2025屆甘肅省張掖市二中高三3月份第一次模擬考試生物試卷含解析

2025屆甘肅省張掖市二中高三3月份第一次模擬考試生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下圖為部分碳循環(huán)示意圖，下列敘述正確的是()A．圖中由生產(chǎn)者、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ構(gòu)成的食物鏈中，能量流動是單向、逐級遞減的B．生產(chǎn)者為第一營養(yǎng)級，①②⑥⑧之和為生產(chǎn)者固定的總能量C．根瘤菌與豆科植物互利共生時，其生命活動所需的有機碳來自⑥過程D．①⑦⑧過程以CO2的形式進行，②③④⑤⑥過程以有機物的形式進行2．下列有關(guān)實驗的敘述錯誤的是（）A．將雙縮脲試劑加入含有過氧化氫酶的溶液后，溶液呈紫色B．可用同位素32P標記的磷酸鹽標記DNA，以追蹤根尖細胞連續(xù)分裂的過程C．對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù)時，先將蓋玻片放在計數(shù)室上，后將培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣D．顯微鏡下觀察到紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞在質(zhì)壁分離過程中，原生質(zhì)層的紫色不斷加深3．下列有關(guān)蛋白質(zhì)的敘述，錯誤的是（）A．艾滋病病毒的成分有DNA和蛋白質(zhì)外殼B．細胞內(nèi)蛋白質(zhì)水解時通常需要另一種蛋白質(zhì)的催化C．生物膜的功能取決于生物膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量D．糖蛋白、載體蛋白、抗體、淀粉酶都是具有特異性的物質(zhì)4．如圖為某種細胞的結(jié)構(gòu)示意圖，正常生理狀態(tài)下，下列選項中的變化都會在該種細胞中發(fā)生的是（）A．氨基酸→RNA聚合酶；[H]+O2→H20B．葡萄糖→淀粉；H2O→[H]+O2C．氨基酸→胰島素；ATP→ADP+PiD．葡萄糖→丙酮酸；染色質(zhì)→染色體5．海拉細胞不同于正常體細胞，它能夠無數(shù)代分裂下去，下列屬于其根本原因的是（）A．有無限增殖的能力 B．遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變C．容易在組織間轉(zhuǎn)移 D．粘連蛋白很少或缺失6．圖1是裸露巖石上開始的群落演替過程，圖2表示群落演替過程中植物的種數(shù)、植物的個體數(shù)及巖石體積的變化。下列敘述正確的是A．圖1所示的群落演替過程屬于次生演替B．形成頂極群落后，群落在水平方向上表現(xiàn)出垂直結(jié)構(gòu)C．演替過程中植物種類豐富度逐漸增加并趨向穩(wěn)態(tài)D．演替過程中植物的種數(shù)增加導(dǎo)致巖石體積下降7．下列有關(guān)細胞分裂、分化、衰老和凋亡的敘述，錯誤的是（）A．造血干細胞在骨髓中可增殖、分化為B細胞或T細胞B．脫毒苗的培育過程中包含細胞分裂、分化、衰老和凋亡C．細胞凋亡有助于機體維持自身的穩(wěn)定D．細胞衰老發(fā)生在生物體的整個生長發(fā)育過程中8．（10分）兔的白色（M）對黑色（m）為顯性?，F(xiàn)有兩籠兔子，甲籠中是一只白色雌兔和一只白色雄兔，乙籠中是一只白色雌兔和一只黑色雄兔。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A．若M/m位于常染色體上且乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中兩只白色兔的基因型均為MmB．若M/m位于常染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則乙籠中白色兔的基因型為MM或MmC．若M/m位于X染色體上且乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則乙籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為1/2D．若M/m位于X染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則甲籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為3/4二、非選擇題9．（10分）質(zhì)粒A和質(zhì)粒B各自有一個限制酶EcoRI和限制酶BamHI的識別位點，兩種酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端不同。限制酶EcoRI剪切位置旁邊的數(shù)字表示其與限制酶BamHI剪切部位之間的堿基對數(shù)(bp)。在含有質(zhì)粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcoRI和BamHI，令其反應(yīng)充分；然后，向剪切產(chǎn)物中加入DNA連接酶進行反應(yīng)，再將其產(chǎn)物導(dǎo)入大腸桿菌中。（實驗中不考慮：無ori的質(zhì)粒；擁有兩個或以上ori的質(zhì)粒；兩個或以上質(zhì)粒同時進入大腸桿菌；三個或以上DNA片段發(fā)生連接）請回答下列問題：（1）只擁有質(zhì)粒A的大腸桿菌________（填“可以”或“不可以”）在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳元素來源的培養(yǎng)基中生存？說明理由____________。（2）DNA連接酶進行反應(yīng)后，存在________種大小不同的質(zhì)粒，有________種質(zhì)粒使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基中生存。（3）綠色熒光蛋白基因是標記基因一種，標記基因的功能是________。（4）質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌通常要用________處理，其作用是________。10．（14分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。11．（14分）酵母菌是單細胞真菌，在自然界中分布廣泛，在人類的生活和生產(chǎn)中應(yīng)用也很多?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：（1）傳統(tǒng)做米酒的操作中沒有進行嚴格的滅菌處理，但米酒井沒有被雜菌污染而腐敗，原因是在____________環(huán)境條件下酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無法適應(yīng)而受抑制：米酒開封后一段時間會變酸，可能的原因是_______。（2）利用酵母菌做出的米酒是做腐乳時鹵湯配制所需原料。鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在12%左右，因為酒含量過高會導(dǎo)致_________，酒含量過低會導(dǎo)致__________。（3）土壤是酵母菌的大本營，人們想從土壤中分離得到純凈的酵母菌，操作過程中要特別注意防止___________。如果還需要統(tǒng)計土壤中酵母菌的含量，應(yīng)該采用的接種方法是_________。（4）科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)酵母菌R能合成胡蘿卜素。若要從酵母菌R中萃取出胡蘿卜素，可以用石油醚作萃取劑，理由是____________（需答出三點理由）。萃取胡蘿卜素時的溫度不能太高，否則會導(dǎo)致_____________。12．三七是一種名貴中藥材，主產(chǎn)地在云南，其成株可高達60cm?？蒲腥藛T測定不同光照強度下三七和云南松光合速率的變化，結(jié)果如下圖。請回答：（1）在A光照強度下，能正常生長的植物是_____________。（2）在B光照強度下，三七植株葉綠體所產(chǎn)生的氧氣量為_____________（）。（3）從環(huán)境資源利用角度分析，可將三七種植在云南松林下的原因是_____________（寫出兩點即可）。（4）與大田種植相比，三七在云南松林下種植較不易發(fā)生病蟲害，其可能的原因是__________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

本題以“部分碳循環(huán)示意圖”為情境，考查學(xué)生對生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)及能量流動等相關(guān)知識的識記和理解能力，以及識圖分析能力。明辨圖示中的數(shù)字所蘊含的生物學(xué)信息，Ⅰ～Ⅳ所示生態(tài)系統(tǒng)的成分，進而對各選項的問題情境進行分析判斷?！驹斀狻繄D中Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ分別表示初級消費者、次級消費者和分解者，由生產(chǎn)者、Ⅱ和Ⅲ構(gòu)成的食物鏈中，能量流動是單向、逐級遞減的，A錯誤；流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量是生產(chǎn)者通過①過程固定的能量，B錯誤；根瘤菌與豆科植物互利共生時，其生命活動所需的有機碳來自①過程，C錯誤；碳由無機環(huán)境進入生物群落的過程①和由生物群落返回無機環(huán)境的過程⑦⑧均以CO2的形式進行，碳在生物群落內(nèi)的流動過程②③④⑤⑥都以有機物的形式進行，D正確。2、D【解析】

1、血細胞計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌計數(shù)時。先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用無菌吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣使其自行滲入并用濾紙吸去多余菌液，再進行觀察計數(shù)。2、把成熟的植物細胞放置在某些對細胞無毒害的物質(zhì)溶液中，當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分子就透過原生質(zhì)層進入到外界溶液中，使原生質(zhì)層和細胞壁都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質(zhì)層就會與細胞壁逐漸分離開來，也就是逐漸發(fā)生了質(zhì)壁分離。當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分子就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中，發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞的整個原生質(zhì)層會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原?！驹斀狻緼、過氧化氫酶是蛋白質(zhì)，將雙縮脲試劑加入過氧化氫酶溶液中，溶液呈紫色，A正確；B、DNA的元素組成是C、H、O、N、P，用同位素32P標記的磷酸鹽標記DNA，以追蹤根尖細胞連續(xù)分裂的過程，B正確；C、用血細胞計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌計數(shù)時，先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，C正確；D、原生質(zhì)層是由細胞膜、液泡膜和兩層膜之間的細胞質(zhì)組成，而紫色存在液泡中，因此在質(zhì)壁分離過程中，液泡的紫色不斷加深，D錯誤。故選D。【點睛】熟知課本上相關(guān)實驗的原理和操作要點以及相關(guān)的實驗步驟是解答本題的關(guān)鍵，血球計數(shù)板的用法是易錯點。3、A【解析】

1、艾滋病是因為感染人類免疫缺陷病毒（HIV）后導(dǎo)致的免疫缺陷病。HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，主要攻擊和破壞的靶細胞為T淋巴細胞，隨著T淋巴細胞的大量死亡，導(dǎo)致人體免疫力降低，病人大多死于其他病原微生物的感染或惡性腫瘤，艾滋病的傳播途徑有：性接觸傳播、血液傳播和母嬰傳播等。2、脂質(zhì)分為脂肪、磷脂和固醇，磷脂是生物膜的主要組成成分之一，磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架。3、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性決定功能多樣性，糖蛋白、載體蛋白、大多數(shù)酶、抗體都是蛋白質(zhì)，幾種蛋白質(zhì)的作用都具有專一性。【詳解】A、艾滋病病毒為RNA病毒，故它的成分有RNA和蛋白質(zhì)外殼，A錯誤；B、細胞內(nèi)蛋白質(zhì)水解時通常需要蛋白酶的催化，蛋白酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，B正確；C、生物膜的成分主要由磷脂和蛋白質(zhì)組成，蛋白質(zhì)是生命活動的承擔者，生物膜功能的復(fù)雜程度主要取決于生物膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量，C正確；D、糖蛋白能特異性識別信息分子，載體蛋白運輸物質(zhì)具有專一性，抗體只能與抗原特異性結(jié)合，淀粉酶能與淀粉特異性結(jié)合，因此這幾種物質(zhì)都具有特異性識別功能，D正確。故選A?！军c睛】本題的知識點是艾滋病的流行與預(yù)防、生物膜的功能，糖蛋白、載體蛋白、抗體的作用特點，對相關(guān)知識的理解與綜合應(yīng)用是解題的關(guān)鍵，D選項的分析是難點，分析時結(jié)合糖蛋白、載體蛋白、抗體、酶發(fā)揮作用的具體過程和特點進行歸納總結(jié)。4、A【解析】

據(jù)圖分析，細胞能分泌胰高血糖素，屬于胰島A細胞。同一生物體的所有體細胞都是由同一個受精卵有絲分裂而來的，含有相同的基因，且每個體細胞都含有該生物全部的遺傳物質(zhì)，但由于細胞分化，即基因發(fā)生的選擇性表達，不同細胞所含的RNA和蛋白質(zhì)種類有所差別?！驹斀狻堪被帷鶵NA聚合酶；[H]+O2→H2O是正常生命活動的代謝基礎(chǔ)，A正確；葡萄糖→淀粉只在部分植物細胞中發(fā)生，H2O→[H]+O2一般是在光合作用中發(fā)生，而該細胞不能進行光合作用，B錯誤；ATP→ADP+Pi表示ATP水解，發(fā)生在所有的活細胞中，但氨基酸→胰島素只有在胰島B細胞中發(fā)生，C錯誤；染色質(zhì)→染色體發(fā)生在具有分裂能力的細胞中，而胰島A細胞屬于高度分化的細胞，不分裂，D錯誤?！军c睛】易錯選項D，染色質(zhì)變?yōu)槿旧w只能在具有分裂能力的細胞中發(fā)生，而題圖細胞表示高度分化的胰島A細胞，不再分裂。5、B【解析】

可是在某些致癌因素的作用下，有的細胞會變得不受控制而無限增殖，這種細胞就是癌細胞。有一種人工培養(yǎng)的細胞叫做海拉細胞，是從一個非洲女子海拉的子宮頸癌組織中分離出來的，這種細胞在體外培養(yǎng)能夠一代一代地傳下去，存活至今，但是這種細胞的染色體已經(jīng)不正常了，已經(jīng)不是原來的細胞了?！驹斀狻緼、海拉細胞具有無限增殖的能力，這是癌細胞的基本特征，A錯誤；B、遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變導(dǎo)致海拉細胞成為無限增殖細胞，故遺傳物質(zhì)改變是其無限增殖的根本原因，B正確；C、由于海拉細胞的細胞膜上的黏連蛋白減少所以容易在組織間轉(zhuǎn)移，但不是無限增殖的原因，C錯誤；D、細胞膜上粘連蛋白很少或缺失是癌細胞容易轉(zhuǎn)移的原因，不是其無限增殖的原因，D錯誤。故選B。6、C【解析】

隨時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程，叫做演替。演替的種類有初生演替和次生演替兩種。初生演替：是指一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替；次生演替：原來有的植被雖然已經(jīng)不存在，但是原來有的土壤基本保留，甚至還保留有植物的種子和其他繁殖體的地方發(fā)生的演替。分析圖示，圖1表示裸露巖石上開始的群落演替過程，屬于初生演替。圖2表示群落演替過程中植物的種數(shù)、植物的個體數(shù)及巖石體積的變化，隨著植物的種數(shù)增加，巖石體積增加?！驹斀狻緼、圖1是裸露巖石上開始的群落演替過程，屬于初生演替，A錯誤；B、形成頂極群落后，群落在垂直方向上有分層現(xiàn)象，表現(xiàn)出垂直結(jié)構(gòu)，B錯誤；C、看圖可知：演替過程中植物種類豐富度逐漸增加并趨向穩(wěn)定，C正確；D、題圖顯示，演替過程中植物的種數(shù)增加時，巖石的體積增大，D錯誤。故選C。7、A【解析】

1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常的生命歷程，對生物體是有利的，而且細胞凋亡貫穿于整個生命歷程。3、衰老細胞的特征：（1）細胞內(nèi)水分減少，細胞萎縮，體積變小，但細胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（2）細胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運輸功能降低；（3）細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。4、癌細胞的主要特征：（1）無限增殖；（2）形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；（3）細胞表面發(fā)生變化，細胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，易轉(zhuǎn)移?！驹斀狻緼、T細胞是在胸腺里分化成熟的，A錯誤；B、脫毒苗的培育過程中包含細胞分裂、分化、衰老和凋亡，B正確；C、細胞凋亡有助于機體維持自身的穩(wěn)定，C正確；D、細胞衰老發(fā)生在生物體的整個生長發(fā)育過程中，D正確。故選A。8、D【解析】

1、若基因在常染色體上，甲籠白色雌兔和白色雄兔的基因型均可表示為M_；乙籠中白色雌兔基因型為M_，黑色雄兔基因型為mm。2、若基因在性染色體上，甲籠白色雌兔的基因型為XMX-，白色雄兔的基因型為XMY；乙籠中白色雌兔基因型為XMX-，黑色雄兔基因型為XmY?！驹斀狻緼、若M/m位于常染色體上，則甲籠兔的基因型為M_，乙籠兔的基因型為M_和mm，若乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中的兩只白色兔子都應(yīng)含有基因m，故其基因型均為Mm，A正確；B、若M/m位于常染色體上，且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則乙籠中的兔子要提供基因M即可，故其基因型可以為Mm，也可以為MM，B正確；C、若M/m位于X染色體上，則甲籠兔的基因型為XMX-和XMY，乙籠兔的基因型為XMX-和XmY，若乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中的白色雌兔應(yīng)含有基因m，其基因型應(yīng)為XMXm，故乙籠中白色雌兔基因型為XMXm的概率為1/2，C正確；D、若M/m位于X染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則甲籠雌兔含乙籠黑兔的Xm，又因其為白色，必含XM，故甲籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為1，D錯誤。故選D?！军c睛】本題考查基因分離定律的實質(zhì)及應(yīng)用，解題關(guān)鍵是根據(jù)甲、乙兩籠兔的表現(xiàn)型、基因的位置和親子代關(guān)系推斷它們的基因型及比例。二、非選擇題9、可以質(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因，使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，還含有半乳糖苷酶基因，使大腸桿菌合成半乳糖苷酶，并水解乳糖獲得能量和碳源42供重組DNA的選擇和鑒定Ca2+使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)【解析】

由圖可知，質(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因和半乳糖苷酶基因，用EcoRI和BamHI酶切后，形成2000bp（含amp）和1000bp(含lac)兩段；質(zhì)粒B含氨芐青霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因和綠色熒光蛋白基因，用EcoRI和BamHI酶切后，形成3000bp（含amp、gfp）和2500bp(含tet)兩段。由題干“兩種酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端不同”可知，酶切后質(zhì)粒自身兩端不能連接?！驹斀狻浚?）由質(zhì)粒A圖可知，只擁有質(zhì)粒A的大腸桿菌可以在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳元素來源的培養(yǎng)基中生存，因為質(zhì)粒A含有氨芐青霉素抗性基因，使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，還含有半乳糖苷酶基因，使大腸桿菌能合成半乳糖苷酶，并水解乳糖獲得能量和碳源。（2）DNA連接酶進行反應(yīng)后，由于實驗中不考慮：無ori的質(zhì)粒；擁有兩個或以上ori的質(zhì)粒；兩個或以上質(zhì)粒同時進入大腸桿菌；三個或以上DNA片段發(fā)生連接，因此可存在4種大小不同的質(zhì)粒，即質(zhì)粒A兩個片段連接3000bp（2000bp+1000bp）、質(zhì)粒A含ori的片段和質(zhì)粒B不含ori的片段連接4500bp(2000bp+2500bp)、質(zhì)粒A不含ori的片段和質(zhì)粒B含ori的片段連接4000bp(1000bp+3000bp)、質(zhì)粒B兩個片段連接5500bp(3000bp+2500bp)，有2種質(zhì)粒使大腸桿菌能夠在含有氨芐青霉素及乳糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基中生存，即質(zhì)粒A兩個片段連接3000bp和質(zhì)粒A不含ori的片段和質(zhì)粒B含ori的片段連接4000bp的質(zhì)粒。（3）標記基因的功能是供重組DNA的選擇和鑒定。（4）質(zhì)粒導(dǎo)入微生物細胞用感受態(tài)細胞法，用Ca2+處理大腸桿菌，增加細胞壁的通透性，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)?！军c睛】答題關(guān)鍵在于掌握DNA重組技術(shù)的基本工具和基因工程的操作順序，將所學(xué)知識與題干信息結(jié)合綜合運用。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體。基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設(shè)置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！军c睛】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運用。11、缺氧和酸性醋酸菌在有氧條件下，將酒和糖轉(zhuǎn)化為醋酸所致腐乳成熟時間延長雜菌污染豆腐腐敗外來雜菌的入侵稀釋涂布平板法沸點高，與水不混溶，能夠充分溶解胡蘿卜素胡蘿卜素分解【解析】

1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?、腐乳制作時，鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右，若酒的含量過低，不足以殺菌，若腐乳的含量過高，則會延長腐乳成熟的時間。3、胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑。萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚?！驹斀狻浚?）