SNT 1961.5-2013 出口食品過敏原成分檢測 第5部分：實時熒光PCR方法檢測開心果成分_第1頁
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出口食品過敏原成分檢測第5部分：實時熒光PCR方法2013-03-01發(fā)布2013-09-16實施 第9部分：實時熒光PCR方法檢測杏仁成分 第11部分：實時熒光PCR方法檢測麩質(zhì)成分： 第12部分：實時熒光PCR方法檢測芝麻成分——第14部分：實時熒光PCR方法檢測魚成分；本部分為SN/T1961的第5部分。1第5部分：實時熒光PCR方法SN/T1961的本部分規(guī)定了食品中過敏原開心果成分的實時熒光PC本部分所規(guī)定方法的最低檢出限(LOD)為0.01%(質(zhì)量分數(shù))。GB/T27403實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學檢測2劑均用無DNA酶污染的容器分裝。序列(5'-3')目的基因內(nèi)參照5’端引物內(nèi)參照3’端引物內(nèi)參照探針AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCFAM-CCGTTTCTCAGGCTCCCTCTCCGGAA真核生物18SrRNA基因FAM-CAGAAGCATACGACCGACACCCGAC開心果18SrRNA與5.8SrRNA基因間區(qū)用10%鹽酸調(diào)pH至8.0,121℃,高壓滅菌20min,備用。5.4蛋白酶K:20mg/μL。5.1070%乙醇。6.4冰箱：2℃~8℃,-20℃。6.7pH計。3C=A260×N×50N——核酸稀釋倍數(shù)。反應(yīng)體系總體積為25μL,其中含：樣品DNA(10μg/mL～100μg/mL)2μL,開心果引物45(資料性附錄)CGAAACCTGCCGAGCAGAACGACCCGCGAACCTGTCATCACATTCGTGCCCGTGTGCCTCCACCCGTG

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