(高清版)GB∕T 37492-2019 糧油檢驗(yàn) 谷物及其制品 水溶性膳食纖維的測(cè)定 酶重量法

ICS67.040GB/T37492—2019糧油檢驗(yàn)谷物及其制品水溶性膳食纖維的測(cè)定酶重量法Inspectionofgrainandoils—Determinationofsolubledietaryfibrein國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T37492—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由全國糧油標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC270)歸口。1GB/T37492—2019糧油檢驗(yàn)谷物及其制品水溶性膳食纖維的測(cè)定酶重量法本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物及其制品中水溶性膳食纖維的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文GB/T5490糧油檢驗(yàn)一般規(guī)則GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3原理4試劑和材料4.1無水乙酸鈉(CH?CO?Na)。4.2無水磷酸氫二鈉(Na?HPO?)。4.3磷酸二氫鈉(NaH?PO?·H?O)。4.4乙酸(CH?CO?H?)。4.5無水乙醇(CH?CH?OH)。4.6丙酮(CH?COCH?)。4.8鹽酸(HCl)。4.11淀粉葡萄糖苷酶。4.12玻璃棉。4.132.0mol/L緩沖液。4.13.2乙酸鈉溶液(2.0mol/L):稱取164.00g無水乙酸鈉(4.1),溶于水，移入1L容量瓶中，稀釋至2GB/T37492—20194.14.30.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH≈7):將61mL0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液(4.14.1)與39mL心10min,然后用含有玻璃棉(4.12)的玻璃坩堝過濾。每日制備并冷藏，于0℃~5℃冰箱保存。酶的活性及判定標(biāo)準(zhǔn)見附錄A。10min,然后用含有玻璃棉(4.12)的玻璃坩堝過濾。每日制備并冷藏，于0℃~5℃冰箱保存。酶的活性及判定標(biāo)準(zhǔn)見附錄A。1500×g離心10min,然后用含有玻璃棉(4.12)的玻璃坩堝過濾。每日制備并冷藏，于0℃~5℃冰箱4.1880%乙醇溶液：5.3烘箱：105℃±2℃。5.5水浴鍋：100℃±1℃。3GB/T37492—20195.12抽濾裝置：由抽濾瓶、抽濾墊及水泵組成。6分析步驟6.1試樣制備取適量試樣磨粉，全部過孔徑為1mm(20目)的篩，混勻。置于樣品盒中室溫保存。6.2.1稱樣準(zhǔn)確稱取試樣0.5g(精確至0.0001g),置50mL具塞磨口試管中。如果試樣的脂肪含量超過10%,則需要先脫脂再進(jìn)行測(cè)定。6.2.2水解加入2mL緩沖溶液(4.13.3),混勻，置于120℃1.3×10?Pa高壓滅菌器中水解60min。6.2.3淀粉酶酶解加入100μLα-淀粉酶溶液(4.16),加塞，置于60℃±1℃水浴鍋中酶解消化30min。然后將經(jīng)過酶處理的試樣倒入玻璃濾器中，抽濾，用50mL試管收集濾液，用10mL熱水沖洗濾器，將所有殘留顆粒無損失地轉(zhuǎn)移至濾器中，再用5mL熱水沖洗坩堝，洗液并入上述濾液。在濾液中加入4mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液(4.13.3),用氫氧化鈉溶液(4.19)或鹽酸溶液(4.20),調(diào)濾液pH至5.2。6.2.5淀粉葡萄糖苷酶酶解加入50μL淀粉葡萄糖苷酶(4.17),攪拌均勻，加塞，置于60℃±1℃水浴鍋中酶解消化30min。6.2.6蛋白酶解加入20μL蛋白酶溶液(4.15),攪拌均勻，加塞，置于60℃±1℃水浴鍋中酶解消化30min。6.2.7沉淀將濾液轉(zhuǎn)移至250mL三角瓶中，加入無水乙醇(4.5),使乙醇與試樣液的體積比為4:1。混勻，加塞，靜置60min,促使沉淀生成。6.2.8洗滌將經(jīng)過沉淀處理的試液倒入處理后玻璃濾器中，抽濾，用80%的乙醇溶液(4.18)清洗三角瓶，將所有殘留顆粒無損失地轉(zhuǎn)移至濾器中，用20mL80%的乙醇溶液清洗濾渣2次，20mL的丙酮清洗2次，棄去濾液。6.2.9烘干將玻璃濾器置于105℃±2℃烘箱內(nèi)烘干3h,取出，置于干燥器中，冷至室溫，稱量m?(精確至0.0001g)。4GB/T37492—20196.2.10灼燒把烘干后稱重的玻璃濾器置于馬弗爐中，525℃±5℃下灼燒1h,冷至200℃以下后，取出，置于干燥器中，冷至室溫，稱量m?(精確至0.0001g)。6.2.11空白測(cè)定按6.2.1～6.2.10測(cè)定空白，但不加試樣。7結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算見式(1):式中：…X——試樣中水溶性膳食纖維的含量，單位為克每百克(g/100g);m?——濾器和試樣殘?jiān)馁|(zhì)量，單位為克(g);m?——濾器和試樣灰分的質(zhì)量，單位為克(g);m?——試劑空白濾器和試樣殘?jiān)馁|(zhì)量，單位為克(g);m?——試劑空白濾器和灰分的質(zhì)量，單位為克(g);m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g);S——預(yù)干燥時(shí)失重的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%,未經(jīng)預(yù)干燥時(shí)，S=0。取兩次測(cè)定結(jié)果的平均值，計(jì)算結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位。測(cè)定結(jié)果不符合重復(fù)性要求時(shí)，應(yīng)按GB/T5490的規(guī)定重新測(cè)定，計(jì)算結(jié)果。8精密度在重復(fù)性條件下，兩次平行測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得大于這兩個(gè)測(cè)定值的算術(shù)平均值的10%。5GB/T37492—2019A.1活性要求及測(cè)定方法淀粉為底物，以Nelson/Somogyi還原糖測(cè)試淀粉酶活性：10000U/mL+1000鐘從可溶性酪蛋白中水解出(并溶于三氯乙酸)1pmol酪氨酸所需要的酶量];或7U/mg～15U/mg酪氨酸在顯色反應(yīng)中所引起的顏色變化，顯色用Folin-Ciocalteau)試劑時(shí)所需要的酶量]。A.1.3淀粉葡萄糖苷酶活性測(cè)定淀粉/葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測(cè)試淀粉葡萄糖苷酶活性：2000U/mL～3300U/mL(1個(gè)酶牙糖苷釋放1pmol對(duì)-硝基苯所需要的A.2判定標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)酶的生產(chǎn)批次改變或更廠使用間隔超過6個(gè)月時(shí)，應(yīng)按表A