2025版新教材高考生物復(fù)習(xí)特訓(xùn)卷考點(diǎn)35微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

考點(diǎn)35微生物的培育技術(shù)及應(yīng)用第一關(guān)小題自助餐自選狂刷eq\a\vs4\al(題組一)刷基礎(chǔ)小卷——固學(xué)問1．[2024·甘肅蘭州一中高三試題]平板冷卻凝固后要將平板倒置，其目的是()A．利于大腸桿菌的生長B．防止空氣進(jìn)入C．利于培育基的冷卻D．防止皿蓋冷卻水落入培育基造成污染2．[經(jīng)典模擬]下表為某培育基的配方，下列敘述正確的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.從物理性質(zhì)看，該培育基屬于液體培育基；從用途看，該培育基屬于選擇培育基B．該培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C．該培育基缺少供應(yīng)生長因子的物質(zhì)D．該培育基調(diào)整合適的pH后就可以接種運(yùn)用3．[經(jīng)典模擬]微生物培育過程中，要非常重視無菌操作。現(xiàn)代生物學(xué)試驗(yàn)中的很多方面也要進(jìn)行無菌操作，以防止雜菌污染。請分析下列操作中錯(cuò)誤的是()①煮沸消毒可以殺死微生物的養(yǎng)分細(xì)胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行③無菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒④家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌⑤培育基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌⑥加入培育基中的指示劑和染料不須要滅菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥4．[2024·四川樂山四校聯(lián)考]某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染狀況而進(jìn)行了試驗(yàn)，試驗(yàn)過程包括制備培育基、滅菌、接種及培育、菌落視察與計(jì)數(shù)。下列與此試驗(yàn)相關(guān)問題的敘述中，正確的是()A．試驗(yàn)用過的帶菌培育基經(jīng)過加熱后才能倒掉B.利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行分別、純化并計(jì)數(shù)C.視察細(xì)菌培育的試驗(yàn)時(shí)，最好是在另一平板上接種清水作為比照試驗(yàn)D．培育基中含有的蛋白胨、淀粉可分別為細(xì)菌培育供應(yīng)氮源和碳源5．[2024·安徽省黃山市高三“八校聯(lián)考”]藍(lán)白斑篩選是基因工程中篩選重組目的基因常用的一種方法，表現(xiàn)為培育基上出現(xiàn)藍(lán)白顏色的菌落，可以顏色為依據(jù)干脆篩選重組菌。用于篩選的菌為β-半乳糖苷酶缺陷型菌株，這種宿主菌中編碼β-半乳糖苷酶的部分缺失，不具有生物活性。用于藍(lán)白斑篩選的質(zhì)粒載體一般含有抗性基因和將宿主菌β-半乳糖苷酶缺失部分補(bǔ)全的序列，在這段序列中還含有多個(gè)限制性酶切位點(diǎn)，便于插入目的基因。β-半乳糖苷酶能夠作用于一種無色化合物X-gal，使其變成藍(lán)色物質(zhì)?；卮鹣铝袉栴}：(1)玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器材利用________方法滅菌。(2)培育基滅菌后，須要冷卻到________℃左右時(shí)，才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要將平板倒置，其緣由是________________。(3)為防止雜菌污染，培育基中要添加________。藍(lán)白斑篩選能勝利，是因?yàn)榕嘤刑砑恿薩_______。(4)最終培育基出現(xiàn)的白色的菌落是()A．目的基因和載體結(jié)合B．只含目的基因C．只含載體(5)若須要長期保存該菌種，可采納的方法是________。eq\a\vs4\al(題組二)刷提升小卷——培素養(yǎng)6．[2024·湖北襄陽市模擬]下列有關(guān)細(xì)菌培育的敘述，正確的是()A．不同細(xì)菌的菌落特征一般相同B．在培育基中加入青霉素可促進(jìn)細(xì)菌生長C．用液體培育基培育破傷風(fēng)桿菌的過程中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長D．培育醋酸桿菌時(shí)，往培育液中通入氧氣可以促進(jìn)菌體快速增殖7．[2024·遼寧沈陽市模擬]下列關(guān)于微生物試驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．微生物培育基中并不都必需添加碳源或氮源B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的培育皿皿蓋放到一邊，以免培育基濺到皿蓋上C．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒D．試驗(yàn)結(jié)束后，帶菌的培育基必需經(jīng)滅菌處理后才能倒掉8．[2024·浙江杭州其次中學(xué)校聯(lián)考模擬]下列有關(guān)微生物培育基的配制表述錯(cuò)誤的是()A.培育硝化細(xì)菌的培育基中的銨鹽可作為氮源和能源B．尿素固體培育基中的K2HPO4能用于維持培育基的pHC．培育光能自養(yǎng)型的藍(lán)細(xì)菌的培育基中不需供應(yīng)有機(jī)物D．馬鈴薯蔗糖固體培育基中的瓊脂能作為酵母菌的碳源9．[2024·浙江模擬]微生物的培育須要相宜的條件。下列相關(guān)敘述正確的是()A．培育基中必需添加水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等B．培育基制備過程中須要將pH調(diào)至中性，然后滅菌C．利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時(shí)，C/N為4∶1時(shí)更有利于菌體繁殖D．為便于接種，培育基中都要添加瓊脂或其他的凝固劑10．[2024·廣東模擬]剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，但對纖維素水解后形成的纖維二糖和葡萄糖無作用。某同學(xué)利用剛果紅配制選擇培育基，分別土壤中能水解纖維素的微生物并視察菌落數(shù)。下列敘述正確的是()A.劃線接種后統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，統(tǒng)計(jì)值比活菌實(shí)際數(shù)高B．選擇培育基中應(yīng)以剛果紅作為唯一碳源，并加入瓊脂糖作凝固劑C.培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間應(yīng)從電源插上起先計(jì)時(shí)D．可以把濾紙埋在土壤中，經(jīng)過一段時(shí)間后，再從已腐爛的濾紙上篩選目的菌11．[2024·浙江模擬]稀釋涂布平板法和平板劃線法是分別和純化微生物的兩種重要方法，關(guān)于二者的比較，下列說法錯(cuò)誤的是()A．稀釋涂布平板法易形成單菌落并可對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B．利用稀釋涂布平板法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)選擇相同稀釋度下的培育基C．平板劃線中用蘸有菌液的接種環(huán)劃一條線后，再次蘸取菌液接著劃線D．二者接種菌液時(shí)分別須要用到的工具是涂布器和接種環(huán)12．[2024·浙江寧波一模]某愛好小組探究慶大霉素和阿米卡星兩種抗生素對大腸桿菌的選擇作用，獲得如下試驗(yàn)結(jié)果。愛好小組還設(shè)置含不同濃度抗生素的液體培育基培育大腸桿菌，結(jié)果顯示抗生素濃度越低，液體越渾濁。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．抑菌圈的直徑越大，說明抗生素的抑菌實(shí)力越強(qiáng)B．抑菌圈隨大腸桿菌代數(shù)增加而變小，說明抗生素對大腸桿菌有選擇作用C．阿米卡星的抑菌效果比慶大霉素小，所以藥用效果相對不夠志向D．為了避開產(chǎn)生耐藥菌，服用抗生素時(shí)要足量、足藥程，剛好停用對細(xì)菌不敏感的藥13．[2024·福建一模]獲得純凈的微生物培育物是發(fā)酵工程的基礎(chǔ)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．獲得純凈的微生物培育物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B．稀釋涂布平板法和顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法C．平板劃線法和稀釋涂布平板法是試驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分別和純化的常用方法D．接種于培育基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為純培育物14．[2024·湖北一模]藥物敏感試驗(yàn)簡稱藥敏試驗(yàn)，旨在了解某病原微生物對各種抗生素的敏感程度，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗(yàn)中一種常用的方法，在紙片四周會形成透亮的抑菌圈。下列敘述正確的是()A．圖1所示操作需待培育基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行，不須要在酒精燈旁操作B．圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變C．進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測試菌，需運(yùn)用的接種工具是接種環(huán)D．接種后的平板在培育時(shí)的放置應(yīng)如圖2中②所示，可以防止污染15．[2024·湖北模擬]某愛好小組為探討“運(yùn)用公筷對餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤運(yùn)用公筷，一盤不用公筷，試驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是()A．在固體培育基X上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種B.固體培育基X對菜品中的細(xì)菌有選擇作用C．依據(jù)菌落的特征可以精確推斷細(xì)菌的種類D．理論上，不食用組的培育基上不會有菌落出現(xiàn)eq\a\vs4\al(題組三)刷真題小卷——登頂峰16．[2024·遼寧卷]為避開航天器在執(zhí)行載人航天任務(wù)時(shí)出現(xiàn)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)，須要對航天器及干凈的組裝車間進(jìn)行環(huán)境微生物檢測。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．航天器上存在適應(yīng)養(yǎng)分物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物B．細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕C．在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品D.采納平板劃線法等分別培育微生物，視察菌落特征17．[2024·江蘇卷]下列是某同學(xué)分別高產(chǎn)脲酶菌的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是()A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分別目的菌株B.在選擇培育基中需添加尿素作為唯一氮源C.適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D.可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌18．[2024·山東卷]解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并汲取利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能干脆汲取脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培育。甲菌菌落四周呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落四周不變色，下列說法錯(cuò)誤的是()A.甲菌屬于解脂菌B．試驗(yàn)中所用培育基以脂肪為唯一碳源C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的實(shí)力19．[2024·北京卷]人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分別出葡萄球菌。下述操作不正確的是()A．對配制的培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．運(yùn)用無菌棉拭子從皮膚表面取樣C．用取樣后的棉拭子在固體培育基上涂布D．視察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步推斷20．[2024·山東卷]含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動實(shí)力，用穿刺接種的方法分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培育基上進(jìn)行培育，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯(cuò)誤的是()A.乙菌的運(yùn)動實(shí)力比甲菌強(qiáng)B．為不影響菌的運(yùn)動需選用液體培育基C．該試驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染21．[2024·海南卷]為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某愛好小組采集園內(nèi)土壤樣本并開展相關(guān)試驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本B．培育細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白胨固體培育基C.土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越簡單得到單菌落D.鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法其次關(guān)大題自助餐自選精做eq\a\vs4\al(題組一)等級考試題專項(xiàng)練1．[2024·河北卷]番茄灰霉病菌嚴(yán)峻影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對多種病原菌具有抑制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，探討者設(shè)計(jì)了相關(guān)試驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：(1)檢測枯草芽孢桿菌對番茄灰霉病菌的抑制作用時(shí)，取適量________菌液涂布于固體培育基上，將無菌濾紙片(直徑5mm)在________菌液中浸泡后覆蓋于固體培育基中心，數(shù)秒后取出濾紙片，培育皿倒置培育后測量________大小以判定抑菌效果。(2)枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培育時(shí)應(yīng)采納________(填“靜置”或“搖床振蕩”)培育。培育過程中抽樣檢測活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采納________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法”)，其緣由是________________________________________。(3)電泳分別蛋白質(zhì)混合樣品的原理是________________________________________。利用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳測定枯草芽孢桿菌的抗菌蛋白分子量時(shí)，SDS的作用是____________________________________________________。(4)枯草芽孢桿菌長期保藏時(shí)，常以其________作為保藏對象。2．[2024·浙江1月，節(jié)選]回答下列(一)小題：(一)某環(huán)保公司從淤泥中分別到一種高效降解富養(yǎng)分化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌株。(1)從淤泥中分別細(xì)菌時(shí)常用劃線分別法或________法，兩種方法均能在固體培育基上形成________。對分別的菌株進(jìn)行誘變、________和鑒定，從而獲得能高效降解富養(yǎng)分化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培育基上繁殖。3．[2024·廣東卷]中國科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在試驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖?；卮鹣铝袉栴}：(1)為提高菌株H對蔗糖的耐受實(shí)力和利用效率，可在液體培育基中將蔗糖作為________，并不斷提高其濃度，經(jīng)多次傳代培育(指培育一段時(shí)間后，將部分培育物轉(zhuǎn)入新配的培育基中接著培育)以獲得目標(biāo)菌株。培育過程中定期取樣并用______________的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，評估菌株增殖狀況。此外，選育優(yōu)良菌株的方法還有____________________(答出兩種方法即可)等。(2)基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受實(shí)力強(qiáng)等特性，探討人員設(shè)計(jì)了一種不須要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培育基鹽濃度設(shè)為60g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不須要滅菌的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(答出兩點(diǎn)即可)(3)探討人員在工廠進(jìn)行擴(kuò)大培育，在相宜的養(yǎng)分物濃度、溫度、pH條件下發(fā)酵，結(jié)果發(fā)覺發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期，并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì)，說明發(fā)酵條件中________可能是高密度培育的限制因素。(4)菌株H還能通過分解餐廚垃圾(主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂等)來生產(chǎn)PHA，說明其能分泌________________________。4．[2024·浙江6月，節(jié)選]回答下列(一)小題：(一)回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題：(1)為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首先配制醋酸菌選擇培育基：將適量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容，調(diào)整pH，再高壓蒸汽滅菌，經(jīng)________后加入3%體積的無水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培育基，振蕩培育24h。用________將少量上述培育液涂布到含CaCO3的分別培育基上，在30℃培育48h。再挑取分別培育基上具有________的單菌落若干，分別接種到與分別培育基成分相同的________培育基上培育24h后，置于4℃冰箱中保存。(2)優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培育基，培育一段時(shí)間后，取合適接種量的菌液在30℃、150r/min條件下振蕩培育。持續(xù)培育至培育液中醋酸濃度不再上升，或者培育液中________含量達(dá)到最低時(shí)，發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應(yīng)有________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)等特點(diǎn)。5．[2024·全國甲卷]某同學(xué)從被石油污染的土壤中分別得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，在此基礎(chǔ)上采納平板培育法比較二者降解石油的實(shí)力，并分析兩個(gè)菌株的其他生理功能。試驗(yàn)所用的培育基成分如下。培育基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培育基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步驟：①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培育基Ⅰ中培育，得到A、B菌液；②液體培育基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔。回答下列問題：(1)試驗(yàn)所用培育基中作為碳源的成分是____________。培育基中NH4NO3的作用是為菌株的生長供應(yīng)氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參加合成______________________(答出2種即可)等生物大分子。(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個(gè)A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是________。(3)為了比較A、B降解石油的實(shí)力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如表所示(“＋”表示有透亮圈，“＋”越多表示透亮圈越大，“－”表示無透亮圈)，推想該同學(xué)的試驗(yàn)思路是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，依據(jù)上表所示試驗(yàn)結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是________，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6．[2024·全國乙卷]化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培育所利用的碳源關(guān)系親密。為此，某小組通過試驗(yàn)比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細(xì)胞干重(g/L)S產(chǎn)量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題。(1)通常在試驗(yàn)室培育微生物時(shí)，須要對所用的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有______________________(答出2點(diǎn)即可)。(2)由試驗(yàn)結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是________________；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是________________。菌株C的生長除須要碳源外，還須要________________(答出2點(diǎn)即可)等養(yǎng)分物質(zhì)。(3)由試驗(yàn)結(jié)果可知，碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長，其緣由是____________________。(4)若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)。請簡要寫出試驗(yàn)思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖廢液生產(chǎn)S可以實(shí)現(xiàn)廢物利用，其意義是____________________________(答出1點(diǎn)即可)。eq\a\vs4\al(題組二)科學(xué)探究類專項(xiàng)練7．[2024·廣西北海市模擬]某探討小組發(fā)覺類產(chǎn)堿假單胞菌對黃脊竹蝗有較強(qiáng)的感染力，并可引起其發(fā)病死亡，該小組成員以此綻開試驗(yàn)探究?；卮鹣铝袉栴}：(1)用來培育類產(chǎn)堿假單胞菌的培育基為牛肉膏蛋白胨培育基，在此培育基中，為微生物供應(yīng)碳源的物質(zhì)是________________________。培育基配制時(shí)，滅菌和調(diào)pH的先后依次為__________________。對培育基進(jìn)行滅菌所用的儀器是______________。(2)在培育類產(chǎn)堿假單胞菌的過程中，培育皿應(yīng)倒置培育，其緣由是________________________________________________________________________。(3)進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，若要頻繁運(yùn)用類產(chǎn)堿假單胞菌，可以采納________________________方法對其進(jìn)行保存，這種方法的缺點(diǎn)是________________________________。(4)探討發(fā)覺：黃脊竹蝗幼蟲在自然狀態(tài)下感染類產(chǎn)堿假單胞菌后，于24小時(shí)后起先死亡，72小時(shí)達(dá)到死亡高峰，染病后出現(xiàn)行動遲緩，伴有稍微痙攣的現(xiàn)象。為驗(yàn)證此菌是蝗蟲致死的緣由，該探討小組成員從病死蟲尸中提取并分別得到該菌，并用該菌__________________，視察到的現(xiàn)象是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．[2024·廣東卷]探討深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號”考察船對中國南?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海疆1146米深海冷泉旁邊沉積物樣品，分別、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步探討了其生物學(xué)特性。回答下列問題：(1)探討者先制備富集培育基，然后采納________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培育一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培育物，為了獲得純種培育物，除了稀釋涂布平板法，還可采納______________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________為碳源時(shí)生長狀況最好。(2)探討發(fā)覺，將采集的樣品置于各種培育基中培育，仍有很多微生物不能被分別篩選出來，推想其緣由可能是____________________________________。(答一點(diǎn)即可)(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特別，推想此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有__________。9．[2024·吉林長春市高三模擬]2024年6月1日起，江浙滬Starbucks全部門店將全面試用Foopak生物可降解飲品杯。該飲品杯經(jīng)填埋處理后，能被微生物經(jīng)分解作用完全降解，可替代傳統(tǒng)塑料及一般部分降解飲品杯，從而避開“白色污染”?；卮鹣铝袉栴}：(1)從填埋Foopak生物可降解飲品杯的土壤中分別Foopak分解菌時(shí)，應(yīng)先從土壤取樣，并接種在液體培育基上進(jìn)行選擇培育，目的是________________；再將選擇后的樣品進(jìn)行梯度稀釋，________________接種到固體培育基上，需進(jìn)行梯度稀釋的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在整個(gè)分別過程中無雜菌污染，培育基上出現(xiàn)多種菌落特征，最可能的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在測定培育液中Foopak分解菌的數(shù)量時(shí)，需至少做三個(gè)重復(fù)試驗(yàn)。做重復(fù)試驗(yàn)的目的是________________，做重復(fù)試驗(yàn)的方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。10．[2024·廣東高三模擬]蘋果醋是當(dāng)下流行的風(fēng)味飲品，是蘋果汁經(jīng)發(fā)酵后，再添加適量蘋果汁等原料而制成的飲品。蘋果醋中的乙酸有軟化血管、降低血壓，能有效預(yù)防高血壓和心腦血管疾病。下圖是蘋果醋飲品的工廠生產(chǎn)過程圖。回答下列有關(guān)問題：(1)得到果醋醪液須要經(jīng)過兩次發(fā)酵，發(fā)酵②須要的發(fā)酵條件是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(寫出2點(diǎn))。(2)蘋果醋含有較高濃度的乙酸，能夠引起____________________________，導(dǎo)致細(xì)菌死亡，使得大多數(shù)微生物不能生長繁殖，但市場保質(zhì)期內(nèi)的蘋果醋飲品有時(shí)會發(fā)生“變質(zhì)”問題。某同學(xué)分析出現(xiàn)“變質(zhì)”的緣由可能如下：①可能在灌裝或包裝過程中無菌操作不夠規(guī)范，引起了耐酸性細(xì)菌污染；②兩次無菌操作采納________________，雖然使得飲品風(fēng)味口感保持不變，但不能殺死耐熱性微生物；③蘋果濃縮汁中出現(xiàn)了食品污染常見的某種桿菌，在不利條件下形成芽孢或孢子，在條件相宜時(shí)其大量繁殖，引起變質(zhì)。11．[2024·黑龍江佳木斯市模擬]谷氨酸鈉是味精的主要成分，工業(yè)生產(chǎn)中常用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸。下表是生物愛好小組探究發(fā)酵條件對微生物數(shù)量和產(chǎn)物生產(chǎn)的影響。組別發(fā)酵條件谷氨酸棒狀桿菌繁殖速率單個(gè)菌體產(chǎn)谷氨酸量第一組通入無菌空氣C/N＝3∶1較慢較多其次組通入無菌空氣C/N＝4∶1較快較少請分析回答下列問題：(1)谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵的培育基中主要養(yǎng)分物質(zhì)有______________________________，該培育基是一種________培育基。(2)得到谷氨酸棒狀桿菌數(shù)目可采納的計(jì)數(shù)方法是______________，用該方法計(jì)數(shù)過程：取其次組的100倍的稀釋液滴加到計(jì)數(shù)板(由25×16＝400個(gè)小室組成，容納液體總體積為0.1mm3)上，經(jīng)檢測共有菌體42個(gè)，則1mL的其次組發(fā)酵液中有菌體________個(gè)。(3)由上述探究可知，要通過發(fā)酵得到大量谷氨酸，需首先不斷向發(fā)酵液中通入________，將碳氮比設(shè)為________培育一段時(shí)間，然后將發(fā)酵液中碳氮比改為________接著培育。12．[2024·遼寧高三模擬]大腸桿菌是一類引起人和幼畜腹瀉的重要病原菌，可通過食物和水源等途徑傳染。某生物愛好小組欲從某患病犢牛糞便中檢測大腸桿菌的數(shù)量，并分別培育及鑒定。請回答下列問題。(1)取10g簇新的犢牛糞便按圖示方法分別大腸桿菌，通過統(tǒng)計(jì)①平板上的菌落數(shù)，可推想出樣品中大約含有的活菌數(shù)，其原理是______________________________。若依據(jù)圖中①平板上的菌落數(shù)來計(jì)算，每克犢牛糞便中活菌數(shù)應(yīng)為________。(2)分別出的大腸桿菌可通過圖中兩種接種方法進(jìn)一步純化，A所示的方法應(yīng)如何使菌液在培育基上勻稱分布？________________________；B所示的接種方法中用到的接種用具應(yīng)如何滅菌？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)接種好的培育基放入恒溫箱中應(yīng)倒置培育，這樣做是為了________________。為檢測培育基的制備是否合格，應(yīng)當(dāng)怎么做______________________________。(4)愛好小組進(jìn)一步采納濾膜法測定犢牛飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，過濾器濾膜的孔徑需________(填“大于”或“小于”)大腸桿菌的直徑，先將1000mL飲用水進(jìn)行過濾，再將濾膜轉(zhuǎn)移到________培育基上，最終培育基置于相宜條件下培育，得到________(填顏色)的菌落，依據(jù)菌落數(shù)可推斷大腸桿菌的數(shù)量。(5)某位愛好小組的同學(xué)用未經(jīng)稀釋的菌液涂布平板，結(jié)果培育基上被菌鋪滿，他把沾有噬菌體的小紙片放在該培育基上接著培育，結(jié)果如圖，請推想出現(xiàn)透亮圈的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________?？键c(diǎn)35微生物的培育技術(shù)及應(yīng)用第一關(guān)小題自助餐自選狂刷1．D平板冷卻凝固后將平板倒置是為了防止皿蓋冷卻水落入培育基后造成污染，D正確；此操作不是利于大腸桿菌的生長，A錯(cuò)誤；空氣仍舊可以進(jìn)入到平板中，B錯(cuò)誤；倒置對于培育基冷卻沒有太大影響，C錯(cuò)誤。2．B分析表中成分可知，該培育基中沒有凝固劑，為液體培育基，該培育基的養(yǎng)分成分齊全，但存在伊紅、美藍(lán)等鑒別物質(zhì)，屬于鑒別培育基，A錯(cuò)誤；該培育基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是絕大多數(shù)生物最常利用的碳源，B正確；該培育基中存在的無機(jī)鹽和蛋白胨中的某些物質(zhì)可以看作是生長因子，C錯(cuò)誤；對培育基調(diào)整完pH后還要進(jìn)行滅菌處理等操作才能運(yùn)用，D錯(cuò)誤。3．D無菌操作包括消毒和滅菌。需進(jìn)行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等，需進(jìn)行滅菌的有器皿、培育基、添加劑（指示劑或染色劑）等。煮沸可以殺死微生物的養(yǎng)分細(xì)胞和一部分芽孢，屬于消毒；為防止空氣中雜菌的污染，接種時(shí)要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行；家庭制作葡萄酒時(shí)所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌；培育基常用高壓蒸汽滅菌。故④⑥操作錯(cuò)誤。4．D試驗(yàn)用過的帶菌培育基要經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，以免污染環(huán)境，A錯(cuò)誤；應(yīng)利用稀釋涂布平板法對細(xì)菌進(jìn)行分別、純化并計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；要使該試驗(yàn)所得結(jié)果牢靠，還應(yīng)當(dāng)同時(shí)在另一平板上接種無菌水作為比照進(jìn)行試驗(yàn)，C錯(cuò)誤；培育基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培育供應(yīng)了氮源和碳源，D正確。5．答案：（1）干熱滅菌（2）50防止皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染（3）抗生素X-gal（4）A（5）甘油管藏法解析：（1）玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器材可用干熱滅菌的方法進(jìn)行滅菌。（2）培育基滅菌后，須要冷卻到50℃左右時(shí)才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要將平板倒置，這樣做可防止皿蓋上的冷凝水落入培育基而造成污染。（3）為防止雜菌污染，培育基中要添加抗生素。β-半乳糖苷酶能夠作用于一種無色化合物X-gal，使其變成藍(lán)色物質(zhì)，藍(lán)白斑篩選能勝利，是因?yàn)榕嘤刑砑恿薠-gal。（4）由于用于藍(lán)白斑篩選的質(zhì)粒載體一般含有抗性基因和將宿主菌β-半乳糖苷酶缺失部分補(bǔ)全的序列，因此最終培育基中出現(xiàn)的白色的菌落是目的基因和載體結(jié)合的菌落，故選A。（5）若須要長期保存該菌種，可采納的方法是甘油管藏法。6．D不同細(xì)菌的菌落特征一般不同，因此可以依據(jù)菌落的特征進(jìn)行菌種的鑒定，A錯(cuò)誤；細(xì)菌對抗生素敏感，在培育基中加入青霉素可抑制細(xì)菌而促進(jìn)真菌生長，B錯(cuò)誤；破傷風(fēng)桿菌是嚴(yán)格厭氧型細(xì)菌，向液體培育基中通入氧氣能抑制破傷風(fēng)桿菌的生長，C錯(cuò)誤；醋酸桿菌屬于好氧型細(xì)菌，因此在培育醋酸桿菌時(shí)，向培育液中通入氧氣促進(jìn)其有氧呼吸，有利于菌體快速增殖，D正確。7．B有些微生物可以利用空氣中的無機(jī)碳源或無機(jī)氮源，故微生物培育基中并不都必需添加碳源或氮源，A正確；倒平板時(shí)，應(yīng)將培育皿皿蓋打開一條縫，若放到一邊，簡單造成雜菌污染，B錯(cuò)誤；接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌，C正確；試驗(yàn)結(jié)束后，帶菌的培育基必需經(jīng)滅菌處理后才能倒掉，以免污染環(huán)境或操作者，D正確。8．D硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)型生物，可利用NH3氧化獲得能量，將無機(jī)物轉(zhuǎn)化為有機(jī)物，故培育硝化細(xì)菌的培育基中的銨鹽可作為氮源和能源，A正確；尿素固體培育基中的K2HPO4能用于維持培育基的pH，保證微生物生長、繁殖所需的酸堿環(huán)境，B正確；培育光能自養(yǎng)型的藍(lán)細(xì)菌的培育基中不需供應(yīng)有機(jī)物，藍(lán)細(xì)菌可利用二氧化碳和水合成有機(jī)物，C正確；瓊脂的作用是凝固劑，不能作為碳源，D錯(cuò)誤。9．C培育基中不肯定都要添加水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等，比如培育能利用CO2的自養(yǎng)型微生物，培育基中可以不添加碳源，A錯(cuò)誤；培育基制備過程中須要調(diào)整pH然后滅菌，但要依據(jù)微生物的生長需求調(diào)整，B錯(cuò)誤；利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時(shí)，C/N為4∶1時(shí)更有利于菌體繁殖，當(dāng)碳氮質(zhì)量比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，C正確；須要將菌種接種到固體培育基時(shí)才要在培育基中添加瓊脂或其他的凝固劑，D錯(cuò)誤。10．D劃線接種不能用于菌落的計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；剛果紅相當(dāng)于指示劑，要用以纖維素為唯一碳源的選擇培育基，B錯(cuò)誤；培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間應(yīng)從達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值起先計(jì)時(shí)，C錯(cuò)誤；濾紙的主要成分是纖維素，可以通過此操作獲得能夠分解纖維素的微生物，D正確。11．C用稀釋涂布平板法接種，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，并可統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，推想出樣品中大約含有多少活菌，A正確；利用稀釋涂布平板法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)選擇相同稀釋度下的培育基，取平均值以削減試驗(yàn)誤差，B正確；平板劃線時(shí)接種環(huán)只蘸取一次菌液，C錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法接種菌液時(shí)須要用到的工具是涂布器，平板劃線法的接種工具是接種環(huán)，D正確。12．C抑菌圈的直徑越大，抗生素對細(xì)菌的作用越強(qiáng)，即抗生素的抑菌實(shí)力越強(qiáng)，A正確；由圖可知，連續(xù)培育幾代后，抑菌圈的直徑漸漸變小，抗生素對細(xì)菌起到了選擇作用，B正確；由圖可知，相同濃度的兩種抗生素，慶大霉素的抑菌圈直徑大，則抑菌效果好于阿米卡星；不同濃度下兩者的效果無法得知，所以不能得出該結(jié)論，C錯(cuò)誤；變異先于環(huán)境變更之前，所以運(yùn)用抗生素是進(jìn)行篩選；因此，為了避開產(chǎn)生耐藥菌，服用抗生素時(shí)要足量、足藥程，剛好停用對細(xì)菌不敏感的藥，D正確。13．D獲得純凈培育物的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，即防止外來雜菌的入侵，A正確；測定微生物數(shù)量的常用方法有活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法，故稀釋涂布平板法和顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法，B正確；試驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分別和純化最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；純培育物是由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體，特定種類微生物的群體不肯定是由單一個(gè)體繁殖而來，D錯(cuò)誤。14．B圖1所示操作是倒平板，須要在酒精燈旁操作，以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落可能是該病原微生物發(fā)生了基因突變，產(chǎn)生了耐藥性，從而存活下來，B正確；進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需將平板上布滿測試菌，利用的接種方法是稀釋涂布平板法，需運(yùn)用的接種工具是涂布器，C錯(cuò)誤；接種后的平板在培育時(shí)須要倒置培育，即圖2中①所示，圖2中②是培育皿正置，倒置培育既能防止培育基中水分過快蒸發(fā)，又能防止冷凝形成的水珠倒流污染培育基，D錯(cuò)誤。15．A由圖分析可知，圖中對菌落進(jìn)行了計(jì)數(shù)，采納的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法，A正確；固體培育基沒有做任何處理，所以對菜品中的細(xì)菌沒有選擇性，B錯(cuò)誤；在肯定培育條件下，不同的微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，依據(jù)菌落的性狀、大小、顏色等特征，可以初步區(qū)分出不同種微生物，但不能精確推斷，C錯(cuò)誤；不食用的菜品，正常狀況下也有微生物存在，D錯(cuò)誤。16．D嗜極微生物適應(yīng)極端環(huán)境的特性使它們有在空間暴露環(huán)境或地外星球環(huán)境中存活的可能，因此航天器上存在適應(yīng)養(yǎng)分物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物，A正確；細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕，會腐蝕艙內(nèi)材料以及設(shè)備線路、元器件，B正確；對航天器及干凈的組裝車間進(jìn)行環(huán)境微生物檢測，須要在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品，C正確；航天器及干凈的組裝車間環(huán)境微生物很少，分別培育微生物，視察菌落特征，不須要采納平板劃線法，D錯(cuò)誤。17．D農(nóng)田或公園土壤中含有較多的含脲酶的微生物，A正確；為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，配制的培育基應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培育基上能生長，B正確；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，C正確；在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培育基的pH上升，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑，能對分別的菌種做進(jìn)一步鑒定，D錯(cuò)誤。18．B依據(jù)題干信息“甲菌菌落四周呈現(xiàn)深藍(lán)色”，說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此甲菌屬于解脂菌，A正確；乙菌落四周沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，但乙菌落也可以在培育基上生存，說明該培育基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比，更加直觀，C正確；可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的實(shí)力，視察指標(biāo)以菌落四周深藍(lán)色圈的大小為依據(jù)，D正確。19．C為避開雜菌污染干擾，需對配制的培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分別，為避開雜菌污染，故須要運(yùn)用無菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；棉拭子上的微生物須要用平板劃線法在培育基上進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；依據(jù)微生物在固體平板培育基表面形成的菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別，D正確。20．B由題圖可知，乙菌的運(yùn)動實(shí)力比甲菌強(qiáng)，A正確；試驗(yàn)所用培育基應(yīng)為固體培育基，B錯(cuò)誤；硫化氫與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀，該試驗(yàn)只能對甲、乙菌能否產(chǎn)生硫化氫進(jìn)行定性分析，并不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量，C正確；穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染，D正確。21．C采集植物園中土壤樣本的原則之一是要隨機(jī)采樣，A正確；牛肉膏蛋白胨固體培育基中含有細(xì)菌生長所需的碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等，可用于細(xì)菌的培育，B正確；土壤溶液稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，才能將聚集的細(xì)菌分散開，有助于在培育基表面形成單菌落，C錯(cuò)誤；不同種類細(xì)菌的理化特性一般不同，鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除依據(jù)菌落特征進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定外，還可以借助生物化學(xué)的方法進(jìn)行鑒定，D正確。其次關(guān)大題自助餐自選精做1．答案：（1）番茄灰霉病菌枯草芽孢桿菌抑菌圈（2）搖床振蕩稀釋涂布平板法用稀釋涂布平板法在培育基上看到的每一個(gè)菌落都來自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法會將死亡的枯草芽孢桿菌也計(jì)算在內(nèi)（3）利用待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的大小、形態(tài)的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別SDS帶有大量的負(fù)電荷，且能使蛋白質(zhì)變性成為肽鏈，使蛋白質(zhì)的遷移速率只與蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量有關(guān)，而與所帶電荷性質(zhì)無關(guān)（4）菌液解析：（1）分析題意，要檢測枯草芽孢桿菌對番茄灰霉病菌的抑制作用，先把適量的番茄灰霉病菌菌液涂布于固體培育基上，將無菌濾紙片在枯草芽孢桿菌菌液中浸泡后覆蓋于固體培育基中心，若對番茄灰霉病菌有抑制作用，被覆蓋的位置的番茄灰霉病菌就會被殺死，培育皿倒置培育后會出現(xiàn)抑菌圈，測量抑菌圈大小以判定抑菌效果強(qiáng)弱。（2）枯草芽孢桿菌為好氧微生物，采納搖床振蕩培育可增大培育液的溶氧量，有利于枯草芽孢桿菌的生長繁殖。培育過程中要抽樣檢測活菌數(shù)量，應(yīng)當(dāng)采納稀釋涂布平板法，用稀釋涂布平板法在培育基上看到的每一個(gè)菌落都來自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法會將死亡的枯草芽孢桿菌也計(jì)算在內(nèi)。（3）電泳分別蛋白質(zhì)混合樣品的原理是：利用待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的大小、形態(tài)的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。SDS帶有大量的負(fù)電荷，且能使蛋白質(zhì)變性成為肽鏈，使蛋白質(zhì)的遷移速率只與蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量有關(guān)，而與所帶電荷性質(zhì)無關(guān)。（4）長期保藏枯草芽孢桿菌，應(yīng)當(dāng)將培育的菌液轉(zhuǎn)移到滅菌好的甘油瓶中，與甘油充分混合，放在－20℃的冷凍箱中保存。2．答案：（一）（1）涂布分別單菌落篩選解析：（1）分別純化細(xì)菌最常用的方法是劃線分別法或涂布分別法，兩種方法均能在固體培育基上形成單菌落。為了獲得能高效降解富養(yǎng)分化污水污染物的菌株，還需對分別的菌株進(jìn)行誘變處理，再經(jīng)篩選和鑒定。3．答案：（1）唯一碳源血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)誘變育種、基因工程育種（2）鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制（3）氧氣（O2或溶解氧）（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等解析：（1）依據(jù)題意分析，該試驗(yàn)的目的是提高菌株H對蔗糖的耐受實(shí)力和利用效率，結(jié)合微生物的代謝需求，其液體培育基應(yīng)當(dāng)以蔗糖作為唯一碳源。并不斷提高其濃度，經(jīng)多次傳代培育（指培育一段時(shí)間后，將部分培育物轉(zhuǎn)入新配的培育基中接著培育）以獲得目標(biāo)菌株。培育過程中定期取樣并用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，評估菌株增殖狀況。此外，選育優(yōu)良菌株的方法還有誘變育種、基因工程育種等。（2）已知菌株H具有嗜鹽、酸堿耐受實(shí)力強(qiáng)等特性，因此當(dāng)培育基鹽濃度為60g/L、pH為10時(shí)，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上，而鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制，故該系統(tǒng)不須要滅菌。（3）分析題意，擴(kuò)大培育時(shí)，養(yǎng)分物濃度、溫度、pH等條件相宜，而發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期，并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì)，說明發(fā)酵條件中氧氣不足，使菌種進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇，即氧氣（O2或溶解氧）是限制高密度培育的重要因素。（4）依據(jù)酶的專一性可知，菌株H之所以能通過分解主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂等的餐廚垃圾來生產(chǎn)PHA，說明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。4．答案：（1）冷卻玻璃刮刀較大透亮圈斜面（2）乙醇耐酒精度高、耐酸高解析：（一）（1）高壓蒸汽滅菌剛結(jié)束時(shí)，培育基溫度較高，要待培育基冷卻后再加入3%體積的無水乙醇。涂布分別法可用于單菌落分別，運(yùn)用玻璃刮刀將待分別的菌液涂布到分別培育基的整個(gè)平面上。醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的醋酸會使培育基中的CaCO3分解，形成透亮圈。菌落小，透亮圈大，代表著高產(chǎn)醋酸菌。菌種的貯存方法：在無菌操作下將單菌落用接種環(huán)取出，再用劃線法接種在斜面培育基上，培育24h后，置于4℃冰箱中保存。（2）醋酸發(fā)酵結(jié)束的標(biāo)記：產(chǎn)物不再增加（醋酸濃度不再上升）或原料消耗到最低值（乙醇含量達(dá)到最低）。優(yōu)質(zhì)菌種不僅要求產(chǎn)酸高，還要耐高酸，同時(shí)還要耐酒精（原料）等特點(diǎn)。5．答案：（1）石油DNA、RNA、蛋白質(zhì)（2）N0·2n（3）在無菌條件下，將等量等濃度的A菌液和B菌液分別接種到平板Ⅰ的甲和乙兩孔處，平板Ⅱ也進(jìn)行同樣的操作，在相同且相宜條件下培育一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透亮圈大小并作記錄，依據(jù)透亮圈大降解實(shí)力強(qiáng)，透亮圈小降解實(shí)力弱，進(jìn)而比較A、B降解石油的實(shí)力（4）AA菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株，并且在沒有添加氮源的培育基中也能生長解析：（1）培育基的成分有碳源、氮源、無機(jī)鹽和水等，從組成培育基的物質(zhì)所含化學(xué)元素可知，作為碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白質(zhì)都含有N元素，故氮源在菌體內(nèi)可以參加合成這些物質(zhì)。（2）由題意“資源和空間不受限制”可知，細(xì)菌的增殖呈“J”形曲線增長，細(xì)菌每繁殖一代就是上一代的2倍，依據(jù)公式Nt＝N0·λt，λ＝2，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是N0·2n。（3）分析表格數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)的結(jié)果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍舊能降解石油，而B菌株不能降解，依據(jù)試驗(yàn)的單一變量和比照原則，推想該同學(xué)的思路是：在無菌條件下，將等量等濃度的A菌液和B菌液分別接種到平板Ⅰ的甲和乙兩孔處，平板Ⅱ也進(jìn)行同樣的操作，在相同且相宜條件下培育一段時(shí)間，比較兩個(gè)平板的兩孔處的透亮圈大小并作記錄，依據(jù)透亮圈大降解實(shí)力強(qiáng)，透亮圈小降解實(shí)力弱，進(jìn)而比較A、B降解石油的實(shí)力。（4）由表格數(shù)據(jù)可知，在平板Ⅱ（無氮源的培育基）上，A菌株仍舊能降解石油，而B菌株不能降解，所以要治理貧氮且被石油污染的土壤，應(yīng)當(dāng)選用A菌株，因?yàn)锳菌株降解石油的實(shí)力高于B菌株，并且在沒有添加氮源的培育基中也能生長。6．答案：（1）高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌（2）葡萄糖制糖廢液水、氮源、無機(jī)鹽（3）菌株C缺少淀粉酶（4）用一系列濃度梯度的制糖廢液分別培育菌株C，測定不同濃度制糖廢液中的S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對應(yīng)的制糖廢液濃度即為最適碳源濃度（5）削減污染、節(jié)約原料、降低生產(chǎn)成本解析：（1）試驗(yàn)室通常采納高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法對玻璃器皿進(jìn)行滅菌處理。（2）表格中，可用細(xì)胞干重來表示細(xì)胞生長狀況，當(dāng)碳源為葡萄糖時(shí)，細(xì)胞干重最大，最適合菌株C生長；當(dāng)碳源為制糖廢液時(shí)，菌株C生產(chǎn)S的產(chǎn)量最高。一般培育基都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)。（3）菌株C缺乏淀粉酶，不能將淀粉水解為菌株可利用的葡萄糖，故碳源為淀粉時(shí)菌株C不能生長。（4）要測定生產(chǎn)S的最適制糖廢液濃度，可配制一系列濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培育基，分別培育菌株C，其他條件保持相同且相宜。一段時(shí)間后，測定并比較不同濃度制糖廢液培育基中的S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時(shí)對應(yīng)的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。（5）利用制糖廢液生產(chǎn)S不僅能節(jié)約原料、降低生產(chǎn)成本，還削減了環(huán)境污染。7．答案：（1）牛肉膏、蛋白胨先調(diào)pH，后滅菌高壓蒸汽滅菌鍋（2）防止皿蓋上凝聚的水珠滴落到培育基上造成污染（3）臨時(shí)保藏保存的時(shí)間不長，菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異（4）感染生理狀況良好的黃脊竹蝗幼蟲感染后的幼蟲出現(xiàn)行動遲緩，伴有稍微痙攣現(xiàn)象解析：（1）牛肉膏蛋白胨培育基，為微生物供應(yīng)碳源的是牛肉膏和蛋白胨；配制培育基時(shí)，應(yīng)先調(diào)整pH，再滅菌，防止雜菌污染；滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法，所以須要用到高壓蒸汽滅菌鍋。（2）為了防止皿蓋上凝聚的水珠滴落到培育基上造成污染，所以培育皿應(yīng)倒置培育。（3）頻繁運(yùn)用類產(chǎn)堿假單胞菌，可以采納臨時(shí)保藏的方法保存；該方法保存的時(shí)間不長，菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異。（4）為證明類產(chǎn)堿假單胞菌是蝗蟲致死的緣由，須要從病死蟲尸中提取并分別得到該菌，并用該菌感染生理狀況良好的黃脊竹蝗幼蟲，假如感染后的幼蟲出現(xiàn)行動遲緩，伴有稍微痙攣現(xiàn)象，即可證明。8．答案：（1）高壓蒸汽滅菌平板劃線纖維素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存（或須要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）（3）擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機(jī)物，歸還到無機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順當(dāng)進(jìn)行（4）耐低溫解析：（1）培育基通常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。可以采納稀釋涂布平板法或平板劃線法，將單個(gè)微生物分散在固體培育基上，經(jīng)過培育