生物制品復(fù)習(xí)題(職稱考試)

生物制品復(fù)習(xí)題（職稱考試）

生物制品復(fù)習(xí)題

第一章緒論

1.生物制品的定義：是指以天然生物材料為原料，經(jīng)物理、化學(xué)、

生物化學(xué)和生物學(xué)工藝制備或

以現(xiàn)代生物技術(shù)獲得的，并以分析技術(shù)控制中間產(chǎn)物和成品質(zhì)量的生

物活性制劑。用于預(yù)防、診斷和治療人類疾病的一類生物制品，稱之為醫(yī)

用（或人用）生物制品。醫(yī)用生物制品簡(jiǎn)稱為生物制品。

2.生物制品學(xué)的理論基礎(chǔ)及技術(shù)基礎(chǔ)？

以微生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等學(xué)科為理論基礎(chǔ)；以

現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、發(fā)酵工程、蛋白質(zhì)工程等為技術(shù)基礎(chǔ)的一門

新的獨(dú)立學(xué)科一一生物制品學(xué)。

3.生物制品的種類？

主動(dòng)免疫一一細(xì)菌類疫苗，病毒類疫苗，聯(lián)合疫苗，類毒素

被動(dòng)免疫一一用馬血清制成：抗毒素及免疫血清，有過(guò)敏源。血液制

品

4.生物制品的種類？

（1）疫苗（主動(dòng)免疫）

細(xì)菌類疫苗：由細(xì)菌、螺旋體或其衍生物制成的減毒活疫苗、滅活疫

苗、重組DNA

疫苗、亞單位疫苗等，如卡介苗、傷寒Vi多糖疫苗等。

病毒類疫苗：由病毒、衣原體、立克次體或其衍生物制成的減毒活疫

苗、滅活疫苗、重組

DNA疫苗、亞單位疫苗等，如麻疹、基因工程乙型肝炎疫苗等。

聯(lián)合疫苗：由二種或二種以上疫苗抗原的原液配置而成的具有多種免

疫原性的滅活疫苗或

活疫苗，如百日咳、白喉、破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗（DPT）,麻疹、流行性腮

腺炎、

風(fēng)疹聯(lián)合疫苗（MMR）等。

類毒素：由細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素，經(jīng)解毒精致而成。如破傷風(fēng)類毒素等。

疫苗類制品由于富含免疫原性強(qiáng)的抗原，用于疾病預(yù)防的，又稱預(yù)防

制品或防疫制品。

（2）抗毒素及免疫血清（被動(dòng)免疫）：由特定抗原免疫動(dòng)物所得血漿

制成的抗毒素或免疫血清，

如白喉抗毒素、抗狂犬病血清、抗蝮蛇毒血清等。

（3）血液制品（被動(dòng)免疫）：由健康人血液或特異免疫人血漿分離、

提純或基因工程技術(shù)制成

的人血漿蛋白組份或血細(xì)胞組份制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、

人特異免

疫球蛋白、人凝血因子、紅細(xì)胞濃縮物等。

（4）細(xì)胞因子制品：由健康人細(xì)胞增殖分離提純或由基因工程技術(shù)

制成的具有多種生物活性

的多肽類或蛋白類制劑，如干擾素（IFN）、白細(xì)胞介素（IL）、集落刺

激因子（CSF）、

紅細(xì)胞生成素（EPO）等。

（5）診斷制品

體外診斷制品：由特定抗原抗體或有關(guān)生物物質(zhì)制成的免疫診斷試劑

或診斷試劑盒，如

傷寒、副傷寒、變形桿菌（0X19、0X2、0XK）診斷菌液、沙門菌屬

診斷血清、乙

型肝炎表面（HbsAg）酶聯(lián)免疫診斷試劑盒等，用于疾病的體外免疫

診斷。

體內(nèi)診斷制品：由變應(yīng)原或有關(guān)抗原材料制成的免疫診斷試劑，如卡

介苗純蛋白衍生物

（BCG-PPD）、布氏菌純蛋白衍生物（RB-PPD）、錫克試驗(yàn)毒素、單克

隆抗體等，

用于疾病的體內(nèi)免疫診斷。

5.生物制品的三大作用？

預(yù)防，治療，診斷

1

6.免疫調(diào)節(jié)劑的作用、分類及代表制劑？

作用：提高人體的非特異免疫功能，以達(dá)到防病治病的效果。

（1）細(xì)菌類免疫調(diào)節(jié)劑：如卡介苗及其衍生物、短棒狀桿菌、鏈球

菌制劑等，可促進(jìn)機(jī)體的非

特異性免疫增強(qiáng)。

（2）細(xì)胞因子：如白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子、干擾素、集落刺激

因子等，能增強(qiáng)機(jī)體免疫功

能，可起到抗炎、抗感染、抗腫瘤的作用。

7.診斷試劑分為哪幾類？

細(xì)菌學(xué)診斷試劑，病毒學(xué)診斷試劑，免疫學(xué)診斷試劑，臨床化學(xué)試劑，

腫瘤診斷試劑，其

他常用試劑。診斷試劑在防病治病中起著重要的“偵定作用二

8.臨床化學(xué)試劑根據(jù)用途分為哪三類及它們的含義？

用途：標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)量控制物及檢測(cè)試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)品：是指定量測(cè)定時(shí)的定標(biāo)物或差比物。在相同條件下測(cè)定的待

檢樣品中某物質(zhì)的定量。質(zhì)量控制物：也叫質(zhì)控物，用來(lái)控制測(cè)定的

質(zhì)量，是對(duì)整個(gè)測(cè)定的評(píng)價(jià)，以判定測(cè)定結(jié)果的可

靠程度。

檢測(cè)試劑盒：由完成某物質(zhì)測(cè)定所需要的各種試劑配套組裝而成，并

經(jīng)過(guò)檢定證明性能可靠，

測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確靈敏度達(dá)到一定要求，且重復(fù)性好的商品試劑。

9.腫瘤標(biāo)志物含義：在癌變過(guò)程中由癌基因表達(dá)而生成的抗原和生

物活性物質(zhì)。它是腫瘤免疫化

學(xué)診斷的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。

10.生物制品發(fā)展歷史上重要首創(chuàng)、年代及發(fā)明者？

創(chuàng)始人：18世紀(jì)的英國(guó)EdwardJenner于1798年發(fā)表論文，開創(chuàng)了

弱毒活病毒疫苗，即牛痘

苗，這就是生物制品的誕生。19世紀(jì)末，Pasteur把弱毒微生物命名

為“疫苗”。

11.我國(guó)生物制品制造業(yè)創(chuàng)始年份及機(jī)構(gòu)：

創(chuàng)始于1919年，北平的天壇成立了我國(guó)第一所生物制品生產(chǎn)、研究

機(jī)構(gòu)——中央防疫處（即

北京生物制品研究所前身）

12.EPI的含義和WHO倡導(dǎo)的EPI疫苗和防止的疾病以及我國(guó)又增加

的疫苗？

EPI是指擴(kuò)大的免疫計(jì)劃，針對(duì)全世界健康兒童。WHO推薦的兒童計(jì)

劃免疫（百日咳、白喉、

破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗、麻疹疫苗、卡介苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗）我國(guó)增加了

乙肝疫苗和流行性

乙腦活疫苗。

13.第一代、第二代、第三代疫苗的含義以及第一個(gè)基因工程疫苗？

第一代是指?jìng)鹘y(tǒng)疫苗，第二代疫苗的基因工程疫苗（基因重組疫苗）

開發(fā)活疫苗，第三代疫苗的核酸疫苗（基因疫苗）DNA

14.學(xué)習(xí)生物制品基礎(chǔ)及技術(shù)的意義？

生物制品是人類與疾病作斗爭(zhēng)的必不可少的強(qiáng)大武器；是多學(xué)科、多

科技的結(jié)晶；是生命

制品；又是反生物恐怖的重要手段。

第二章生物制品的GMP管理

1.GMP的中文意思是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范。

2.藥品生產(chǎn)管理部門和質(zhì)量管理部門負(fù)責(zé)人不得相互兼任。

3.主要工作室的照明宜為300勒克斯。

4.驗(yàn)證是證明任何程序、生產(chǎn)過(guò)程、設(shè)備、物料、活動(dòng)或系統(tǒng)確實(shí)

能達(dá)到預(yù)期結(jié)果的有文件證明

的一系列活動(dòng)。

5.在潔凈區(qū)域中，細(xì)菌污染的最大來(lái)源是操作人員。

6.質(zhì)量管理部門是唯一能批準(zhǔn)原材料合格與否，可否使用的部門。

2

7.制藥企業(yè)的藥品生產(chǎn)人員，尤其是與藥品直接接觸的人員，其健

康狀況如何，將可能直接或間

接地威脅藥品質(zhì)量。為此，有必要采取一定的措施以保證他們的身體

狀況維持在一定的水平，這主要是從以下方面予以控制：入廠前的體格檢

查，定期的健康檢查，生病或皮膚表面有害傷口時(shí)的報(bào)告與處理。

8.潔凈室（區(qū)）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與藥品生產(chǎn)工藝要求相適應(yīng)，

無(wú)特殊要求外，溫濕度的控制

范圍為18-26℃,45-65%

9.成品的制檢與銷售記錄要保存至該批成品有效期后一年。

10.取樣中最主要的影響因素是樣品代表性和所取樣品數(shù)。

11.藥品質(zhì)量是生產(chǎn)出來(lái)的。

12.潔凈室（區(qū)）應(yīng)定期輪換使用兩種以上（包括兩種）消毒劑進(jìn)行

消毒。

13.藥品生產(chǎn)車間其潔凈級(jí)別可劃分為100級(jí)、1萬(wàn)級(jí)、10萬(wàn)級(jí)、30

萬(wàn)級(jí)。

14.注射用水的儲(chǔ)存可采用4c以下存放，80℃以上保溫，65℃以上

保溫循環(huán)。

15.1988年3月根據(jù)國(guó)家主席令正式頒布了我國(guó)的《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管

理規(guī)范》

16.GMP根據(jù)其適用范圍可分為三類：國(guó)際性的GMP,國(guó)家性質(zhì)的

GMP,行業(yè)性的GMP

17.GMP的基本內(nèi)容是什么？

三個(gè)方面：（1）人員（2）硬件（3）軟件包含了14個(gè)部分，

共88條。

第三章有關(guān)生物制品檢定與標(biāo)準(zhǔn)化

1.生物制品檢定的目的意義？

制品的質(zhì)量是生產(chǎn)出來(lái)的，檢定只是客觀地反映產(chǎn)品的質(zhì)量水平。通

過(guò)檢定可以發(fā)現(xiàn)制品

中存在的質(zhì)量問(wèn)題，提出改進(jìn)意見。從而促進(jìn)質(zhì)量的提高。檢定是制

品質(zhì)量控制基本內(nèi)容之一，是質(zhì)量保證的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

2.生物制品檢定的前提和依據(jù)？

生物制品是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）,在GMP的要求下生產(chǎn)的

制品，才能

保證質(zhì)量，這是前提。

依據(jù)是《生物制品規(guī)程》，它是國(guó)家技術(shù)法規(guī)，對(duì)項(xiàng)目、方法、質(zhì)量

指標(biāo)有明確規(guī)定。

3.生物制品檢定的對(duì)象？

生物制品檢定的對(duì)象有原料的檢定，包括菌毒種、血源、生物材料、

化學(xué)材料、水；輔料

的檢定，包裝材料的檢定，內(nèi)外包裝材料、標(biāo)簽、防偽標(biāo)志和使用說(shuō)

明等；中間產(chǎn)品的檢定，即原液、中間品等；半成品的檢定和成品的檢定。

從性質(zhì)來(lái)分為三方面：理化、安全性、效力。

4.半微量凱氏定氮法的原理？

原理：量取一定體積樣品（含氮量廠2mg左右）于凱氏定氮瓶中，加

濃硫酸進(jìn)行消化至澄

明藍(lán)綠色，使樣品中的含氮物質(zhì)經(jīng)消化后變?yōu)榱蛩徵U，用氫氧化鈉釋

放氨，用硼酸吸收，以標(biāo)準(zhǔn)酸進(jìn)行滴定，由滴定的毫升數(shù)求出總氮量。

5.酚試劑法的原理？

原理是在堿性溶液中，蛋白質(zhì)與銅離子形成復(fù)合體，再與酚試劑反應(yīng)

呈深蘭色，顯色強(qiáng)度

與蛋白質(zhì)含量成正比。

6.聚丙烯酰胺凝膠電泳的雙重作用？

聚丙烯酰胺凝膠電泳是目前分辨力最好的一種電泳方法，不僅具有電

泳作用，而且有分子

篩效果。

7.免疫電泳的特點(diǎn)？

免疫電泳是瓊脂電泳與免疫擴(kuò)散相聯(lián)合的技術(shù)，應(yīng)用于可溶性抗原和

抗體系統(tǒng)的檢定。3

8.電泳的特點(diǎn)？

根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同，在不同環(huán)境中所帶電荷的差異，以及分子

大小的不同。使它們

在電場(chǎng)中泳動(dòng)速度不同而被分離開來(lái)，這就是電泳。

9.宜試驗(yàn)的原理？

革蘭陰性菌細(xì)胞壁成分--內(nèi)毒素，可激活宜變形細(xì)胞溶解物中的凝固

酶原成為凝固蛋白，

再經(jīng)交連酶的作用，進(jìn)而聚合為纖維狀凝膠，由此創(chuàng)立了細(xì)菌內(nèi)毒素

檢測(cè)的凝膠邕試驗(yàn)技術(shù)。本法靈敏度高，特異性好，簡(jiǎn)便。

10.外源性污染檢查主要包括哪些方面檢查？

包括野毒檢查、支原體檢查、乙肝表面抗原（HbsAg）、丙肝抗體（HCAb）

和艾滋抗體（HIAb）

的檢查、殘余細(xì)胞DNA檢查4個(gè)方面。

11.血液制品中檢查有關(guān)病毒所用試劑的要求：必須是國(guó)家批批檢合

格的試劑。

12.理想的效力試驗(yàn)應(yīng)具備的條件？

理想的效力試驗(yàn)應(yīng)具備的條件是（1）試驗(yàn)方法具最佳代表性（2）試

驗(yàn)方法應(yīng)簡(jiǎn)便易行，重復(fù)性好（3）結(jié)果應(yīng)明確（4）試驗(yàn)結(jié)果要能與流行

病學(xué)調(diào)查基本取得一致（5）所用試驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化

13.什么叫ED50和CCID50?

ED50：動(dòng)物半數(shù)能抗病癥的劑量，稱為半數(shù)有效量，用ED50表示。

CCID50：能使半數(shù)組織培養(yǎng)細(xì)胞感染的病毒劑量，稱為半數(shù)組織細(xì)胞

培養(yǎng)感染量，用CCID50

表示。

14.活病毒感染細(xì)胞，引起細(xì)胞病變?cè)陲@微鏡下檢查的主要有哪三種

現(xiàn)象？

活病毒感染細(xì)胞后，可引起細(xì)胞圓縮、細(xì)胞破碎、細(xì)胞融合等現(xiàn)象。

15.什么叫Lf,并簡(jiǎn)單描述？

Lf是指絮狀單位，能和一個(gè)單位抗毒素最先發(fā)生絮狀沉淀反應(yīng)的類毒

素（或毒素）量稱為

一個(gè)絮狀單位。

16.生物制品規(guī)程的性質(zhì)：是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)法規(guī)。

17.什么叫標(biāo)準(zhǔn)品及使用標(biāo)準(zhǔn)品的作用？

用一已知效價(jià)的制品作為對(duì)照來(lái)校正試驗(yàn)結(jié)果，這種對(duì)照品就是標(biāo)準(zhǔn)

品或參考品。

18.制備標(biāo)準(zhǔn)品的最基本要求：準(zhǔn)確和穩(wěn)定

19.生物制品檢定規(guī)范化管理的基本要求？

（1）檢定實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)布局

（2）檢定實(shí)驗(yàn)室、設(shè)備、儀器、儀表、小容器玻璃器皿、量具

（3）試劑、溶液、標(biāo)準(zhǔn)品、檢定菌毒種的管理

（4）檢定操作

（5）檢定人員

（6）取樣

（7）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理

20.生物制品的質(zhì)量檢定主要分哪幾大類？

檢定操作細(xì)則的編制，檢定記錄和檢定報(bào)告單

4

第四章生物制品的培養(yǎng)基

1.培養(yǎng)基的定義：人工配制的含有適合微生物生產(chǎn)繁殖所需營(yíng)養(yǎng)成

分的混合物。

2.培養(yǎng)基是能滿足微生物生長(zhǎng)需要的一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其成分包括氮

源、碳源、無(wú)機(jī)鹽、維生素及

其它促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、水、凝固物質(zhì)、指示劑、緩沖劑、抑制劑等九

種物質(zhì)。

3.有機(jī)氮源：包括各種蛋白膝、氨基酸、酵母浸膏和動(dòng)植物組織的

浸出液。

4.化學(xué)消毒劑按殺滅微生物能力的大小，可分為高效，中效和低效

三類。高效消毒劑能殺滅包括

細(xì)菌芽抱和真菌抱子在內(nèi)的所有微生物，如過(guò)氧乙酸、戊二醛、環(huán)氧

乙烷等；中效消毒劑能殺滅除細(xì)菌芽抱之外的各種微生物，如甲醛、碘伏、

石炭酸等；低效消毒劑只能殺滅細(xì)胞繁殖體，如氯已定、苯扎澳鏤等。

5.水處理工作中，膜分離法包括微孔過(guò)濾、超過(guò)濾、電滲析、反滲

透。

6.什么是離子交換樹脂的化學(xué)特性？

兩個(gè)規(guī)律：一是化合價(jià)越大，吸附能力越大；二是同價(jià)金屬離子，原

子量越大，被吸附能力越

強(qiáng)。其選擇性順序?yàn)椋?/p>

Fe3+>AI3+>Ca2+>Mg2+>K+>Na+>H+

7.離子交換樹脂結(jié)構(gòu)分為幾部分？

通常分為兩個(gè)部分：一部分稱為母體骨架，不參與交換反應(yīng)，另一部

分是連接在骨架上的活性

基團(tuán)，活性基團(tuán)上的可交換離子能與水中同種離子進(jìn)行交換。

8.注射用水：以純化為水源，經(jīng)蒸儲(chǔ)而制備，供輸液和注射用的水。

9.什么是滅菌？：是用化學(xué)藥品或物理方法清除或殺滅所有活的微

生物（致病微生物、非致病微

生物以及它們的芽抱在內(nèi)）的方法。

10.滅菌時(shí)間的含義及分幾部分？

滅菌時(shí)間是指當(dāng)滅菌柜室達(dá)到規(guī)定溫度后為達(dá)到滅菌要求所需的持

續(xù)時(shí)間。有三部分組

成：（1）熱穿透時(shí)間（2）熱死亡時(shí)間（3）安全時(shí)間

11.滅菌效果監(jiān)測(cè)是指什么？

滅菌效果監(jiān)測(cè)是指生物指示劑監(jiān)測(cè)，利用對(duì)熱耐受力最強(qiáng)的嗜熱脂肪

芽抱桿菌的死亡情況

來(lái)判斷效果。它隨同物品一起滅菌后應(yīng)置于55-60C溫箱中孵育7天

后判別結(jié)果。

12.簡(jiǎn)述壓力蒸汽滅菌器的滅菌原理？

（1）細(xì)菌蛋白質(zhì)在含水多的環(huán)境中遇熱易凝固

（2）蒸汽傳導(dǎo)快，滲透力強(qiáng)

（3）蒸汽中大量潛伏熱，可迅速提高溫度

13.生物制品培養(yǎng)基有幾種？

無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基，菌種保存培養(yǎng)基，鑒別培養(yǎng)基，產(chǎn)菌培養(yǎng)基，產(chǎn)

毒培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)

基6種。

14.細(xì)胞合成所需氨基酸是什么？

L一谷氨酰胺是所有細(xì)胞培養(yǎng)液中必不可少的氨基酸成分。

15.常用合成培養(yǎng)液適用細(xì)胞

合成培養(yǎng)液名稱適用細(xì)胞

MEM哺乳動(dòng)物細(xì)胞系

DMEM多種細(xì)胞，特別是雜交瘤細(xì)胞

IMEM腫瘤細(xì)胞

HamFlO雜交瘤細(xì)胞，二倍體細(xì)胞

HamF12雜交瘤細(xì)胞，二倍體細(xì)胞

MeCay5A腫瘤細(xì)胞，原代細(xì)胞，淋巴細(xì)胞

RPMI1640正常細(xì)胞，白血病細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞

16.生產(chǎn)用注射用水工藝流程：

自來(lái)水一預(yù)處理一過(guò)濾一離子交換一微孔過(guò)濾一超過(guò)濾一多效蒸儲(chǔ)

一注射用水5

第五章生物制品的分包裝

1.生物制品成品保存，除了要注意保溫外，還要注意避光。

2.無(wú)菌室用雙碟培養(yǎng)基收雜菌，其中沙門氏培養(yǎng)基主要收陰性小桿

菌。

3.酒精的殺菌作用，在于使菌體蛋白脫水變性而死。

4.生產(chǎn)記錄必須填寫清楚整齊；需要改時(shí)，應(yīng)更改并簽名，且使原

數(shù)據(jù)仍可辨認(rèn)。

5.無(wú)菌分裝驗(yàn)證試驗(yàn)中選擇分裝樣本應(yīng)23000瓶。

6.無(wú)菌分裝驗(yàn)證可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)為污染率W0.1%

7.清潔和消毒潔凈房間應(yīng)從高級(jí)別到低級(jí)別。

8.在灌封過(guò)程中，應(yīng)隨機(jī)，按規(guī)定階段（前中后）抽取樣品，貼上

瓶簽作檢定用。

9.嚴(yán)格遵循SOP的主要目的是為了把人為的誤差降低到最小限度與

原設(shè)計(jì)目的相吻合。

10.藥品應(yīng)在潔凈環(huán)境與無(wú)菌環(huán)境的條件下生產(chǎn)。

11.藥品生產(chǎn)工藝中使用的水，包括飲用水，純化水，注射用水。

12.每一生產(chǎn)階段完成后必須進(jìn)行清場(chǎng)，并填寫記錄。

13.標(biāo)簽，使用說(shuō)明書按品種、規(guī)格專柜（庫(kù)）存放，憑批包裝指令

發(fā)放，專人保管、領(lǐng)用、銷毀、

并有發(fā)放、使用、銷毀記錄。

14.無(wú)菌工作服的式樣和穿戴方式能包蓋全部頭發(fā)，胡須及腳部，并

能阻留人體脫落。

15.分包裝的作用？

（1）保護(hù)內(nèi)裝物：防止劣化變質(zhì)，防止破損，防止浸入或泄漏

（2）方便使用：?jiǎn)卧b，多劑量包裝，組合包裝

（3）構(gòu)成商品，促進(jìn)銷售：一個(gè)獨(dú)立的包裝，都有具體的品名、規(guī)

格、批號(hào)、生產(chǎn)日期、有

效期以及生產(chǎn)廠家的封口保證。

（4）物流合理化

16.潔凈區(qū)（室）的布置：人、物流通道分開，保證生產(chǎn)安全，應(yīng)有

2~8℃冷庫(kù)和-25C以下低溫

冰箱等。

第六章安全防護(hù)技術(shù)

1.什么是化學(xué)危險(xiǎn)品？

凡是具有燃燒、爆炸、毒害、腐蝕、放射等危險(xiǎn)性，并在一定條件下

能引起燃燒、爆炸、

導(dǎo)致人體中毒、灼傷、死亡等事故和財(cái)產(chǎn)受損毀的化學(xué)物品均稱為化

學(xué)危險(xiǎn)品。

2.化學(xué)危險(xiǎn)品的種類：世界上有化學(xué)危險(xiǎn)品約6000多種，其中用途

廣泛的有2000多種。

3.化學(xué)危險(xiǎn)品的分類：我國(guó)分為十大類：爆炸品、易燃液體、自燃

物品、遇水燃燒物品、易燃固體、壓縮氣體和液化氣體、氧化劑、毒害品、

腐蝕物品、放射性物品。

4.鋼瓶剩余壓力的要求：瓶?jī)?nèi)氣體得不用盡，必須留有剩余壓力，

一般不得小于

0.05mPao

5.毒害品有哪些？包括氟化物，氟化鈉等。

6.氫氣與空氣的比例是多少會(huì)發(fā)生爆炸?

當(dāng)兩者之比達(dá)到4.1%~74.1%時(shí);遇到明火就會(huì)發(fā)生爆炸。

7.放射性試驗(yàn)室的配置法？采用三區(qū)配置法：非活性區(qū)，低活性區(qū)，

高活性區(qū)。

8.防護(hù)監(jiān)測(cè)區(qū)的要求：在污染源的周圍，要修出大于50米的防護(hù)監(jiān)

測(cè)區(qū)，作為定期監(jiān)測(cè)環(huán)境污染的范圍。

9.何為外源性感染？

是指病原體來(lái)自感染者體外，包括患者、帶菌者，帶菌動(dòng)物及外界環(huán)

境。

10.何為內(nèi)源性感染？

是指病原體來(lái)自感染者本身，這大多數(shù)為體內(nèi)的正常菌群感染，當(dāng)機(jī)

體免疫功能降低或正6

常菌群平衡失調(diào)時(shí)引發(fā)二重感染。

11.氣溶膠的種類？

生物制品生產(chǎn)中產(chǎn)生的氣溶膠有三種：滴核、干粉和粉塵。

12.何為放射性廢物放置衰變法？

對(duì)半衰期短（T1/2〈30天〉的固體或液體放射性廢物，集中放置大約

10個(gè)半衰，可按一般廢物處理。

13.微生物感染途徑有哪些？

一般的感染途徑有：接觸感染，經(jīng)口感染，動(dòng)物咬、抓傷和昆蟲媒介，

經(jīng)呼吸道吸入。

14.什么是易燃液體？

常溫下液體存在，具有易燃性和揮發(fā)性。閃點(diǎn)在45℃以下的物品是易

燃物品。

15.爆炸的分類：物理性爆炸、化學(xué)性爆炸和混合氣體爆炸。

16.毒物經(jīng)何途徑進(jìn)入人體？

主要經(jīng)呼吸道、皮膚、消化道等途徑進(jìn)入人體，引起毒害。

17.放射源的防護(hù)：X、丫射線可選用鉛、鐵、水泥等作為防護(hù)屏的

材料、8射線可采用鋁、有

機(jī)玻璃塑料等作為防護(hù)屏材料。

18.低濃度的放射氣體和氣溶膠的排放要求：可通過(guò)高出周圍150米

內(nèi)建筑3米以上的排氣煙囪

排入大氣，經(jīng)大氣擴(kuò)散稀釋后，濃度可低于相應(yīng)的限制濃度。

19.如何控制放射源的質(zhì)和量？

在不影響效果的情況下，應(yīng)盡量減少放射源的強(qiáng)度、能量和毒性。

20.呼吸道防護(hù)設(shè)備的類型：有密閉型和寬松型兩種類型。

第七章細(xì)菌類疫苗

1.細(xì)菌性疫苗的定義：用細(xì)菌、螺旋體或其衍生物制成，進(jìn)入人體

后，使機(jī)體自身產(chǎn)生抵抗相應(yīng)

細(xì)菌能力的生物制品，稱為細(xì)菌類疫苗。

2.細(xì)菌性疫苗除了按細(xì)菌名稱、按細(xì)菌組成成份、按細(xì)菌存活狀態(tài)

和按生產(chǎn)工藝進(jìn)行分類，還可

以按給藥方法、按疫苗外觀、按菌株來(lái)源、按菌型數(shù)和按治療疾病的

名稱進(jìn)

行分類。細(xì)菌性疫苗的用途主要用于防止細(xì)菌性傳染病的發(fā)生和流行。

細(xì)菌

性疫苗生產(chǎn)中加入適當(dāng)佐劑，其優(yōu)點(diǎn)在于注射次數(shù)少，劑量小，可增

強(qiáng)疫苗

的免疫原性，且接種反應(yīng)輕微，佐劑種類很多，國(guó)內(nèi)主要使用AI(0H)3

3.工作種子批：有一定數(shù)量的來(lái)自主種子批經(jīng)傳代、擴(kuò)增獲得的菌

株，其生物學(xué)特征應(yīng)于原始種

子批一致。工作種子批用于生產(chǎn)疫苗。

4.百日咳菌可分四種相變，I相菌毒力最強(qiáng)，有免疫原性，IV相菌

毒力消失，無(wú)免疫原性。根據(jù)

百日咳菌主要的凝集因子可將I相菌分為1、2、3,1、2和1、3三

個(gè)血清型。百日咳菌種從啟開，接種于改良包-姜氏或活性炭半綜合培養(yǎng)基

上，于35-37°。培養(yǎng)不超過(guò)72小時(shí)。經(jīng)過(guò)擴(kuò)量轉(zhuǎn)種，最后到用于生產(chǎn)時(shí)不

應(yīng)超過(guò)12代。提取百日咳菌主要保護(hù)性抗原FHA和PT,經(jīng)5%~30%蔗糖

密度梯度離心去除重液的內(nèi)毒素，收集輕液的PT和FHAo收獲之百日咳菌

體混懸于pH7.0-7.4磷酸緩沖溶液中制成原液，采用最終濃度為0.1%甲醛

溶液，放置37℃2~3天殺菌脫毒處理。用于生產(chǎn)百日咳疫苗的菌種，在生

產(chǎn)前需進(jìn)行菌種的檢定，檢定項(xiàng)目有形態(tài)及培養(yǎng)特性、血清學(xué)試驗(yàn)、皮膚

壞死試驗(yàn)、毒力試驗(yàn)和效價(jià)測(cè)定。百日咳用發(fā)酵罐液體培養(yǎng)法生產(chǎn)，收集

菌體的方法有兩種，一種是離心沉淀法，此法可除去游離的毒性物質(zhì)；另

一種是用酸沉淀法，但此法上清夜中毒性物質(zhì)有可能同時(shí)沉出。百日咳菌

的抗原結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，除了有耐熱的菌體0抗原和不耐熱的表面K抗原。

百日咳菌還有25種有抗原性的生物學(xué)活性物質(zhì)，其中百日咳毒素；絲狀

血凝素兩種物質(zhì)是主要的保護(hù)性抗原。提純這兩種免疫原制成百日咳組分

疫苗。

5.A群多糖菌苗的生化檢定項(xiàng)目有蛋白含量測(cè)、核酸含量、磷含量和

氧-乙?；?。多糖抗原為T細(xì)胞不依賴抗原，接種嬰幼兒僅產(chǎn)生LgM

抗體，而不能產(chǎn)生回憶反應(yīng)，亦無(wú)加強(qiáng)應(yīng)答這是多7

糖類疫苗所共存的問(wèn)題。莢膜多糖是分群的物質(zhì)基礎(chǔ)，根據(jù)腦膜炎球

雙菌和肺炎球菌的莢膜多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及免疫學(xué)特征可將腦膜炎球菌分

成13個(gè)血清群;肺炎球菌可分成84個(gè)血清型等，其可分成不同的血清型。

生產(chǎn)A群腦膜炎雙球多糖疫苗用液體培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基配方中不應(yīng)含有與

加入的0.1%十六烷基三甲基溟化錢形成沉淀的成分，亦不應(yīng)含有對(duì)人體有

害成分或其他過(guò)敏物資。

6.A群腦膜炎雙球多糖疫苗生產(chǎn)工藝中去核酸步驟：上清夜中加入十

六烷基三甲基澳化鏤?；靹蚝箅x心收集沉淀物。將十六烷基三甲基溪化鏤

-多糖沉淀物均勻地懸浮于蒸儲(chǔ)水內(nèi)，加等量的2M氯化鈣使十六烷基三

甲基澳化鏤一多糖復(fù)合物分解，攪拌混懸液1小時(shí)，加無(wú)水乙醇至最終濃

度為25%V/V,沉淀核酸和大量可溶性蛋白，靜置3小時(shí),，離心去除沉淀，

保留完全澄清的上清夜。

7.腦膜炎雙球菌多糖疫苗生產(chǎn)工藝中沉淀多糖步驟：在上清夜內(nèi)加

入乙醇至最終濃度為80%V/V沉淀A群多糖，離心收集沉淀。用一定量的

無(wú)水乙醇至少洗三次，去除殘余十六烷基三甲基溟化鏤和氯化鈣，沉淀物

約再用一定量的丙酮洗二次，真空干燥，將粗制多糖保存在-20C以下待進(jìn)

一步精制。

8.聯(lián)合疫苗就是采用多種具有免疫原性的抗原制成多價(jià)疫苗，一次

注射這種疫苗可達(dá)到預(yù)防的目的。

9.生物反應(yīng)器必須具備密封性能良好，可避免一切外來(lái)的不需要的

微生物污染。它的用途是給動(dòng)植物細(xì)胞或微生物的生長(zhǎng)代謝提供一個(gè)最優(yōu)

化的環(huán)境，從而促使其生長(zhǎng)并在其生長(zhǎng)代謝過(guò)程中產(chǎn)生出最大量最優(yōu)質(zhì)的

所需產(chǎn)物。微生物發(fā)酵的生物反應(yīng)器，它主要由如下一些部分組成：罐體、

攪拌系統(tǒng)、加溫和冷卻系統(tǒng)、進(jìn)出氣系統(tǒng)、進(jìn)出液系統(tǒng)、檢測(cè)和控制系統(tǒng)，

管線和接頭也是整套設(shè)備中不可缺少的組成部分。

10.霍亂弧菌的抗原結(jié)構(gòu)和其他革蘭陰性菌類同，都具有熱不穩(wěn)定的

鞭毛抗原和熱穩(wěn)定的菌體抗原?；魜y弧菌菌體抗原即O抗原。鞭毛抗原又

稱H抗原。菌體抗原的脂多糖（LPS）成分具有血清分型意義。

11.結(jié)核桿菌菌體分胞漿和細(xì)胞壁兩部分。現(xiàn)已證明胞漿內(nèi)微粒系核

糖體和核糖酸，是產(chǎn)生免疫的有效成分。胞壁是激發(fā)機(jī)體遲法型變態(tài)反應(yīng)

和抗感染免疫的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是一種良好的免疫佐劑。

12.炭疽桿菌的抗原結(jié)構(gòu)可分為菌體抗原、莢膜抗原和毒素抗原三種。

菌體多糖抗原免疫動(dòng)物不能產(chǎn)生保護(hù)作用。毒素抗原中的保護(hù)性抗原（PA）

組份或PA65片段免疫動(dòng)物均具保護(hù)作用，是炭疽有效的保護(hù)性抗原。

13.半合成培養(yǎng)基由天然有機(jī)物和化學(xué)成份已知的化合物組成。疫苗

生產(chǎn)用培養(yǎng)基要求能使細(xì)菌保持原有的各種特性，能使細(xì)菌擴(kuò)量繁殖，達(dá)

到生產(chǎn)的目的。生產(chǎn)菌種用培養(yǎng)基要求能使細(xì)菌保持原有的各種特性，又

能使菌種達(dá)到長(zhǎng)期保藏的目的。

14.卡介苗是從牛體分離的一株牛型結(jié)核桿菌，對(duì)人有致病力，用加

入牛膽汁的甘油土豆培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)這株結(jié)核桿菌，約每2~3星期傳代一

次，前后共傳代了231代，經(jīng)約13年時(shí)間，終于獲得一株獨(dú)立穩(wěn)定的減

毒株。

15.在微生物培養(yǎng)過(guò)程中需要在線檢測(cè)的主要物化參數(shù)有溫度、溶解

氧濃度、酸堿度、攪拌速度、罐壓和進(jìn)出液流量。

16.目前，百日咳疫苗的培養(yǎng)主要以發(fā)酵罐培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行生產(chǎn)，請(qǐng)以

ApplicomBI01200型為例，

敘述其主要步驟和基本內(nèi)容。

（1）發(fā)酵罐的清潔：物理、化學(xué)方法清洗

（2）培養(yǎng)基的加入和滅菌：一般以120C,滅菌20~30分鐘。

（3）菌種接種：以無(wú)菌操作方式將擴(kuò)量制備的菌種壓入發(fā)酵罐。

（4）培養(yǎng)：培養(yǎng)參數(shù)設(shè)定，溫度36~37℃；通氣總流量100L/min溶

氧10%~15%；pH7.2；

攪拌轉(zhuǎn)速275r/min；培養(yǎng)時(shí)間8~10小時(shí)。

（5）培養(yǎng)過(guò)程中檢測(cè)：細(xì)菌形態(tài)；細(xì)菌濃度；pH值。

17.簡(jiǎn)述多糖疫苗生產(chǎn)通則？

流腦菌大罐液體培養(yǎng)

8

棄去沉淀上清夜+1%0十六烷基三甲基澳化錢

沉淀抗原

沉淀物+0.9MCacl2溶液

解離、離心

沉淀物（初制多糖抗原）棄去上清

抗原抽干

2~3次

上清液棄去沉淀物（蛋白）

透析（除去殘余酚）

萬(wàn)g3小時(shí)

棄去沉淀物

溶解

除菌過(guò)濾

配制原苗

凍干成品

第八章病毒類疫苗

1.疫苗發(fā)展三個(gè)時(shí)期及三次革命？

三個(gè)時(shí)期：古典疫苗時(shí)期；病毒培養(yǎng)疫苗時(shí)期；基因重組疫苗時(shí)期

三次革命：組織培養(yǎng)技術(shù)（第一次）；基因重組技術(shù)（第二次）；核酸

（DNA）疫苗技術(shù)（第三

次）

2.疫苗分類（按理化性狀分類）：

（1）根據(jù)有無(wú)被滅活分為滅活及減毒活疫苗

（2）根據(jù)病毒有無(wú)被裂解分為全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗、

表面抗原疫苗等

（3）按有無(wú)佐劑可分為佐劑疫苗和無(wú)佐劑疫苗

（4）按疫苗的物理狀態(tài)可分為液體疫苗、凍干疫苗等

3.常用病毒培養(yǎng)方法及病毒檢測(cè)方法？

病毒培養(yǎng)方法：細(xì)胞培養(yǎng)法、雞胚培養(yǎng)法、動(dòng)物培養(yǎng)法、

病毒檢測(cè)方法：血清學(xué)方法（中和試驗(yàn)、血凝及血凝抑制試驗(yàn)、補(bǔ)體

結(jié)合實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附9

試驗(yàn)）外源性病毒檢查；活病毒量測(cè)定；滅活病毒效力測(cè)定。

4.疫苗的安全性應(yīng)注意的問(wèn)題？

減毒活疫苗防止毒力返祖；滅活疫苗滅活不徹底，后果嚴(yán)重；污染外

源因子和致敏原的問(wèn)題，檢查十分重要。疫苗種類

活

疫

苗

滅

活

疫

苗優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)L一般僅通過(guò)自然途徑免

疫一次，可產(chǎn)生廣譜L毒株有毒力回升，返祖的危險(xiǎn)的抗體，并具細(xì)胞

免疫作用2.可自然傳播給接觸者2.產(chǎn)生局部的分泌性IgA,有局部免

疫作用。3.可能發(fā)生嚴(yán)重副反應(yīng)4.有污染外源因子或生物活性物質(zhì)之

可能3.免疫持久性長(zhǎng)，可能在局部消除野型病毒5.可因病毒干擾影響

免疫效果6.不易保存，易被熱滅活1.較為安全2.能制備多價(jià)混合疫

苗3.穩(wěn)定，耐熱性相對(duì)較好1.一般需多次接種及加強(qiáng)免疫2.不能誘

生局部抗體，一般無(wú)細(xì)胞免疫作用。3.需要病毒抗原高濃度

6.病毒類疫苗生產(chǎn)對(duì)毒種和細(xì)胞的要求？

毒種要求：必須經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)。主要質(zhì)控項(xiàng)目（鑒別試

驗(yàn)、病毒外源因子檢查、

猴體神經(jīng)毒力試驗(yàn)、免疫原性檢查（抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率或保護(hù)率）

細(xì)胞的要求：原代細(xì)胞、二倍體細(xì)胞、傳代細(xì)胞（一般不能用作疫苗

生產(chǎn)）、細(xì)胞質(zhì)控

7.脊髓灰質(zhì)炎疫苗：屬微小核糖核酸病毒科，單股正鏈RNA,無(wú)外

膜，病毒對(duì)理化因素的抵抗力

較強(qiáng)，對(duì)有機(jī)溶劑不敏感，對(duì)溫度敏感，56℃30分鐘即可滅活，-20C

以下可

保存數(shù)年。Salk首先用猴睪丸或腎組織培養(yǎng)三個(gè)型病毒，經(jīng)甲醛滅活

制成脊髓

灰質(zhì)炎滅活疫苗（IPV）,Sabin通過(guò)猴組織傳代培養(yǎng)和蝕斑篩選方法,

研制出三

個(gè)型的減毒活疫苗（OPV）。我國(guó)是從昆明一4歲女孩分離III型病毒，

用原代猴

腎細(xì)胞和2BS株人二倍體細(xì)胞，劑型是口服糖丸。生產(chǎn)毒種的專項(xiàng)檢

定：家兔

試驗(yàn)（Ret特征與d特征、SV40序列測(cè)定）；病毒原液的專項(xiàng)檢定：

MAPREC

試驗(yàn)、猴體神經(jīng)毒力試驗(yàn)。存在問(wèn)題：服苗后腸道排毒與有關(guān)病例。

發(fā)展趨勢(shì)：

全球基本消滅，主張使用IPV；開發(fā)和使用聯(lián)合疫苗，如DTP-IPV等;

發(fā)展重

組DNA,如三型嵌合減毒活疫苗等。

8.減毒活疫苗的生產(chǎn)工藝流程：

人二倍體細(xì)胞原代細(xì)胞制備

（37℃靜止或轉(zhuǎn)瓶擴(kuò)增傳代）（37℃靜止或轉(zhuǎn)瓶2~3天）

單層細(xì)胞對(duì)照細(xì)胞外源因子檢查

（棄細(xì)胞生長(zhǎng)液）（血吸附試驗(yàn)、觀察細(xì)胞病變）

（30~35℃培養(yǎng)3~5天）

細(xì)胞洗滌、換液

（基礎(chǔ)液洗滌2~3次，30~35℃培養(yǎng)，細(xì)胞病變達(dá)+++以上）

病毒收獲

（釋放性病毒：?jiǎn)纹?次收獲或再換液培養(yǎng)多次收液）

（不易釋放性病毒：消化、收集感染細(xì)胞）

10

病毒釋放及保存

（超聲波或細(xì)胞粉碎機(jī)處理感染細(xì)胞使病毒釋放）

（經(jīng)干冰酒精速凍后置-60C以下保存）

病毒原液合并、澄清無(wú)菌試驗(yàn)、病毒滴定

（單瓶收獲病毒液合并后用0.45~0.6Um濾膜澄清過(guò)濾）

半成品配制無(wú)菌試驗(yàn)

（加入病毒保護(hù)劑或凍干保護(hù)劑）

分裝及凍干

成品檢定鑒別試驗(yàn)、物理檢查、病毒滴定、

熱穩(wěn)定性試驗(yàn)、無(wú)菌試驗(yàn)、水分、

異常毒性試驗(yàn)、牛血清蛋白殘留量

9.麻疹疫苗：副粘液病毒群，為RNA病毒，有6條多肽，呈多形態(tài)

或球形中間是長(zhǎng)形核蛋白，

外圍是脂蛋白，外膜上有兩種糖蛋白表面抗原一血凝素與血溶素。對(duì)

熱不穩(wěn)定，

對(duì)紫外線和有機(jī)溶劑敏感，56℃30分鐘可被滅活，37℃半衰期為2

小時(shí)，4℃

可維持滴度數(shù)周，-60℃以下可保存較長(zhǎng)。國(guó)內(nèi)：滬191株1960年上

海分離，由

原代人胚腎細(xì)胞傳33代，原代人羊膜細(xì)胞傳39代，適應(yīng)到原代雞胚

細(xì)胞5代后，

將培養(yǎng)溫度從37℃降低到31℃至底10代后用于疫苗生產(chǎn)。存在問(wèn)題:

原發(fā)性免

疫與繼發(fā)性免疫失??；發(fā)病年齡后移和小年齡發(fā)?。唤臃N后的神經(jīng)系

統(tǒng)反應(yīng)。發(fā)

展趨勢(shì)：開發(fā)鼻腔接種和氣溶膠疫苗或口服疫苗；使用

聯(lián)合疫苗（MMR）（麻、腮、風(fēng)）和開發(fā)MMRV（麻、腮、風(fēng)、水痘）；

發(fā)展重

組DNA疫苗，如痘苗病毒載體活疫苗。

10.腮腺炎疫苗：屬副粘液病毒，單股DNA,有囊膜，膜上有糖蛋白

構(gòu)成的血凝素、血溶素和神

經(jīng)氨酸酶。僅有一個(gè)抗原型，不耐酸，對(duì)有機(jī)溶劑敏感，對(duì)熱極不穩(wěn)

定，56℃20

分鐘即可滅活，-60℃以下可保存較長(zhǎng)時(shí)間。現(xiàn)國(guó)內(nèi)毒株：S79：1979

年上海生物制

品研究所通過(guò)國(guó)際交往獲得幾株病毒，經(jīng)雞胚細(xì)胞選育建立，1984

年獲國(guó)家批

準(zhǔn)。國(guó)內(nèi)外多用SPF雞胚細(xì)胞。

11.風(fēng)疹疫苗：國(guó)內(nèi)：BRD-H株：北京生物制品研究所上世紀(jì)80年

代分離，經(jīng)人二倍體細(xì)胞（2BS）

低溫（30℃）傳26~30減毒。我國(guó)用2BS株和MRC-5株，靜止或傳瓶

培養(yǎng)多次收獲

病毒液的方法。臨床效果：一次免疫的抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率均＞95%,90%以

上可維持15年。

12.水痘減毒活疫苗：即水痘一帶狀庖疹病毒（VZV）,雙鏈DNA,呈

圓形。最外層為糖蛋白和脂

質(zhì)構(gòu)成的包膜，無(wú)血凝素與血溶素。V-Z極為脆弱，對(duì)溫度、有機(jī)溶

劑及胃蛋

白酶極為敏感。在常溫下易被滅活，-70℃以下較穩(wěn)定，pH＞7.8或＜

6.2/2

易失活。疫苗簡(jiǎn)史：1974年日本首先研制Oka株，1978年比利時(shí)史

克公司用

該株生產(chǎn)疫苗，1981年美國(guó)默克公司開始生產(chǎn)Oka株疫苗，于1995

年3月獲

FDA批準(zhǔn)。上海所于1996年從日本引進(jìn)Oka毒株和生產(chǎn)技術(shù)，2000

年獲得

生產(chǎn)文號(hào)產(chǎn)品上市。Oka株是至今WHO唯一認(rèn)可的。水痘病毒不易

從細(xì)胞內(nèi)

釋放，需收集感染細(xì)胞用超聲波等方法處理釋放病毒。

13.甲型肝炎減毒活疫苗：屬小RNA病毒科，為單股RNA病毒，球

形顆粒，無(wú)脂蛋白外膜，對(duì)

有機(jī)溶劑及理化因子的抵抗力較強(qiáng)，對(duì)紫外線敏感，耐高溫，乙醛和

酸堿，

60℃4小時(shí)不能完全滅活。HAV只有一個(gè)血清型?，F(xiàn)用毒株：H2株:

KMB-17株人二倍體細(xì)胞傳15代；L-A-1株：經(jīng)2BS株人二倍體細(xì)胞傳

11

4代。病毒培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)（最長(zhǎng)28天左右），需收集感染細(xì)胞用凍融或

超聲

波等方法破碎細(xì)胞釋放病毒。

14.乙型腦炎減毒活疫苗：?jiǎn)喂烧淩NA球形病毒，有脂蛋白包膜,

有血凝素，含有中和抗體和

血凝抑制劑反應(yīng)的抗原決定簇，Ph7~9時(shí)穩(wěn)定，加熱56℃30分鐘即被

滅

活，-70℃保存2年，0.2%甲醛也可滅活。毒株是SA14-14-2,地鼠腎

細(xì)胞

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方法。臨床使用：8月齡以上健康兒童，7歲時(shí)加強(qiáng)1齊上

15.乙型腦炎滅活疫苗：毒株是P3強(qiáng)毒株，用地鼠腎細(xì)胞和Vero細(xì)

胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方法。臨床使用：

為減少甲醛引起的疼痛，需加入亞硫酸氫鈉溶液中和甲醛后再進(jìn)行接

種。

存在問(wèn)題：動(dòng)物外源因子問(wèn)題；副反應(yīng)發(fā)生率較高。

16.狂犬病疫苗：屬?gòu)棤畈《究?，為單股?fù)鏈RNA和核蛋白衣殼，有

脂蛋白的包膜，血凝素，在

PH6.4和4℃條件下能凝集鵝紅細(xì)胞。對(duì)紫外線、日光和溫度敏感,56℃

數(shù)10分鐘

即被滅活，pH小于4或大于7.5易使病毒滅活?！敖侄尽笔钳?cè)蚱?/p>

它瘋動(dòng)物發(fā)病

時(shí)，存在于痰液內(nèi)及神經(jīng)系統(tǒng)中的天然狂犬病毒。“固定毒”是由“街

毒”通過(guò)家

兔腦內(nèi)生長(zhǎng)而對(duì)家兔的潛伏期固定于一定天數(shù)的減毒株。簡(jiǎn)史：上世

紀(jì)50年代開

始，研制未經(jīng)純化的雞胚或鴨胚疫苗；60年代末原代地鼠腎細(xì)胞滅活

疫苗；70年

代中期，研制人二倍體細(xì)胞培養(yǎng)，1977年WHO推薦使用；80年代出

現(xiàn)用其他細(xì)

胞培養(yǎng)，研究出Vero細(xì)胞純化疫苗；2001年10月，國(guó)家又規(guī)定必須

生產(chǎn)純化疫

苗，我國(guó)生產(chǎn)兩種細(xì)胞基質(zhì)的純化疫苗，即地鼠腎細(xì)胞和Vero細(xì)胞純

化疫苗。四

種類型：人二倍體細(xì)胞、Vero細(xì)胞、原代地鼠腎細(xì)胞、原代雞胚細(xì)胞。

17.流行性感冒疫苗：甲、乙、丙三個(gè)型。甲型以流行形式出現(xiàn)，乙

型局部爆發(fā)，丙型以散在病例

形式出現(xiàn)。多發(fā)性流行，病毒易變異（抗原轉(zhuǎn)變、抗原漂移），乙型

與丙型毒

株僅有抗原性漂移。毒株是根據(jù)每年2月底WHO國(guó)際流感合作中心

確認(rèn)的流

行毒株型別，通常為三株即甲1型、甲3型和乙型。培養(yǎng)方法：雞胚

培養(yǎng)收集

尿囊液病毒，經(jīng)純化或裂解純化，甲醛滅活制成純化全病毒疫苗（不

能去除病

毒的脂質(zhì)體成分）、裂解純化疫苗（去除了病毒脂質(zhì)體成分，保留病

毒的HA、

NA和內(nèi)部抗原，免疫效果及反應(yīng)性均較好）或亞單位疫苗（免疫效

果不如全

病毒疫苗裂和解純化疫苗）。發(fā)展趨勢(shì)：細(xì)胞培養(yǎng)疫苗、開發(fā)減毒活

疫苗、開

發(fā)氣霧或鼻用途徑疫苗、開發(fā)新型佐劑、開發(fā)DNA疫苗。

18.乙型肝炎疫苗：為環(huán)狀雙鏈DNA,HBV有三種抗原一抗體系統(tǒng),

即HBSAg-抗HBS；HBeAg-

抗HBe；HBcAg-抗HBc；抗HBS具主要保護(hù)作用。三種抗原表達(dá)系統(tǒng)：

酵母系

統(tǒng)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)及痘苗病毒載體系統(tǒng)。發(fā)展趨勢(shì)：研究多種分

子量HBSAg

亞單位疫苗、開發(fā)新型佐劑疫苗、開發(fā)聯(lián)合疫苗、基因重組可食性植

物疫苗、載

體活疫苗。

19.腎綜合征出血熱疫苗：為單股負(fù)鏈RNA病毒，有包膜，即G1和

G2糖蛋白，復(fù)制時(shí)出現(xiàn)三

種特征性包涵體（顆粒包涵體、絲狀包涵體、顆粒-絲狀包涵體），37℃

以

上易滅活，56C30分鐘可使病毒滅活而仍保留其抗原性，-70℃以下

可長(zhǎng)

時(shí)期保持活性。毒種：我國(guó)I型用Z10株，II型用L99株，沙鼠腎細(xì)

胞

培養(yǎng)生產(chǎn)I型疫苗，用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)H型疫苗，并生產(chǎn)I、II

型雙

價(jià)疫苗。滅活方法：甲醛或丙內(nèi)酯4~8℃過(guò)夜，37℃水解。

20.病毒類新疫苗研究的技術(shù)路線?

傳統(tǒng)疫苗技術(shù)；基因重組疫苗（重組亞單位疫苗、重組活疫苗、基因

缺失活疫苗、核酸可

食性植物疫苗）合成肽疫苗技術(shù)；抗獨(dú)特型抗體疫苗技術(shù)。

第九章類毒素和抗毒素制品

1.細(xì)菌毒素：是指許多致病性細(xì)菌能產(chǎn)生一些毒性物質(zhì)，稱為細(xì)菌

毒素。分為外毒素和內(nèi)毒素。

2.內(nèi)毒素：是菌體細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分，細(xì)菌在生活狀態(tài)時(shí)不能釋放

出來(lái)，只有在細(xì)菌死亡之后菌12

體自溶或用人工方法使細(xì)菌崩解后才能釋放至外界環(huán)境中。

3.外毒素：是指細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中所產(chǎn)生的毒素，可從菌體擴(kuò)散或

自溶后釋放到菌體外者，稱為

外毒素。

4.類毒素：由外毒素經(jīng)甲醛作用及加溫處理去除毒性而仍保留其免

疫原性者稱為類毒素。它是一

種自動(dòng)免疫制劑。

5.脫毒：毒素變成類毒素的過(guò)程稱為脫毒。

6.精制類毒素：將原制類毒素用適宜方法加以提純，或?qū)⒃仆舛?/p>

素提純后再精制，均可制成精

制類毒素。

7.毒性逆轉(zhuǎn)發(fā)生條件：類毒素稀釋，溫度，游離甲醛濃度

8.MLD（最小致死量）：一定時(shí)間內(nèi)殺死全部試驗(yàn)動(dòng)物的最小毒素量。

9.LD50（半數(shù)致死量）：一定時(shí)間內(nèi)殺死半數(shù)試驗(yàn)動(dòng)物的最小毒素量。

10.LF（絮狀反應(yīng)單位）：與一個(gè)國(guó)際單位抗毒素混合后最先出現(xiàn)絮狀

沉淀反應(yīng)的毒素（或類毒素）

量。

11.抗毒素定義：系指用細(xì)菌外毒素或類毒素免疫動(dòng)物取得的免疫血

清。

12.抗毒素種類：是免疫血清的一種。為抗菌、抗病毒和抗毒血清三

大類。

13.類毒素的用途：作為自動(dòng)免疫制劑，制備抗毒素作人工被動(dòng)免疫

制劑。

14.影響脫毒的主要因素：溫度，pH（7.0~7.5）,甲醛濃度，含氮量。

15.類毒素制造重要環(huán)節(jié)：溫度，pH,糖量，氣量，氮源和生長(zhǎng)因子

的補(bǔ)充，培養(yǎng)時(shí)間。

16.影響免疫血清（漿）效價(jià)因素：為獲抗毒效價(jià)高的免疫血清（漿），

馬匹，免疫原（外毒素或

類毒素）及免疫方法是重要的條件。

17.類毒素生產(chǎn)工藝通則：

精制脫毒

精制毒素

毒素精制類毒素

吸附類毒素

精制類毒素加佐劑

脫毒精制

18.衡量抗毒素精制效果優(yōu)劣主要指標(biāo):

（1）純凈度

（2）提純系數(shù)（通稱R植，即精制品每克蛋白所含單位數(shù)與原血漿

每克蛋白所含單位數(shù)的比

值）

（3）收獲率（精制品總單位數(shù)與原血漿總單位的比值（％）

第十章血液制品

1.血液制品是指哪一類制品？

血液制品是由健康人的血漿或特異免疫人血漿分離、提純或由重組

DNA技術(shù)制成的血漿

蛋白組份或血細(xì)胞組份制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血

因子（天然或重組）、紅細(xì)胞濃縮物等，用于診斷、治療或被動(dòng)免疫預(yù)防。

2.為保證血液制品無(wú)傳播病毒疾病的危險(xiǎn)，對(duì)每一份血漿應(yīng)作哪些

病毒的檢測(cè)？

（1）丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）：用賴氏法檢測(cè)應(yīng)不高與25U

（2）乙肝表面抗原（HbsAg）：陰性

（3）血清電泳：白蛋白含量應(yīng)不低于血漿蛋白總量的50%,電泳圖

譜正常

（4）梅毒：應(yīng)為陰性

（5）HIV-1/HIV-2抗體:應(yīng)為陰性

（6）HCV抗體：應(yīng)為陰性

3.根據(jù)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)常用蛋白質(zhì)分離方法分為幾種類型?

蛋白質(zhì)分離方法大致可分以下幾類:

13

（1）根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同，即按蛋白質(zhì)親水性和疏水性的差異，

進(jìn)行分離的方法。包括鹽析

法、有機(jī)溶劑法、疏水層析法、等電點(diǎn)沉淀法

（2）根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小、形狀和密度差異進(jìn)行分離的方法。有凝

膠過(guò)濾層析法（分子篩）、

透析法、超濾法、離心和超離心法等。

（3）根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電性的不同進(jìn)行分離。如離子交換層析法、制

備電泳等

（4）根據(jù)蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)中的特定位電與某種特定配體的特異親和

力進(jìn)行分離，這種方法叫親

和層析法。

4.在低溫乙醇法中，稱之為“五變系統(tǒng)”的哪五個(gè)重要差數(shù)，在實(shí)

際應(yīng)用中作用？

影響蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)的因素主要有五個(gè)，稱為“五變系統(tǒng)二pH、乙

醇、濃度、溫度、蛋

白濃度、離子強(qiáng)度。Cohn6法用于分離白蛋白，Cohn9接Cohn6法用

于提制免疫球蛋白。在實(shí)際應(yīng)用中的作用是簡(jiǎn)化了操作，縮短了生產(chǎn)周

期。

5.血源性病毒的基本性質(zhì)及其危害性？

病毒大小脂包膜基因組疾病

HBV42+DNA乙肝

HCV

HDV

HIV-1

HIV-2

HTLV

PVB19

HAV

CMV30-6028~3980~10010090~14018~2627~32200+++++——+

RNARNARNARNARNADNADNADNA丙肝丁肝AIDSAIDS成人T淋巴細(xì)

胞白血病可引起暫時(shí)性病毒血癥甲肝巨細(xì)胞病毒減毒染

血癥

6.主要血液制品的品種及臨床用途?

名稱用途

白蛋白休克、低蛋白血癥、腦水腫、

胸腹水

免疫球蛋白

肌注免疫球蛋白預(yù)防某些傳染病

靜注免疫球蛋白預(yù)防或治療感染癥、免疫缺陷性

疾病

組胺免疫球蛋白支氣管哮喘、過(guò)敏癥

特異性免疫球蛋白預(yù)防和治療相應(yīng)傳染病、感染

癥

纖維蛋白原制劑低纖維蛋白血癥

纖維蛋白粘合劑局部止血、組織修補(bǔ)、軟

骨粘連

因子vin制劑A種血友病

凝血酶原復(fù)合物（PCC）因子n、vn、ix、x缺乏

癥

因子IX制劑B種血友病

凝血酶制劑外科局部及上消化道止

血

因子xin制劑因子xin缺乏癥

抗凝血酶m制劑彌散性血管內(nèi)凝血

癥

纖維蛋白溶酶原制劑血栓、新生兒纖維

肺

纖維結(jié)合蛋白制劑庖疹性角膜炎及潰

瘍

C1酯酶抑制劑遺傳性血管神經(jīng)水

腫

a1-抗胰蛋白酶制劑某些肺氣腫、急性

肺損傷

a1-巨球蛋白酶制劑放射性損傷及潰瘍

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轉(zhuǎn)鐵蛋白制劑低轉(zhuǎn)鐵蛋白癥

7.常用的病毒滅活/去除技術(shù)有哪些？

病毒檢測(cè)技術(shù)是保證血液制劑安全性的重要環(huán)節(jié)之一。

病毒滅活處理技術(shù)是最理想的方法，普遍采用的加熱法、有機(jī)溶劑/

表面活性劑法、低pH孵放法，還有光化學(xué)法（紫外線+化學(xué)試劑）、加壓

法、酶消化法以及去除病毒的納米過(guò)濾（即膜過(guò)

8.血液制品質(zhì)量控制的基本原則及目的？

血液制品質(zhì)量控制一般應(yīng)從該制劑的安全性、有效性和穩(wěn)定性三方面

考慮。9.血漿蛋白的精制目的及常用方法？

精制目的是為了控制蛋白制品在一定濃度，除去雜質(zhì)，調(diào)整適當(dāng)?shù)膒H,

經(jīng)除菌過(guò)濾，分裝

凍干并經(jīng)質(zhì)量檢定合格后，方能作為正式制品，提供給臨床用于患者

的治療及疾病預(yù)防。常用方法：脫醇、脫鹽、純化及濃縮常用

方法；配制；除菌過(guò)濾；真空冷凍干燥；離心機(jī)

及超濾技術(shù)。

第十一章基因工程產(chǎn)品

1.基因工程的概念和一般步驟有哪些？

所謂基因工程是指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)粒等載體分子，構(gòu)

成遺傳物質(zhì)新組合，

并使之轉(zhuǎn)入到原先沒有這類分子的宿主細(xì)胞內(nèi)，且能持續(xù)穩(wěn)定地復(fù)制

和表達(dá)。步驟:

（1）從復(fù)雜的生物有機(jī)體基因組中經(jīng)酶切消化步驟，分離出帶有目

的基因的DNA片段。

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（2）在體外將外源DNA片段連接到能夠自我復(fù)制并具有選擇記號(hào)的

載體分子上，形成重組

DNA分子。

（3）將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞（宿主細(xì)胞），并隨之一

起擴(kuò)殖。

（4）從大量的細(xì)胞繁殖群體中，篩選出含有重組DNA分子的受體細(xì)

胞克隆，從中提取已經(jīng)

得到的擴(kuò)增的目的基因。

2.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的特點(diǎn)有那些？

三個(gè)基本特征：（1）對(duì)DNA分子雙鏈有特異性識(shí)別序列部位；（2）2

個(gè)單鏈斷裂部位在

DNA分子上的分布，不是彼此直接相對(duì)；（3）斷裂的結(jié)果形成的DNA

片段往往具有互補(bǔ)的單鏈延伸末端--即所謂的粘性末端，這是由Ha型

酶作用的結(jié)果，而H卜型酶酶切后只形成鈍端，不形成粘性末端。

3.什么是質(zhì)粒？其一般的生物學(xué)性質(zhì)有哪些？

質(zhì)粒是一些細(xì)菌的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，是存在于多種細(xì)菌染色體外的遺傳單

位，它們是一類雙鏈、

閉環(huán)的DNA分子，常含有一些特殊編碼的基因。

4.作為外源基因的克隆載體，質(zhì)粒應(yīng)該具有哪些基本特征?

克隆載體的質(zhì)粒必須具有下列基本條件：

(1)具有對(duì)一種或數(shù)種限制酶都存在一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，并在插入外源

DNA及酶切后不影響質(zhì)

粒的復(fù)制。

(2)在限制位點(diǎn)插入外源DNA形成的重組質(zhì)粒，必須能進(jìn)入寄主細(xì)

胞。

(3)必須能夠?yàn)榧闹骷?xì)胞提供易于檢測(cè)的表型形狀作為標(biāo)記，在寄

主細(xì)胞內(nèi)能自我復(fù)制、穩(wěn)

定地遺傳。

(4)具有較低的分子量和較高的拷貝數(shù)，操作起來(lái)簡(jiǎn)單方便。

5.什么叫細(xì)菌轉(zhuǎn)化？

宿主細(xì)胞得到外源的基因，轉(zhuǎn)入DNA的遺傳物質(zhì)，引起遺傳性質(zhì)的轉(zhuǎn)

變。

6.Southernblot的基本原理是什么？

根據(jù)毛細(xì)血管作用的原理，使在電泳凝膠中分離的DNA片段轉(zhuǎn)移并結(jié)

合在適當(dāng)?shù)臑V模上，

然后通過(guò)同DNA或RNA探針的雜交作用檢測(cè)這些被“吸印”的DNA

片段，這種實(shí)驗(yàn)方法稱DNA吸印雜交技術(shù)。由于它是由R.Southern于1975

年首先設(shè)計(jì)出來(lái)的，故又稱為薩瑟恩DNA吸印雜交技術(shù)。

7.作為生產(chǎn)用的工程菌株，需要做哪些方面的檢測(cè)？

作為生產(chǎn)用的工程菌株，需要做以下方面的檢測(cè)：

(1)工程菌種的必要檢定：質(zhì)粒圖譜(酶切圖譜)；電鏡檢查；對(duì)各

代工程菌的其他檢測(cè)項(xiàng)目

（劃種平板、涂片革蘭染色、抗生素抗性、生化反應(yīng)等均需與原代

一致）

（2）表達(dá)產(chǎn)物的檢定：免疫印跡法；表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列分析；

表達(dá)產(chǎn)

物的功能分析；其他。

（3）工程菌種的歷史（4）工程菌種的性質(zhì)（5）文字記

錄文件

（6）工程菌的穩(wěn)定性

8.高密度發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)注意哪些問(wèn)題？

高密度發(fā)酵過(guò)程一般可以在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期工程菌的表達(dá)逐漸達(dá)到最佳

平臺(tái)期。

9.常用于蛋白分離的層析技術(shù)有哪些？其基本原理是什么/

蛋白分離的層析技術(shù)有凝膠過(guò)濾：其原理是利用分子大小進(jìn)行分離;

離子交換法：其原理是在不溶性介質(zhì)上引進(jìn)帶電基團(tuán)（酯化、氧化、酸化）

形成不同介質(zhì)；疏水層析：其原理是在介質(zhì)表面引進(jìn)有疏水作用的基團(tuán),

如短鏈烷基、聚酸、苯基等，使表面含有疏水基團(tuán)的目的蛋白與之作用而

吸附上去，起到分離純化的目的；親和層析：其原理是利用生物大分子的

特異性（如抗原性），可以與另外一些物質(zhì)（如抗體）進(jìn)行專一性的可逆

結(jié)合進(jìn)行層析；徑向?qū)游觯浩湓硎怯芍芗皩游鼋橘|(zhì)組成，液體在柱內(nèi)

的流向是從柱的一端流向另一端。

16

10.制訂基因工程純化工藝時(shí)要注意哪些問(wèn)題？

（1）純度應(yīng)盡可能高（2）收獲率盡可能高（3）投資盡可能

少

（4）工藝路線盡可能簡(jiǎn)短（5）注意提高經(jīng)濟(jì)效益

第十二章診斷試劑

1.簡(jiǎn)述診斷試劑的意義及在防治疾病中起什么作用？

診斷試劑是檢測(cè)相關(guān)抗原、抗體或機(jī)體免疫狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)診斷制劑。主

要

在防治疾病中起“探針”作用。

2.診斷試劑在首要質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是什么？

都有其嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

（1）靈敏度：表示該試劑具有檢測(cè)出最低量被檢物質(zhì)的能力，是診

斷試劑的首要診斷試劑

（2）特異性（3）精密性（4）準(zhǔn)確性（5）穩(wěn)定性（6）安全性

（7）簡(jiǎn)易性

3.診斷試劑生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)如何進(jìn)行？

診斷試劑生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)從生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行，原材料和半成品、

成品的質(zhì)量控制等。

4.要保證試劑質(zhì)量的一致性，必須進(jìn)行那些工作？特別注意那些問(wèn)

題？

要保證試劑質(zhì)量的一致性，必須進(jìn)行全面質(zhì)量管理和控制，特別注意

試劑的批內(nèi)差異和批間差異。

5.什么叫標(biāo)準(zhǔn)品，它有什么作用？

標(biāo)準(zhǔn)品是一種參比對(duì)照品，它的應(yīng)用可以使試劑具有統(tǒng)一的靈敏度和

特異性。

6.WHO的GMP規(guī)范，對(duì)診斷試劑如何定位？

根據(jù)WHO的GMP規(guī)范，診斷試劑可用于人或獸的疾病檢測(cè)，屬于藥

品范疇。

7.試劑生產(chǎn)過(guò)程中要考慮符合什么規(guī)范與什么要求？

試劑生產(chǎn)過(guò)程中必須遵循藥品生產(chǎn)規(guī)范，其生產(chǎn)過(guò)程中包括人員、廠

房、設(shè)備、原材料、

生產(chǎn)操作、環(huán)境衛(wèi)生等都應(yīng)符合藥品生產(chǎn)管理規(guī)范及各診斷試劑的質(zhì)

檢規(guī)程的要求。

8.簡(jiǎn)述臨床化學(xué)試劑中，質(zhì)控物與標(biāo)準(zhǔn)品的性質(zhì)？

臨床化學(xué)試劑是一類用來(lái)測(cè)定人體的某些體液和排泄物中一些化學(xué)

成分以及酶含量，藉以觀