fā)病3天內(nèi)的咽拭子標(biāo)本。用無菌拭子(人造合成的聚酯纖維或滌綸拭子頭)擦拭雙側(cè)咽部扁桃體及咽后壁并旋轉(zhuǎn)3-5次，取樣后將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊管蓋，避免泄露?！け茄适米?盡可能采集患者發(fā)病3天內(nèi)的鼻咽拭子標(biāo)本。將植絨拭子由鼻腔插入鼻咽部(位置大于鼻孔至外耳距離的一半)遇阻力后旋轉(zhuǎn)3-5圈，取樣后將拭子頭浸入采樣液中，尾部棄去，旋緊管蓋?！ど羁忍狄?要求病人用力咳出深部痰液到含采樣液的50ml螺口無菌杯中，密閉輕晃無菌杯讓采樣液浸潤痰液?！し闻莨嘞匆?BALF):重癥患者或病情進(jìn)展迅速的肺炎患者,由臨床醫(yī)生無菌操作下吸入≥5mlBALF到貼有標(biāo)本條形碼并帶螺帽的50ml無菌容器中。收集標(biāo)本后旋緊標(biāo)本蓋并用封口膜封口?！ぱ?發(fā)病后7天內(nèi)或危重癥患者，或考慮病毒病毒血癥患者，可采集血液標(biāo)本。標(biāo)本采集管先貼好條形碼。使用含有乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝劑的真空采血管采集血液標(biāo)本2~4ml?！ぜS便:如發(fā)病早期出現(xiàn)腹瀉等消化道癥狀的患者，則留取糞便標(biāo)本3~5g(黃豆大小)或3-5ml水樣便。標(biāo)本收集于帶螺帽的50ml無菌容器中。標(biāo)本采集管先貼好條形碼。

是新型冠狀病毒

的類型的采集

的送檢和保存標(biāo)本運(yùn)輸和管理4.1國內(nèi)運(yùn)輸(院外運(yùn)輸):新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性生物材料的運(yùn)輸包裝分類屬于a類,對(duì)應(yīng)的聯(lián)合國編號(hào)為un2814,包裝符合國際民航組織文件doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》的pi602分類包裝要求?！ば滦凸跔畈《径局昊蚱渌麧撛诟腥拘圆牧线\(yùn)輸應(yīng)當(dāng)按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(衛(wèi)生部令第45號(hào))辦理《準(zhǔn)運(yùn)證書》。·新冠樣本的運(yùn)輸:1月23日國家衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)》中作出明確規(guī)定。A類、B類運(yùn)輸包裝的共同點(diǎn)·均為三層包裝·完整的三層包裝必須能通過《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》規(guī)定的跌落試驗(yàn),跌落高度不低于1.2m。。完整的三層包裝內(nèi)主容器最大運(yùn)輸量液體為4L、固體為4kg·輔助容器必須能承受在-40℃至+55℃溫度范圍內(nèi)95kPa的內(nèi)部壓力而無滲漏。B

類不符合列入A類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)B類RiologicalsubstancecategoryBUN3373不需要《名錄》規(guī)定的第三類、第四類病原微生物菌(毒)科及其樣本；部分第二類病原微生物樣本；防水、防穿刺、防泄漏

最小邊長≥100mm型防水、防破損、防泄漏至少有一個(gè)表面≥100mm×100mm不需要·外包裝上標(biāo)識(shí)、聯(lián)系人、地址清楚A類對(duì)人或動(dòng)物致死

或永久致殘可感染人的感染性物質(zhì)Infectious

substance,

affectinghumans區(qū)別定義運(yùn)輸專用名稱英文運(yùn)輸專用名歐UN編號(hào)UN專用標(biāo)記運(yùn)輸對(duì)象區(qū)別次級(jí)容器外包裝危險(xiǎn)品申報(bào)單

標(biāo)識(shí)《名錄》規(guī)定的第一類、第

二類病原微生物菌(毒)種

及其樣本；第三類中包裝分類為A類的病原微生物菌液體50mL、固體50g液體4L、固體4kg液體1L,固體4kg液體4L、固體4kgA.B類感染性物質(zhì)及包裝區(qū)別(續(xù))主容器單包裝

最大運(yùn)輸量總包裝主容器

最大運(yùn)輸量A

、

B

類

感

染

性

物

質(zhì)

及

包

裝

區(qū)

別UN2814@(毒

)種

及

共

樣

本A類B

類需要UN2814

生物安全運(yùn)輸箱4.2院內(nèi)運(yùn)輸(1)標(biāo)本按二類高致病性病原微生物管理,采集后盡快送往實(shí)驗(yàn)室,不能立刻送檢,可置于4℃保存。專人專庫專鎖保存。(2)按照固定運(yùn)送路線,避開人群密集走道與電梯。(3)運(yùn)送人員需經(jīng)過專門生物安全培訓(xùn),運(yùn)送需兩人一起運(yùn)送。(4)運(yùn)送人員做二級(jí)防護(hù),包括醫(yī)用防護(hù)帽、一次性外科口罩、手套、工作服和隔離衣。(5)標(biāo)本交接過程中,運(yùn)送人員不要觸碰標(biāo)本,應(yīng)注意個(gè)人及環(huán)境生物安全防護(hù)。制定應(yīng)急預(yù)案,如有泄露污染按預(yù)案處理。(6)標(biāo)本運(yùn)送過程中需保持標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱平穩(wěn)、不顛倒震蕩,切記不要自行打開轉(zhuǎn)運(yùn)箱。4.3標(biāo)本保存·用于病毒核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè),能在24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本可置于4℃保存；·24小時(shí)內(nèi)無法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70℃或以下保存(如無-70℃保存條件,則于-20℃暫存)

是新型冠狀病毒的類型的采集的送檢和保存·開展新型冠狀病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)制定廢棄物處置程序文件及污物、污水處理操作程序?！に械奈ｋU(xiǎn)性廢棄物必須依照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標(biāo)示方式,完整并且合規(guī)地標(biāo)示廢棄物內(nèi)容?！?yīng)當(dāng)由經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)的人員使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備和設(shè)備處理危險(xiǎn)廢棄物?！りP(guān)于廢棄物的處理措施有明確要求。1液體廢物的處理(1)普通污水產(chǎn)生于洗手池等設(shè)備,對(duì)此類污水應(yīng)當(dāng)單獨(dú)收集,排入實(shí)驗(yàn)室水處理系統(tǒng),經(jīng)處理達(dá)標(biāo)后方可排放。