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PAGE9-課后分層檢測案10DNA的粗提取與鑒定[基礎(chǔ)鞏固練]1.在制備雞血細(xì)胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的是()A.防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加速凝血2.用過濾的方法得到含DNA的氯化鈉溶液后,還要用酒精處理,才可以得到較純的DNA,這是因?yàn)?)A.DNA易溶于酒精,而濾液中某些雜質(zhì)不易溶于酒精B.DNA不易溶于酒精,而濾液中某些雜質(zhì)易溶于酒精C.DNA和濾液中其他成分更易溶于酒精D.DNA和濾液中其他成分都不溶于酒精3.在DNA提取過程中,最好運(yùn)用塑料的試管和燒杯,目的是()A.不易裂開B.削減提取過程中DNA的損失C.增加DNA的含量D.簡單洗刷4.下面不能影響DNA粗提取含量的是()A.選材B.洗滌劑的用量C.二苯胺的用量D.?dāng)嚢韬脱心サ某潭?.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”的試驗(yàn)操作的說法,有誤的是()A.該試驗(yàn)中有兩次加入蒸餾水,均是為了析出DNAB.該試驗(yàn)操作中多次用到攪拌,除最終一步未強(qiáng)調(diào)方向外,其余均要求單向攪拌C.該試驗(yàn)中有3次過濾,過濾時(shí)運(yùn)用紗布的層數(shù)與濾液或黏稠物有關(guān)D.試驗(yàn)中3次加入濃度為2mol/L的NaCl溶液,均是為了溶解DNA6.若從植物細(xì)胞中提取DNA,發(fā)覺試驗(yàn)效果不好,如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色反應(yīng)等。其可能的緣由是()①植物細(xì)胞中DNA含量低②研磨不充分③過濾不充分④95%冷酒精的量過大A.①②B.③④C.①④D.②③7.在DNA的粗提取與鑒定試驗(yàn)中有三次過濾(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液(2)過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液(3)過濾溶解有DNA的物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液以上三次過濾分別為了獲得()A.含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA濾液C.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNAD.含較純DNA濾液、紗布上黏稠物、含DNA濾液8.DNA的粗提取與鑒定試驗(yàn)的正確操作步驟是()A.制備雞血細(xì)胞液→提取細(xì)胞核物質(zhì)→溶解核內(nèi)的DNA→析出并濾取DNA黏稠物→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAB.制備雞血細(xì)胞液→提取細(xì)胞核物質(zhì)→溶解并析出DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAC.制備雞血細(xì)胞液→溶解DNA→提取細(xì)胞核中的DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定D.制備雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)提取液→溶解DNA并析出→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定9.下圖為“DNA的粗提取與鑒定”試驗(yàn)的一些重要操作示意圖,據(jù)圖回答下列有關(guān)該試驗(yàn)的問題:(1)正確的操作依次是________。(2)上圖C、E步驟都加入蒸餾水,但其目的不同,分別是__________________和____________________。(3)上圖A步驟中所用酒精必需是經(jīng)過________才能運(yùn)用,該步驟的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可滴加________試劑,沸水浴,假如出現(xiàn)________,則該絲狀物的主要成分為DNA。[實(shí)力提升練]10.下列關(guān)于DNA的粗提取和鑒定的試驗(yàn)過程的敘述,不正確的是()A.操作步驟為:制備雞血細(xì)胞→裂開細(xì)胞,獲得含DNA的濾液→溶解核內(nèi)的DNA并過濾→析出并濾取含DNA的黏稠物→DNA的再溶解并過濾→提取較純凈的DNA→鑒定DNAB.試驗(yàn)過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2mol/L,目的是溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNAC.試驗(yàn)過程中,過濾含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液和過濾溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液的目的分別是得到紗布上的黏稠物和含DNA的濾液D.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺試劑即可出現(xiàn)藍(lán)色改變11.下列圖示中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是()12.在“DNA的粗提取和鑒定”試驗(yàn)中,甲、乙、丙、丁四個(gè)小組除下表中所列處理方法不同外,其他操作步驟均正確,但試驗(yàn)結(jié)果卻不同。下列有關(guān)敘述不正確的是()組別試驗(yàn)材料提取核物質(zhì)時(shí)加入的溶液去除雜質(zhì)時(shí)加入的溶液DNA鑒定時(shí)加入的試劑甲雞血蒸餾水95%的酒精(25℃)二苯胺乙菜花蒸餾水95%的酒精(冷卻)雙縮脲試劑丙豬血蒸餾水95%的酒精(冷卻)二苯胺丁雞血蒸餾水95%的酒精(冷卻)二苯胺A.試驗(yàn)材料選擇錯(cuò)誤的組別是丙B.沸水浴后試管中溶液顏色變藍(lán)的組別是甲、丁C.甲組試驗(yàn)現(xiàn)象差的緣由是25℃的酒精對DNA的凝集效果差D.乙組試驗(yàn)不勝利僅因?yàn)樵阼b定時(shí)加入了雙縮脲試劑13.甲、乙兩圖為“DNA的粗提取與鑒定”試驗(yàn)中涉及的兩個(gè)操作裝置圖。相關(guān)敘述正確的是()A.圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaCl溶液,但兩者濃度不同B.圖乙試管經(jīng)稍稍加熱后即可視察到一支試管中的溶液明顯變藍(lán),另一支試管中的溶液不變藍(lán)C.圖甲操作需用玻璃棒快速攪拌以使DNA析出,并纏繞在玻璃棒上D.圖乙操作中所用的二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用以達(dá)到較好的鑒定效果14.在DNA粗提取與鑒定試驗(yàn)中,將第三次過濾獲得的紗布上含有DNA的黏稠物(含有較多雜質(zhì))分別處理如下:序號操作過程①放入2mol/L的NaCl溶液,攪拌后過濾②再加入0.14mol/L的NaCl溶液,攪拌后過濾③再加入冷卻的、同體積的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌,卷起絲狀物上述操作過程正確的是()A.①②B.①②③C.①③D.②③15.科研人員以金定鴨、長樂灰鵝和象洞雞的全血為試驗(yàn)材料,比較苯酚—氯仿抽提法(方法A)和鹽析法(方法B)提取血液中DNA的效率。下圖中EDTA具有破壞細(xì)胞膜、抑制DNA酶活性的作用,SDS具有破壞細(xì)胞膜和核膜、使蛋白質(zhì)變性和抑制DNA酶活性的作用。提取過程:試驗(yàn)結(jié)果:測定項(xiàng)目金定鴨長樂灰鵝象洞雞方法A方法B方法A方法B方法A方法B純度/OD值1.951.951.852.361.961.90濃度/μg·mL-1534.29240.00899.17583.33385.35914.17注:純DNA的OD值為1.8,OD值在1.75~1.85間,DNA純度較好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值低于1.8,一般有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)污染。請回答下列問題:(1)本試驗(yàn)不選擇哺乳動(dòng)物血液作為試驗(yàn)材料的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)步驟①中,若只用蛋白酶K消化處理,對試驗(yàn)結(jié)果的影響是________________________。(3)步驟③中,裂開細(xì)胞常用的方法是________________________________________________________________________。步驟⑤中加入蒸餾水的目的是________________________________________________________________________。(4)對于長樂灰鵝、象洞雞來說,較相宜的DNA提取方法分別是________、________。(5)結(jié)果表明,用不同方法提取DNA的試驗(yàn)中,影響DNA純度的主要物質(zhì)是________。不同鳥類的相同體積的血液中DNA提取量有明顯差異,其緣由可能是________________________________。[素養(yǎng)養(yǎng)成練]16.某生物愛好小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng),詳細(xì)步驟如下:材料處理:稱取簇新的菜花、辣椒和蒜黃各2份,每份10g。剪碎后分成兩組,一組置于20℃、另一組置于-20℃條件下保存24h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。其次步:先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液,再加入20mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步:取6支試管,分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測:在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑,混合勻稱后,置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表:材料保存溫度菜花辣椒蒜黃20℃++++++-20℃+++++++++(注:“+”越多表示藍(lán)色越深)分析上述試驗(yàn)過程,回答下列問題:(1)該探究性試驗(yàn)課題名稱是________________________________________________________________________。(2)其次步中“緩緩地”攪拌,這是為了削減________。(3)依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1:與20℃相比,相同試驗(yàn)材料在-20℃條件下保存,DNA的提取量較多。結(jié)論2:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼恼f明:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響微小。為了進(jìn)一步提高粗提取時(shí)DNA的純度,依據(jù)氯仿的特性,在第三步的基礎(chǔ)上接著操作的步驟是:________________________________________________________________________________________________________________________________________________,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。課后分層檢測案10DNA的粗提取與鑒定1.解析:檸檬酸鈉是抗凝血物質(zhì),可防止凝血,有利于雞血細(xì)胞液的制備。答案:A2.解析:DNA不易溶于酒精,而濾液中某些雜質(zhì)易溶于酒精,利用這個(gè)特點(diǎn)可去除溶于酒精的雜質(zhì),得到較純的DNA。答案:B3.解析:雞血細(xì)胞裂開以后釋放出的DNA,簡單被玻璃容器吸附,由于細(xì)胞內(nèi)DNA的含量原來就比較少,若再被玻璃容器吸附一部分,提取到的DNA就會更少。因此,試驗(yàn)過程中最好運(yùn)用塑料的燒杯和試管,削減提取過程中DNA的損失。答案:B4.解析:A項(xiàng):盡量選擇DNA含量高的材料粗提取DNA。B項(xiàng):洗滌劑的用量和類型能影響細(xì)胞膜的瓦解程度,從而導(dǎo)致DNA的釋放量的改變。C項(xiàng):二苯胺是DNA的鑒定劑,而非提取劑。D項(xiàng):攪拌和研磨充分有利于DNA的釋放。答案:C5.解析:兩次加入蒸餾水,第一次是為了使細(xì)胞吸水裂開釋放出核物質(zhì)(DNA),其次次是為了降低NaCl溶液的濃度,從而析出DNA。答案:A6.解析:研磨不充分會使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少;過濾不充分,也會導(dǎo)致提取的DNA量過少;若用于沉淀DNA的酒精量過少,也會導(dǎo)致DNA的沉淀量少,都會影響試驗(yàn)效果。答案:D7.解析:過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液應(yīng)取濾液(其內(nèi)含DNA);過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液應(yīng)取黏稠物(因其內(nèi)含析出的DNA);DNA易溶于物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液,故過濾該溶液時(shí)應(yīng)取濾液(其內(nèi)溶有DNA)。答案:A8.解析:B項(xiàng)漏掉了DNA溶解前要過濾;C項(xiàng)提取細(xì)胞核中DNA敘述欠妥,應(yīng)是提取核物質(zhì),并且應(yīng)放在溶解DNA之前;D項(xiàng)敘述明顯有誤。答案:A9.解析:兩次加入蒸餾水的作用:第一次是使雞血細(xì)胞吸水漲破,DNA從細(xì)胞中釋放出來進(jìn)入濾液;其次次是使溶解于物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,與雜質(zhì)分別。本題還涉及DNA的鑒定,DNA可在沸水浴條件下與二苯胺試劑作用,被染成藍(lán)色。答案:(1)C→B→E→D→A(2)加速血細(xì)胞的裂開降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出(3)充分冷卻提取含雜質(zhì)少的DNA(4)二苯胺藍(lán)色10.解析:DNA的粗提取和鑒定的試驗(yàn)步驟包括:制備雞血細(xì)胞→裂開細(xì)胞,獲得含DNA的濾液→溶解核內(nèi)的DNA并過濾→析出并濾取含DNA的黏稠物→DNA的再溶解和過濾→提取較純凈的DNA→鑒定DNA,A正確;試驗(yàn)過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2mol/L,目的是溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA,B正確;過濾含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液的目的是去除溶于0.14mol/L的NaCl溶液中的雜質(zhì),得到含有DNA的黏稠物,過濾溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液的目的是得到含DNA的濾液,C正確;只有在沸水浴條件下,DNA才能與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色,D錯(cuò)誤。答案:D11.解析:在質(zhì)量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。答案:C12.解析:菜花細(xì)胞有細(xì)胞壁,加入蒸餾水不裂開,須經(jīng)過研磨。鑒定時(shí)要用二苯胺試劑。答案:D13.解析:圖甲燒杯中為酒精溶液,圖乙試管中為NaCl溶液;圖乙試管須要在沸水中加熱5min;圖甲用玻璃棒沿一個(gè)方向輕輕攪拌,卷起絲狀物;圖乙操作中所用的二苯胺最好現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果。答案:D14.解析:第三次過濾后在紗布上的是粗提取的DNA,此DNA還含有雜質(zhì),因此將其溶于2mol/L的NaCl溶液中,再進(jìn)行過濾,以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的雜質(zhì)。然后向?yàn)V液中加入同體積的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液即可析出DNA,然后挑出DNA進(jìn)行鑒定。答案:C15.解析:(1)哺乳動(dòng)物血液中的血細(xì)胞主要是紅細(xì)胞,哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體等,故不含DNA。(2)可依據(jù)題目中的提示信息解答。(3)動(dòng)物細(xì)胞在蒸餾水中會吸水漲破;步驟⑤是通過加入蒸餾水來降低NaCl溶液的濃度,DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,從而可以析出。(4)比照試驗(yàn)結(jié)果的表格即可得出結(jié)論。(5)結(jié)合表格中的數(shù)據(jù)和表格下的標(biāo)注,因OD值都高于1.8,沒有小于1.8的,則
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