2020年高中生物二輪復習-專題15-基因工程和胚胎工程

專題15基因工程和胚胎工程一、基因工程1.〔2021·金山模擬〕能以圖中虛線所示方式切割DNA分子的酶是〔〕A.

DNA切割酶B.

DNA聚合酶C.

解旋酶D.

限制酶【答案】D【考點】基因工程的根本工具簡介【解析】【解答】解：由題圖可知，該酶在能夠識別DNA分子的特定核苷酸序列，并且在特定的位點進行切割，且作用于磷酸二酯鍵，故該酶是限制酶，即D符合題意，A、B、C不符合題意。故答案為：D【分析】

1、限制酶具有特異性，只能識別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位置切割DNA分子的磷酸二酯鍵。

2、DNA聚合酶：主要是連接DNA片段與單個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，在DNA復制中起做用。

3、DNA連接酶：主要是連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵，起連接作用，在基因工程中起作用。

4、解旋酶的作用是使氫鍵斷裂。

5、DNA修飾酶是指對DNA分子進行修飾的酶，目前基因工程中常用的酶有：堿性磷酸酶、末端轉(zhuǎn)移酶、甲基化酶。

6、反轉(zhuǎn)錄酶：依賴于RNA的DNA聚合酶，既可以用DNA為模板，也可以用RNA為模板進行互補鏈的合成。2.〔2021·閔行模擬〕如圖為Ti質(zhì)粒簡圖．目的基因在兩側(cè)分別有1個BamHⅠ和1個HindⅢ識別序列，而中間有1個EcoRⅠ的識別序列．以下相關(guān)表達錯誤的選項是〔〕A.

構(gòu)建重組質(zhì)粒應(yīng)選擇BamHⅠ和HindⅢ，絕對不能選擇EcoRⅠB.

在切割后的質(zhì)粒與目的基因連接時會產(chǎn)生4個水分子C.

把切割后的質(zhì)粒與目的基因混合時會產(chǎn)生4種不同連接方式的質(zhì)粒D.

一般地，將重組質(zhì)粒導入受體細胞的概率僅為10﹣7左右【答案】C【考點】基因工程的原理及技術(shù)【解析】【解答】解：A、如果用EcoRⅠ限制酶切割那么會導致目的基因破壞，因此不可取，A正確；B、在切割后的質(zhì)粒與目的基因連接時會形成4個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生4個水分子，B正確；C、選用BamHⅠ和HindⅢ限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因，會使兩者之間定向連接，不會出現(xiàn)多種連接方式，C錯誤；D、一般地，將重組質(zhì)粒導入受體細胞的概率僅為10﹣7左右，D正確．應(yīng)選：C．【分析】基因工程的工具酶包括限制酶和DNA連接酶，為了便于質(zhì)粒和目的基因重組，往往用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因．分析題意可知，“目的基因在兩側(cè)分別有1個BamHⅠ和1個HindⅢ識別序列，而中間有1個EcoRⅠ的識別序列〞，如果用EcoRⅠ限制酶切割那么會導致目的基因破壞，因此不可取，那么應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅢ限制酶分別切割．3.〔2021·海南模擬〕質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，以下關(guān)于質(zhì)粒的表達，錯誤的選項是〔〕A.

質(zhì)粒是具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀的DNA分子B.

質(zhì)粒存在于細菌擬核之中，與擬核一起控制細菌的生命活動C.

作為載體的質(zhì)粒上有限制酶的切割位點D.

作為載體的質(zhì)粒存在特殊的標記基因【答案】B【考點】基因工程的根本工具〔詳細〕【解析】【解答】解：A.由分析可知，質(zhì)粒是具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀的DNA分子，A正確；B.擬核DNA是細菌的主要遺傳物質(zhì),包含控制細菌生命活動的遺傳信息,沒有了它細菌就無法存活、繁殖；質(zhì)粒DNA是附加的遺傳物質(zhì),使細菌表達一些特殊的形狀,沒有了它細菌依然可以正常生活、繁殖，B錯誤；C.作為載體的質(zhì)粒上有限制酶的切割位點，這是質(zhì)粒作為運載體的條件之一，C正確；D.作為載體的質(zhì)粒存在特殊的標記基因，以便對于目的基因進行檢測，D正確；該題需選擇錯誤選項，故答案為B?！痉治觥抠|(zhì)粒存在于許多細菌以及酵母菌等生物的細胞中，是擬核或細胞核以外能夠自主復制的很小的環(huán)狀DNA分子。4.〔2021·山東模擬〕為臨床檢測腫瘤壞死因子〔TNF-α)，利用“噬菌體展示技術(shù)〞獲得TNF-α抗體，需要獲得TNF-α抗體的基因片段，插入到噬菌體基因組中，經(jīng)過篩選得到能正確表達TNF-α抗體的噬菌體，進行大量擴增。以下相關(guān)表達不正確的選項是〔〕A.

將TNF-α抗體的基因片段與噬菌體DNA重組需用限制酶和DNA連接酶B.

在細菌體內(nèi)，噬菌體以自身氨基酸為原料合成TNF-α抗體C.

TNF-α抗體隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體外表D.

噬菌體通過侵染細菌繁殖，增殖速度快，更容易快速獲得抗體【答案】B【考點】噬菌體侵染細菌實驗，基因工程的根本操作程序【解析】【解答】解：將TNF-α抗體的基因片段與噬菌體DNA重組需用限制酶和DNA連接酶，A正確；在細菌體內(nèi)，噬菌體以細菌的氨基酸為原料合成TNF-α抗體，B錯誤；因為噬菌體由DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成，DNA在內(nèi)部，外面包裹著蛋白質(zhì)，所以TNF-α抗體隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體外表，C正確；噬菌體通過侵染細菌繁殖，增殖速度快，更容易快速獲得抗體，D正確。綜上所述因此選B?！痉治觥看祟}考查與基因工程相關(guān)的知識，基因工程的根本操作程序是：目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)氲绞荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。5.〔2021·靜海模擬〕以下圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制備“工程菌〞的示意圖。細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因。判斷以下說法正確的選項是〔〕A.

將重組質(zhì)粒導入細菌B常用的方法是顯微注射法B.

將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能生長的只是導入了重組質(zhì)粒的細菌C.

將完成導入過程后的細菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,能生長的就是導入了質(zhì)粒A的細菌D.

目的基因成功導入的標志是受體細胞能產(chǎn)生生長激素的mRNA【答案】C【考點】基因工程的根本操作程序【解析】【解答】解：將重組質(zhì)粒導入細菌B常用的方法是鈣離子處理法〔CaCl2溶液〕，A不符合題意；由于抗氨芐青霉素的基因未被破壞，所以能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長的是導入普通質(zhì)粒A的細菌和導入重組質(zhì)粒的細菌，B不符合題意；由于抗四環(huán)素基因被破壞，所以在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長的只是導入普通質(zhì)粒A的細菌，C符合題意；目的基因成功導入的標志是受體細胞能產(chǎn)生人的生長激素，D不符合題意。故答案為：C【分析】圖示為將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制備“工程菌〞的示意圖，其中質(zhì)粒A有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，而目的基因〔人的生長激素基因〕插入的位點是抗四環(huán)素基因，那么重組質(zhì)粒有抗氨芐青霉素基因。受體細胞是細菌B，常用Ca2+處理細胞，使之變成感受態(tài)細胞，然后讓重組質(zhì)粒和感受細胞混合將重組質(zhì)粒導入細菌。根據(jù)題意，細菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因即沒有抗氨芐青霉素基因與抗四環(huán)素基因。所以完成導入重組質(zhì)粒A的細菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長，而不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基中生長；導入質(zhì)粒A的細菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長，也能在含四環(huán)素培養(yǎng)基中生長。6.〔2021·靜海模擬〕北極比目魚中有抗凍基因。如圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖,有關(guān)表達正確的選項是〔〕A.

過程①獲取的目的基因,可用于比目魚基因組測序B.

過程①中通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得的目的基因,可用于基因工程C.

過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進行篩選D.

應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中基因的存在與否及是否完全表達【答案】B【考點】基因工程的應(yīng)用【解析】【解答】解：圖中①是獲取目的基因的過程，獲取的目的基因，可用于基因工程，但由于該基因中缺少非編碼區(qū)和內(nèi)含子，該基因不能用于比目魚基因組測序，A不符合題意，B符合題意；標記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法只能將質(zhì)粒導入受體細胞，不能對重組質(zhì)粒進行篩選，C不符合題意；利用DNA探針技術(shù)可檢測目的基因是否導入到受體細胞及是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA，但不能檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)，D不符合題意。故答案為：B【分析】1、圖示為獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，其中①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達載體的構(gòu)建過程；基因表達載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標記基因構(gòu)成，其中標記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導入受體細胞番茄組織塊中；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導入目的基因的番茄組織細胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株。

2、從基因文庫中獲得目的基因中含有內(nèi)含子，真核生物中有相應(yīng)的機制，能切除內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的局部，內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的局部不表達，結(jié)果和供體細胞合成的蛋白質(zhì)相同；原核生物中沒有相應(yīng)的機制，不能切除內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的局部，所以內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄的局部要表達，結(jié)果和供體細胞合成的蛋白質(zhì)不同。故從真核細胞中提取目的基因?qū)朐思毎斜仨毻ㄟ^逆轉(zhuǎn)錄或化學合成獲得。7.〔2021·寧波模擬〕基因編輯是指將外源DNA片段導入到細胞染色體特定位點或刪除基因內(nèi)部的片段，定點改造基因，獲得預期的生物體基因序列發(fā)生遺傳改變的技術(shù)。以下圖是對某生物B基因進行編輯的過程，該過程中用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點，以下表達正確的選項是〔〕A.

sgRNA是合成Cas9酶的模板B.

sgRNA的堿基序列與靶基因堿基序列能夠全部互補C.

核酸內(nèi)切酶Cas9可在特定切割位點斷裂核苷酸之叫的磷酸二酯鍵D.

B基因被編輯后因不能轉(zhuǎn)錄而無法表達相關(guān)蛋白質(zhì)【答案】C【考點】基因工程的應(yīng)用【解析】【解答】sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點，不是合成Cas9酶的模板，A不符合題意；sgRNA的堿基序列與靶基因的局部堿基序列互補，B不符合題意；核酸內(nèi)切酶Cas9可在特定切割位點進行切割，使相應(yīng)部位的核苷酸之間的磷酸二酯斷裂，C符合題意；被編輯后的B基因仍能進行轉(zhuǎn)錄，D不符合題意。故答案為：C【分析】解答此題的關(guān)鍵是從題圖和題意中提取關(guān)鍵信息：用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點并進行切割，進而將編輯前的B基因中的Ⅱ片段切除，將Ⅰ和Ⅲ片段連接形成新的B基因。據(jù)此圍繞基因工程的相關(guān)知識對各選項作出準確的判斷。8.〔2021·廣州模擬〕徑柳匙葉草是一種泌鹽植物。科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因〔TaNHX2基因〕轉(zhuǎn)移到棉花細胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點；圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，請分析答復以下問題：〔1〕將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導入受體菌的群體中儲存，再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從________獲取目的基因?！?〕不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中獲得TaNHX2基因的mRNA，其原因是________?！?〕假設(shè)用BamHI切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，那么需選用________切割圖3所示質(zhì)粒，以便構(gòu)建基因表達載體，該方案的缺陷是________。故切割圖1所示DNA片段的最正確方案是選用________酶?！?〕用上述最正確方案構(gòu)建基因表達載體，所得重組質(zhì)粒________〔選填“能〞“不能〞或“不一定能〞〕被BamHI切割?！?〕圖3中，質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是________?！?〕為了檢測技術(shù)成果，科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于________水平的檢測?！敬鸢浮俊?〕基因文庫中〔2〕基因的選擇性表達〔徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中TaNHX2基因不能表達〕〔3〕Sau3AI；出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定；EcoRI和BamHI〔4〕不一定能〔5〕以便篩選出含有目的基因的受體細胞〔6〕個體【考點】細胞分化及其意義，基因工程的操作程序〔詳細〕【解析】【解答】解：〔1〕根據(jù)題意分析，該獲取目的基因的方法是將不同基因的DNA片段導入受體菌的群體中儲存，再根據(jù)TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，因此該方法為從基因文庫中獲取目的基因?！?〕由于細胞中基因是選擇性表達的，而徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中TaNHX2基因不能表達，因此不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中獲得TaNHX2基因的mRNA?！?〕切割圖1所示的DNA片段的限制酶是BamHI，因此切割目的基因的限制酶應(yīng)該是BamHI或者是切割后能夠產(chǎn)生相同粘性末端的限制酶，圖2顯示BamHI與Sau3AI切割后產(chǎn)生的粘性末端相同，而圖3質(zhì)粒又沒有BamHI識別位點，因此只能用Sau3AI切割質(zhì)粒；該方案切割后，目的基因兩側(cè)的粘性末端以及質(zhì)粒的兩個粘性末端相同，可能會引起目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定等情況；為了防止這種現(xiàn)象的出現(xiàn)，我們應(yīng)該選擇不同的限制酶切割目的基因的兩側(cè)以及質(zhì)粒，結(jié)合圖1和圖3分析，應(yīng)該選擇EcoRI和BamHI切割圖1所示DNA片段，EcoRI和Sau3AI切割圖3質(zhì)粒?！?〕結(jié)合以上分析可知，形成的重組質(zhì)粒上肯定含有EcoRI、Sau3AI的識別位點，不一定含有BamHI的識別位點，所以所得重組質(zhì)粒不一定能被BamHI切割?！?〕圖3中，質(zhì)粒上的抗生素抗性基因為標記基因，其作用是篩選出含有目的基因的受體細胞?！?〕科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，屬于個體水平上的檢測?！痉治觥炕蚬こ碳夹g(shù)的根本步驟：1.目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。2.基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3.將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。4.目的基因的檢測與鑒定：〔1〕分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?！?〕個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。二、細胞工程9.〔2021·山東模擬〕超氧化物歧化酶〔SOD〕是一種源于生命體的活性物質(zhì)，在生活實踐中有非常重要的應(yīng)用價值。以下圖為人工培育含SOD植物新品種的過程，相關(guān)表達正確的選項是〔〕A.

①過程中最常用的方法是采用顯微注射技術(shù)將SOD基因?qū)胫参锛毎鸅.

②、③分別表示脫分化、再分化，兩個過程不需要無菌操作也可完成C.

SOD催化O2形成H2O2的機制是為該反響提供活化能D.

該育種方式利用了細胞工程和基因工程，能表達細胞的全能性【答案】D【考點】酶促反響的原理，植物細胞的全能性及應(yīng)用，植物組織培養(yǎng)的過程，基因工程的根本操作程序【解析】【解答】解：①過程表示將目的基因〔SOD基因〕導入植物細胞的過程，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A錯誤；②、③分別表示脫分化、再分化過程，需要在嚴格無菌操作就可以完成，B錯誤；SOD催化O2形成H2O2的機制是降低化學反響的活化能，不能為該反響提供能量，C錯誤；據(jù)圖分析可知，該育種方式利用了細胞工程和基因工程，通過離體細胞發(fā)育成完整的植株的過程表達了植物細胞具有全能性，D正確?！痉治觥繐?jù)圖分析，圖中①過程表示將目的基因〔SOD基因〕導入植物細胞的過程；②表示脫分化形成愈傷組織的過程；③過程表示再分化形成胚狀體的過程。10.〔2021·浙江模擬〕愈傷組織細胞通過液體懸浮培養(yǎng)可以分散形成胚性細胞，以下表達正確的選項是〔〕A.

液體懸浮培養(yǎng)過程中，需要營造封閉無氧環(huán)境B.

胚性細胞細胞質(zhì)豐富、液泡大、細胞核大，是一種相對沒有分化的薄壁細胞C.

擬南芥和小麥的胚性細胞再生成植株，屢次繼代培養(yǎng)后，都能保持細胞全能性D.

胚性細胞經(jīng)培養(yǎng)基中成分的誘導，可依次經(jīng)歷細胞團、球形胚、心形胚和胚狀體等過程【答案】D【考點】植物組織培養(yǎng)的過程【解析】【解答】解：A、液體懸浮培養(yǎng)過程中，需要營造有氧環(huán)境，A錯誤；B、胚性細胞具有旺盛分裂能力，細胞質(zhì)豐富，細胞核大，核仁明顯，但沒有液泡，B錯誤；C、擬南芥和小麥的胚性細胞再生成植株，屢次繼代培養(yǎng)后，遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，不一定都能保持細胞全能性；C錯誤。D、表達單個的植物細胞在液體培養(yǎng)條件下，可以發(fā)生類似受精卵發(fā)育成胚的過程，從單細胞→細胞團→球形胚→心形胚→胚狀體，然后再生出完整的小植株，D正確。故答案為：D?！痉治觥?、植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的過程，脫分化的結(jié)果是形成愈傷組織，愈傷組織是高度液泡化，無定形狀態(tài)薄壁細胞組成的排列疏松、無規(guī)那么的組織，細胞分化程度低，全能性高，液體培養(yǎng)條件下的單細胞可依次到細胞團、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整的植株。

2、植物細胞的懸浮培養(yǎng)是指將植物細胞或較小的細胞團懸浮在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中能夠保持良好的分散狀態(tài)。將疏松型的愈傷組織縣浮在液體培養(yǎng)基中并在振蕩條件下培養(yǎng)一段時間后，可形成分散懸浮培養(yǎng)物。11.〔2021·山東模擬〕以下關(guān)于單克隆抗體制備的說法，正確的選項是〔〕A.

將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體B.

經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體C.

誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，發(fā)生融合的細胞均為雜交瘤細胞D.

篩選出雜交瘤細胞后，需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細胞【答案】D【考點】單克隆抗體的制備過程【解析】【解答】解：A、向小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，小鼠會產(chǎn)生漿細胞，可以從小鼠血清中獲得抗體，但此時的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；B、經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外無增殖能力，無法通過培養(yǎng)獲得單克隆抗體，B錯誤；C、誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，產(chǎn)生的融合細胞可能是：B細胞－B細胞融合、瘤細胞－瘤細胞融合、B細胞－瘤細胞融合，C錯誤；D、單克隆抗體制備過程需要2次篩選：第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能夠產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，因此經(jīng)過B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞還需進行抗體陽性檢測才能可進行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，D正確。故答案為：D?！痉治觥繂慰寺】贵w的制備過程：〔1〕制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞?！?〕獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體?！?〕克隆化培養(yǎng)和抗體檢測〔4〕將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；〔5〕提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。12.〔2021·南通模擬〕通過體細胞核移植技術(shù)培育克隆牛的過程中，未涉及的操作是〔〕A.

用顯微操作技術(shù)處理次級卵母細胞，去除細胞核B.

將精子放入適宜的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，使其獲能C.

用物理或化學方法激活重組細胞，使其完成發(fā)育進程D.

選擇適宜時期的胚胎進行移植，使其發(fā)育成完整個體【答案】B【考點】動物細胞核移植技術(shù)，胚胎移植【解析】【解答】解：根據(jù)以上分析可知，對于受體卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，然后利用顯微操作技術(shù)去除其細胞核，A不符合題意；該技術(shù)需要的是供體細胞核和受體卵母細胞，不需要精子的參與，B符合題意；需要用物理或化學方法激活核移植產(chǎn)生的重組細胞，使其完成發(fā)育進程，C不符合題意；選擇適宜時期的胚胎進行移植，使其發(fā)育成完整個體，D不符合題意。故答案為：B【分析】用體細胞核培育克隆牛是無性繁殖，沒有經(jīng)過受精作用。體細胞核移植培育克隆牛的大致過程是：良種牛體細胞，進行細胞培養(yǎng)；同時采集卵母細胞，在體外培養(yǎng)到減二分裂中期的卵母細胞，去核〔顯微操作〕；將供體細胞注入去核卵母細胞；通過電刺激使兩細胞融合，供體核進入受體卵母細胞，構(gòu)建重組胚胎；將胚胎移入受體〔代孕〕母牛體內(nèi)；生出與供體牛遺傳基因相同的犢牛。13.〔2021·南通模擬〕將攜帶抗M基因、無抗N基因的鼠細胞去除細胞核后，與攜帶N基因、無抗M基因的鼠細胞融合，獲得的胞質(zhì)雜種細胞具有M、N兩種抗性。該實驗證明了〔〕A.

該胞質(zhì)雜種細胞具有全能性B.

抗M基因位于細胞質(zhì)中C.

該胞質(zhì)雜種細胞具有無限增殖能力D.

抗N基因位于細胞核中【答案】B【考點】植物體細胞雜交的過程及應(yīng)用【解析】【解答】A．細胞的全能性是指已經(jīng)分化的細胞，仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能，題干中的信息不能證明該胞質(zhì)雜種細胞是否具有全能性，A不符合題意；B．由題干分析可知，抗M基因位于細胞質(zhì)中，B符合題意；C．題干中的信息不能證明該胞質(zhì)雜種細胞是否具有無限增殖的能力，C不符合題意；D．由題干信息可知，抗N基因可能位于細胞核或位于細胞質(zhì)中，D不符合題意；故答案為：B【分析】由題干可知，“將攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細胞去除細胞核后，與攜帶N基因、不帶抗M基因的鼠細胞融合，獲得的胞質(zhì)雜種細胞具有M、N兩種抗性〞，該實驗可證明抗M基因位于細胞質(zhì)中，抗N基因位于細胞質(zhì)、或位于細胞核中。14.〔2021·南通模擬〕以下關(guān)于細胞工程的表達，錯誤的選項是〔〕A.

PEG可誘導植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合B.

去除植物細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶來處理C.

小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫的小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體D.

甲、乙兩種二倍體植物體細胞雜交，獲得的雜種植株后代依然為二倍體【答案】D【考點】植物體細胞雜交的過程，動物細胞與組織培養(yǎng)過程，單克隆抗體的制備過程【解析】【解答】誘導植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合，均可用聚乙二醇〔PEG〕作為誘導劑，A不符合題意；去除植物細胞壁需使用纖維素酶和果膠酶，將動物組織分散成單個細胞可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，B不符合題意；小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫的小鼠的B淋巴細胞融合后得到的雜交瘤細胞，既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體，所以可用來制備單克隆抗體，C不符合題意；甲、乙兩種二倍體植物體細胞雜交，獲得的雜種植株后代為四倍體，D符合題意。故答案為：D【分析】理清單克隆抗體的制備過程：?15.〔2021高二下·南昌期末〕以下圖是利用四倍體蘭花的葉片進行植物組織培養(yǎng)的過程，以下表達錯誤的選項是〔〕A.

過程①～③均需要外界提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素B.

過程①為脫分化，過程②為再分化，均需要給予光照C.

可利用過程②獲得的胚狀體外包人工種皮來制備人工種子D.

用此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的單倍體植株理論上是可育的【答案】B【考點】植物組織培養(yǎng)的過程，植物組織培養(yǎng)的影響因素【解析】【解答】解：過程①～③分別表示脫分化、再分化、生長與發(fā)育，均需要外界提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素，A不符合題意；過程①為脫分化，需要在避光條件下培養(yǎng)，過程②為再分化，需要給予光照條件，B符合題意；人工種子是以通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，因此可利用過程②獲得的胚狀體外包人工種皮來制備人工種子，C不符合題意；用此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得的單倍體植株的體細胞中含有2個染色體組，存在同源染色體，理論上是可育的，D不符合題意。故答案為：B【分析】1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)是植物細胞工程的最根本技術(shù)，是在人為創(chuàng)造的無菌條件下將生活的離體器官〔如根、莖、葉、莖段、原生質(zhì)體〕、組織或細胞置于培養(yǎng)基內(nèi)，并放在適宜的環(huán)境中，進行連續(xù)培養(yǎng)以獲得細胞、組織或個體的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化兩個階段，脫分化也稱去分化，是指離體培養(yǎng)條件下生長的細胞，組織或器官經(jīng)過細胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結(jié)構(gòu)和功能而恢復分生狀態(tài)，形成無組織結(jié)構(gòu)的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞的過程。再分化指離體培養(yǎng)的植物細胞和組織可以由脫分化狀態(tài)重新分化，形成另一種或幾種類型的細胞、組織、器官，甚至形成完整植株的過程。

2、題圖示表示將四倍體蘭花的葉片通過植物組織培養(yǎng)形成植株的過程，其中①階段表示脫分化，②階段表示再分化過程。據(jù)此答題。16.〔2021高三下·長沙模擬〕生物治療是繼手術(shù)、放療和化療后開展起來的第四類癌癥治療方法，可分為細胞治療和非細胞治療。細胞治療是從患者的外周血中采集單核細胞進行擴增及腫瘤抗原刺激等，再回輸至患者體內(nèi)。常用細胞有能傳遞抗原的額樹突狀細胞〔DC〕和細胞因子誘導的殺傷性細胞〔CIK〕等。非細胞治療包括單克隆抗體治療，寡核苷酸藥物治療等。答復以下問題：〔1〕單核細胞的體外擴增過程中需要先用胰蛋白酶處理，其目的是________，在體外培養(yǎng)過程中，單核細胞具有細胞貼壁和________的特性?！?〕體外培養(yǎng)DC細胞時，培養(yǎng)液的pH需要用________來維持，此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便________?！?〕體外培養(yǎng)的CIK細胞，一般傳代培養(yǎng)到________代后就不易傳下去了，原因是________?！?〕制備用于非細胞治療的單克隆抗體時，需要用到的技術(shù)有________〔答出兩項即可〕。最后得到的單克隆抗體的優(yōu)點是________?！敬鸢浮俊?〕使組織分散成單個細胞；接觸抑制〔2〕CO2；去除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害〔3〕10；10代后的細胞，其二倍體核型可能會發(fā)生改變〔4〕動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合；特異性強、靈敏度高并可大量制備【考點】動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，動物體細胞克隆，單克隆抗體的制備過程【解析】【解答】解：〔1〕單核細胞的體外擴增過程中需要先用胰蛋白酶處理，其目的是使組織分散成單個細胞；在體外培養(yǎng)過程中，單核細胞具有細胞貼壁和接觸抑制的特性?！?〕體外培養(yǎng)DC細胞時，培養(yǎng)液的pH需要用CO2來維持，此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害?！?〕體外培養(yǎng)的CIK細胞，一般傳代培養(yǎng)到10代后就不易傳下去了，原因是10代以內(nèi)的細胞能保持其二倍體核型，10代后的細胞其二倍體核型可能會發(fā)生改變?！?〕制備用于非細胞治療的單克隆抗體時，需要用到的技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合；最后得到的單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高并可大量制備?！痉治觥?、動物細胞培養(yǎng)的條件：無菌、無毒的環(huán)境；營養(yǎng)物質(zhì)充足；溫度和pH適宜；氧氣和二氧化碳等氣體充足等。2、一般來說，細胞在傳至10—50代左右時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時局部細胞的細胞核型可能會發(fā)生改變。17.〔2021·內(nèi)江模擬〕利用小鼠胚胎干細胞能誘導出多種細胞，進而還可以用于制備單克隆抗體，某研究團隊設(shè)計的技術(shù)流程如圖。答復以下問題：〔1〕技術(shù)流程中的①過程，可用________酶處理內(nèi)細胞團獲得一個胚胎干細胞；②過程所采用的技術(shù)是________；④過程的核心步驟是________?！?〕甲細胞與乙細胞融合形成丙細胞，常采用的生物融合劑是________，丙細胞的特點是________?！?〕圖中的乙細胞是從小鼠體內(nèi)獲得的________細胞。單克隆抗體的應(yīng)用中，利用________反響，可以診斷和防治多種疾病，可以研究相應(yīng)抗原的結(jié)構(gòu)、________及其功能。【答案】〔1〕胰蛋白；克隆培養(yǎng)法(細胞克隆)；重組DNA的構(gòu)建〔2〕滅活的仙臺病毒或聚乙二醇；既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異抗體〔3〕漿；抗原一抗體雜交；細胞學分布【考點】單克隆抗體的制備過程【解析】【解答】解：〔1〕內(nèi)細胞團是一群胚胎干細胞，要從內(nèi)細胞團中獲得一個胚胎干細胞，通常用胰蛋白酶將其處理成為單個細胞。②過程是將一個胚胎干細胞進行克隆形成一群胚胎干細胞，該技術(shù)稱為克隆培養(yǎng)法或細胞克隆。④過程是轉(zhuǎn)基因，其核心步驟是構(gòu)建重組DNA分子?！?〕動物細胞雜交采用的生物融合劑是滅活的仙臺病毒或聚乙二醇，融合形成的丙細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體?！?〕圖中的乙細胞是從小鼠體內(nèi)獲得的能產(chǎn)生特異性抗體的漿細胞。單克隆抗體的應(yīng)用中，利用抗原一抗體反響，可以診斷和防治多種疾病，可以研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細胞學分布及其功能【分析】要識記單克隆抗體制備過程中的兩次篩選，第一次篩選是用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，第二次是用抗體陽性檢測的方法篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞。18.〔2021高三上·邯鄲期末〕培育乳汁中含有人凝血因子IX醫(yī)用蛋白的二倍體轉(zhuǎn)基因綿羊的簡易流程如下圖。請答復以下有關(guān)問題：〔1〕圖中①表示________的過程，為了使目的基因在轉(zhuǎn)基因綿羊的乳腺細胞中成功表達，需將人凝血因子Ⅸ基因與________等調(diào)控組件重組在一起，且使目的基因的位置處于________?！?〕重組細胞的細胞核來自________。為了獲得綿羊胎兒的單個成纖維細胞，________〔填“能〞或“不能〞〕使用胃蛋白酶處理綿羊組織塊，理由是________?！?〕③過程中，采取________的方法促使重組細胞的形成?！?〕④過程所用培養(yǎng)液的成分比擬復雜，除一些無機鹽和有機鹽外，還需添加________〔答出三種即可〕?！敬鸢浮俊?〕構(gòu)建基因表達載體；乳腺蛋白基因的啟動子；啟動子和終止子之間〔2〕整合有目的基因的成纖維細胞；不能；胃蛋白酶的最適pH為左右，在接近中性的環(huán)境中胃蛋白酶根本沒有活性〔3〕電刺激〔4〕維生素、激素、氨基酸、核苷酸、動物血清、葡萄糖【考點】動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，動物細胞核移植技術(shù)，基因工程的操作程序〔詳細〕【解析】【解答】解：〔1〕圖中①過程為基因表達載體的構(gòu)建，要使目的基因在轉(zhuǎn)基因綿羊的乳腺細胞中成功表達，需將人凝血因子Ⅸ基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，且使目的基因處于啟動子和終止子之間?！?〕重組細胞的細胞核來自整合有目的基因的成纖維細胞。胃蛋白酶的最適pH為左右，在接近中性的環(huán)境中胃蛋白酶根本沒有活性，所以不能用胃蛋白酶處理綿羊組織塊?！?〕電刺激可以促使供體細胞的細胞核進入去核的卵母細胞中?！?〕圖中④過程是早期胚胎的培養(yǎng)過程，所用培養(yǎng)液除一些無機鹽和有機鹽外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸、葡萄糖和動物血清等?！痉治觥扛鶕?jù)圖中能分泌人凝血因子Ⅸ醫(yī)用蛋白的二倍體轉(zhuǎn)基因綿羊的培育流程分析，①為目的基因〔人凝血因子Ⅸ基因〕構(gòu)建的基因表達載體，②為鑒定篩選含目的基因的成纖維細胞，③為含目的基因的細胞〔核〕與去核卵細胞形成重組細胞，④表示利用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)重組胚胎，⑤是通過胚胎移植技術(shù)完成對早期胚胎的移植。三、真題演練19.〔2021·江蘇〕以下生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造，不會遺傳給子代的是〔〕A.

將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得基因工程菌B.

將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞，經(jīng)組培獲得花色變異植株C.

將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛D.

將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者，進行基因治療【答案】D【考點】基因工程的應(yīng)用【解析】【解答】A.將含胰島素基因表達載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌，由于改變的是遺傳物質(zhì)，所以可以通過二分裂將胰島素基因傳給后代，A不符合題意；

B.將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞，由于改變的是遺傳物質(zhì)，經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細胞均含有花青素代謝基因，花青素代謝基因會隨該植物傳給后代，B不符合題意；

C.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛所有細胞均含有腸乳糖酶基因，可以遺傳給后代，C不符合題意；

D.該患者進行基因治療時，由于只改變了淋巴細胞，所以性原細胞不含該基因，故不能遺傳給后代，D符合題意。故答案為：D【分析】〔1〕轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組。即將目的基因和生物的遺傳物質(zhì)重新組合，從而使得生物表現(xiàn)出目的基因的性狀?！?〕基因治療：指把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而到達治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。分為體外基因治療和體內(nèi)基因治療，區(qū)別在于轉(zhuǎn)基因的場所是在體內(nèi)還是體外。20.〔2021·北京〕甲、乙是嚴重危害某二倍體欣賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株，再將二者雜交后得到F1，結(jié)合單倍體育種技術(shù)，培育出同時抗甲、乙的植物新品種。以下對相關(guān)操作及結(jié)果的表達，錯誤的選項是〔〕A.

將含有目的基因和標記基因的載體導入受體細胞B.

通過接種病原體對轉(zhuǎn)基因的植株進行抗病性鑒定C.

調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株D.

經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的假設(shè)干再生植株均為二倍體【答案】D【考點】植物組織培養(yǎng)的過程，基因工程的操作程序〔詳細〕【解析】【解答】A、要獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株應(yīng)將含有目的基因和標記基因的載體導入受體細胞，A不符合題意；B、對轉(zhuǎn)基因植株進行個體水平檢測的方法是接種病原體對轉(zhuǎn)基因的植株進行抗病性鑒定，B不符合題意；

C、花藥培養(yǎng)基配方、誘導叢芽或胚狀體的培養(yǎng)基配方和誘導生根的培養(yǎng)基配方個植物激素的種類，濃度比例不同，要想獲得F1花粉再生植株需要調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例，C不符合題意；

D、經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的再生植株為單倍體植株，需再經(jīng)過人工誘導使染色體數(shù)目加倍，才能獲得二倍體植株，D符合題意。故答案為：D【分析】1.目的基因的檢測與測定

2.花藥離體培養(yǎng)21.〔2021·全國Ⅰ卷〕基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因。答復以下問題。〔1〕基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀╛_______和________。〔2〕生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是________。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反響體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是________。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的________?！?〕目前在PCR反響中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是________?！敬鸢浮俊?〕基因組文庫；cDNA文庫〔2〕解旋酶；加熱至90~95℃；氫鍵〔3〕Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活【考點】PCR技術(shù)的根本操作和應(yīng)用，DNA分子的復制，基因工程的操作程序〔詳細〕【解析】【解答】〔1〕將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。如果這個文庫包含了某種生物的所有基因，那么，這種基因文庫叫做基因組文庫。如果這