抗擊癌癥的新紀(jì)元：CAR-T細(xì)胞療法

抗擊癌癥的新紀(jì)元：CAR-T細(xì)胞療法介紹癌癥是一個(gè)日益嚴(yán)重的全球性健康問題。常見的癌癥治療方法是手術(shù)、化療和放射療法。目前，隨著分子生物學(xué)和腫瘤生物學(xué)的發(fā)展，癌癥免疫療法已成為治療各種類型癌癥中具有前景的一種新興治療手段。嵌合抗原受體T細(xì)胞治療（CAR-Ttherapy）因其產(chǎn)生顯著而持久的臨床反應(yīng)，具有革命性意義。嵌合抗原受體（CAR，也稱為嵌合免疫受體）是經(jīng)過修飾的受體蛋白，使T細(xì)胞具有靶向特異性蛋白的能力。這種受體稱為“嵌合”是因?yàn)樗鼈冊(cè)趩蝹€(gè)受體中結(jié)合了抗原識(shí)別和T細(xì)胞激活功能。當(dāng)CAR-T細(xì)胞注射到患者體內(nèi)時(shí)，它們可充當(dāng)針對(duì)癌細(xì)胞的“活藥物”[1]。CAR與細(xì)胞表面的靶抗原結(jié)合并被激活，隨后繼續(xù)增殖并產(chǎn)生細(xì)胞毒性[2]（圖1）。圖1.CAR-T細(xì)胞療法過程示意圖CAR-T細(xì)胞經(jīng)歷了四個(gè)發(fā)展階段。Kuwana等人于1987年研發(fā)了第一個(gè)CAR-T細(xì)胞，隨后相繼出現(xiàn)了第二代、第三代和第四代CAR-T細(xì)胞。對(duì)這些進(jìn)行改良后，CART細(xì)胞抗腫瘤活性、效應(yīng)功能和體內(nèi)持久性得到改進(jìn)，能識(shí)別基質(zhì)細(xì)胞相關(guān)抗原或分泌基質(zhì)降解酶來破壞實(shí)體瘤中的物理屏障[3]。2017年發(fā)生了CAR-T細(xì)胞療法的兩起標(biāo)志性事件：美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）首次批準(zhǔn)兩種CD19的CAR-T細(xì)胞療法分別用于治療急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤。目前，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)了6款CAR-T細(xì)胞療法的產(chǎn)品（表1）。表1FDA批準(zhǔn)的CAR-T細(xì)胞療法CAR-T細(xì)胞藥物名稱批準(zhǔn)日期靶點(diǎn)

適應(yīng)癥tisagenlecleucelKymriah2017/8/30CD19B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）axicabtageneciloleucelYescarta2017/10/18CD19彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）濾泡性淋巴瘤brexucabtageneautoleucelTecartus2020/7/24CD19套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）lisocabtagenemaraleucelBreyanzi2021/2/5CD19彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）idecabtagenevicleucelAbecma2021/3/26BCMA多發(fā)性骨髓瘤ciltacabtageneautoleucelCarvykti2022/2/28BCMA多發(fā)性骨髓瘤CAR-T細(xì)胞療法治療腫瘤CAR-T細(xì)胞免疫治療通過基因改造技術(shù)，比常規(guī)免疫細(xì)胞具有更高的靶向性、殺傷活性和效應(yīng)T細(xì)胞的持久性。還可以克服腫瘤局部的免疫抑制微環(huán)境，打破宿主免疫耐受狀態(tài)，在腫瘤的臨床治療中顯示出巨大的應(yīng)用潛力和發(fā)展前景。但該技術(shù)也存在細(xì)胞因子風(fēng)暴、脫靶效應(yīng)、插入突變和其他臨床應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)。CAR-T細(xì)胞治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤CAR-T細(xì)胞療法在血液惡性腫瘤中取得了初步成效。以CAR-T細(xì)胞為基礎(chǔ)的高效療法廣泛用于血液系統(tǒng)癌癥，如急性和慢性白血病、淋巴瘤和骨髓瘤?？笴D19CAR-T細(xì)胞可有效治療R/R（復(fù)發(fā)性或難治性）B細(xì)胞惡性腫瘤，如兒童和成人患者的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（NHL)、ALL和慢性淋巴細(xì)胞白血病[4]。CD19是表達(dá)于B細(xì)胞表面表達(dá)免疫球蛋白超家族成員，是CAR靶向治療的理想靶點(diǎn)之一[5]。CART細(xì)胞臨床試驗(yàn)（多中心2期ELIANA臨床試驗(yàn)）應(yīng)用CART細(xì)胞治療B細(xì)胞淋巴瘤，對(duì)75例患者接受輸注的患者進(jìn)行隨訪調(diào)查，結(jié)果顯示，75名患者的總緩解率為81%，45例患者（60%）完全緩解，注射后6個(gè)月的總生存率為90%[6]。B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）是腫瘤壞死因子受體超家族的成員，在惡性漿細(xì)胞中高表達(dá)。調(diào)節(jié)B細(xì)胞增殖和存活。它已成為抗體藥物偶聯(lián)物、雙特異性抗體、嵌合抗原受體T細(xì)胞療法和其他多發(fā)性硬化骨髓瘤免疫治療的關(guān)鍵靶點(diǎn)[7]。CAR-T細(xì)胞可以靶向B細(xì)胞腫瘤上的另一種過表達(dá)抗原CD22。據(jù)報(bào)道，CD22CAR-T細(xì)胞在CD19CAR-T細(xì)胞治療后的復(fù)發(fā)性癌癥或在ALL腫瘤細(xì)胞中發(fā)揮抗腫瘤功能。此外，數(shù)項(xiàng)研究證實(shí)了CD20CAR-T細(xì)胞在R/R非霍奇金淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤和套細(xì)胞淋巴瘤中的安全性和療效[8]。義翹神州提供高質(zhì)量的血液惡性腫瘤靶點(diǎn)蛋白和ELISA試劑盒。這些高質(zhì)量試劑已經(jīng)過多種方法驗(yàn)證，并可提供一致和可重復(fù)的結(jié)果（圖2）。A 重組人CD19蛋白（ECD，His標(biāo)簽）（貨號(hào)：11880-H08H）B FITC標(biāo)記的人BCMA蛋白（貨號(hào)：10620-H03H-F）C PE標(biāo)記的人CD22蛋白（貨號(hào)：11958-H08H-P）CAR-T細(xì)胞療法治療實(shí)體瘤實(shí)體瘤與血液腫瘤相比更為復(fù)雜，CAR-T細(xì)胞需要解決多種挑戰(zhàn)。腫瘤細(xì)胞的遺傳不穩(wěn)定性導(dǎo)致它們不能有效表達(dá)T細(xì)胞靶向的抗原；或者缺乏呈遞這些抗原的機(jī)制。其他挑戰(zhàn)包括缺乏選擇性和高表達(dá)的表面抗原，CAR-T細(xì)胞很難準(zhǔn)確注入到腫瘤位點(diǎn)，免疫抑制性微環(huán)境和腫瘤抗原異質(zhì)性[9]。實(shí)體瘤臨床試驗(yàn)不斷增加，包括靶向癌胚抗原的CAR-T細(xì)胞、間皮素、白細(xì)胞介素13受體α（IL-13Rα）、人表皮生長因子受體2（HER2）、成纖維細(xì)胞活化蛋白（FAP）、L1細(xì)胞粘附分子（L1CAM）和表皮生長因子受體。HER2是一種酪氨酸激酶受體，在多種癌癥和約80%的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中過表達(dá)[10]。HER2在發(fā)育、細(xì)胞增殖和分化中起著至關(guān)重要的作用。HER2基因與惡性腫瘤和許多癌癥的不良預(yù)后相關(guān)，包括乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌等。最近有研究證明，第三代HER2CAR-T細(xì)胞可以靶向殺死膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞。當(dāng)其與PD-1阻斷劑聯(lián)合使用時(shí)，療效得到顯著改善[11]。義翹神州已成功開發(fā)一組高質(zhì)量的實(shí)體瘤靶點(diǎn)蛋白，產(chǎn)品具有高活性和高純度（圖3）。圖3.高質(zhì)量HER2靶點(diǎn)蛋白提高CAR-T細(xì)胞治療療效的策略盡管CAR-T細(xì)胞療法具有良好的治療效果，但其增殖、持久性和抗腫瘤能力可能會(huì)下降，在血液腫瘤或?qū)嶓w瘤中面臨著一些挑戰(zhàn)。以下是提高CAR-T免疫療法的應(yīng)對(duì)策略。策略1：輸送CAR-T細(xì)胞靜脈輸注（全身給藥）和顱內(nèi)輸注（局部給藥）可增加CAR-T細(xì)胞療法的安全性和有效性。因此，靜脈給予CAR-T細(xì)胞時(shí)，靶向各種B細(xì)胞淋巴瘤上表達(dá)的CD19、CD20、CD30和BCMA抗原可改善治療結(jié)果。此外，在實(shí)體瘤中已成功局部輸送CAR-T細(xì)胞。例如，向膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者顱內(nèi)輸注IL13Rα-CAR-T細(xì)胞，腫瘤進(jìn)展得到有效緩解[12]。策略2：靶向多種抗原CAR-T細(xì)胞療法具有挑戰(zhàn)性的局限性之一是腫瘤對(duì)靶向單抗原CAR構(gòu)建體的耐藥性的發(fā)展。因此，多種策略依賴于靶向多種抗原來降低CAR-T細(xì)胞對(duì)血液惡性腫瘤和實(shí)體瘤的復(fù)發(fā)率。這些方法使用雙CAR構(gòu)建體或串聯(lián)CAR，其中串聯(lián)CAR是含有兩個(gè)scFvs的單個(gè)CAR構(gòu)建體，同時(shí)靶向多個(gè)腫瘤抗原。臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，CD19/CD22CAR-T細(xì)胞療法在治療成人ALL和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤具有一定的療效。此外，研究人員已在實(shí)體瘤臨床前模型中對(duì)其進(jìn)行了試驗(yàn)，包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的HER2和IL13Ra2以及乳腺癌中的HER2和MUC1。在這兩種情況下，雙靶向治療均比單一靶向治療產(chǎn)生更好的抗腫瘤效果。這項(xiàng)研究闡明了優(yōu)化靶抗原的重要性，不僅可以改善抗腫瘤反應(yīng)，還可以降低抗原逃逸機(jī)制的靶抗原，以預(yù)防疾病復(fù)發(fā)[13]。結(jié)論CAR-T細(xì)胞是本世紀(jì)初癌癥免疫治療中最受歡迎的關(guān)鍵療法之一。它將是21世紀(jì)的重要免疫學(xué)技術(shù)，最終有望戰(zhàn)勝癌癥等致命疾病。然而，我們需要進(jìn)一步研究來優(yōu)化CAR-T細(xì)胞療法，對(duì)它們的特異性、安全性和效力做出改進(jìn)[14]。對(duì)有望支持CAR-T療法攻克實(shí)體瘤治療需面對(duì)的多重障礙。我們希望CAR-T療法早日攻克多重障礙，為更多患者造福。參考文獻(xiàn)[1]doi:10.1158/2159-8290.CD-12-0548.[2]doi:10.15252/emmm.201607485.[3]doi:10.3389/fimmu.2022.817296[4]doi:10.1186/s40364-017-0102-y[5]doi:10.1038/ni1547[6]doi:10.2478/ahp-2020-0002[7]doi:10.1016/j.critrevonc.2021.103453.[8]doi:10.1038/nm.4441.[9]doi:10.1016/j.smim.201