GB-T 43968-2024 高效液相色譜-原子熒光光譜儀聯(lián)用分析方法通則

ICS71.040CCSN53中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T43968—2024高效液相色譜-原子熒光光譜儀聯(lián)用分析方法通則Generalrulesforhighperformanceliquidchromatography-atomicfluorescencespectrometryanalysismethod2024-04-25發(fā)布2024-11-01實施國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會ⅠGB/T43968—2024前言 Ⅲ1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14分析方法原理 15試劑和材料 25.1氬氣 25.2水 25.3試劑 25.4標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品 26儀器 26.1儀器主要組成部分 26.2儀器性能要求 27樣品處理 28分析步驟及方法 28.1分析條件的選擇 28.2基線穩(wěn)定性的確認 38.3干擾的消除 38.4進樣 38.5定性分析 38.6定量分析 38.7質(zhì)量控制 59分析結(jié)果的表述 59.1定量分析的結(jié)果計算 59.2分析方法與測定結(jié)果的評價 510安全注意事項 6附錄A(資料性)常用分離模式 7ⅢGB/T43968—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出。本文件由全國儀器分析測試標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC481)歸口。本文件起草單位:清華大學(xué)、北京海光儀器有限公司、北京吉天儀器有限公司、北京北分瑞利分析儀器(集團)有限責(zé)任公司、北京寶德儀器有限公司、北京清質(zhì)分析技術(shù)有限公司、北京電子科技職業(yè)學(xué)院、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所、廣東省科學(xué)院測試分析研究所(中國廣州分析測試中心)、上海煙草集團北京卷煙廠有限公司。1GB/T43968—2024高效液相色譜-原子熒光光譜儀聯(lián)用分析方法通則1范圍本文件確立了高效液相色譜-原子熒光光譜儀聯(lián)用法進行元素含量及其形態(tài)分析的通用規(guī)則。本文件適用于對易形成氫化物、氣態(tài)組分或冷蒸氣的元素含量及其形態(tài)的定性、定量分析。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T4842氬GB/T6379.1測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第1部分:總則與定義GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T13966分析儀器術(shù)語GB/T16631高效液相色譜法通則GB/T27411檢測實驗室中常用不確定度評定方法與表示GB/T27417合格評定化學(xué)分析方法確認和驗證指南JJG1151液相色譜-原子熒光聯(lián)用儀JY/T0566原子熒光光譜分析方法通則3術(shù)語和定義GB/T6379.1、GB/T13966、GB/T16631、GB/T27411、GB/T27417和JY/T0566界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。化學(xué)形態(tài)chemicalspecies一種化學(xué)元素的特定形式,定義為同位素組成、電子或氧化狀態(tài)和(或)絡(luò)合物或分子結(jié)構(gòu)。3.2形態(tài)分析speciationanalysis識別和(或)定量測量樣品中特定元素的一種或多種化學(xué)形態(tài)的分析工作。4分析方法原理試樣中含特定元素的各待測組分隨流動相進入色譜柱后被分離,特定元素再以一定方式生成氣態(tài)物質(zhì)并在原子化器中還原成基態(tài)原子;根據(jù)各組分中特定元素的基態(tài)原子受光源特定波長輻射激發(fā)后,發(fā)出的熒光時間分辨信號(即色譜圖)進行待測組分形態(tài)的定性和定量分析。根據(jù)試樣與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品各待測組分色譜峰的保留時間對比進行定性分析,根據(jù)試樣與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品各待測2GB/T43968—2024組分的色譜峰高或峰面積對比進行定量分析。5試劑和材料5.1氬氣符合GB/T4842中純氬的規(guī)格。5.2水符合GB/T6682中實驗室用水的一級水規(guī)格。5.3試劑試劑應(yīng)是分析純或分析純以上的試劑。試劑不應(yīng)干擾分析。流動相的溶劑應(yīng)是高效液相色譜級或相同等級及以上的產(chǎn)品,溶劑不應(yīng)干擾分析。流動相配制宜經(jīng)過脫氣及過濾處理,以防止影響后續(xù)的組分分離。5.4標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/有證標(biāo)準(zhǔn)樣品。6儀器6.1儀器主要組成部分高效液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀主要由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、在線消解裝置、原子熒光檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。6.2儀器性能要求儀器在投入使用前,應(yīng)對檢測分析結(jié)果的準(zhǔn)確性或有效性有影響的設(shè)備和用于測量環(huán)境條件等輔助測量設(shè)備進行檢定或校準(zhǔn)。高效液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀的性能應(yīng)符合JJG1151要求。7樣品處理樣品在分析之前,應(yīng)針對分析目的使用合適的方法進行處理。處理過程避免待測組分的形態(tài)轉(zhuǎn)化、損失或污染等對測定結(jié)果的影響,應(yīng)同時制備相應(yīng)的空白溶液以及校準(zhǔn)溶液。若針對該分析目的、樣品性質(zhì)和測試項目有標(biāo)準(zhǔn)方法,則按標(biāo)準(zhǔn)方法進行處理。樣品應(yīng)溶解在少量洗脫能力等于或小于初始流動相的溶劑中。8分析步驟及方法8.1分析條件的選擇8.1.1儀器開機按照儀器操作說明書對儀器進行開機預(yù)熱。3GB/T43968—20248.1.2高效液相色譜條件的選擇應(yīng)根據(jù)試樣和所要分離組分的性質(zhì),選擇合適的分離模式、色譜柱類型、流動相、進樣體積、柱溫及洗脫程序。常見分離模式見附錄A。8.1.3原子熒光光譜儀分析條件的選擇根據(jù)分析需要選擇合適的空心陰極燈及燈電流、原子化器高度、光電倍增管負高壓、載氣和屏蔽氣的氣體流量等參數(shù),使儀器的分析性能滿足測試需求。8.2基線穩(wěn)定性的確認儀器開機穩(wěn)定后,檢查儀器的基線噪聲和基線漂移,確認基線的波動對測定沒有影響。基線噪聲和基線漂移按JJG1151的要求。8.3干擾的消除8.3.1化學(xué)干擾可采取化學(xué)分離等手段對干擾進行消除。8.3.2熒光淬滅干擾提高原子化效率,減少原子蒸氣中的干擾粒子。8.4進樣若采用手動進樣的方式,則使用液相色譜注射器將一定體積的樣品注入進樣閥,扳動閥鈕進樣。若采用自動進樣器進樣,則設(shè)定合適的自動進樣器條件。8.5定性分析在相同的分析條件下,分別測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品和試樣中各待測組分色譜峰的保留時間;若樣品中的全部組分已經(jīng)確定且達到基線分離,則組分的保留時間可作為定性的依據(jù)。8.6定量分析8.6.1概述根據(jù)各組分色譜峰的峰高或峰面積,按以下方法計算試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度。無論采用下述哪一種方法,峰高或峰面積和質(zhì)量濃度的關(guān)系曲線(校準(zhǔn)曲線)繪制后,盡快測定試樣溶液。若質(zhì)量濃度是由儀器軟件自動計算,確保軟件的計算原理與以下方法一致。8.6.2標(biāo)準(zhǔn)曲線法配制不少于6個不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(包括溶劑空白,多個標(biāo)準(zhǔn)溶液之間的質(zhì)量濃度應(yīng)分布合理,標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配),按照質(zhì)量濃度從低到高依次測定標(biāo)準(zhǔn)溶液中各分離組分的峰高或峰面積,以標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測組分的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),相應(yīng)的待測組分色譜峰峰高或峰面積為縱坐標(biāo),繪制校準(zhǔn)曲線、計算回歸方程,其相關(guān)系數(shù)不小于0.99。在相同條件下分離試樣溶液中各待測組分,測定各組分峰高或峰面積,按公式(1)計算試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度(見圖1)。當(dāng)試樣中待測組分質(zhì)量濃度高于校準(zhǔn)曲線范圍時,應(yīng)將樣品稀釋至校準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)重新測定。4GB/T43968—2024ρ檢=式中:ρ檢—試樣溶液中待測組分的質(zhì)量濃度;S檢-ba…………(1)S檢—試樣溶液中待測組分色譜峰的峰高或峰面積;b—校準(zhǔn)曲線與縱坐標(biāo)軸截距;a—校準(zhǔn)曲線斜率。此方法只適合于無基體干擾情況時的測定。圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線法校準(zhǔn)曲線8.6.3標(biāo)準(zhǔn)加入法分別取等體積的試樣溶液n份,一份不加標(biāo)準(zhǔn)溶液,其余n-1份溶液分別按比例加入不同體積標(biāo)準(zhǔn)溶液,再稀釋至相同體積,溶液質(zhì)量濃度通常分別為ρ檢,ρ檢+ρ0,ρ檢+2ρ0,…,ρ檢+(n-1)ρ0(ρ0為標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度;溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配)。在規(guī)定儀器條件下,依次測定這n份溶液各組分色譜峰的峰高或峰面積,以加入標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),相應(yīng)的待測組分色譜峰的峰高或峰面積為縱坐標(biāo)繪制校準(zhǔn)曲線,其相關(guān)系數(shù)不小于0.99。曲線反向延伸與質(zhì)量濃度軸反向延伸的交點的絕對值即為溶液中待測組分的質(zhì)量濃度ρ檢,見圖2。根據(jù)ρ檢計算試樣溶液中待測組分質(zhì)量濃度。使用標(biāo)準(zhǔn)加入法時:至少采用5點(包括試樣溶液本身)來繪制外推關(guān)系曲線,同時首次加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度與試樣溶液質(zhì)量濃度大致相同,即ρ檢≈ρ0。圖2標(biāo)準(zhǔn)加入法校準(zhǔn)曲線5GB/T43968—20248.7質(zhì)量控制為確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確,樣品分析過程中應(yīng)添加質(zhì)控樣品。質(zhì)控樣品采用與分析樣品具有相同或相似基質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品。在無質(zhì)控樣品時,使用其他質(zhì)控方法進行質(zhì)量控制。9分析結(jié)果的表述9.1定量分析的結(jié)果計算待測樣品取樣量按質(zhì)量計算時,樣品中被測組分含量以質(zhì)量分數(shù)(mg/kg)表示,計算方法見公式(2)。…………(2)式中:X—樣品中被測組分的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);ρ檢—試樣溶液中被測組分的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);ρ空白—試樣空白溶液中被測組分的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);V—試樣溶液的體積,單位為毫升(mL);f—稀釋倍數(shù);m—待測樣品取樣量,單位為克(g)。待測樣品取樣量按體積計算時,樣品中被測組分含量以質(zhì)量濃度(mg/L)表示,計算方法見公式(3)?！?3)式中:X—樣品中被測組分的含量,單位為毫克每升(mg/L);ρ檢—試樣溶液中被測組分的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);ρ空白—試樣空白溶液中被測組分的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);V1—試樣溶液的體積,單位為毫升(mL);f—稀釋倍數(shù);V2—待測樣品取樣量,單位為毫升(mL)。9.2分析方法與測定結(jié)果的評價9.2.1概述分析方法用檢出限和定量限、準(zhǔn)確度(正確度和精密度)來評定;分析結(jié)果用測量不確定度評定。9.2.2檢出限和定量限檢出限與定量限按照GB/T27417中的方法與原則評估。9.2.3準(zhǔn)確度(精密度和正確度)9.2.3.1精密度精密度反映偶然誤差的分布,通常用標(biāo)準(zhǔn)偏差s或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD來表示,計算方法見公式(4)和公式(5)。精密度與質(zhì)量濃度有關(guān),報告精密度時應(yīng)指明獲得該精密度的被測組分的質(zhì)量濃度,同時標(biāo)明測量次數(shù)n(n≥7)。6GB/T43968—2024(4)RSD=×100%…………(5)式中:s—n次測量值的實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差,單位為毫克每升(mg/L);n—測量次數(shù);xi—第i次測量值,單位為毫克每升(mg/L);x—n次測量值平均值,單位為毫克每升(mg/L);RSD—n次測量值的相對實驗標(biāo)準(zhǔn)偏差。9.2.3.2正確度正確度反映測量值與真值的系統(tǒng)誤差,在實際工作中,可使用與分析樣品具有相同或相似基體的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進行對照試驗;或加入被測定組分的純物質(zhì)進行回收試驗以評估正確度。當(dāng)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品對照試驗評估正確度時,以絕對誤差或相對誤差表征正確度;當(dāng)用回收試驗評估正確度時,以回收率R表征正確度,回收率R計算方法見公式(6)?！?00%…………(6)式中:R—回收率;ρi—加入ρa后的測定值,單位為毫克每升(mg/L);ρ0—初始測定值,單位為毫克每升(mg/L);ρa—標(biāo)準(zhǔn)加入量,單位為毫克每升(mg/L)。9.2.4測量不確定度如果需要分析檢測結(jié)果的測量不確定度,按照GB/T27411中的評定方法和原則進行評定。10安全注意事項10.1實驗室人員應(yīng)認真遵守實驗室操作規(guī)范,遵守儀器使用規(guī)范,遵守化學(xué)品使用規(guī)范,熟練掌握試驗與儀器操作過程。10.2應(yīng)按高壓鋼瓶安全操作規(guī)定使用高壓氣體鋼瓶。10.3儀器室排風(fēng)良好,應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)使用有毒、易燃易爆的試劑。10.4廢棄的流動相液體應(yīng)集中收集,做好標(biāo)記、貼上標(biāo)簽,按規(guī)定交由有資質(zhì)的處置單位進行處理。10.5儀器應(yīng)單獨接地,并符合安裝要求。10.6實驗室環(huán)境溫濕度應(yīng)滿足儀器使用要求。10.7注意用電安全。7GB/T43968—2024附錄A(資料性)常用分離模式A.1食品中無機砷測定儀器參考條件A.1.1液相色譜參考條件色譜柱:陰離子交換色譜柱(柱長250mm,內(nèi)徑4mm),或等效柱。陰離子交換色譜保護柱(柱長10mm,內(nèi)徑4mm),或等效柱。流動相組成如下。/磷:A.1.2原子熒光檢測參考條件負高壓:320V;砷燈總電流:90mA;主電流/輔助電流:55/35;原子化方式:火焰原子化器;原子化器溫度:中溫。載液:20%鹽酸溶液,流速4mL/min;還原劑:30g/L硼氫化鉀溶液,流速4mL/min;載氣流速400mL/mL;輔助氣流速:400mL/mL。表A.1食品中無機砷測定液相色譜梯度洗脫條件組成時間/min0810202232流動相A/%10010000100100流動相B/%0010010000A.2食品中有機汞測定儀器參考條件A.