細(xì)菌對抗菌藥物的敏感試驗(實驗)

抗菌藥物敏感性試驗成都醫(yī)學(xué)院臨床微生物學(xué)教研室*實驗?zāi)康?.掌握紙片擴(kuò)散法(K-B

法)原理、操作方法、結(jié)果的判讀及其臨床意義。2.掌握紙片擴(kuò)散法的質(zhì)量控制。實

驗內(nèi)容紙片瓊脂擴(kuò)散法(K-B

法)實驗器材1.菌種：金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922(幼齡菌，1.5×108/ml)2.培養(yǎng)基：水解酪蛋白瓊脂

(MH瓊脂)平板，1個/人3.抗菌紙片：青霉素(PEN)、

紅霉素(ERY)、慶大霉素(GEN)4.其它：無菌生理鹽水、無菌棉簽、鑷子、接種環(huán)、刻度尺(自帶)、0.5麥?zhǔn)媳葷峁?相當(dāng)于1.5×10?CFU/ml)抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感性，

并與該藥對測試菌的最

低抑菌濃度

(MIC)

呈負(fù)

相關(guān)，即抑菌圈越大，MIC

越小。1.原理2

.

方法待檢菌液無

簽MH瓊脂表面

貼含藥紙片5min室溫35℃

觀察

16～18h

結(jié)果操作注意事項：菌液應(yīng)在15分鐘內(nèi)接種完畢接種后，平板放置時間不要超過5min注意紙片距離3.結(jié)果解釋測量抑菌圈直徑，參照CLSI

的標(biāo)準(zhǔn)解釋結(jié)果。4.影響紙片法藥敏結(jié)果的因素①培養(yǎng)基質(zhì)量成分、pH、深度、硬度和表面

濕度等。②藥敏紙片的質(zhì)量

含藥量和保存方式。③接種菌量④操作質(zhì)量接種后貼藥片的時間；培養(yǎng)溫度

和時間；抑菌圈測量工具的精度5.質(zhì)量控制采用標(biāo)準(zhǔn)菌株與測試菌在同一條件下做藥敏試驗。

標(biāo)準(zhǔn)菌株的抑菌圈應(yīng)落在預(yù)期范圍內(nèi)。如果超出該范圍，

則不應(yīng)發(fā)出報告，及時檢查原因，予以糾正。ATCC25923金黃色葡萄球菌ATCC25922

大腸埃希菌ATCC27853

銅綠假單胞菌ATCC29212

或33186

糞腸球菌抗菌藥物?紙

片

含

藥

量抑菌環(huán)直徑(mm)?相對應(yīng)MIC值(μ

g/ml)?R?I+S?R+S?青霉素10單位≤28+-4≥29+β

-

內(nèi)

酰

胺

酶≤0.12+苯唑西林1μ

ge≤10+11-12+≥13+≥4+≤2萬古霉素30μg+-+-4154-+≤4+慶大霉素10μge≤12+13-14+15+≥8+≤4+紅霉素?15μg+≤13+14-22+≥23+≥8+≤0.5+環(huán)丙沙星5μge≤15+16-20+4

≥21+≥4+≤1+克林毒素2μg?≤1415-20+≥21?≥40≤0.54甲氧芐啶磺胺

甲噁唑?1.2523.75μge≤10+11-15+16+8/152+≤238+金黃色葡萄球菌抗菌藥物敏感性試驗結(jié)果判斷44抗菌藥物紙片含藥量(μg)抑菌環(huán)直徑(mm)相對應(yīng)MIC值(μgm1)?ReIeSReSe氨芐西林?100≤13414-16≥17e320≤8e哌拉西林?100?≤17?18-20e=21?1284英160氨芐西林/舒巴坦20/10?≤13+14-17e18e32/16+≤8/4頭孢唑啉30?≤14?15-17e≥18e=320≤8+頭孢噻肟?30≤14+15-22023e64≤8e頭孢曲松?30?≤13414-20?≥21?64?≤80頭孢他啶30e≤14?15-17e18e32?≤8e亞胺培南10?三13414-15016e=160≤4e氨曲南30?≤15?16-21e22?32e≤8e慶大霉素?100≤12+13-14e≥1508?≤40阿米卡星30?≤14?15