牛巴氏桿菌病的綜合防控措施

牛巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌感染引起的一類急性、敗血性疾病，我國將其列為二類動物疫病，在全世界范圍內(nèi)均有分布。病牛表現(xiàn)為全身多臟器出血，死亡率較高，對肉牛養(yǎng)殖行業(yè)的健康發(fā)展造成了不利影響。1病原學特點牛巴氏桿菌病的病原為多殺性巴氏桿菌，是革蘭氏陰性球桿菌，外觀呈兩端鈍圓的小桿狀，大小為0.5～2.5μm×0.2～0.4μm。按照該細菌的莢膜抗原的不同可將其分為A、B、C、D、E5個類型，其中感染牛的主要為B型和E型多殺性巴氏桿菌，臨床表現(xiàn)主要為敗血癥，A型和F型巴氏桿菌感染后主要表現(xiàn)為呼吸系統(tǒng)病變；按照菌落的熒光反應可將其分為Fg型、Fo型兩種類型，這兩種類型的細菌可在特定情況下相互轉換。多殺性巴氏桿菌在進行體外培養(yǎng)時對營養(yǎng)的要求比較高，無法在普通肉湯、普通瓊脂培養(yǎng)基中生長，當培養(yǎng)基中添加血液、血清時該細菌生長良好，培養(yǎng)24h后可形成肉眼可見的菌落。該細菌對于環(huán)境的抵抗能力交叉，60℃下能存活20min，70℃下僅能存貨5～10min；糞便或血液中的細菌能夠存活10d，但如果被陽光折射或遇到高溫條件會馬上死亡；在生產(chǎn)實踐中常使用5%的石碳酸、10%的漂白粉或0.5%～1%氫氧化鈉對環(huán)境進行消毒，以減少巴氏桿菌病的發(fā)生。2流行特點2.1易感動物多殺性巴氏桿菌除了能夠感染牛之外，對豬、雞、鴨、兔等動物也有感染性，但馬、驢、驢、犬等動物不易感染，人通常不感染或感染后危害較輕微。家畜中最易感的是牛，任何品種、年齡的牛均可發(fā)病，其中3周歲以內(nèi)的牛發(fā)病率較高，犢牛感染后常為急性經(jīng)過，治療不及時容易死亡。2.2傳播途徑病牛的排泄物和分泌物中均存在大量的多殺性巴氏桿菌，可對環(huán)境、飲水、飼料或生產(chǎn)用具造成污染，健康牛被細菌污染的環(huán)境后經(jīng)消化道發(fā)生感染。病牛也可通過咳嗽、打噴嚏的方式將病毒以飛沫的形式排出，健康?？山?jīng)呼吸道造成感染。此外，吸血昆蟲叮咬過發(fā)病牛后再次叮咬健康牛只也可能造成本病的發(fā)生。2.3流行特點牛巴氏桿菌病的發(fā)生常呈地方性流行或散發(fā)，由于該細菌有一定的侵襲性，故同種屬動物患病后會迅速傳播，但不同動物之間不出現(xiàn)交叉感染。任何季節(jié)均有本病的發(fā)生，沒有明顯的季節(jié)性，但在多雨、潮濕的季節(jié)或季節(jié)交替時更易發(fā)病。3臨床癥狀根據(jù)病牛的不同臨床表現(xiàn)可將該病分為三種類型，分別是急性敗血型、肺炎型和水腫型。3.1急性敗血型病牛表現(xiàn)為體溫明顯上升，通常為41～42℃，脈搏加快，采食量降低或食欲廢絕，被毛粗亂，鼻鏡干燥，反芻次數(shù)明顯減少。鼻孔和尿液中有紅細胞或有血，而后逐漸出現(xiàn)腹痛、腹瀉，起初排除的糞便為稀粥狀，逐漸轉變?yōu)橐后w樣稀糞，糞便中往往含有粘液、血液或脫落的腸粘膜，有惡臭氣味。發(fā)病12～24h后，病牛的體溫逐漸降低。由于急性敗血型病例的病程較短，在飼養(yǎng)管理較差的養(yǎng)殖場中經(jīng)常出現(xiàn)來不及診斷、治療，患病牛就因失血過多而死亡。剖檢病死?？梢娙砑毙詳⊙宰兓つど嫌行〕鲅c，淋巴結充血、腫脹，多器官上有出血點。3.2肺炎型該型較為常見，病牛主要表現(xiàn)為呼吸困難、咳嗽，心跳加快，眼結膜充血，體溫通常在40℃左右，有時咳嗽會流出帶血、帶泡沫或膿性的鼻液，咳嗽時有明顯痛感。當癥狀較為嚴重時，牛只呼吸極度困難，有伸頸、張口呼吸的表現(xiàn)，可視黏膜發(fā)紺，反芻基本停止，常趴臥于角落，部分病牛有血痢的表現(xiàn)。叩診病牛胸部，有較大面積的濁音區(qū)，聽診有支氣管呼吸音、鑼音或胸膜摩擦音。多數(shù)肺炎型巴氏桿菌病牛因呼吸困難而窒息死亡，病程在7d左右，預后不良。剖檢病死?？梢姵鲅?、纖維性胸膜肺炎，肺臟組織出現(xiàn)大面積肝變，根據(jù)病程發(fā)展的不同階段肺臟表面呈紅色、黑紅色、灰白色或灰黃色，表面有小型黃色壞死灶，壞死灶周圍的結締組織可形成包囊，肺小葉間組織因水腫而增寬；胸腔內(nèi)有黃色液體，液體中有大量纖維蛋白凝塊，心包與肺部可發(fā)生粘連，伴發(fā)纖維素性心包炎。3.3水腫型病牛的眼睛紅腫、流淚，口角流涎，可視黏膜發(fā)紺，呼吸困難，舌頭以及咽喉處高度腫脹，頭部、下頜和胸前部水腫，有時水腫可延伸至下腹部，嚴重時肛門、四肢也會發(fā)生水腫，當咽喉處水腫時會伴有呼吸、吞咽困難，按壓水腫部位有明顯的疼痛反應，指壓留痕，大部分病例有全身虛脫的表現(xiàn)。病程可持續(xù)12～36h。剖檢可見口鼻內(nèi)有大量液體，咽喉、皮下和肌肉中有膠樣浸潤，下頜間、咽喉處和胸前皮下有明顯的凹陷性水腫，指壓留痕；有時舌體腫大而伸出體外；空腸段黏膜出血，腸內(nèi)容物有血液或黏膜組織；胸腔腹腔中有纖維素性滲出液；多器官有出血點，肺部氣腫。將水腫處切開，可以看到淡黃色、略渾濁的液體，頜下淋巴結、縱膈淋巴結等有急性漿液性出血炎癥。4診斷方法4.1臨床診斷根據(jù)病牛的臨床癥狀可以進行初步診斷，當牛的體溫升高至40℃以上，精神狀態(tài)交叉，可視黏膜發(fā)紺，頭頸、咽喉處明顯腫大，手壓有明顯痛感，鼻腔中泡沫狀、帶血或膿性液體流出時可初步認為是牛巴氏桿菌病，但需要和炭疽、氣腫疽、惡性水腫等有類似臨床癥狀的疾病進行鑒別診斷。4.2鑒別診斷（1）炭疽多在雨水較多的夏季或吸血昆蟲活動頻繁的季節(jié)發(fā)生，患病牛突然高燒，體溫為40～42℃，迅速死亡，瀕死期口腔、鼻腔、陰門等天然孔流出暗紅色、粘稠、凝固不良的煤焦油樣血液，尸體膨脹，尸僵不全。（2）氣腫疽多發(fā)生在4周歲以內(nèi)的牛群中，肌肉較為豐滿的部位容易發(fā)生腫脹，腫脹為炎性、氣性腫脹，按壓柔軟，有捻發(fā)音，將腫脹部位切開，切面為黑色，切口處有暗紅色帶泡沫的酸臭液體，肌肉中有暗紅色的壞死灶，肌纖維之間有裂隙，橫截面呈海綿狀。（3）惡性水腫常伴發(fā)于去勢、分娩或外傷，傷口周圍呈氣性、炎性腫脹，有輕微捻發(fā)音，切開腫脹部位，切面蒼白，肌肉為暗紅色。4.3細菌培養(yǎng)及涂片鏡檢在無菌條件下采集病牛、病死牛的淋巴結、肝臟、脾臟或肺臟等病料，接種于血液瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)，在37℃下培養(yǎng)18～24h，可以看到培養(yǎng)基中有半透明、灰白色的圓形菌落，約米粒大小，表面濕潤光滑。將該菌落（也可直接使用病料抹片）涂片后進行革蘭氏染色，可以看到紅色的短桿菌，進行美蘭染色可以看到兩極深染的橢圓形小桿菌。4.4動物試驗在無菌條件下采集病料進行研磨，后加入滅菌生理鹽水，制成1:5的懸濁液，在4℃下靜止12h，取上清液。將上清液以腹腔注射或皮下注射接種給試驗動物，小鼠每只接種0.3mL，家兔每只接種0.5mL。試驗動物若在18～36h內(nèi)因敗血癥死亡，且采集病料進行抹片、染色后看到革蘭氏陰性小桿菌、兩極深染的小桿菌時，可判斷為牛巴氏桿菌病。4.5血清學診斷膠體金定性檢測技術：將待檢液滴1～2滴到膠體金試紙條的加樣孔內(nèi)，在室溫下靜置5～10min，當檢測線（T）和對照線（C）各出現(xiàn)一條較深的紫紅色的線時，該樣品為陽性樣品；當檢測線（T）有一條較淺的紫紅色線，而對照線（C）有一條較深的紫紅色線時，該樣品為弱陽性樣品；當檢測線（T）不出現(xiàn)色線，對照線（C）有一條較深的紫紅色線時，該樣品為陰性樣品；當對照線（C）不出現(xiàn)色線時，結果為無效，需重新檢測。5綜合防控措施5.1治療當發(fā)現(xiàn)病牛時，應當立刻進行隔離治療，病死牛的尸體、排泄物、分泌物、污染的墊草等不得隨意丟棄，要按照無害化處理要求進行規(guī)范處理，防止疾病的進一步擴散。治療時也要注意環(huán)境的衛(wèi)生，及時清理糞便和臟污墊料，圈舍、運動場消毒可交替使用5%的石灰乳、1%的漂白粉或3%的石碳酸溶液等，最后在地面撒布生石灰吸干水分，保持圈舍干燥。有條件的養(yǎng)殖場應當通過細菌分離培養(yǎng)配合藥敏試驗來確定用藥方案，這樣能夠有效降低病原菌耐藥性的產(chǎn)生。無法進行藥敏試驗時，可使用多種藥物聯(lián)合使用，巴氏桿菌對氟苯尼考、硫酸頭孢喹肟、頭孢噻呋鈉、多西環(huán)素等藥物均比較敏感，具體用藥可使用頭孢噻呋鈉或阿莫西林鈉配合恩諾沙星、強力霉素或泰拉菌素配合氟苯尼考等藥物通過肌內(nèi)注射、靜脈注射的方法進行治療；值得注意的是，通?？股夭徊捎每诜o藥的方式用于治療，這是因為牛的瘤胃內(nèi)有大量的微生物菌群，口服抗生素容易導致瘤胃微生物穩(wěn)態(tài)遭到破壞，且注射給藥后血藥濃度上升快，峰濃度高，效果更好。同時，應當觀察患病牛的臨床癥狀，必要時使用抗組胺藥、瘤胃興奮劑等藥物進行對癥治療；當病牛只的經(jīng)濟價值較高時，也可以考慮使用同源高免血清來縮短病程。5.2預防5.2.1免疫接種接種疫苗能夠起到預防牛巴氏桿菌病的作用，用于預防本病的疫苗可分為滅活疫苗、弱毒疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗和聯(lián)合疫苗5種。（1）滅活疫苗較為安全，易于保存和運輸，但接種劑量要求較大，需要多次接種，現(xiàn)有的滅活疫苗包括熱滅活疫苗、甲醛滅活疫苗、明礬沉淀疫苗、油佐劑滅活疫苗以及氫氧化鋁膠佐劑滅活疫苗，在疫苗中加入佐劑能夠很好的延緩抗原釋放，有助于高親和力抗體的產(chǎn)生，提升疫苗的免疫效果，油佐劑滅活疫苗的保護力更佳，且不會引起接種部位的局部腫脹。（2）弱毒疫苗能夠在被接種動物體內(nèi)進行繁殖，僅需要少量接種就能產(chǎn)生較為堅強的抵抗力，免疫期長于滅活疫苗。弱毒疫苗包括突變致弱活疫苗、連續(xù)傳代致弱活疫苗以及自然弱毒活疫苗。免疫期長于滅活疫苗。弱毒疫苗包括突變致弱活疫苗、連續(xù)傳代致弱活疫苗以及自然弱毒活疫苗。（3）亞單位疫苗是提取牛巴氏桿菌莢膜等特殊蛋白質(zhì)結構，找到有免疫活性的片段進行疫苗制作，這樣的疫苗能夠避免集體產(chǎn)生無關抗體，以減少疫苗的副反應，但免疫原性較低。（4）基因工程疫苗是對巴氏桿菌強毒株的毒力相關基因進行敲除后構建的活疫苗，安全性和免疫原性都比較高，但目前沒有商品化的疫苗可供使用。（5）聯(lián)合疫苗是針對不同血清型或不同種屬的細菌、病毒制作的疫苗，這種疫苗能夠減少免疫注射的次數(shù)，方便高效，針對牛巴氏桿菌病已經(jīng)有莢膜A型、莢膜B型的聯(lián)合疫苗可用于免疫接種，但在臨床的使用方面仍存在一定的爭議。目前，在臨床上廣泛使用的為牛巴氏桿菌油佐劑滅活疫苗或氫氧化鋁膠佐劑滅活疫苗，分別在春季和秋季各進行一次免疫接種，牛群中的免疫密度應超過95%，否則達不到良好的防控效果。體重超過100kg的牛，肌肉注射6mL疫苗，體重低于100kg的牛，肌肉注射4mL疫苗，通常接種2～3周后體內(nèi)的抗體可達到保護水平。疫苗接種前后一周內(nèi)不得使用免疫抑制類藥物，如地塞米松、安乃近、氨基比林、對乙酰氨基酚等。5.2.2加強管理由于巴氏桿菌