2025屆山東棗莊八中北校區(qū)高考沖刺押題（最后一卷）生物試卷含解析

2025屆山東棗莊八中北校區(qū)高考沖刺押題（最后一卷）生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．有關(guān)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能和檢測的敘述，錯誤的是（）A．蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變必將導(dǎo)致生物活性的喪失B．足夠多的3種氨基酸最多可以合成27種鏈狀三肽C．加熱變性后的蛋白質(zhì)會與雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色D．氨基酸序列相同的多肽可折疊成不同的空間結(jié)構(gòu)2．離子的跨膜運輸是神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與傳遞的基礎(chǔ)?興奮在突觸部位的傳遞過程和離子運輸情況如圖所示?下列相關(guān)敘述正確的是（）A．圖中的神經(jīng)遞質(zhì)可能引起突觸后神經(jīng)元的興奮性下降B．圖中各種物質(zhì)的運輸都不需要消耗能量C．Ca2+通道打開可能與興奮傳到突觸小體引起電位變化有關(guān)D．突觸間隙中Na+濃度增大時，興奮引起后膜電位變化幅度減小3．2019年世界艾滋病日的宣傳主題是“社區(qū)動員同防艾，健康中國我行動”。意在強調(diào)個人健康責(zé)任意識，為遏制艾滋病流行和健康中國建設(shè)做出貢獻。艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的免疫性疾病。下列與艾滋病有關(guān)的敘述，錯誤的是（）A．人類免疫缺陷病毒（HIV）有高度變異性B．HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感C．HIV破壞免疫系統(tǒng)，使機體無體液免疫，不能通過檢測抗體來診斷HIV感染D．共用注射器吸毒和性濫交是傳播艾滋病的主要危險行為，因此要拒絕毒品、潔身自愛4．下列有關(guān)穩(wěn)態(tài)的敘述正確的是（）A．體溫、尿液濃度相對穩(wěn)定均屬于內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)B．內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)遭到破壞，一定引起細胞代謝紊亂C．穩(wěn)態(tài)是指內(nèi)環(huán)境中化學(xué)物質(zhì)含量沒有增加或減少D．飲水少，抗利尿激素釋放增加屬于內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)失調(diào)5．利用無色洋蔥內(nèi)表皮細胞，先后加入適量紅墨水的蔗糖溶液和清水，開展“觀察質(zhì)壁分離及質(zhì)壁分離復(fù)原”活動。下列關(guān)于該過程的敘述，正確的是（）A．本實驗中觀察了兩次，通過前后兩次觀察，采用了自身前后對照B．細胞中液泡顏色變化：淺→深→淺C．細胞吸水能力變化：大→小→大D．視野中紅色區(qū)域變化：小→大→小6．如圖描述了一種鹿的種群生長速率的變化，下列說法錯誤的是（）A．1910-1925年間。鹿種群數(shù)量上升的原因可能是食物資源非常充裕B．1925-1940年間，鹿種群數(shù)量下降的原因主要是鹿種群數(shù)量過多，導(dǎo)致種內(nèi)斗爭C．1925年時，鹿種群內(nèi)種內(nèi)斗爭最激烈D．1930年時，大約有12000只鹿在此環(huán)境下生存而不會因饑餓致死二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）ClB品系果蠅具有一條正常的X染色體（X+）和一條含CB區(qū)段的X染色體（），其中C表示染色體上的倒位區(qū)，可抑制X染色體間交叉交換；l基因?qū)е滦坌怨壟咛ブ滤?；B為顯性棒眼基因。ClB品系可用于隱性突變和致死突變的檢測?；卮鹣铝袉栴}：（1）ClB品系果蠅的染色體出現(xiàn)倒位區(qū)，表明該品系果蠅發(fā)生了_________變異，該變異__________（填“能”或“不能”）用光學(xué)顯微鏡進行觀察。（2）自然狀態(tài)下一般不存在基因型為的果蠅，原因是________________________．（3）下圖是研究ⅹ射線對正常眼果蠅Ⅹ染色體誘變示意圖。F1代中棒眼個體為_______________(填“雄性”或“雌性”），所占比例為_____________。為了鑒定X染色體上是否發(fā)生了隱性突變，可用正常眼雄蠅和F1中的ClB雌果蠅雜交，若雜交后代中________________，則說明X染色體上發(fā)生了隱性突變。8．（10分）實時熒光定量PCR簡稱qPCR，靈敏度高特異性好，是目前檢測微小殘留病變的常用方法。將標(biāo)有熒光素的Taqman探針與待測樣本DNA混合后，在變性、復(fù)性、延伸的熱循環(huán)中，與待測樣本DNA配對結(jié)合的Taqman探針被Taq酶切斷，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光（如下圖所示），隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值（該值與待測樣本中目的基因的個數(shù)呈負相關(guān)）。（1）做qPCR之前，需要先根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成__________。除此之外，qPCR的反應(yīng)體系還需要加入___________、_________和___________。（2）在反應(yīng)過程中，___________為新鏈的合成提供能量。（3）醫(yī)務(wù)人員對三位慢性粒細胞白血病患者（由B基因過量表達導(dǎo)致）進行治療后，想檢測治療效果，利用上述技術(shù)寫出實驗思路和簡要結(jié)果分析。實驗思路：__________________簡要結(jié)果分析：_____________________________9．（10分）如圖是優(yōu)良種牛的繁殖路線圖，據(jù)圖回答下列問題：（1）牛5、牛6、牛7培育中均用到的生物工程技術(shù)有_____________________。圖中需要進行同期發(fā)情處理的牛是_________。（2）可用_____________激素促進牛2盡可能多地排卵。保證A過程只能由1個精子進入卵細胞的生理反應(yīng)是_________________。從牛2體內(nèi)獲得的卵子需要培養(yǎng)到__________才能和獲能的精子結(jié)合完成受精。（3）C過程的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加_____________________等營養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。（4）E過程采用的方法是______，牛7的新性狀是_______________。10．（10分）下圖所示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。據(jù)圖請回答下列問題：（1）基因工程的基本原理是____。要獲得圖中的重組質(zhì)粒過程用到的3種工具的本質(zhì)是____（填“都是蛋白質(zhì)”或“蛋白質(zhì)或核酸”或“都是核酸”）。（2）圖中外源基因的黏性末端的形成與___酶的作用有關(guān)，基因工程中所用的目的基因可以是____，也可以從____中獲得。（3）為使外源基因在此植物細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的外源基因片段正確插入表達載體的____之間。（4）圖中表示基因工程最核心步驟的是____（寫數(shù)字）；在基因表達載體中，標(biāo)記基因的作用是_____。11．（15分）某生態(tài)農(nóng)場遵循“綠水青山就是金山銀山”的發(fā)展理念，推行生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展模式，如圖所示。請回答下列問題：（1）流經(jīng)該生態(tài)農(nóng)場的總能量指的是_____________________________。從能量流動的角度分析，構(gòu)建生態(tài)農(nóng)場的實踐意義是_____________________。（2）生態(tài)農(nóng)田中的蝗蟲、螳螂、青蛙之間相互傳遞著大量信息，這體現(xiàn)了信息傳遞具有________的作用。（3）除沼渣和糞尿等外，管理者還需向生態(tài)農(nóng)田施用一定量的化肥，才能使其正常運轉(zhuǎn)和長期發(fā)展，其原因是____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

1.蛋白質(zhì)具有多樣性的原因是：氨基酸的種類、數(shù)目和排列順序不同，多肽鏈的條數(shù)不同，蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)不同。2.高溫、過酸或者過堿會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性失活，但是變性后的蛋白質(zhì)仍然具有肽鍵，肽鍵遇到雙縮脲試劑出現(xiàn)紫色反應(yīng)。【詳解】A、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變未必導(dǎo)致生物活性的喪失，如酶在催化過程中空間結(jié)構(gòu)會發(fā)生改變，A錯誤；B、足夠多的3種氨基酸最多可以合成3×3×3＝27種鏈狀三肽，B正確；C、變性后的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)改變，但是肽鍵沒有斷裂，會與雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色，C正確；D、氨基酸序列相同的多肽鏈可折疊成不同的空間結(jié)構(gòu)，具有不同的功能，D正確。故選A。2、C【解析】

突觸小體中有突觸小泡，突觸小泡中有神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放到突觸后膜，使后膜產(chǎn)生興奮（或抑制）所以是單向傳遞；（突觸前膜→突觸后膜，軸突→樹突或胞體）。當(dāng)興奮傳遞至突觸小體，引起Ca2+通道開放，Ca2+促進突觸小體釋放遞質(zhì)，遞質(zhì)作用于突觸后膜上的受體，引起Na+內(nèi)流，進而引起突觸后膜發(fā)生興奮?！驹斀狻緼、神經(jīng)遞質(zhì)和受體結(jié)合后，引起Na+內(nèi)流，所以突觸后神經(jīng)元的興奮性增加，A錯誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)的運輸方式是胞吐作用，需要消耗能量，B錯誤；C、從圖中看出當(dāng)興奮傳遞至突觸小體后，引起Ca2+通道打開，C正確；D、突觸間隙中Na+濃度增大，當(dāng)突觸后膜興奮時，內(nèi)流的Na+增多，引起動作電位的值變大，D錯誤。故選C?！军c睛】本題關(guān)鍵是分析出圖中興奮在突觸間興奮傳遞的過程，結(jié)合教材知識進行解答。3、C【解析】

關(guān)于“艾滋病”，考生可以從以下幾方面把握：（1）艾滋病的中文名稱是獲得性免疫缺陷綜合征（AlDS），其病原體是人類免疫缺陷病毒（HIV）。（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒進入人體后，與人體的T淋巴細胞結(jié)合，破壞T淋巴細胞，使免疫調(diào)節(jié)受到抑制，使人的免疫系統(tǒng)癱瘓，最后使人無法抵抗其他細菌、病毒的入侵，讓人死亡。（3）艾滋病的傳播途徑包括：血液傳播、性傳播、母嬰傳播?！驹斀狻緼、艾滋病病毒是RNA病毒，遺傳物質(zhì)是RNA，有高度變異性，A正確；B、HIV破壞免疫系統(tǒng)，防衛(wèi)功能減弱，HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感，B正確；C、艾滋病病毒主要攻擊T淋巴細胞，可以保留部分體液免疫，C錯誤；D、艾滋病主要通過性接觸、血液和母嬰三種途徑傳播，D正確。故選C。4、B【解析】

內(nèi)環(huán)境又叫細胞外液，由血漿、組織液、淋巴組成，凡是可以存在于血漿、組織液或淋巴中的物質(zhì)都可以看做內(nèi)環(huán)境的組成成分，只存在于細胞內(nèi)的物質(zhì)不是內(nèi)環(huán)境的組成成分?！驹斀狻緼、尿液不屬于內(nèi)環(huán)境的成分，故其穩(wěn)定不屬于內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，A錯誤；B、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)遭到破壞，其組成成分和理化性質(zhì)不能維持平衡，則必將引起細胞代謝紊亂，B正確；C、穩(wěn)態(tài)是指內(nèi)環(huán)境中化學(xué)物質(zhì)含量保持相對穩(wěn)定，而非絕對不變，C錯誤；D、飲水少，抗利尿激素釋放增加屬于水鹽平衡的調(diào)節(jié)，是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)實現(xiàn)的調(diào)節(jié)機制，D錯誤。故選B?！军c睛】內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指正常機體通過調(diào)節(jié)作用，使各個器官、系統(tǒng)協(xié)調(diào)活動共同維持內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定的狀態(tài)，內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)機制是神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，外界環(huán)境的變化和體內(nèi)細胞代謝活動均可影響內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，當(dāng)外界環(huán)境變化過于劇烈或人體自身調(diào)節(jié)出現(xiàn)障礙時內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)會遭到破壞。5、D【解析】

（1）將發(fā)生質(zhì)壁分離的植物細胞置于低濃度的溶液或蒸餾水中，植物細胞會發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，但如果所用溶液為葡萄糖、KNO3、NaCl、尿素、乙二醇等，發(fā)生質(zhì)壁分離后因細胞主動或被動吸收溶質(zhì)而使細胞液濃度增大，植物細胞會吸水引起質(zhì)壁分離后的自動復(fù)原。

（2）質(zhì)壁分離過程中，外界溶液濃度大于細胞液濃度，質(zhì)壁分離程度越大，植物細胞吸水能力越強；質(zhì)壁分離復(fù)原過程中，外界溶液濃度小于細胞液濃度。

（3）質(zhì)壁分離與復(fù)原過程中水分子的移動是雙向的，總結(jié)果是單向的。

（4）本實驗用顯微鏡觀察了三次，第一次與第二次形成對照，第三次與第二次形成對照，該對照方法為自身對照?！驹斀狻緼、本實驗用顯微鏡觀察了三次，第一次與第二次形成對照，第三次與第二次形成對照，該對照方法為自身對照，A錯誤；B、由于用的是無色洋蔥內(nèi)表皮，因此液泡無顏色，B錯誤；

C、細胞失水過程中，吸水能力增強，吸水過程中，吸水能力減弱，即細胞吸水能力變化：小→大→小，C錯誤；

D、細胞失水過程中，細胞縮小，紅色區(qū)域由小變大，吸水過程中，細胞漲大，紅色區(qū)域由大變小，視野中紅色區(qū)域變化：小→大→小，D正確。

故選D。6、B【解析】

分析圖形：在1905～1925年期間，環(huán)境的容納量是25000；在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導(dǎo)致資源被過度破壞，導(dǎo)致鹿群的食物減少，資源被破壞，所以在1925～1930期間，環(huán)境容納量持續(xù)下降；所以在1930～1940年期間，環(huán)境容納量大約是12000?！驹斀狻緼、1910-1925年間，鹿種群數(shù)量上升的原因可能是食物資源非常充裕，A正確；B、1925-1940年間鹿種群環(huán)境容納量下降，種內(nèi)斗爭是內(nèi)源性因素，鹿種群數(shù)量下降的主要原因是：在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導(dǎo)致資源被過度破壞，導(dǎo)致鹿群的食物減少，資源被破壞，所以在1925～1930期間，環(huán)境容納量持續(xù)下降，B錯誤；C、1925年時鹿種群數(shù)量最大，所以種內(nèi)斗爭最激烈，C正確；D、在1905-1925年間，環(huán)境的容納量大約是25000只；在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導(dǎo)致資源被過度破壞，鹿群的食物減少，所以在1925-1930年間，環(huán)境容納量持續(xù)下降，由圖可知1930年，環(huán)境容納量大約是12000只，D正確。故選B?！军c睛】本題主要考查種群數(shù)量變化等知識，意在考查學(xué)生的理解與表達能力、獲取與處理信息的能力。二、綜合題：本大題共4小題7、染色體（結(jié)構(gòu)）能含有l(wèi)基因的雄果蠅胚胎致死，不可能產(chǎn)生的配子，所以自然狀態(tài)下一般不存在基因型為的雌性個體雌性1/3雄性個體為新（突變）性狀【解析】

閱讀題干和題圖可知，本題涉及的知識有染色體變異、基因的自由組合定律和伴性遺傳，明確知識點，梳理相關(guān)的基礎(chǔ)知識，分析題圖，結(jié)合問題的具體提示綜合作答．【詳解】（1）染色體片段的倒位屬于染色體結(jié)構(gòu)的變異，染色體的變異在光學(xué)顯微鏡下能觀察到。（2）由題干信息“l(fā)基因?qū)е滦坌怨壟咛ブ滤馈?，因此不可能產(chǎn)生的雄配子，所以自然狀態(tài)下一般不存在基因型為的雌性個體。（3）由示意圖可知，雌果蠅提供的XCIB配子與Y染色體結(jié)合，由于含有l(wèi)基因，會導(dǎo)致雄果蠅胚胎致死，因此存在的棒眼個體一定為雌性，其所占比例為1/3。F1中的ClB雌果蠅的基因型為XCIBX？，其與正常眼的雄果蠅X+Y雜交，若X染色體上發(fā)生了隱性突變，則X？Y出現(xiàn)了一種新性狀，即雄性個體出現(xiàn)新性狀。【點睛】本題考查伴性遺傳的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖能力和判斷能力，運用所學(xué)知識綜合分析問題的能力。8、引物和Taqman探針待測樣本（模板DNA）dNTP熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）dNTP三位患者分別編號甲、乙、丙，分別抽取適量血樣提取RNA，反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，根據(jù)B基因的序列設(shè)計引物和探針，進行PCR擴增，檢測熒光信號強度三位患者檢測的Ct值越小，說明治療效果越好，反之，治療效果越差【解析】

PCR技術(shù)：1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【詳解】（1）PCR需要根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成引物，同時qPCR還需要Taqman探針與待測樣本DNA混合，所以還需要合成Taqman探針；在反應(yīng)體系中還需要添加待測樣本（模板DNA）、dNTP、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）。（2）在反應(yīng)過程中，dNTP為新鏈的合成提供能量。（3）根據(jù)題干信息“將標(biāo)有熒光素的Taqman探針與待測樣本DNA混合后，在變性、復(fù)性、延伸的熱循環(huán)中，與待測樣本DNA配對結(jié)合的Taqman探針被Taq酶切斷，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值（該值與待測樣本中目的基因的個數(shù)呈負相關(guān)）”；所以設(shè)計實驗思路：三位患者分別編號甲、乙、丙，分別抽取適量血樣提取RNA，反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，根據(jù)B基因的序列設(shè)計引物和探針，進行PCR擴增，檢測熒光信號強度；結(jié)果：Ct值越小，說明治療效果越好，反之，治療效果越差?！军c睛】本題需要考生分析題干中給出的材料，理解檢測的基本原理，結(jié)合PCR技術(shù)進行分析解答。9、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)牛2和牛4促性腺激素透明帶反應(yīng)、卵細胞膜反應(yīng)成熟氨基酸、維生素、核苷酸、激素顯微注射法產(chǎn)生出人乳鐵蛋白【解析】

由圖可知，A為體外受精技術(shù)、B為細胞核移植技術(shù)、C為早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、D為胚胎移植技術(shù)、E為采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細胞?！驹斀狻浚?）培育克隆牛5用到細胞核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)，培育試管牛6用到體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)，培育轉(zhuǎn)基因牛7用到基因工程技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)，因此三者培育中均用到的生物工程技術(shù)有早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)。同期發(fā)情使供體、受體母牛的生理狀態(tài)相同，為被移植的胚胎提供了相同的生理環(huán)境，需要進行同期發(fā)情處理的牛是2和4。（2）通常用促性腺激素處理供體母牛2，使其超數(shù)排卵。保證體外受精過程只能由1個精子進入卵細胞的生理反應(yīng)依次是透明帶反應(yīng)、卵細胞膜反應(yīng)。采集的卵細胞需要培養(yǎng)成熟后才可與獲能的精子受精。（3）早期胚胎培養(yǎng)液成分：無機鹽、有機鹽類、氨基酸、維生素、核苷酸、激素、血清等。（4）將目的基因（人乳鐵蛋白基因）導(dǎo)入受體細胞（奶牛受精卵1），采用顯微注射法。將人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛后，利用牛的乳腺細胞產(chǎn)生出人乳鐵蛋白，牛7的新性狀是產(chǎn)生出人乳鐵蛋白?！军c睛】本題結(jié)合試管牛、克隆牛和轉(zhuǎn)基因牛的培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程等知識。答題關(guān)鍵在于掌握體外受精、細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)，明確核移植時，對提供細胞核和細胞質(zhì)的奶牛不需要進行同期發(fā)情處理，但胚胎移植時，需要進行同期發(fā)情處理。10、基因重組蛋白質(zhì)或核酸限制性核酸內(nèi)切人工合成基因文庫啟動子和終止子②便于重組載體（目的基因表達載體）的鑒定和篩選【解析】

（1）獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取、②利用PCR技術(shù)擴增、③人工合成（化學(xué)合成）。原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成。（2）DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。（3）目的基因的檢測與鑒定，常用基因探針——用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段。Ⅰ、分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)；Ⅱ、個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因工程利用的基本原理是基因重組。圖中重組質(zhì)粒用到的工具包括限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體質(zhì)粒，前兩者本質(zhì)是蛋白質(zhì)，后者是核酸。（2）用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割質(zhì)粒和目的基因露出相同的黏性末端。目的基因的獲取方法包括從基因文庫中獲取和PCR技術(shù)擴增。（3）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因，啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端。（4）基因工程最核心的步驟是表達載體的構(gòu)建，即圖中的②。表達載體上的標(biāo)記基因用于重組載體（目的基因表達載體）的鑒定和篩選?！军c睛】本題考查了基因工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能