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文檔簡介
2025屆吉林省通化市梅河口第五中學(xué)高考考前提分生物仿真卷考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.已知控制果蠅翅型的基因位于2號染色體上,科研人員用適宜劑量的化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,在子一代發(fā)現(xiàn)了具有卷翅的果蠅,以下說法錯誤的是()A.卷翅性狀的出現(xiàn)是顯性基因突變的結(jié)果B.控制這對性狀的基因的遺傳遵循自由組合定律C.用EMS化學(xué)誘變劑飼喂果蠅不能定向產(chǎn)生卷翅突變體D.若控制翅型基因用A、a表示,則子一代中卷翅果蠅基因型為Aa2.下列關(guān)于冠狀病毒的相關(guān)敘述正確的是()A.冠狀病毒是一種致病性很強的DNA病毒B.抗生素對冠狀病毒具有較強的殺傷作用C.冠狀病毒屬于非細胞生物,不能獨立代謝D.冠狀病毒只感染人體,不能感染其它動物3.下列有關(guān)種群和群落的描述錯誤的是()A.對跳蝻進行種群密度調(diào)查時選擇樣方法B.在“S”型曲線中,種群增長速率持續(xù)增加C.群落演替過程中,物種豐富度不一定增加D.群落的垂直和水平結(jié)構(gòu)利于提高生物對資源的利用率4.下列有關(guān)細胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述,正確的是()A.細胞骨架是由纖維素組成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)B.肝細胞具有識別胰島素的特異性受體C.線粒體是硝化細菌進行有氧呼吸的主要場所D.細胞核是所有活細胞具有的結(jié)構(gòu)5.2019年12月30日,“基因編輯嬰兒”案在深圳市-一審公開宣判。被告人由于對人類胚胎CCR5基因進行定點“編輯”(如改變基因中的部分堿基對),將編輯后的胚胎植入母體誕下一對可免疫艾滋病的雙胞胎女嬰而被判處有期徒刑3年。CCR5基因的表達產(chǎn)物:CCR5蛋白是HIV病毒進入人體T細胞的主要受體之一。下列有關(guān)表述,錯誤的是()A.人體T細胞中有CCR5基因,成熟紅細胞中不含CCR5基因B.對CCR5基因進行“編輯”用到的限制酶可通過基因表達獲得C.編輯胚胎發(fā)育過程中,DNA聚合酶和RNA聚合酶的結(jié)合位點都在DNA上D.一條染色體上的CCR5基因被編輯后,該染色體在減數(shù)分裂中無法與其同源染色體進行聯(lián)會6.科研人員調(diào)查了某種群數(shù)量的動態(tài)變化,首次測得的種群數(shù)量為N0,第t年測得的種群數(shù)量為Nt,如圖表示Nt/N0的值隨時間變化的曲線。下列敘述正確的是()A.N3即為k/2B.圖中a值大于1C.圖中N1/N0代表種群增長速率D.圖中第6年,該種群數(shù)量達到環(huán)境容納量7.下列有關(guān)蛋白質(zhì)的敘述,錯誤的是()A.艾滋病病毒的成分有DNA和蛋白質(zhì)外殼B.細胞內(nèi)蛋白質(zhì)水解時通常需要另一種蛋白質(zhì)的催化C.生物膜的功能取決于生物膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量D.糖蛋白、載體蛋白、抗體、淀粉酶都是具有特異性的物質(zhì)8.(10分)同位素標記法是進行生物學(xué)研究的一項重要技術(shù),下列有關(guān)敘述正確的是()A.可用3H標記亮氨酸來研究性激素的合成與分泌過程B.可用32P標記的胰島素基因作探針來檢測細胞中的胰島素基因是否進行了轉(zhuǎn)錄C.用14C標記CO2來研究暗反應(yīng)中碳的轉(zhuǎn)移途徑為:14CO2→14C5→14C3→14C6H12O6D.在研究DNA復(fù)制方式時只運用了同位素標記法二、非選擇題9.(10分)新型冠狀病毒(COVID–19)感染引起的肺炎是一種新型傳染病。該病毒主要依靠呼吸道飛沫傳播,接觸人體黏膜后進入人體內(nèi)繁殖。請回答下列問題:(1)COVID–19可識別人體部分細胞表面的特異性_______并與之結(jié)合而進入細胞,通過病毒RNA的復(fù)制和翻譯進行繁殖。(2)病毒在人體細胞內(nèi)大量繁殖時,免疫系統(tǒng)中的______細胞與宿主細胞密切接觸進而使其裂解,釋放出病毒。體液中相應(yīng)的______可與該病原體中的抗原結(jié)合,抑制病原體的繁殖并形成沉淀,進而被____細胞消化。(3)控制傳染病的流行有三個基本環(huán)節(jié),隔離患者屬于其中的____環(huán)節(jié)。10.(14分)2019年武漢病毒性肺炎病例被發(fā)現(xiàn),其病原體是一種新型冠狀病毒,2020年2月11日該病毒被世界衛(wèi)生組織命名COVIO-19。完成下列有關(guān)問題:(1)新型冠狀病毒沒有細胞結(jié)構(gòu),必須在________內(nèi)增殖。(2)新型冠狀病毒入侵人體過程中,病毒表面的S蛋白首先與人體細胞膜上ACEⅡ蛋白結(jié)合,這體現(xiàn)細胞膜的________功能,之后該病毒入侵人體細胞。已知新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是+RNA,進入宿主細胞后,首先翻譯出RNA聚合酶,這一過程需要的物質(zhì)有________________________(至少答3種)。(3)新型冠狀病毒入侵細胞后,T細胞增殖分化形成________________,與被病毒入侵的宿主細胞密切接觸,使這些細胞裂解死亡;在肺炎康復(fù)者的血清中存在________,能與新型冠狀病毒的抗原特異性結(jié)合。11.(14分)人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主,肝硬化、肝癌多從乙肝發(fā)展而來。接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。下圖為“乙肝基因工程疫苗”的生產(chǎn)和使用過程。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色,若無該基因,菌落則成白色。(1)過程①需要用到限制酶和_____________酶。根據(jù)質(zhì)粒和目的基因所在DNA上酶切位點的分布情況,如果過程①用一種限制酶應(yīng)選_____________,如果用兩種限制酶應(yīng)選_____________。(2)在該項目中青霉素抗性基因作為_____________基因;目的基因的具體功能是_____________。(3)在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中還應(yīng)額外加入青霉素和X-gal,培養(yǎng)一段時間挑選出_____________(藍色/白色)的菌落進一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。(4)血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液,用高速離心提純血液中的乙肝病毒,之后再滅活,制成乙肝疫苗,具有一定的感染風(fēng)險。用基因工程疫苗接種比血源性疫苗更安全,試從疫苗的結(jié)構(gòu)特點解釋原因:__________________________。12.細胞自噬是指細胞利用溶酶體選擇性清除自身受損、衰老的細胞器,或降解過剩的生物大分子,供細胞回收利用的正常生命過程?;卮鹣铝袉栴}。(1)真核細胞中,構(gòu)成蛋白質(zhì)的多肽鏈錯誤折疊,可能成為細胞自噬的對象,這種蛋白質(zhì)的錯誤折疊過程可能發(fā)生在___________(填細胞器)中。通常,細胞中具有正常生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)需要有正確的氨基酸序列和___________結(jié)構(gòu)。(2)自噬過程主要依賴于溶酶體內(nèi)水解酶的作用,水解酶的最適pH為5,若少量溶酶體破裂,水解酶溢出一般不會損傷細胞結(jié)構(gòu),其原因是______________________。(3)研究發(fā)現(xiàn),細胞內(nèi)的介導(dǎo)分子可結(jié)合過剩的蛋白質(zhì)進入溶酶體,而過剩的蛋白質(zhì)不與介導(dǎo)分子結(jié)合很難進入溶酶體,該現(xiàn)象說明介導(dǎo)分子與溶酶體膜受體蛋白之間存在___________。哺乳動物在冬眠時細胞內(nèi)介導(dǎo)分子明顯增多,從細胞內(nèi)物質(zhì)利用的角度分析,合理的解釋是______________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】
根據(jù)題意,科研人員用適宜劑量的化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,子一代出現(xiàn)卷翅,故推測卷翅的出現(xiàn)是突變的結(jié)果,而基因突變具有低頻性、不定向性、普遍性、多害少利性、隨機性等特點,據(jù)此分?!驹斀狻緼、用化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,子一代出現(xiàn)卷翅,可知是基因突變的結(jié)果,若正常翅是隱性,則雜交后子代仍為正常翅,故正常翅性狀是顯性,卷翅性狀的出現(xiàn)是顯性基因突變的結(jié)果,A正確;B、卷翅與正常翅是一對相對性狀,受一對等位基因控制,符合基因的分離定律,B錯誤;C、基因突變具有不定向性,因此用EMS化學(xué)誘變劑飼喂果蠅導(dǎo)致產(chǎn)生卷翅突變體的過程是不定向的,C正確;D、若控制翅型基因用A、a表示,據(jù)選項A可知,正常翅性狀是顯性,用化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,在子一代發(fā)現(xiàn)了具有卷翅的果蠅,設(shè)aa為正常翅,親本雄果蠅突變?yōu)锳a,則F1中卷翅為Aa,D正確。故選B。2、C【解析】
病毒無細胞結(jié)構(gòu),只含有核酸和蛋白質(zhì),必需寄生在活細胞中才能生存?!驹斀狻緼、冠狀病毒是一種致病性很強的RNA病毒,A錯誤;B、抗生素只對細菌有較強的殺傷作用,對冠狀病毒無殺傷作用,B錯誤;C、冠狀病毒屬于非細胞生物,不能獨立代謝,必需寄生在活細胞中,C正確;D、冠狀病毒可感染包括人在內(nèi)的脊椎動物,D錯誤。故選C。3、B【解析】
1、種群密度:單位空間內(nèi)某種群個體數(shù)量。特點:面積相同,不同物種種群密度不同;同種生物不同條件下種群密度可能不同。
調(diào)查方法:樣方法、標志重捕法。種群數(shù)量變化分為“J”型和“S”型。
2、群落演替:隨著時間的推移,一個群落被另一個群落代替的過程。
主要類型:初生演替和次生演替。
初生演替:是指一個從來沒有被植物覆蓋的地面,或者是原來存在過植被,但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替。
次生演替:原來有的植被雖然已經(jīng)不存在,但是原來有的土壤基本保留,甚至還保留有植物的種子和其他繁殖體的地方發(fā)生的演替。群落的結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)。【詳解】A、對一些活動能力弱,活動范圍小的動物,如跳蝻,可以用樣方法調(diào)查種群密度,A正確;B、在“S”型曲線中,種群增長速率先持續(xù)增加,當(dāng)種群數(shù)量超過K/2值時,種群增長速率開始持續(xù)下降到0,B錯誤;C、群落演替時,物種豐富度一般會增加,若演替時氣候等環(huán)境條件不適宜,也會使豐富度下降,C正確;D、群落呈現(xiàn)的垂直結(jié)構(gòu)、水平結(jié)構(gòu)利于提高生物對光、土壤等資源的利用,D正確。故選B。【點睛】1、人類的活動會改變?nèi)郝溲萏娴乃俣群头较颉?、群落的垂直結(jié)構(gòu)有分層現(xiàn)象,水平結(jié)構(gòu)呈鑲嵌分布。4、B【解析】
1、細胞骨架是由蛋白質(zhì)纖維搭建起的骨架網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),細胞骨架與細胞運動、分裂、分化以及物質(zhì)運輸、能量轉(zhuǎn)換、信息傳遞等生命活動有關(guān),而且能維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性。2、原核細胞沒有由核膜包被的典型的細胞核,只有核糖體一種細胞器;真核細胞有由核膜包被的典型的細胞核,有多種功能不同的細胞器?!驹斀狻緼、細胞骨架是由蛋白質(zhì)纖維搭建起的骨架網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),A錯誤;B、胰島素可以促進肝糖原分解為葡萄糖,肝細胞的細胞膜上有胰島素的特異性受體,B正確;C、硝化細菌為原核細胞,無線粒體,C錯誤;D、原核細胞沒有由核膜包被的細胞核,并非所有的真核細胞都有細胞核,如哺乳動物成熟的紅細胞,D錯誤。故選B。【點睛】本題考查細胞的結(jié)構(gòu)和功能,意在考查考生的識記能力和理解判斷能力。5、D【解析】
1、HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,其遺傳物質(zhì)是DNA,其侵染T細胞時,需要先以RNA為模板合成DNA,DNA再整合到人體的染色體中。2、基因編輯技術(shù)是一種精準改變目標DNA序列的技術(shù),其原理是使基因發(fā)生定向突變。3、(1)基因的表達即基因控制蛋白質(zhì)的合成過程包括兩個階段:基因是通過控制氨基酸的排列順序控制蛋白質(zhì)合成的。整個過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個主要階段。(2)轉(zhuǎn)錄:轉(zhuǎn)錄是指以DNA的一條鏈為模板,按照堿基互補配對原則,合成RNA的過程。(3)翻譯:翻譯是指以mRNA為模板,合成具有一定氨基酸排列順序的蛋白質(zhì)的過程?!驹斀狻緼、人體T細胞中有CCR5基因,而且表達出CCR5蛋白,成熟紅細胞中不含細胞核,不含CCR5基因,A正確;B、對CCR5基因進行“編輯”改變目標DNA序列的技術(shù),用到的限制酶和DNA連接酶,限制酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),需要通過基因表達獲得,B正確;C、DNA復(fù)制需要DNA聚合酶,轉(zhuǎn)錄需要RNA聚合酶,而兩者的模板都是DNA,說明DNA聚合酶和RNA聚合酶的結(jié)合位點都在DNA上,C正確;D、一條染色體上的CCR5基因被編輯改變基因中的部分堿基對,形成等位基因,并沒有改變?nèi)旧w的形態(tài)和數(shù)目,該染色體在減數(shù)分裂中與其同源染色體依然能進行聯(lián)會,D錯誤。故選D。6、D【解析】
解答此類問題的關(guān)鍵是抓住Nt/N0值的內(nèi)涵,即:Nt/N0=1時,該種群的數(shù)量不變,Nt/N0>1時,該種群的數(shù)量增加。在此基礎(chǔ)上,分析曲線圖中橫、縱坐標的含義以及曲線的變化趨勢,運用所學(xué)的知識加以分析合理的解釋各種情境下的曲線含義,在解題的過程中就可以有效處理,得到答案?!驹斀狻緼、k/2為ab/2,但不一定就是N3的值,A錯誤;B、a時Nt=N0,所以圖中a表示的值為1,B錯誤;C、圖中(N1-N0)/單位時間代表種群增長速率,C錯誤;D、1-6年Nt/N0>1,種群的數(shù)量增加,在第6年后Nt/N0的比值不變,此時該種群的數(shù)量已經(jīng)達到環(huán)境容納量,D正確。故選D。7、A【解析】
1、艾滋病是因為感染人類免疫缺陷病毒(HIV)后導(dǎo)致的免疫缺陷病。HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,主要攻擊和破壞的靶細胞為T淋巴細胞,隨著T淋巴細胞的大量死亡,導(dǎo)致人體免疫力降低,病人大多死于其他病原微生物的感染或惡性腫瘤,艾滋病的傳播途徑有:性接觸傳播、血液傳播和母嬰傳播等。2、脂質(zhì)分為脂肪、磷脂和固醇,磷脂是生物膜的主要組成成分之一,磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架。3、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性決定功能多樣性,糖蛋白、載體蛋白、大多數(shù)酶、抗體都是蛋白質(zhì),幾種蛋白質(zhì)的作用都具有專一性?!驹斀狻緼、艾滋病病毒為RNA病毒,故它的成分有RNA和蛋白質(zhì)外殼,A錯誤;B、細胞內(nèi)蛋白質(zhì)水解時通常需要蛋白酶的催化,蛋白酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),B正確;C、生物膜的成分主要由磷脂和蛋白質(zhì)組成,蛋白質(zhì)是生命活動的承擔(dān)者,生物膜功能的復(fù)雜程度主要取決于生物膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量,C正確;D、糖蛋白能特異性識別信息分子,載體蛋白運輸物質(zhì)具有專一性,抗體只能與抗原特異性結(jié)合,淀粉酶能與淀粉特異性結(jié)合,因此這幾種物質(zhì)都具有特異性識別功能,D正確。故選A?!军c睛】本題的知識點是艾滋病的流行與預(yù)防、生物膜的功能,糖蛋白、載體蛋白、抗體的作用特點,對相關(guān)知識的理解與綜合應(yīng)用是解題的關(guān)鍵,D選項的分析是難點,分析時結(jié)合糖蛋白、載體蛋白、抗體、酶發(fā)揮作用的具體過程和特點進行歸納總結(jié)。8、B【解析】
放射性同位素標記法在生物學(xué)中廣泛應(yīng)用的實例:(1)用35S標記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼,用32P標記噬菌體的DNA,分別侵染細菌,最終證明DNA是遺傳物質(zhì);(2)用3H標記氨基酸,探明分泌蛋白的合成與分泌過程;(3)15N標記DNA分子,證明了DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制;(4)卡爾文用14C標記CO2,研究出碳原子在光合作用中的轉(zhuǎn)移途徑,即CO2→C3→有機物;(5)魯賓和卡門用18O分別標記水和二氧化碳,證明光合作用所釋放的氧氣全部來自于水?!驹斀狻緼、性激素的本質(zhì)是脂質(zhì),其合成不需要氨基酸,故用3H標記亮氨酸不能研究性激素的合成與分泌過程,A錯誤;B、轉(zhuǎn)錄過程中遵循堿基互補配對原則,胰島素基因和胰島素基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA可以發(fā)生堿基互補配對,所以為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用32P標記的胰島素基因片段作探針與提取的mRNA雜交,B正確;C、暗反應(yīng)過程中二氧化碳和C5結(jié)合形成C3,C3被還原形成葡萄糖,所以用14C標記CO2來研究暗反應(yīng)中碳的轉(zhuǎn)移途徑為:14CO2→14C3→14C6H12O6,C錯誤;D、在研究DNA復(fù)制方式時除運用了同位素標記法,對實驗結(jié)果分析時還運用了密度梯度離心法,D錯誤。故選B。二、非選擇題9、受體效應(yīng)T抗體吞噬控制傳染源【解析】
傳染病能夠在人群中流行,必須同時具備三個基本環(huán)節(jié):傳染源、傳播途徑、易感人群,如果缺少其中任何一個環(huán)節(jié),傳染病就不能流行。傳染源:能夠散播病原體的人或動物。傳播途徑:病原體離開傳染源到達健康人所經(jīng)過的途徑。主要有空氣傳播、水傳播、飲食傳播、生物媒介傳播、接觸傳播等。易感人群:對某種傳染病缺乏免疫力而容易感染該病的人群。如未出過麻疹的兒童,就是麻疹的易感人群。只要切斷傳染病流行的三個基本環(huán)節(jié)中的任何一個,其流行便終止。因此傳染病的預(yù)防措施有三個:控制傳染源,切斷傳播途徑;保護易感人群?!驹斀狻浚?)病毒需要依賴于宿主細胞才能進行繁殖,COVID–19可識別人體部分細胞表面的特異性受體并與之結(jié)合而進入細胞進行繁殖。(2)免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)T細胞與被感染的體細胞結(jié)合,使其裂解,釋放出病毒。體液中相應(yīng)的抗體與該病原體中的抗原特異性結(jié)合,可以抑制病原體的繁殖并形成沉淀。進而被吞噬細胞消化。(3)患者為傳染源,隔離患者屬于控制傳染源環(huán)節(jié)。【點睛】熟悉病毒的生存、繁殖以及傳染病的傳播及預(yù)防方式是解答本題的關(guān)鍵。10、活細胞(或宿主細胞)信息交流新型冠狀病毒的+RNA、氨基酸、ATP、酶、tRNA、rRNA效應(yīng)T細胞抗體【解析】
1、人體免疫系統(tǒng)的三大防線:
(1)第一道:皮膚、粘膜的屏障作用及皮膚、黏膜的分泌物(淚液、唾液)的殺滅作用。
(2)第二道:吞噬細胞的吞噬作用及體液中殺菌物質(zhì)的殺滅作用。
(3)第三道:免疫器官、免疫細胞、免疫物質(zhì)共同組成的免疫系統(tǒng)。
2、新冠病毒不具有獨立代謝能力,必須在活細胞內(nèi)增殖,當(dāng)侵染人呼吸道上皮細胞時,會經(jīng)過吸附、穿入、脫殼、生物合成和成熟釋放等幾個階段?!驹斀狻浚?)病毒營寄生生活,不能獨立代謝,必須在活細胞(或宿主細胞)內(nèi)增殖。(2)新型冠狀病毒表面的S蛋白能與人體細胞膜上ACEⅡ白結(jié)合,是通過細胞膜的信息交流功能。翻譯合成RNA聚合酶的過程就是新型冠狀病毒的+RNA與核糖體結(jié)合,tRNA將氨基酸搬運至核糖體發(fā)生脫水縮合,該過程需要酶和ATP,核糖體由rRNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成,rRNA也參與翻譯過程。(3)T細胞在接受抗原的刺激后,通過增殖分化形成效應(yīng)T細胞,效應(yīng)T細胞可以與被抗原入侵的宿主細胞密切接觸,使這些細胞裂解死亡,病原體失去了寄生的基礎(chǔ),因而能被吞噬、消滅;在肺炎康復(fù)者的血清中存在的抗體能與新型冠狀病毒的抗原特異性結(jié)合?!军c睛】本題以新冠病毒的社會熱點考查免疫調(diào)節(jié)在維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中的作用,對于免疫過程的理解和歸納總結(jié)是解答本題的關(guān)鍵。11、DNA連接BamHIBamHI和EcoRI標記控制病毒蛋白外殼的合成白色該疫苗不含遺傳物質(zhì),不會出現(xiàn)病毒感染和增殖【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù);個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。圖中表示的是通過基因工程獲得疫苗和產(chǎn)生相應(yīng)抗體的過程圖,過程①表示基因表達載體的構(gòu)建,過程②表示將目的基因?qū)胧荏w細胞,過程③表示目的基因的表達?!驹斀狻浚?)過程①表示基因表達載體的構(gòu)建,需要用到限制酶和DNA連接酶。根據(jù)質(zhì)粒和目的基因所在DNA上酶切位點的分布情況,有兩種選擇限制酶的方案,只選擇BamHⅠ既能將目的基因切下,也能切割質(zhì)粒,在獲取目的基因和切割質(zhì)粒時,使目的基因和質(zhì)粒兩端產(chǎn)生相同的黏性末端,而在連接酶作用會出現(xiàn)自身環(huán)化、目的基因自身與自身連接、質(zhì)粒自身與自身連接、目的基因與質(zhì)粒連接多種情況,需要篩選;用兩種限制酶切割,質(zhì)粒和目的基因兩端不會形成相同黏性末端,在連接酶作用下不會發(fā)生環(huán)化還可以防止反向連接,最終在連接酶作用下只會出現(xiàn)目的基因與質(zhì)粒成功重組和沒有進行重組的質(zhì)粒,如果過程①用一種限制酶則應(yīng)選BamHI,如果用兩種限制酶應(yīng)選BamHI和EcoRI。(2)在該項目中青霉素抗性基因作為標
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