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第一章緒論一、動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(一)動物組織學(xué)的概念和研究內(nèi)容1、概念:研究動物(主要是家畜和家禽)機體微細結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué),亦稱微視解剖學(xué)。2、微細結(jié)構(gòu)的涵義:光鏡或電鏡下所顯示的結(jié)構(gòu),分為顯微結(jié)構(gòu)與超微結(jié)構(gòu):⑴、顯微結(jié)構(gòu)(光鏡結(jié)構(gòu))放大倍數(shù):幾十至幾千倍最高分辨率:0.2微米常用計量單位:微米動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容⑵、超微結(jié)構(gòu)(電鏡結(jié)構(gòu))

放大倍數(shù):幾千至幾萬倍,甚至幾十萬至幾百萬倍

最高分辨率:0.2納米

常用計量單位:納米3、研究內(nèi)容:(1)細胞學(xué):細胞為研究對象,細胞是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。(2)組織:一些形態(tài)相似和功能相關(guān)的細胞群和細胞間質(zhì)構(gòu)成組織。按其形態(tài)、功能和發(fā)生,分為上皮組織、結(jié)締組織、肌組織和神經(jīng)組織四大基本組織。(3)器官:幾種不同組織按一定規(guī)律組合成一定形狀并執(zhí)行特定生理功能的結(jié)構(gòu)。如腦、肝、脾、肺等。(4)系統(tǒng):由功能密切相關(guān)的器官組成,動物機體有十大功能系統(tǒng)。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(二)動物胚胎學(xué)的概念與研究內(nèi)容1、概念:研究動物個體發(fā)生及發(fā)育規(guī)律的科學(xué)。2、研究內(nèi)容胚前發(fā)育:兩性生殖細胞的發(fā)生與結(jié)構(gòu)。胚胎發(fā)育:從受精至胎兒娩出的過程。胚后發(fā)育:動物出生后的生長發(fā)育直至性成熟的過程。二、動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法(一)固定組織研究法把組織或胚胎標(biāo)本經(jīng)化學(xué)處理,使其中蛋白質(zhì)等成分迅速凝固且保持生活狀態(tài)的形態(tài)結(jié)構(gòu),然后進行觀察。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容1、組織學(xué)制片技術(shù):組織學(xué)最基本和經(jīng)常使用的技術(shù)。(1)切片法:在切片機上把組織切成薄片。常用的有石蠟切片,冰凍、火棉膠及超薄切片(2)非切片法:有涂片(血液、骨髓、精液)、磨片(骨)、鋪片(疏松結(jié)締組織)和裝片(雞胚)等。

2、組織化學(xué)技術(shù):包括細胞化學(xué)技術(shù),指通過化學(xué)或物理反應(yīng)形成有色的沉淀來顯示組織細胞內(nèi)的化學(xué)成分。

3、免疫組織化學(xué)技術(shù):利用特異性的抗原抗體反應(yīng)來研究組織或細胞內(nèi)所含抗原物質(zhì)的定位和定量技術(shù)。

4、顯微放射自顯影術(shù):亦稱同位素示蹤術(shù),指應(yīng)用某種具放射性的同位素標(biāo)記物,注入動物體內(nèi)或加入細胞的培養(yǎng)基內(nèi),該物質(zhì)被細胞攝取后,將組織或細胞制成切片或涂片進行觀察。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(二)活體組織研究法1、組織培養(yǎng)術(shù):亦稱體外實驗,是把離體的活細胞、組織甚至器官放入培養(yǎng)液中,在無菌條件下生長,觀察其形態(tài)變化。克?。╟lone):在培養(yǎng)皿內(nèi)分離出的單個細胞進行培養(yǎng)后可獲得由單細胞繁殖的純細胞株,稱為克隆。2、活體染色:把染料(無毒或毒性很小)注入活體動物體內(nèi),在體內(nèi)被一些細胞攝取后,處死動物后制成切片,觀察染色情況,可研究細胞的吞噬功能及分布情況。3、細胞融合:應(yīng)用人工方法將兩個或兩個以上的細胞合并成一個新細胞的技術(shù)。可培育出新的動物雜交品種,具有非常廣闊的應(yīng)用前景。4、細胞電泳:在顯微鏡下觀察細胞在電場作用下泳動速度。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(三)顯微鏡1、光學(xué)顯微鏡(lightmicroscope,LM)(1)生物顯微鏡:組織學(xué)中最常用的觀察工具。(2)熒光顯微鏡:用來觀察組織細胞中的熒光物質(zhì)。(3)相差顯微鏡:多用于觀察活細胞的各種形態(tài)。(4)暗視野顯微鏡:觀察胞核、線粒體、纖毛的運動等。(5)偏光顯微鏡:某些組織細胞由于微細結(jié)構(gòu)的不同,當(dāng)光線通過標(biāo)本時,光速和折射率會發(fā)生改變的特性制作的。(6)共聚焦激光掃描顯微鏡:是種新型的高光敏度、高分辨率的生物顯微鏡,以激光為光源,采用共聚焦成像系統(tǒng)和電子光學(xué)系統(tǒng),可使樣品內(nèi)任何一點的反射光形成的圖像都被準(zhǔn)確地接受下來并產(chǎn)生信號,傳遞到彩色顯示器上,再連接到微機圖象分析系統(tǒng)進行分析處理。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容2、電子顯微鏡(electronmicroscope,EM)

(1)、透射電子顯微鏡:光源為電子流,用電子槍將電子束穿透標(biāo)本,投射到熒光屏上出現(xiàn)黑白反差的結(jié)構(gòu)圖像,呈現(xiàn)深色的結(jié)構(gòu)電子密度高,反之電子密度低。分辨率達0.2nm。(2)、掃描電子顯微鏡:特點是視場大,景深長,樣品制作比較簡單,在熒光屏上掃描成像,呈現(xiàn)立體感強的表面圖象,能顯示三維的超微結(jié)構(gòu)。缺點是不能見到組織細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。分辨率為5~7nm。(3)超高壓電子顯微鏡:電壓在500Kv以上,電子束可穿透較厚的切片,用于觀察和研究細胞內(nèi)部的立體超微結(jié)構(gòu)。(四)胚胎學(xué)技術(shù)1、描述胚胎學(xué):應(yīng)用組織學(xué)和解剖學(xué)的方法觀察胚胎發(fā)育的形態(tài)演變過程,是胚胎學(xué)的基本內(nèi)容。2、比較胚胎學(xué):比較不同種系動物的胚胎發(fā)育。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容3、實驗胚胎學(xué):對胚胎或體外培養(yǎng)的胚胎組織給予理化因素刺激,或施加顯微手術(shù),觀察其對胚胎發(fā)育的影響。4、化學(xué)胚胎學(xué):應(yīng)用化學(xué)與生化技術(shù)揭示胚胎生長發(fā)育過程中諸多化學(xué)物質(zhì)的質(zhì)與量的變化及代謝過程。5、分子胚胎學(xué):用分子生物學(xué)的理論和方法探索胚胎發(fā)生過程中基因表達的時間順序,空間分布與調(diào)控因素,研究基因表達產(chǎn)物—蛋白質(zhì),從根本上闡明胚胎發(fā)育的分子過程和機理。6、生殖工程學(xué):人工介入早期生殖過程,獲得人們期望的新生個體。主要技術(shù)有體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植、卵質(zhì)內(nèi)單精子或細胞核注射、配子和胚胎凍存等。試管嬰兒和克隆動物是該領(lǐng)域中最著名的成就。胚胎學(xué)是門豐富多彩的學(xué)科,具有重要的理論意義和實用價值,“是一門充滿魅力的學(xué)科”。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容三、動物組織學(xué)與胚胎學(xué)在動科專業(yè)中的地位本課程是重要的專業(yè)基礎(chǔ)課,是在動物學(xué)、解剖學(xué)的基礎(chǔ)上進一步深入研究機體的微觀結(jié)構(gòu),為學(xué)習(xí)生理學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)、臨床診斷學(xué)及免疫學(xué)等打下必要的基礎(chǔ),是動物科學(xué)專業(yè)知識結(jié)構(gòu)的重要基石。四、動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)方法

1、形態(tài)聯(lián)系功能

2、平面聯(lián)系立體

3、靜態(tài)聯(lián)系動態(tài)

4、理論聯(lián)系實際

5、共性聯(lián)系個性動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容五、組織學(xué)常用的染色方法

1、嗜酸性:組織細胞內(nèi)堿性物質(zhì)與酸性染料(如伊紅)有較強的親和力,染色結(jié)果為紅色。

2、嗜堿性:組織細胞內(nèi)酸性物質(zhì)與堿性染料(如蘇木素)有較強的親和力,染色結(jié)果為藍色。

3、異染性:有些組織細胞的結(jié)構(gòu)染色時會呈現(xiàn)與染料完全不同的顏色。

4、HE染色:即蘇木精·伊紅染色,簡稱HE染色,是最經(jīng)典和最常用的染色方法。有關(guān)HE染色的染色特性有三種:嗜酸性、嗜堿性、嗜中性。

5、銀染法:亦稱鍍銀或銀浸法,是將切片浸于銀鹽(硝酸銀)染料中,使銀鹽沉定在這些結(jié)構(gòu)的表面而顯出黑褐色,其他結(jié)構(gòu)不著色,是顯示神經(jīng)細胞、神經(jīng)纖維和網(wǎng)狀纖維的一種方法。

動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(一)細胞的形態(tài)多種多樣,有球形、方形、梭形、扁平及突起等。細胞的形態(tài)與功能是密切相關(guān)的。(二)細胞的大小差別很大,直徑多為10~20um,小的直徑只有幾微米,如小腦的顆粒細胞(4~5um),大的可達數(shù)厘米,如鳥類的卵細胞。(三)細胞的化學(xué)成分包括蛋白質(zhì)、脂類、糖類、核酸、無機鹽和水分等。第二章細胞學(xué)概論一、細胞的形態(tài)、大小及化學(xué)成分動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容二、細胞的結(jié)構(gòu)與功能光鏡下,分為細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核構(gòu)成的;電鏡下,可分為膜性結(jié)構(gòu)和非膜性結(jié)構(gòu)。膜性結(jié)構(gòu):細胞膜、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、溶酶體、過氧化體和核膜

非膜性結(jié)構(gòu):核糖體、中心粒、微管、微絲、中間絲、核仁、染色質(zhì)(體)(一)細胞膜1、細胞膜的結(jié)構(gòu)細胞膜由蛋白質(zhì)、類脂和少量的糖類組成,厚度6~10nm,在光鏡不能分辨,電鏡下可見三層結(jié)構(gòu),內(nèi)外兩層電子密度高(深暗),中間層電子密度(明亮),通常把具有這樣三層結(jié)構(gòu)的膜稱為單位膜或生物膜。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容2、液態(tài)鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)學(xué)說細胞膜結(jié)構(gòu)以液態(tài)的脂質(zhì)雙層分子為基架,不同分子結(jié)構(gòu)和不同生理功能的蛋白質(zhì)分子(主要是α-螺旋或球形蛋白)鑲嵌在膜內(nèi)(鑲嵌蛋白),或附著于胞膜的內(nèi)表面(表在蛋白)。糖類分布于細胞的外表面,或與類脂結(jié)合形成糖脂,或與蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白。這種分子結(jié)構(gòu)使細胞膜具有可塑性、流動性及不對稱性等特點。

脂質(zhì)雙分子層:骨架。包括磷脂、糖脂和膽固醇。

鑲嵌蛋白:(70~80%)蛋白質(zhì)分子

表在蛋白:(20~30%)糖類:糖脂;糖蛋白。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容3、細胞膜的功能

(1)界膜作用:維持細胞形態(tài),防止細胞內(nèi)物質(zhì)的流失及有害物質(zhì)的侵入。

(2)物質(zhì)交換:最主要的功能。交換的方式有多種:①被動運輸:物質(zhì)由高濃度向低濃度轉(zhuǎn)運。包括:單純擴散:脂溶性物質(zhì)和中性小分子。易化擴散:有些離子和非脂溶性物質(zhì)需膜蛋白為載體。②主動運輸:由低濃度向高濃度運輸,需消耗能量,依靠載體(鑲嵌蛋白)轉(zhuǎn)運某種離子,如鈣泵、鈉-鉀泵等。③胞吞與胞吐:細胞攝取或釋放大分子或顆粒物質(zhì)的方式,包裹胞外物質(zhì)攝入細胞內(nèi)為胞吞;把胞內(nèi)物質(zhì)以小泡的方式排出胞外為胞吐。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(3)調(diào)節(jié)代謝:細胞膜的某些蛋白是特殊的酶或受體,調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的某種代謝活動。如肝細胞膜上的β受體接受腎上腺素的信號,引起細胞內(nèi)的糖原分解為葡萄糖。(4)信息傳遞與細胞識別:有些膜蛋白是特異性受體,可以與激素、藥物、抗原、神經(jīng)遞質(zhì)等結(jié)合來傳遞信息,或可對同種和異種細胞、自己和異己物質(zhì)進行鑒別。如中性粒細胞可識別細菌;淋巴細胞可識別、排斥異體細胞。此外,細胞膜還參與細胞的運動、細胞分化、傳導(dǎo)沖動及保護等功能活動。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容(二)細胞質(zhì)1、胞基質(zhì)細胞質(zhì)中的液體部分,半透明均質(zhì)狀膠體物,主要含蛋白質(zhì)、脂類、糖類、無機鹽、水分和一些可溶性酶。內(nèi)含物有糖原顆粒、脂滴、色素顆粒、分泌顆粒等。2、細胞器細胞質(zhì)中具有特定形態(tài)結(jié)構(gòu),執(zhí)行一定生理功能的成分。光鏡下可見的細胞器只有中心體、線粒體和高爾基復(fù)合體。電鏡下分為膜性細胞器和非膜性細胞器。動物組織學(xué)與胚胎學(xué)的概念及研究內(nèi)容1、線粒體:除成熟的紅細胞,所有細胞內(nèi)均有存在,代謝率越高的細胞數(shù)量越多。光鏡下:呈桿狀或粒狀。電鏡下:兩層單位膜構(gòu)成,外膜光滑,內(nèi)膜內(nèi)折形成線粒體嵴,嵴間為嵴間腔,內(nèi)外膜間為膜間腔。嵴間腔內(nèi)充滿線粒體基質(zhì),含基質(zhì)顆粒,多種酶系統(tǒng)。內(nèi)膜表面還附有許多棒球狀的基粒:由頭、柄和基片三部分組成,一種ATP酶。功能:通過一系列生物氧化反應(yīng),產(chǎn)生大量能量供細胞生命活動需要,故稱為細胞的“供

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