草品種DUS測試指南第4部分羊草

1草品種DUS測試指南本文件規(guī)定了羊草新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試的技術(shù)要求和結(jié)果判定的一般原則。本文件適用于羊草（Leymuschinensis）品種管理。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3543農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程GB6142禾本科草種子質(zhì)量分級GB/T19557.1植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則TG/3/11GuidelinesfortheConductofTestsforDistinctness，HomogeneityandStabilityWheat3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1群體目測Visualassessmentbyasingleobservationofagroupofplantsorpartsofplants對一批植株或植株的某器官或部位進行目測，獲得一個群體記錄。3.2個體目測Visualassessmentbyobservationofindividualplantsorpartsofplants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個目測，獲得一組個體記錄。3.3群體測量Singlemeasurementofagroupofplantsorpartsofplants對一批植株或植株的某器官或部位進行測量，獲得一個群體記錄。3.4個體測量Measurementofanumberofindividualplantsorpartsofplants對一批植株或植株的某器官或部位進行逐個測量，獲得一組個體記錄。4符號下列符號適用于本文件。MG——群體測量；MS——個體測量；2VG——群體目測；VS——個體目測；QL——質(zhì)量性狀；QN——數(shù)量性狀；PQ——假質(zhì)量性狀。5提交種子的要求5.1種子重量至少5kg。5.2種子質(zhì)量要求按GB6142規(guī)定的三級以上種子，無包衣。5.3種子符合中國植物檢疫的有關(guān)規(guī)定。6測試方法6.1測試周期至少三個獨立完整的生長周期。6.2測試地點在羊草適合推廣的一個試驗點進行。6.3田間試驗6.3.1試驗設(shè)計參試品種和對照品種隨機區(qū)組，重復(fù)3次，小區(qū)面積3×5m2。條播，10行，行距33cm，播深1.0cm~6.3.2田間管理大田生產(chǎn)管理，各小區(qū)田間管理嚴格保持一致。6.4性狀觀測6.4.1觀測時期性狀觀測生育期觀測，觀測表見A.1。6.4.2觀測方法性狀觀測，規(guī)定的觀測方法（VG、VS、MG、MS）進行。6.4.3觀測數(shù)量個體觀測性狀取樣數(shù)量不少于30株，在觀測植株的器官或部位時，每個植株取樣數(shù)量應(yīng)為1個。群體觀測性狀應(yīng)觀測整個小區(qū)或規(guī)定大小的群體。7特異性、一致性和穩(wěn)定性結(jié)果的判定37.1總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T19557.1確定的原則進行。7.2特異性判定申請品種至少在一個性狀上與標準品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時，即可判定申請品種具備特異性。7.3一致性判定群體整齊一致，異株率不超過2％。7.4穩(wěn)定性判定如果一個品種具備一致性，則可認為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對穩(wěn)定性進行測試。必要時，可以種植該品種的下一代種子，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性。8性狀表根據(jù)測試需要，將性狀分為基本性狀、選測性狀，基本性狀是測試中必須觀測的性狀。8.1概述性狀表列出了性狀名稱、表達類型、表達狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標準品種、觀測時期和方法等內(nèi)容（表B.2）。8.2表達類型根據(jù)性狀表達方式，將性狀分為質(zhì)量性狀、假質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀三種類型。8.3表達狀態(tài)和相應(yīng)代碼每個性狀劃分成一系列表達狀態(tài)，以便于定義性狀和規(guī)范描述；每個表達狀態(tài)賦予一個相應(yīng)的數(shù)字代碼，以便于數(shù)據(jù)記錄和進行品種性狀描述。對于質(zhì)量性狀和假質(zhì)量性狀，所有的表達狀態(tài)都應(yīng)當在測試指南中列出；對于數(shù)量性狀，為了縮小性狀表的長度，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可以不列出，偶數(shù)代碼的表達狀態(tài)可描述為前一個表達狀態(tài)到后一個表達狀態(tài)的形式（表B.3）。8.4標準品種性狀表中列出了部分性狀有關(guān)表達狀態(tài)可參考的標準品種（西烏珠穆沁羊草以助于確定相關(guān)性狀的表達狀態(tài)和校正環(huán)境因素引起的差異。4（規(guī)范性）生育期觀測A.1返青期（或出苗期）50％幼苗出土為出苗期，50％的植株返青為返青期。表示方法“MMDD”。A.2分蘗期有50％的幼苗在莖的基部莖節(jié)上生長側(cè)芽1cm以上為分蘗期。表示方法“MMDD”。A.3拔節(jié)期50％植株的第一個節(jié)露出地面1cm～2cm為拔節(jié)期。表示方法“MMDD”。A.44孕穗期50％植株出現(xiàn)劍葉為孕穗期。表示方法“MMDD”。A.5抽穗期50％植株的穗頂由上部葉鞘伸出而顯露于外時為抽穗期。表示方法“MMDD”。A.6開花期50％的植株開花為開花期。表示方法“MMDD”。A.7成熟期成熟期是指80％以上的種子成熟。成熟期分為三個時期，即乳熟期、蠟熟期和完熟期。乳熟期是指50％以上植株的籽粒內(nèi)充滿乳汁，并接近正常大?。幌炇炱谑侵?0％以上植株籽粒的顏色接近正常，內(nèi)呈蠟狀；完熟期是指80％以上的種子堅硬。表示方法“MMDD”。A.8生育天數(shù)由出苗（返青）至種子成熟的天數(shù)。表示方法“DD”。A.9枯黃期50％的植株枯黃時為枯黃期。表示方法“MMDD”。A.10生長天數(shù)由出苗（返青）至枯黃期的天數(shù)。表示方法“DD”。A.11抗逆性和抗病蟲性可根據(jù)小區(qū)內(nèi)發(fā)生的旱害、病蟲害等具體情況加以觀測記載。A.12抗倒性植株傾斜大于45度為倒伏。觀察并記載各材料在抗倒伏能力方面的差異。5A.13越冬率（越冬前及返青期觀測）在越冬前及第二年返青后分別統(tǒng)計每株分蘗總數(shù)及返青數(shù)，計算越冬率。越冬返青率(%)=返青后存活分蘗數(shù)/越冬前總分孽數(shù)×100%。表A.1羊草生育期觀測表試驗?zāi)甓龋海ǚ登嗥冢┲旮咛鞌?shù)天數(shù)(%)注2：抗逆性、抗倒伏和抗病蟲性：一般要求的，可根據(jù)小區(qū)內(nèi)發(fā)生的凍害、旱害、病蟲害、倒伏等具體情況目測觀測記載；特殊要求鑒定某一抗性性狀的，根6性狀觀測B.1農(nóng)藝性狀B.1.1草產(chǎn)量相關(guān)性狀B.1.1.1莖桿節(jié)數(shù)觀測時間：初花期。觀測部位：節(jié)間。觀測方法：目測，計數(shù)。每株（叢）隨機選5個枝條，共30枝。計數(shù)植株莖稈的節(jié)數(shù)，記錄表格（見表2）。自地面開始第一節(jié)數(shù)至花序以下的最末節(jié)。結(jié)果以平均值表示，精確到一節(jié)。觀測量：整個小區(qū)，如果不一致，計算變異率。B.1.1.2株高（株叢高度）觀測時間：返青期到成熟期，整個生育期。每隔10天測定一次。觀測部位：全株。觀測方法：測量從地面拉直后至植株最高部位（芒除外）的絕對高度。觀測量：每株（叢）隨機選5小叢，根蘗分蘗較少則以6株為主。B.1.1.3葉片長度觀測時間：初花期。觀測部位：旗葉以下第2或3葉，植株中部長度最長葉片。觀測方法：直尺測量。觀測量：每株（叢）隨機選5葉片，總計30片，精確到0.1cm，計算平均值。B.1.1.4葉片寬度觀測時間：初花期。觀測部位：旗葉以下第2或3葉，植株中部寬度最寬葉片。觀測方法：直尺測量。觀測量：每株（叢）隨機選5葉片，總計30片，精確到0.1cm，計算平均值。B.1.1.5鮮草產(chǎn)量觀測時間：初花期。觀測部位：地上部分。觀測方法：將每個試驗小區(qū)分為兩半，其中一半用于鮮草產(chǎn)量測量。收割后立即稱取重量，精確到1g/m2。最終產(chǎn)量為一個生長周期中單位面積牧草鮮草的累計產(chǎn)量。以g/m2表示。觀測量：小區(qū)的一半，即4.5m2。B.1.1.6干草產(chǎn)量觀測時間：初花期。觀測部位：地上部分。7觀測方法：用測鮮草產(chǎn)量的樣本，從每個小區(qū)中抽取1kg鮮草自然風干或烘干后稱重，計算出鮮干比，并折算出干草產(chǎn)量。結(jié)果以平均值表示，精確到1g/m2。最終產(chǎn)量為一個生長周期中單位面積牧草干草的累計產(chǎn)量。以g/m2表示。產(chǎn)草量登記觀測量：小區(qū)的一半，即4.5m2。B.1.1.7莖葉比觀測時間：初花期（刈割測產(chǎn)時）。觀測部位：地上部分。觀測方法：從中取不少于10株的樣品，將莖（含葉鞘）、葉（含花序）分開，待風干后分別稱重，精確到0.1g。然后計算單株（叢）牧草的莖葉比，取平均數(shù)。表示方法為：1：X，X精確到0.01。莖葉比登記式中：Ws——莖重，單位為克（g）。Wt——葉重，單位為克（g）。觀測量：不少于10株的樣品。2.8葉面積觀測時間：初花期。觀測部位：葉片。觀測方法：使用葉面積儀測量旗葉以下第2或3葉，植株中部寬度最大葉片，同時記錄葉面積、葉長、葉寬等。觀測量：每株（叢）隨機選5葉片，總計30片，精確到0.1cm，計算平均值。B.1.1.8光合效率觀測時間：初花期。觀測部位：葉片。觀測方法：用葉室輕輕夾取復(fù)葉的頂生小葉測量，旗葉以下第2或3葉，植株中部長度最寬葉片。每株（叢）隨機選1葉片，總計6片。LI-6400光合儀采用開放式氣路，根據(jù)當時環(huán)境條件設(shè)定參數(shù)，光源為LI-6400配置的紅藍光LED光源，標準葉室（2cm×3cm），大氣C02含量（Q）380μmol?mol-1，光強（PFD）為l400μmolCO2?m-2?s-1，葉室溫度為28-30℃。測定Pn前使用1200μmol?m-2?s-1冷光源誘導(dǎo)10min，在每個CO2濃度下平衡120s，測完后用激光葉面積儀測量樣本的離體葉面積。主要指標：凈光合速率（Pn，μmol?m-2?s-1）、蒸騰速率（Tr，mmol?mol-1）、氣孔導(dǎo)度（Gs，mol?m-2?s-1）、胞間CO2濃度（Ci，μmol?mol-1）等光合參數(shù)，測定時通過系統(tǒng)控制葉片溫度為25士1℃。光合效率登記表（見表9）。觀測量：6叢隨機測量6個葉片?？傆?片。單位μmol?m-2?s-1。B.1.1.9分蘗數(shù)觀測時間：枯黃期。觀測部位：株叢枝條。觀測方法：調(diào)查每一株的分蘗數(shù)。觀測量：每株（叢）分別測量，計算平均值。8B.1.2種子產(chǎn)量相關(guān)性狀B.1.2.1花序長度觀測時間：開花期。觀測部位：花序。觀測方法：直尺測量。每株（叢）隨機選5枝，按下圖測量花序主軸最基部至花序頂端的長度。結(jié)果以平均值表示，精確到0.1cm。觀測量：每株（叢）隨機選5枝，總樣本數(shù)為30。B.1.2.2花序?qū)挾扔^測時間：開花期。觀測部位：花序。觀測方法：直尺測量。每株（叢）隨機選5枝，與花序長度測量對應(yīng)。按圖B.1測量最寬處的自然長度。結(jié)果以平均值表示，精確到1mm。觀測量：每株（叢）隨機選5枝，總樣本數(shù)為30。圖B.1花序長度及寬度測量方法B.1.2.3全部小穗數(shù)觀測時間：成熟期。觀測部位：穗。觀測方法：目測，計數(shù)每穗的小穗數(shù)（含不育小穗），單位：枚/穗軸節(jié)。登記（見表15）。觀測量：每株（叢）隨機選5枝高度一致的30個穗的小穗數(shù)，計算平均值。2.13小穗著生密度觀測時間：成熟期。觀測部位：穗和小穗。觀測方法：計數(shù)每穗的小穗數(shù)（含不育小穗），并測量穗軸長度。穗軸長度登記。觀測量：每株（叢）隨機選5枝高度一致的30個穗，計算平均值。B.1.2.4小花數(shù)觀測時間：開花期。觀測部位：穗。9觀測方法：目測。觀測記載花序中部小穗的完整小花數(shù)。觀測量：每株（叢）隨機選5枝高度一致的30個穗。B.1.2.5結(jié)實率觀測時間：蠟熟期。觀測部位：穗。觀測方法：每株分別測定5個果穗的小花總數(shù)（包括不孕和發(fā)育不全者）和發(fā)育正常的穎果數(shù)。用式計算單株（叢）羊草的結(jié)實率，結(jié)果以平均值表示。式中：FR——結(jié)實率，單位為百分率（%）；N——每一果穗的小花總數(shù)，單位為個；N1——每一果穗發(fā)育正常的穎果數(shù)，單位為個。觀測量：每株（叢）隨機選5枝高度一致的30個穗。B.1.2.6種子產(chǎn)量觀測時間：完熟期。觀測部位：小穗種子。觀測方法：利用每個試驗小區(qū)鮮草產(chǎn)量測產(chǎn)余下的另一半進行種子產(chǎn)量測量，3次重復(fù)。結(jié)果以平均值表示，精確到1g/m2，以g/m2表示。觀測量：測產(chǎn)余下的另一半小區(qū)。B.1.2.7千粒重觀測時間：收獲后。觀測部位：籽粒。觀測方法：用天平稱，測量兩個干燥而健全的籽粒500粒的重量，精確至0.01g。兩者差不超過0.5g，計算平均值。如果兩者差超過0.5g，再測量一個500粒重量，從三者中選兩個之差不超過0.5g的，計算平均值。觀測量：兩個干燥而健全的籽粒500粒的重量。B.1.2.8種子發(fā)芽率觀測時間：完熟期。觀測部位：種子。觀測方法：利用濾紙法，3次重復(fù)。結(jié)果以平均值表示登記。觀測量：50粒/皿。B.1.3品質(zhì)相關(guān)性狀B.1.3.1粗蛋白測定時間：初花期。測定部位：全株。測定方法：全自動凱氏定氮儀。測定量：測產(chǎn)后自然風干的樣品，粉碎樣3g以上，3次重復(fù)。B.1.3.2粗脂肪測定時間：初花期。測定部位：全株。測定方法：自動索氏浸提系統(tǒng)。測定量：測產(chǎn)后自然風干的樣品，粉碎樣3g以上，3次重復(fù)。B.1.3.3粗纖維、中洗、酸洗測定時間：初花期。測定部位：全株。測定方法：全自動纖維分析儀。測定量：測產(chǎn)后自然風干的樣品，粉碎樣3g以上，3次重復(fù)。B.1.3.4粗灰分、水分測定時間：初花期。測定部位：全株。測定方法：《土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)常規(guī)分析方法》，中國土壤學(xué)會農(nóng)業(yè)化學(xué)專業(yè)委員會編1983.8。測定量：測產(chǎn)后自然風干的樣品，粉碎樣3g以上，3次重復(fù)。B.1.3.5鈣、磷測定時間：初花期。測定部位：全株。測定方法：鈣采用原子吸收光譜儀；磷采用紫外分光光度計。測定量：測產(chǎn)后自然風干的樣品，粉碎樣3g以上，3次重復(fù)。B.1.4其他一些補充形態(tài)性狀B.1.4.1芽鞘色觀測時間：芽鞘出土約1cm～2cm。觀測部位：芽鞘。觀測方法：目測，觀測芽鞘顏色。顏色類型有綠色、黃綠、紫色等。觀測量：觀測整個小區(qū)，如果顏色不一致，計算變異率。B.1.4.2幼苗習(xí)性觀測時間：5～6片葉期。觀測部位：幼苗葉片。觀測方法：目測，觀測幼苗的姿態(tài)，按標準分級。觀測量：觀測整個小區(qū)，如果不一致，計算變異率。表B.1幼苗習(xí)性的分級標準B.1.4.3幼苗顏色觀測時間：分蘗盛期。觀測部位：葉片。觀測方法：目測，觀測幼苗的顏色，分藍綠，黃綠，深綠色等。觀測量：整個小區(qū)，如果不一致，計算變異率。B.1.4.4莖葉蠟質(zhì)觀測時間：開花至灌漿期。觀測部位：莖和葉。觀測方法：目測，觀測莖葉上的蠟質(zhì)，分無、多、少三種情況。觀測量：整個小區(qū)，如果不一致，計算變異率。B.1.4.5穗蠟質(zhì)觀測時間：開花至灌漿期。觀測部位：穗。觀測方法：目測，觀測穗上的蠟質(zhì)，分無、多、少三種情況。觀測量：整個小區(qū)，如果不一致，計算變異率。B.1.4.6葉片形態(tài)觀測時間：孕穗期。觀測部位：旗葉以下第2或3葉，植株中部葉片。觀測方法：目測，分扁平、稍內(nèi)卷、內(nèi)卷。觀測量：整個小區(qū)。B.1.4.7葉片被毛觀測時間：