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文檔簡介
植物根系活力的測定主講:呂巍
博士一、目的意義根系具有的生理功能:植物根系是活躍的吸收器官和合成器官。吸收水分,吸收礦物質(zhì)合成激素根的生長情況和活力水平直接影響地上部分的生長和營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。通過本實驗學習根系活力的測定方法,為植物營養(yǎng)研究提供依據(jù)。二、實驗原理具有生活力的組織在呼吸作用過程中都有氧化還原反應(yīng),而無生活力組織則無此反應(yīng)。TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)是一種水溶性物質(zhì),可以透過細胞膜進入細胞內(nèi)部,并不傷害組織。當TTC溶液滲入活細胞內(nèi),作為氫受體被脫氫輔酶(NADH或NADPH)還原,產(chǎn)生紅色的三苯基甲臜(TTF)。通過測定單位時間內(nèi)TTC還原量,表示為脫氫酶活性,并作為根系活力的指標。活力強的部位呼吸速率高,還原的TTC多;呼吸作用弱,還原的TTC少,脫氫酶的活性亦大大下降,故可由紅色的程度推知根系活力的強弱。應(yīng)用:根系活力測定種子活力測定花粉活力測定TTCTTF三、實驗材料小麥幼苗根系四、方法步驟1.標準曲線的制作
TTC溶液,加少許Na2S2O4(保險粉),產(chǎn)生紅色的TTF。吸收峰485nm,建立直線方程。
2、根系活力
稱重0.5g放到小培養(yǎng)皿中(3份)空白用樣品(1份)測定用樣品(2份)加2ml1mol/L硫酸加入10mlTTC溶液加入10mlTTC溶液34-37℃,保溫30min37℃,保溫30min加2ml1mol/L硫酸取具有活力的根系,吸去表面水分,剪成2cm小段TTC溶液低溫避光保存加入的TTC溶液不定量對結(jié)果是否有影響?為什么?空白用樣品測定用樣品吸去表面上的水分放入研缽中加石英砂,少量乙酸乙酯,研磨加5ml乙酸乙酯提取液過濾到20ml刻度試管中殘渣沖洗2次,定容10ml485nm比色測定計算TTC還原強度
五、注意事項1吸水濾紙可重復(fù)利用,用完放回。2吸干根系水分時,用力要輕,以免壓壞根尖。3比色測定在(B-126)六、思考題為什么放置到34-37℃的黑暗處?加入硫酸的作用是什么?下一個實驗:
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