血清總膽固醇的測(cè)定

關(guān)于血清總膽固醇的測(cè)定WHAT血清中的膽固醇包括與脂肪酸結(jié)合的膽固醇酯（CE）和游離膽固醇（FC），前者約占總膽固醇的70%.人體內(nèi)含膽固醇約140g，主要在體內(nèi)合成，也可從食物中吸收。其中25%分布在腦和神經(jīng)組織，10%~20%分布在血液中。第2頁,共26頁，星期六，2024年，5月WHY膽固醇是脂類化合物的一種，是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及構(gòu)成細(xì)胞膜的重要成分。正常人血清膽固醇含量圍:3.0~5.20mmol/L危險(xiǎn)閾值:5.20~6.20mmol/L高膽固醇血癥:≥6.20mmol/L

第3頁,共26頁，星期六，2024年，5月如果其在血液中濃度過高，也可造成心腦血管的嚴(yán)重?fù)p害。肝功能障礙時(shí)CE會(huì)減低。臨床檢測(cè)TCH濃度，主要用于原發(fā)性和繼發(fā)性脂代謝異常癥的診斷、動(dòng)脈粥樣硬化疾病的危險(xiǎn)性預(yù)測(cè)、重癥肝病及營養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)。第4頁,共26頁，星期六，2024年，5月HOW總膽固醇的測(cè)定有化學(xué)比色法和酶學(xué)方法兩類。本實(shí)驗(yàn)采用后一方法。化學(xué)比色法：

膽固醇及其酯在硫酸作用下與鄰苯二甲醛產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)，此物質(zhì)在550nm波長(zhǎng)處有最大吸收。因此，可用比色法作總膽固醇的定量測(cè)定。第5頁,共26頁，星期六，2024年，5月膽固醇氧化酶法

第6頁,共26頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆昭蹇偰懝檀紲y(cè)定的方法（膽固醇氧化酶法）與臨床意義第7頁,共26頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)原理第一步：血清膽固醇酯可被膽固醇酯酶水解為游離膽固醇和游離脂肪酸。第二步：膽固醇在膽固醇氧化酶的氧化作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2。第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在時(shí)，經(jīng)過氧化物酶催化，反應(yīng)生成苯醌亞胺非那腙的紅色醌類化合物，其顏色深淺與標(biāo)本中TC含量成正比。第8頁,共26頁，星期六，2024年，5月試劑基礎(chǔ)液：100ml0.1mol/L磷酸緩沖液（pH=6.7）(含膽酸鈉129mg),4-氨基安替比林16mg,苯酚132mg,TritionX-1000.2ml酶試劑應(yīng)用液：臨用前取商品三酶（膽固醇酯酶，膽固醇氧化酶，過氧化物酶）合劑1ml,加基礎(chǔ)液30ml,混勻既得膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液（5.17mmol/L）:精準(zhǔn)稱取膽固醇200mg,用純無水乙醇溶解，用乙醇定容至100ml，分裝4oC保存，臨用時(shí)取出第9頁,共26頁，星期六，2024年，5月操作第10頁,共26頁，星期六，2024年，5月

混合后置于37oC水浴中保溫15分鐘，用空白管調(diào)零，在500nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度。公式：第11頁,共26頁，星期六，2024年，5月

氧化酶法測(cè)定血清總膽固醇，此方法特異性好和靈敏度高，既可用于手工操作，也可自動(dòng)化分析第12頁,共26頁，星期六，2024年，5月臨床意義膽固醇增高：常見于動(dòng)脈粥樣硬化，原發(fā)性高脂血癥，（如家族性高膽固醇血癥，家族性apoB缺陷癥，多源性高膽固醇血癥，混合性高脂蛋白血癥等），糖尿病，腎病綜合癥，總膽管阻塞，甲狀腺功能減退，肥大性骨關(guān)節(jié)炎，老年性白內(nèi)障和牛皮癬等?？偰懝檀冀档停撼Ｒ娪诘椭鞍籽Y，貧血，敗血癥，甲狀腺功能亢進(jìn)，肝疾病，嚴(yán)重感染，營養(yǎng)不良，腸道吸收不良和藥物治療過程中的溶血性黃疸及慢性消耗性疾病，如癌癥晚期等。第13頁,共26頁，星期六，2024年，5月注意事項(xiàng)1、最后加酶試劑，各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)一致；2、比色應(yīng)在30min內(nèi)完成；3、試管在操作前盡量保持干燥；4、試劑中酶的質(zhì)量影響測(cè)定結(jié)果；5、若需檢測(cè)游離膽固醇濃度，將酶試劑成分中去掉膽固醇酯酶即可。第14頁,共26頁，星期六，2024年，5月

此法中血紅蛋白高于2g/L時(shí)引起正干擾；膽紅素高于0.1g/L時(shí)有明顯負(fù)干擾；血中維生素C與甲基多巴濃度高于治療水平時(shí)，會(huì)使結(jié)果降低。高TG血癥對(duì)本法無明顯影響。檢測(cè)TC的血清(漿)標(biāo)本密閉保存時(shí)，在4℃可穩(wěn)定1周，－20℃可穩(wěn)定半年以上。第15頁,共26頁，星期六，2024年，5月健康1.飲食不當(dāng)。過多進(jìn)食含高膽固醇的食物，比如心、肝等動(dòng)物內(nèi)臟。身體內(nèi)攝入過多的膽固醇，引起總膽固醇偏高，這也是造成總膽固醇偏高的原因之一2.肝細(xì)胞受損。膽固醇的酯化發(fā)生障礙，血中膽固醇減少，在肝硬化、重癥肝炎等嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，血中總膽固醇也降低。3.阻塞性黃疸。這時(shí)由于膽汁排出受阻，血中出現(xiàn)脂蛋白-X和肝內(nèi)膽固醇合成亢進(jìn)所致，以游離型膽固醇的增加為主，引起總膽固醇偏高。所以阻塞性黃疸是造成總膽固醇偏高的原因之一。第16頁,共26頁，星期六，2024年，5月

總膽固醇偏高的飲食原則是多吃降低膽固醇以及保肝護(hù)肝的食物。比如：豆腐。豆腐富含蛋白質(zhì)，糖分也較少，不含膽固醇，常吃豆腐有降低膽固醇，防止血管硬化的作用。菌菇類。香菇中含有的核糖類物質(zhì)，可以有效地抑制血清和肝臟中膽固醇的上升。金針菇有降血脂的作用，草菇含大量的維生素C和蛋白質(zhì)，而脂肪含量低，又不含膽固醇，同時(shí)還具有降低血中膽固醇的作用。肉類。馬肉中含豐富的蛋白質(zhì)，而脂肪含量很低，尤其是膽固醇含量又很低其蛋白質(zhì)中的氨基酸達(dá)20余種，營養(yǎng)價(jià)值很高。鴿肉能益氣、養(yǎng)血、補(bǔ)腎，又屬低脂肪高蛋白的補(bǔ)益食品。雞肉有甘溫益氣作用，而且又是一種高蛋白低脂肪食物。蛙肉性涼味甘，能滋陰降火，對(duì)高脂血癥患者來說，是為理想的清補(bǔ)食品。第17頁,共26頁，星期六，2024年，5月

魚類。烏魚又稱黑魚性寒味甘，能補(bǔ)脾利水同時(shí)它又是一種高蛋白低脂肪食品。青魚性平味甘，能補(bǔ)氣健脾化濕。鰒魚又稱鮑魚，肉性平味甘咸，蛋白質(zhì)含量極高，而脂肪含量很低的清補(bǔ)營養(yǎng)品。黃鱔甘溫，古代醫(yī)家認(rèn)為它有添精益髓，又有通血脈、壯筋骨的作用同時(shí)它又是一種低脂食品。另外，如黃瓜、海帶、羊棲菜、海藻、槐花等食物，均有降低血中膽固醇的效果?？偰懝檀计叩幕颊呖梢远喑孕?，但是吃任何東西都要把握一個(gè)度。另外要保持膳食的平衡，不吃辛辣刺激的以及加工類的食物?？偰懝檀计叩娘嬍彻倘恢匾?，最根本的還是進(jìn)行治療。第18頁,共26頁，星期六，2024年，5月思考互相問答第19頁,共26頁，星期六，2024年，5月第20頁,共26頁，星期六，2024年，5月第21頁,共26頁，星期六，2024年，5月第22頁,共26頁，星期六，2024年