2024-2025高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)學(xué)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測5含解析新人教版選修1_第1頁
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PAGEPAGE11專題五學(xué)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測本試卷分第Ⅰ卷(選擇題)和第Ⅱ卷(非選擇題)兩部分。滿分100分,考試時間90分鐘。第Ⅰ卷(選擇題共50分)一、選擇題(共25小題,每小題2分,共50分,在每小題給出的4個選項中,只有1項是符合題目要求的)1.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,錯誤的是(D)A.DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水B.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水是為了釋放出DNAC.向濃鹽溶液中加蒸餾水是為了析出DNAD.用菜花替代雞血做試驗,其試驗操作步驟相同[解析]DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水,A正確;向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水是為了讓雞血細(xì)胞吸水漲破,從而釋放出DNA,B正確;向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水是為了降低DNA的溶解度,進(jìn)而析出DNA,C正確;用菜花替代雞血作為試驗材料,其試驗操作步驟不完全相同,如植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,裂開細(xì)胞時須要研磨并加入食鹽和洗滌劑,D錯誤。2.選用紅細(xì)胞作分別蛋白質(zhì)的試驗材料,有何好處(A)A.血紅蛋白是有色蛋白 B.紅細(xì)胞無細(xì)胞核C.紅細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高 D.紅細(xì)胞DNA含量高[解析]血紅蛋白因含有血紅素而呈現(xiàn)紅色,在凝膠色譜分別時可以通過視察顏色來推斷什么時候應(yīng)當(dāng)收集洗脫液,A正確。3.很多生物大分子具有的可解離的基團(tuán),在下列哪種條件下,會帶上正電或負(fù)電(B)A.肯定溫度 B.肯定pHC.肯定壓強(qiáng) D.肯定容器[解析]很多生物大分子具有可解離的基團(tuán),在肯定pH下,這些基團(tuán)可以帶正電或負(fù)電。4.(2024·南京、鹽城一模)下列有關(guān)用雞血進(jìn)行DNA粗提取和鑒定試驗的操作,錯誤的是(D)A.雞血細(xì)胞中加入蒸餾水后,用玻璃棒攪拌B.用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNAC.在溶有DNA的濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后,用玻璃棒輕緩攪拌D.將卷在玻璃棒上的絲狀物加入4mL二苯胺試劑中,沸水浴加熱,冷卻后視察[解析]雞血細(xì)胞中加入蒸餾水后,用玻璃棒攪拌,使細(xì)胞吸水漲破,A正確;DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度高,再結(jié)合酶的專一性原理,可用蛋白酶純化溶解于2mol/LNaCl溶液中的DNA,B正確;DNA不溶于體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,因此在溶有DNA的濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后,用玻璃棒輕緩攪拌,可以進(jìn)一步純化DNA,C正確;將卷在玻璃棒上的絲狀物先溶于2mol/LNaCl溶液中,再向溶液中加入4mL二苯胺試劑,沸水浴加熱,冷卻后視察,D錯誤。5.將攪拌好的混合液離心來分別血紅蛋白溶液時,第2層是(C)A.甲苯 B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層 D.其他雜質(zhì)的沉淀[解析]甲苯層位于第1層,A錯誤;血紅蛋白水溶液位于第3層,B錯誤;第2層是脂溶性物質(zhì)的沉淀層,C正確;其他雜質(zhì)的沉淀物位于第4層,D錯誤。6.DNA變性后理化性質(zhì)有下述變更,其中正確的是(B)A.對260nm紫外線汲取削減 B.溶液黏度下降C.磷酸二酯鍵斷裂 D.核苷酸斷裂[解析]DNA變性后在理化性質(zhì)上應(yīng)表現(xiàn)為溶液黏度下降。7.凝膠色譜操作正確的是(A)A.將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B.將橡皮塞下部用刀切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片[解析]凝膠色譜柱制作過程中須要將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴,A正確;由A分析可知,B錯誤;插入玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底部,C錯誤;將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞上部一樣大小的圓片,D錯誤。8.關(guān)于中學(xué)生物學(xué)試驗的基本原理,敘述不正確的是(C)A.噬菌體須在活菌中增殖培育是因其缺乏獨立的代謝系統(tǒng)B.提取組織DNA是利用不同化合物在溶劑中溶解度的差異C.成熟植物細(xì)胞在高滲溶液中發(fā)生質(zhì)壁分別是因為細(xì)胞壁具有選擇透過性D.PCR呈指數(shù)擴(kuò)增DNA片段是因為上一輪反應(yīng)的產(chǎn)物可作為下一輪反應(yīng)模板[解析]A.噬菌體屬于侵染細(xì)菌的病毒,它沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),缺乏自主代謝機(jī)制,它的生命活動離不開宿主細(xì)胞,故噬菌體繁殖必需在細(xì)菌中才能進(jìn)行,故A正確;B.提取DNA利用了不同化合物在溶劑中的溶解度不同和DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同的原理進(jìn)行,故B正確;C.細(xì)胞壁屬于全透性的,成熟植物細(xì)胞在高滲溶液中發(fā)生質(zhì)壁分別緣由是原生質(zhì)層具有選擇透過性,故C錯誤;D.PCR擴(kuò)增DNA的原理是DNA復(fù)制,上一輪復(fù)制得到子代DNA可為下一輪DNA復(fù)制供應(yīng)模板,故D正確。9.在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品分別是(D)①0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液②2.00mol/L的NaCl溶液③0.14mol/L的NaCl溶液④體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液A.①③ B.②③C.②④ D.③④[解析]在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中,DNA析出而蛋白質(zhì)溶解;冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液能使DNA析出。10.在進(jìn)行DNA的粗提取試驗中,若選擇的是植物細(xì)胞,在裂開細(xì)胞時,加入肯定量的洗滌劑和食鹽,則加入洗滌劑與食鹽的目的分別是(B)①有利于DNA溶解②分別DNA和蛋白質(zhì)③溶解蛋白質(zhì)④溶解細(xì)胞膜A.①② B.④①C.②③ D.④②[解析]洗滌劑是一種離子去垢劑,可以溶解細(xì)胞膜,有利于細(xì)胞內(nèi)含物(DNA)的釋放,食鹽的主要成分是NaCl,可以加鹽析,游離出DNA分子,并使DNA分子充分溶解于NaCl溶液中,則①有利于DNA溶解;④溶解細(xì)胞膜正確。11.如圖表示DNA變性和復(fù)性示意圖,下列相關(guān)說法正確的是(A)A.向右的過程為加熱(80~100℃)變性的過程B.向左的過程是DNA雙鏈快速制冷復(fù)性C.變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件、實質(zhì)都相同D.圖中DNA片段共有4個游離的磷酸基、4個3′端[解析]向左為緩慢冷卻復(fù)性;變性是在90℃以上時,DNA雙鏈解旋為單鏈,這一過程在生物體內(nèi)需解旋酶;圖中DNA片段有兩個游離磷酸基,2個3′端。12.PCR一般要經(jīng)過三十次循環(huán),從其次輪循環(huán)起先,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參加反應(yīng),由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時將(B)A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長B.與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延長C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行子鏈延長D.無需與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈[解析]當(dāng)由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時,此單鏈引物端為5′端,因此與它互補(bǔ)的子鏈應(yīng)從另一端起先合成,即由引物Ⅱ結(jié)合延長DNA的子鏈。13.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延長的基礎(chǔ)。以下敘述錯誤的是(B)A.變性過程中斷裂的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B.退火時引物A必需與引物B堿基互補(bǔ)配對C.由原來的母鏈為模板合成的兩個新DNA分子中,只含有引物A或引物BD.延長時須要耐高溫DNA聚合酶催化[解析]在PCR技術(shù)變性過程中高溫能破壞的是DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu),使其堿基對間的氫鍵斷裂,A正確;退火時引物A、引物B須要與模板進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對,假如引物A和引物B發(fā)生堿基互補(bǔ)配對則不能與相應(yīng)模板鏈結(jié)合,無法完成子鏈的延長,B錯誤;由于DNA復(fù)制為半保留復(fù)制,而引物為單鏈DNA片段,所以由原來的母鏈為模板合成的兩個新DNA分子中,只含有引物A或引物B,C正確;延長時的溫度為72℃左右,所以要用耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈合成,D正確。故選B。14.下列敘述中錯誤的是(A)A.變更NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色C.用電泳法可分別帶電性質(zhì)、分子大小和形態(tài)不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)[解析]在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時,DNA的溶解度最低,DNA析出。15.下列說法錯誤的是(D)A.在肯定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠反抗外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D.透析袋能使大分子自由進(jìn)出,而將小分子保留在袋內(nèi)[解析]透析袋一般用硝酸纖維素制成,又稱玻璃紙。透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi)。16.下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分別試驗的敘述中,錯誤的有(D)A.提取動物細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)可以采納蒸餾水漲破細(xì)胞的方法B.采納不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)C.蛋白質(zhì)純化過程中采納透析法可去除溶液中的小分子雜質(zhì)D.血紅蛋白只能采納凝膠色譜法純化,DNA則可采納電泳、鹽析等方法純化[解析]提取動物細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)可以采納蒸餾水漲破細(xì)胞的方法,因為蒸餾水相當(dāng)于低滲溶液;高鹽溶液溶解DNA,能除去在高鹽溶液中不能溶解的雜質(zhì),用低鹽溶液使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中不能溶解的雜質(zhì),因此采納不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì);透析袋可允許小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在袋內(nèi),因此通過透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì);血紅蛋白能采納凝膠色譜法純化,也可采納電泳法純化。17.下列關(guān)于DNA的粗提取試驗和血紅蛋白的提取試驗,敘述正確的是(A)A.前者選擇雞血細(xì)胞作材料較好;后者選擇哺乳動物成熟的紅細(xì)胞做試驗材料較好B.樣品預(yù)處理時,前者靜置1d除去上清液即可;后者要加入清水反復(fù)低速短時間離心洗滌,至上清液無黃色即可C.DNA粗提取試驗中,向質(zhì)量濃度為2mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時,應(yīng)緩慢加入,直到出現(xiàn)黏稠物為止D.血紅蛋白的提取和分別試驗的原理是在電場中帶電顆粒遷移的速度不同[解析]雞血細(xì)胞有細(xì)胞核,哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,故前者適于提取DNA,后者適于提取血紅蛋白;提取血紅蛋白的試驗中,洗滌紅細(xì)胞時,不能加清水,而應(yīng)加入生理鹽水,否則細(xì)胞提早裂開釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合,會加大提取難度;DNA初次析出時,加清水至黏稠物不再增加時為止;血紅蛋白提取和分別的原理是透析和凝膠色譜柱中相對分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì)遷移速率不同而實現(xiàn)分別。18.細(xì)胞裂開后,各種蛋白質(zhì)就會被釋放出來,再依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性進(jìn)行提取。下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中,不正確的是(D)A.酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取B.水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)提取C.脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑提取D.堿性蛋白質(zhì)可用強(qiáng)酸性溶液提取[解析]提取蛋白質(zhì)的基本原理是依據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì),加入不同的試劑,使蛋白質(zhì)溶于試劑中而提取蛋白質(zhì)。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都會使蛋白質(zhì)變性而沉淀。19.凝膠色譜分別法分別蛋白質(zhì)時,凝膠的種類較多,但其作用的共同點是(A)A.變更蛋白質(zhì)分子通過凝膠的路徑B.吸附一部分蛋白質(zhì),從而影響蛋白質(zhì)分子的移動速度C.將酶或細(xì)胞固定在凝膠中D.與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而影響其移動速度[解析]凝膠的種類很多,但每一種凝膠內(nèi)部都有通道,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)分子簡單進(jìn)入通道,移動距離變長,移動速度減慢,而相對分子質(zhì)量大的分子不能進(jìn)入通道,其移動距離短,移動速度快,因此可把相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分開。20.下圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分別試驗的裝置,下列有關(guān)敘述不正確的是(B)A.首先用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)B.圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)C.用圖乙裝置分別血紅蛋白時,待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每管收集5mL,連續(xù)收集D.圖丙裝置中電泳法分別提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有肯定量的電荷,在電場的作用下向一極移動[解析]用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。圖乙裝置表示通過凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的過程。蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量較大,被排阻在凝膠顆粒的外面,在顆粒之間快速通過。21.依據(jù)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜示意圖分析,所帶負(fù)電荷最多的球蛋白是(A)A.α1-球蛋白 B.α2-球蛋白C.β-球蛋白 D.γ-球蛋白[解析]依據(jù)電泳的原理進(jìn)行分析。帶電粒子在電場中向與其電性相反的電極泳動的現(xiàn)象稱為電泳,因此,移動越慢的,所帶負(fù)電荷就越少(點樣是在負(fù)極)。22.下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取和分別試驗中樣品處理步驟的描述,正確的是(C)A.紅細(xì)胞的洗滌:加入蒸餾水,緩慢攪拌,低速短時間離心B.血紅蛋白的釋放,加入生理鹽水和甲苯,置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢鐲.分別血紅蛋白:將攪拌好的混合液離心,過濾后,用分液漏斗分別D.透析:將血紅蛋白溶液裝入透析袋,然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12h[解析]紅細(xì)胞洗滌步驟中應(yīng)加入生理鹽水而不是蒸餾水,血紅蛋白釋放中加入蒸餾水,透析時緩沖液pH應(yīng)為7.0而不是4.0。23.在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是(D)A.防止血紅蛋白被氧化B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),須要酸中和C.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能[解析]利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的pH環(huán)境,保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能,便于分別視察(紅色)和探討(活性)。24.PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),如圖表示合成過程。下列說法錯誤的是(B)A.甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用B.丙過程用到的酶在高溫下失活,因此在PCR擴(kuò)增時須要再添加C.假如把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,循環(huán)3次后,在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25%D.PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變[解析]PCR中解旋是通過高溫進(jìn)行的,故甲過程高溫使DNA變性解旋,該過程不須要解旋酶的作用,A正確;丙過程用到的酶為耐高溫的DNA聚合酶,在高溫下不會失活,因此在PCR擴(kuò)增時不須要再添加,B錯誤;假如把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,循環(huán)3次后,形成的DNA分子為8個,而含有15N標(biāo)記的DNA分子為2個,故在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25%,C正確;PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變,D正確。故選B。25.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外快速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)驗下述三十多次循環(huán);95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延長(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是(C)A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成C.延長過程中須要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所須要酶的最適溫度較高[解析]PCR擴(kuò)增DNA的過程中須要的原料是四種脫氧核苷酸。第Ⅱ卷(非選擇題共50分)二、非選擇題(共50分)26.(10分)關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”試驗:(1)試驗的正確操作步驟是(A)A.制備雞血細(xì)胞→提取細(xì)胞核物質(zhì)→溶解核內(nèi)的DNA→析出并濾取DNA黏稠物→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAB.制備雞血細(xì)胞液→提取細(xì)胞核物質(zhì)→溶解并析出DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAC.制備雞血細(xì)胞液→溶解DNA→提取細(xì)胞核中DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定D.制備雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)提取液→溶解并析出DNA→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定(2)試驗過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是__2mol/L__;其次次所用NaCl溶液的濃度是__2mol/L__。所用酒精最好是__冷酒精__,其體積分?jǐn)?shù)為__95%__。(3)鑒定DNA的方法是,向溶有DNA絲狀物的試管中加入__4__mL的__二苯胺__試劑,混合勻稱后,將試管置于沸水中加熱5min,冷卻后可視察到溶液呈__藍(lán)色__;也可取少許DNA絲狀物置于載玻片上,滴一滴__甲基綠__溶液,片刻后用水沖洗,可見絲狀物被染成__綠色__。[解析](1)DNA粗提取的試驗步驟:提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)、溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA、析出含DNA的黏稠物、過濾、再溶解、過濾、提取出含雜質(zhì)較少的DNA、DNA的鑒定,故A正確;(2)在濃度較高的氯化鈉溶液(物質(zhì)的量濃度為2mol/L)中,核蛋白簡單解聚,游離出DNA;所用酒精最好為體積分?jǐn)?shù)95%的酒精。(3)DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍(lán)色,DNA遇甲基綠變成綠色。27.(10分)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,在工業(yè)生產(chǎn)中具有重要價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下圖。回答下列問題:eq\x(\a\al(產(chǎn)乳糖酶微,生物L(fēng)的篩選))→eq\x(產(chǎn)乳糖酶微生物L(fēng)的培育)→eq\x(\a\al(乳糖酶的,提取和純化))→eq\x(\a\al(乳糖酶的,固定化))(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時,培育基中的唯一碳源應(yīng)當(dāng)是__乳糖__,在試驗室培育微生物L(fēng)時,一方面須要為L供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件,另一方面須要__防止雜菌污染__,以獲得純凈的培育物。(2)將微生物L(fēng)研磨裂開得到提取液后,可采納凝膠色譜法分別純化其中的乳糖酶。分別過程中,比乳糖酶相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì),在凝膠中的移動速度比乳糖酶__慢__(填“快”或“慢”),緣由是__相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,移動速度較慢__。(3)工業(yè)生產(chǎn)中,若要將乳糖酶固定化,一般__不相宜__(填“相宜”或“不相宜”)采納包埋法,緣由是__酶分子很小,簡單從包埋物中漏出__,與運用游離酶相比,工業(yè)生產(chǎn)中運用固定化酶的優(yōu)點是__酶不易失活,可以重復(fù)用,能提高產(chǎn)品質(zhì)量__。[解析](1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物時,宜用乳糖作為培育基中的唯一碳源。在試驗室培育微生物,一方面要為培育的微生物供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件,另一方面須要防止雜菌污染。(2)用電泳法純化乳糖酶時,若在相同條件下分別帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其分子量越小,電泳速度越慢。凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分別蛋白質(zhì)的有效方法,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程長,移動的速度慢,相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不簡單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程短,移動的速度快,因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分別。(3)固定化酶的方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法等。由于乳糖酶分子很小,簡單從包埋物中漏出,因此工業(yè)生產(chǎn)中,若要將乳糖酶固定化,一般不相宜采納包埋法,乳糖酶宜采納化學(xué)結(jié)合法(共價鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化。與運用游離酶相比,工業(yè)生產(chǎn)中運用固定化酶的優(yōu)點是酶不易失活,可以重復(fù)用,能提高產(chǎn)品質(zhì)量。28.(10分)分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的問題:PCR是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)。1988年,PCR儀問世,并被廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增和DNA序列測定。如圖是PCR技術(shù)示意圖,請回答下列問題:(1)標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為__變性__、__復(fù)性__、__延長__三大步驟。(2)引物是此過程中必需加入的物質(zhì),從化學(xué)本質(zhì)上說,引物是一小段__單鏈DNA或RNA__。(3)將雙鏈DNA__加熱到90℃以上__,使之變性,從而導(dǎo)致__雙鏈DNA解聚為兩條單鏈__。(4)引物延長需供應(yīng)__四種脫氧核苷酸__作為原料。[解析](1)標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延長三大步驟。(2)引物是一小段單鏈DNA或RNA。(3)高溫變性時,須要將雙鏈DNA加熱到95℃,使之變性,從而導(dǎo)致雙鏈DNA分別成兩條單鏈。(4)中溫延長是須要以四種脫氧核苷酸為原料。29.(10分)圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們始終在努力探討、找尋固氮基因。對基因的探討經(jīng)常因探討樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深化探討使人類跨入了蛋白組探討時代,從困難的細(xì)胞混合物中提取、分別高純度的蛋白質(zhì)是該探討要做的基本工作之一。(1)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分別、提純的圓褐固氮菌中獲得固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。表1PCR反應(yīng)體系50μL緩沖液5μL脫氧核苷酸1μL引物A0.5μL引物B0.5μLDNA聚合酶0.5U模板DNA1~2μL加去離子水補(bǔ)足至50μL表2反應(yīng)條件溫度時間變性95℃30s復(fù)性55℃30s延長72℃1min30次循環(huán)后相宜5~10min保溫4℃12h①從上表中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)分之一是__不須要ATP(或須要加入引物,或不須要解旋酶,或不須要DNA連接酶)__。此外,從反應(yīng)條件看,所運用的DNA聚合酶應(yīng)具有__耐高溫__的特點。每次循環(huán)都須要2種引物的主要緣由是__DNA聚合酶只能從3′端延長DNA鏈__。②下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。__如

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