天津耀華嘉誠(chéng)國(guó)際中學(xué)2025屆高考?jí)狠S卷生物試卷含解析

天津耀華嘉誠(chéng)國(guó)際中學(xué)2025屆高考?jí)狠S卷生物試卷注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書(shū)寫(xiě)，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效；在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．家貓?bào)w色由X染色體上一對(duì)等位基因B、b控制，只含基因B的個(gè)體為黑貓，只含基因b的個(gè)體為黃貓，其他個(gè)體為玳瑁貓。下列說(shuō)法正確的是（）A．只有雌性貓具有純黑色品種B．玳瑁貓與黃貓雜交后代中玳瑁貓占50%C．只有用黑貓和黃貓雜交，才能獲得最大比例的玳瑁貓D．為持續(xù)高效地繁育玳瑁貓，應(yīng)逐代淘汰其他體色的貓2．下列關(guān)于細(xì)胞的敘述，正確的是（）A．生物體都是由細(xì)胞組成的B．細(xì)胞都能進(jìn)行分裂和分化C．細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)都是DNAD．細(xì)胞分解葡萄糖都能產(chǎn)生CO23．20世紀(jì)60年代，醫(yī)院開(kāi)始用淀粉酶替代酸來(lái)分解淀粉。下圖為某同學(xué)探究不同pH條件下淀粉酶對(duì)淀粉的分解作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列說(shuō)法不正確的是（）A．應(yīng)先將各組淀粉溶液的pH值調(diào)到設(shè)定數(shù)值再加入淀粉酶B．pH值為3和9的兩組試驗(yàn)中的淀粉酶的活性相同C．1h后若將pH為13的試管的pH調(diào)至7，則其淀粉量基本不變D．淀粉酶通過(guò)降低淀粉分解反應(yīng)所需的活化能來(lái)實(shí)現(xiàn)催化作用4．下列關(guān)于微生物的敘述，正確的是（）A．染色體變異不能發(fā)生在噬菌體中B．微生物都是生態(tài)系統(tǒng)中的分解者C．格里菲思的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明了DNA是遺傳物質(zhì)D．T2噬菌體侵染大腸桿菌時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄酶與DNA—起進(jìn)入細(xì)胞5．下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解。請(qǐng)根據(jù)圖分析下列四個(gè)選項(xiàng)，其中說(shuō)法不正確的一項(xiàng)是（）A．單克隆抗體制備過(guò)程的順序是：B．在單克隆抗體制備過(guò)程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有在體外大量繁殖、產(chǎn)生特異性抗體的特性C．單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備的優(yōu)點(diǎn)，所以可以制成“生物導(dǎo)彈”D．由圖中可看出，此過(guò)程運(yùn)用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物組織培養(yǎng)6．最小存活種群是指保證種群在一個(gè)特定的時(shí)間內(nèi)能健康地生存所需的最小有效數(shù)量，這是一個(gè)種群的閾值，低于這個(gè)閾值，種群會(huì)趨向滅絕。下列敘述正確的是（）A．小于最小有效數(shù)量的種群其基因的多樣性較低，適應(yīng)性較差B．越小的種群種內(nèi)斗爭(zhēng)越激烈，導(dǎo)致種群會(huì)較快地趨向絕滅C．種群的年齡組成和性別比例不會(huì)影響最小存活種群的大小D．大于閾值的種群存活時(shí)間較長(zhǎng)，穩(wěn)定后不會(huì)發(fā)生生物進(jìn)化7．下圖為動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過(guò)程模式圖。下列相關(guān)描述正確的是（）A．②中染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分B．顯微鏡觀察時(shí)視野中③數(shù)量最多C．染色體數(shù)目加倍發(fā)生在④→⑤過(guò)程中D．②→⑥經(jīng)歷了一個(gè)細(xì)胞周期8．（10分）研究發(fā)現(xiàn)人體的生物鐘機(jī)理如圖所示，下丘腦SCN細(xì)胞中，基因表達(dá)產(chǎn)物PER蛋白的濃度呈周期性變化，振蕩周期為24h，下列分析錯(cuò)誤的是（）A．核糖體在圖中的移動(dòng)方向是從右向左B．圖中過(guò)程③體現(xiàn)了負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制C．per基因只在下丘腦SCN細(xì)胞中復(fù)制與表達(dá)D．一條mRNA上，可同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體翻譯出多條相同肽鏈二、非選擇題9．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對(duì)人體沒(méi)有影響。我國(guó)科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低，研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點(diǎn)的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請(qǐng)?zhí)顚?xiě)以下表格（若選用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長(zhǎng)滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，比較_________的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點(diǎn)是_________。10．（14分）小鼠的黃毛與灰毛由一對(duì)等位基因（R、r）控制，彎曲尾與正常尾由另一對(duì)等位基因（T、t）控制，兩對(duì)等位基因獨(dú)立遺傳，控制尾形的基因無(wú)致死現(xiàn)象?，F(xiàn)從鼠群中選擇多只表現(xiàn)型相同的雌鼠和雄鼠，進(jìn)行隨機(jī)交配，F(xiàn)1的表現(xiàn)型及比例如下圖所示。請(qǐng)回答：（1）小鼠的黃毛與灰毛是一對(duì)相對(duì)性狀，其中顯性性狀是_______?？刂莆残蔚腡和t基因位于____________。（2）親代雌鼠的基因型為_(kāi)___________，F(xiàn)1灰毛彎曲尾雌鼠中雜合子占的比例為_(kāi)___________。（3）F1黃毛彎曲尾雌雄鼠隨機(jī)交配，F(xiàn)2中灰毛彎曲尾雄鼠所占的比例為_(kāi)___________。（4）請(qǐng)用遺傳圖解表示以F1中雜合的灰毛彎曲尾雌鼠與灰毛正常尾雄鼠為親本雜交得到子代的過(guò)程。____________11．（14分）胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得。利用紅酵母發(fā)酵，是提取天然β-胡蘿卜素的方法之一。二者流程如下：（l）篩選產(chǎn)胡蘿卜素的紅酵母時(shí)，可選用____法進(jìn)行接種（答出一種即可），通過(guò)對(duì)其菌落的____進(jìn)行觀察，初步確定某一菌株是否為紅酵母菌株。（2）碳源的種類對(duì)β-胡蘿卜素的產(chǎn)量有著一定的影響，有關(guān)研究結(jié)果如下表：碳源麥芽糖蔗糖淀粉β-胡蘿卜素含量（mg·L-3）3．252．833．68據(jù)表分析，最佳碳源是_____。若要進(jìn)一步探究最佳氮源，可以用蔗糖為碳源，分別用_____進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)并比較β-胡蘿卜素含量。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和____，以防止胡蘿卜素分解；萃取過(guò)程中在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，為了防止________（2）圖中X過(guò)程表示____，其目的是____。12．植物甲為常見(jiàn)陽(yáng)生植物，植物乙為常見(jiàn)陰生植物，陽(yáng)生植物的光補(bǔ)償點(diǎn)（光合速率與呼吸速率相等時(shí)環(huán)境中的光照強(qiáng)度）一般大于陰生植物，回答下列問(wèn)題：（1）葉綠素分布于植物乙葉綠體基粒的___薄膜上，光反應(yīng)階段產(chǎn)生的ATP和NADPH將直接參與暗反應(yīng)階段中的____過(guò)程。（2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，給植物甲澆灌H2l8O，發(fā)現(xiàn)葉肉細(xì)胞中出現(xiàn)了（CH218O）。分析其最可能的轉(zhuǎn)化途徑是_________________________，植物乙凈光合速率為0時(shí)，植物甲凈光合速率_____________（填大于0、等于0、小于0）。（3）若將植物甲密閉在無(wú)O2、但其他條件適宜的小室中，遮光培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)該植物細(xì)胞無(wú)氧呼吸過(guò)程中除第一階段有少量ATP生成外，第二階段并未有ATP生成，原因是___________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

分析題意可知，黑貓個(gè)體的基因型為XBXB和XBY，黃貓個(gè)體的基因型為XbXb和XbY，玳瑁貓個(gè)體的基因型為XBXb，且玳瑁貓只有雌性個(gè)體?！驹斀狻緼、黑貓個(gè)體的基因型為XBXB和XBY，故雌性與雄性貓均有純黑色品種，A錯(cuò)誤；B、玳瑁貓與黃貓雜交，即XBXb與XbY雜交，獲得后代中玳瑁貓的概率為25%，B錯(cuò)誤；C、用雌性黑貓XBXB和雄性黃貓XbY雜交，或用雄性黑貓XBY和雌性黃貓XbXb雜交，獲得玳瑁貓的概率均為50%，后代比例為玳瑁貓的比例最大，C正確；D、玳瑁貓只有雌性個(gè)體，淘汰其他體色的貓而只保留玳瑁貓無(wú)法繁殖，必須和其他體色的貓雜交才能得到玳瑁貓，D錯(cuò)誤；故選C。2、C【解析】

1、細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。2、高度分化的細(xì)胞不再進(jìn)行細(xì)胞分裂。3、只要是細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物，其遺傳物質(zhì)就是DNA。4、細(xì)胞有氧呼吸的產(chǎn)物是二氧化碳和水，無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳或乳酸?！驹斀狻緼、除病毒外，絕大多數(shù)生物都是由細(xì)胞組成的，A錯(cuò)誤；B、已高度分化的細(xì)胞一般不再分裂，如精細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞生物包括原核生物和真核生物，二者的遺傳物質(zhì)都是DNA，C正確；D、乳酸菌無(wú)氧呼吸分解葡萄糖時(shí)不產(chǎn)生CO2，D錯(cuò)誤。故選C。3、B【解析】

分析柱形圖：圖示為某同學(xué)探究不同pH條件下淀粉酶對(duì)淀粉的分解作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由圖可知pH為7時(shí)，淀粉酶的活性最高；pH在3～7時(shí)，隨著pH的升高，酶活性逐漸增強(qiáng)；pH在7～9時(shí)，隨著pH的升高，酶活性逐漸降低；pH達(dá)到11時(shí)，酶基本已經(jīng)變性失活?！驹斀狻緼、本實(shí)驗(yàn)的目的是探究不同pH條件下淀粉酶對(duì)淀粉的分解作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)先將各組試管溶液pH分別調(diào)到設(shè)定數(shù)值再混合，A正確；B、在pH為3和9時(shí)兩只試管中的淀粉剩余量相同，但pH為3時(shí)，酶可以催化淀粉水解，酸也會(huì)促進(jìn)淀粉水解，而pH為9時(shí)只有酶的催化作用，所以兩種pH下酶的催化效率應(yīng)該是不同的，即pH為3和9時(shí)酶的活性不同，B錯(cuò)誤；C、pH為13時(shí)，酶已經(jīng)變性失活，因此再將pH調(diào)為7時(shí)，反應(yīng)速率不變，即淀粉含量基本不變，C正確；D、淀粉酶通過(guò)降低淀粉分解反應(yīng)所需的活化能來(lái)實(shí)現(xiàn)催化作用，D正確。故選B。4、A【解析】

1、在生態(tài)系統(tǒng)中，微生物可能是生產(chǎn)者（如硝化細(xì)菌、光合細(xì)菌等）、消費(fèi)者（如寄生細(xì)菌）、分解者（如腐生細(xì)菌）。2、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。3、T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。【詳解】A、噬菌體屬于病毒，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不含染色體，所以不可能發(fā)生染色體變異，A正確；B、在生態(tài)系統(tǒng)中，微生物不一定都是分解者，如硝化細(xì)菌屬于生產(chǎn)者、寄生細(xì)菌屬于消費(fèi)者，B錯(cuò)誤；C、格里菲思的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，證明了已經(jīng)被加熱殺死的S型細(xì)菌中，必然含有某種促成這一轉(zhuǎn)化的活性物質(zhì)—“轉(zhuǎn)化因子”，沒(méi)有證明DNA是遺傳物質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、T2噬菌體屬于DNA病毒，不含逆轉(zhuǎn)錄酶，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題主要考查病毒的結(jié)構(gòu)、遺傳物質(zhì)的探索等相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確T2噬菌體屬于DNA病毒，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。5、D【解析】

單克隆抗體的制備：

1.細(xì)胞來(lái)源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無(wú)限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無(wú)限繁殖。

2.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。

3.兩次次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。

4.兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性。

5.提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

6.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備?！驹斀狻緼、單克隆抗體制備過(guò)程包括獲取免疫能力的效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、誘導(dǎo)細(xì)胞融合和篩選出雜交瘤細(xì)胞、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)并篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞、體外或體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞、獲取大量單克隆抗體。因此按單克隆制備過(guò)程的順序用箭頭把代表各圖解的字母連接為，A正確；

B、在單克隆抗體產(chǎn)生過(guò)程中，之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，融合成D表示雜交瘤細(xì)胞，具備融合前兩種細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)，既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生特定的抗體，B正確；C、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈，C正確；D、此過(guò)程運(yùn)用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D?！军c(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題的能力。6、A【解析】

種群的數(shù)量特征包括種群密度、年齡組成、性別比例、出生率、死亡率、遷入率和遷出率?！驹斀狻緼、當(dāng)種群數(shù)量小于最小有效數(shù)量時(shí)，因?yàn)閿?shù)量少，基因的多樣性較低，適應(yīng)性較差，A正確；B、種群數(shù)量越大種內(nèi)斗爭(zhēng)越激烈，越小的種群種內(nèi)斗爭(zhēng)相對(duì)較小，B錯(cuò)誤；C、種群的年齡組成和性別比例都會(huì)影響種群的數(shù)量，C錯(cuò)誤；D、大于閾值的種群存活時(shí)間較長(zhǎng)，穩(wěn)定后基因頻率仍會(huì)改變，仍會(huì)發(fā)生生物進(jìn)化，D錯(cuò)誤。故選A。7、A【解析】

有絲分裂是指一種真核細(xì)胞分裂產(chǎn)生體細(xì)胞的過(guò)程。有絲分裂分裂具有周期性，即連續(xù)分裂的細(xì)胞，從一次分裂完成時(shí)開(kāi)始，到下一次分裂完成時(shí)為止，從形成子細(xì)胞開(kāi)始到再一次形成子細(xì)胞結(jié)束為一個(gè)細(xì)胞周期，包括分間期和分裂期。圖中①為間期，②為前期，③為中期，④為后期，⑤為末期，⑥為分裂得到的兩個(gè)子細(xì)胞?！驹斀狻緼、②為有絲分裂前期，出現(xiàn)染色體，染色體主要是由DNA和蛋白質(zhì)組成，而DNA是細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分，A正確；B、間期時(shí)間最長(zhǎng)，因此顯微鏡觀察時(shí)視野中①數(shù)量最多，B錯(cuò)誤；C、有絲分裂后期開(kāi)始時(shí)著絲粒分裂，染色體數(shù)目加倍，因此染色體數(shù)目加倍發(fā)生在③→④過(guò)程中，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞周期包括間期和分列前，①→⑥經(jīng)歷了一個(gè)細(xì)胞周期，D錯(cuò)誤。故選A。8、C【解析】

細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因。根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中①為轉(zhuǎn)錄過(guò)程，②為翻譯過(guò)程，③過(guò)程表示PER蛋白能進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)per基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程?！驹斀狻緼、根據(jù)多肽鏈的長(zhǎng)短，可判斷核糖體在圖中移動(dòng)的方向是從右向左，A正確；B、過(guò)程③體現(xiàn)了負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，B正確；C、per基因只在下丘腦SCN細(xì)胞中表達(dá)，而由于各個(gè)細(xì)胞都含有該基因，所以隨著其他細(xì)胞的復(fù)制而復(fù)制，C錯(cuò)誤；D、一條mRNA鏈上，可同時(shí)結(jié)合多個(gè)核糖體翻譯出多個(gè)相同的肽鏈，D正確。故選C。二、非選擇題9、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會(huì)造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)1、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交。4、有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細(xì)胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過(guò)4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點(diǎn)的基因突變技術(shù)。②與研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照原則，若要比較新蛋白A的表達(dá)效率是否提高，則需設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對(duì)照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長(zhǎng)滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因?yàn)榈鞍譇基因的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會(huì)造成基因污染；有效成分純度較高?！军c(diǎn)睛】本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，考生需要理解和記憶相關(guān)知識(shí)，并學(xué)會(huì)應(yīng)用所學(xué)知識(shí)正確答題。10、黃毛X染色體RrXTXT和RrXTXt1/35/36【解析】

本題結(jié)合圖形考查基因自由組合定律的應(yīng)用，要求考生理解基因自由組合定律的實(shí)質(zhì)，能利用所學(xué)知識(shí)解讀圖形，準(zhǔn)確判斷兩對(duì)性狀的顯隱性關(guān)系及位于何種染色體上，再結(jié)合題給信息分析回答問(wèn)題。【詳解】（1）分析圖形可知，多只表現(xiàn)型相同的雌鼠和雄鼠，進(jìn)行隨機(jī)交配，F(xiàn)1雄鼠中黃毛：灰毛=（200+100）：（100+50）=2:1，雌鼠中黃毛：灰毛=300：150=2:1，可知小鼠的黃毛與灰毛這對(duì)相對(duì)性狀中顯性性狀是黃毛，這對(duì)基因位于常染色體上，親本的基因型均為Rr，且基因型為RR的個(gè)體致死。F1雄鼠中彎曲尾：正常尾=（200+100）:（100+50）=2:1，雌鼠全為彎曲尾，由于控制尾形的基因無(wú)致死現(xiàn)象，可知控制尾形的T和t基因位于X染色體上，且彎曲尾對(duì)正常尾為顯性，親本中雄鼠的基因型為XTY，親本中雌鼠的基因型為XTXT：XTXt=1：2。（2）根據(jù)上述分析可知，親代雌鼠的基因型為RrXTXT：RrXTXt=1：2，親本中雄鼠的基因型為RrXTY，由于基因型為RR的個(gè)體致死，則F1中Rr：rr=2：1，XTXT：XTXt：XTY：XtY=2：1：2：1，因此F1灰毛彎曲尾雌鼠中雜合子占的比例為1/(2+1)=1/3。（3）由上述分析可知，F(xiàn)1黃毛彎曲尾雄鼠的基因型為RrXTY，F(xiàn)1黃毛彎曲尾雌鼠的基因型為RrXTXT：RrXTXt=2：1，由于基因型為RR的個(gè)體致死，則F1黃毛彎曲尾雌雄鼠隨機(jī)交配，F(xiàn)2中Rr：rr=2：1，XTXT：XTXt：XTY：XtY=5：1：5：1，因此F2中灰毛彎曲尾雄鼠所占的比例為1/3x5/12=5/36。（4）根據(jù)上述分析可知，F(xiàn)1中雜合的灰毛彎曲尾雌鼠基因型為rrXTXt，其與灰毛正常尾雄鼠（rrXtY）為親本雜交得到子代的遺傳圖解可表示為：?！军c(diǎn)睛】解題思路點(diǎn)撥：解答本題的關(guān)鍵是準(zhǔn)確判斷親本的基因型，而難點(diǎn)在于如何推理出本題中“F1雄鼠中彎曲尾：正常尾==2:1、雌鼠全為彎曲尾”這一現(xiàn)象；如果親本中雌鼠的基因型只有一種，則不管XTXT還是XTXt與雄鼠XTY雜交，其子代都不符合上述現(xiàn)象，因此應(yīng)考慮親本中雌鼠的基因型既有XTXT也有XTXt，可設(shè)親本中雌鼠的基因型XTXT：XTXt=a：b，根據(jù)“F1雄鼠中彎曲尾：正常尾==2:1”，可確定a：b=1：2，即可確定親本雌鼠中XTXT：XTXt=1：2。11、稀釋涂布平板法（或平板劃線法）顏色蔗糖不同氮源時(shí)間加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)過(guò)濾濾去不溶物【解析】

接種微生物常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等。胡蘿卜素的提取流程為胡蘿卜-粉碎-干燥-萃取-過(guò)濾-濃縮-胡蘿卜素-鑒定。【詳解】（3）微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法?？梢詫?duì)紅酵母菌株的菌落顏色進(jìn)行初步鑒定。（2）根據(jù)表格分析，蔗糖作為碳源產(chǎn)生的β-胡蘿卜素含量最多，可知表中的最佳碳源是蔗糖。要研究最佳氮源，用蔗糖做碳源，比較不同氮