無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理課件

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第6章無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理工程

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理內(nèi)容概述:幾個(gè)術(shù)語(yǔ)和微生物基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)介熱力滅菌基本原理藥典對(duì)最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)注射劑常見(jiàn)滅菌方法滅菌工藝的驗(yàn)證常見(jiàn)滅菌設(shè)備介紹（示意）容器密封可靠性驗(yàn)證無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

第一節(jié)概述

1.1術(shù)語(yǔ)

無(wú)菌What理論定義“無(wú)菌”的實(shí)際定義無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)-SALWhyHow滅菌消毒無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第一節(jié)

1.2微生物基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)介

一、微生物生存的環(huán)境人類(lèi)生活的環(huán)境充斥著大量微生物海拔100英里（約160公里）以上海平面以下600英尺（約182米）的地方都可以發(fā)現(xiàn)微生物的蹤跡1英里=5,280英尺或1.609公里無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理常見(jiàn)微生物種類(lèi)基本特點(diǎn)細(xì)菌0.5～5μm，生長(zhǎng)態(tài)時(shí)不耐熱，部分能形成耐熱芽孢真菌5μm～50μm，形成芽孢隨空氣擴(kuò)散，不耐熱病毒小于0.1μm，一般不耐熱，0.22μm過(guò)濾不了無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理真菌和細(xì)菌大小真菌5μm~50μm細(xì)菌0.5~5μm主要成員酵母、霉菌細(xì)菌細(xì)胞組成酵母是單細(xì)胞，其它為多細(xì)胞均為單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)成份遺傳物質(zhì)(DNA)被雙層核膜包裹(真核)，并且還有如線粒體、葉綠體及高卡基體等被膜包裹的細(xì)胞器。遺傳物質(zhì)(DNA)祼露并游離于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)(原核)，并且不含有其它有膜細(xì)胞器。繁殖方式有性（如大型真菌或無(wú)性如酵母），霉菌則二者兼有無(wú)性（裂殖）孢子霉菌產(chǎn)生分生孢子（生長(zhǎng)繁殖，類(lèi)似于植物的種子)，雖不耐熱，但會(huì)飄浮于空氣中而難以消除。酵母不會(huì)產(chǎn)生孢子。主要只有兩個(gè)屬產(chǎn)生孢子（內(nèi)生孢子），又名芽孢：Bacillus-芽孢桿菌屬和Clostridium-梭菌屬，細(xì)菌芽孢屬于休眠體，一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞產(chǎn)生一個(gè)芽孢生長(zhǎng)條件20-25oC,3-5天30-35oC,1-2天殺滅程度不耐熱，但難用消毒劑消毒（因孢子處于漂浮狀態(tài)）生長(zhǎng)態(tài)菌不耐熱（極個(gè)別除外），但形成芽孢后耐熱。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理微生物分布特點(diǎn)微生物無(wú)處不在氣源性微生物革蘭氏陽(yáng)性菌較多它們可形成芽孢，難以殺滅因此，藥品生產(chǎn)需要

?水源性則革蘭氏陰性菌居多不會(huì)生成孢子耐熱性差但會(huì)形成細(xì)菌內(nèi)毒素G+G-無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理細(xì)菌芽胞（孢）的形成及其特性成熟芽孢孢子壁母細(xì)胞孢子壁的形成生長(zhǎng)態(tài)細(xì)胞內(nèi)生孢子產(chǎn)生于Gram+細(xì)菌:芽孢桿菌屬Bacillus梭菌屬Clostridium僅含核酸及少量萌發(fā)必需物皮層含DPA和Ca2+復(fù)合物能抵御各種惡劣環(huán)境可休眠上百萬(wàn)年真菌孢子因不具上述特性而不耐熱DPA：吡啶二羧酸無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理什么是芽孢？當(dāng)某些細(xì)菌遇到不良生存環(huán)境條件時(shí)，為保護(hù)自身，在細(xì)胞內(nèi)形成一外壁厚而堅(jiān)硬的體眠體，該體眠體即稱芽孢（Spore）或孢子。由于其對(duì)不良環(huán)境的耐受性遠(yuǎn)高于生長(zhǎng)態(tài)細(xì)胞，常被用于挑戰(zhàn)滅菌工藝，以確認(rèn)被滅菌物品無(wú)菌的可靠性。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理芽孢的特性主要產(chǎn)生于Gram+

細(xì)菌的兩個(gè)屬芽孢桿菌屬Bacillus梭菌屬Clostridium能抵御各種惡劣環(huán)境，可存活上百萬(wàn)年，因?yàn)樗泻竦钠咏Y(jié)構(gòu)僅含核酸及少量萌發(fā)必需物含水量極低休眠體，內(nèi)生孢子，不可再生（每個(gè)細(xì)胞只產(chǎn)生一個(gè)芽孢）；真菌孢子屬于分生孢子，不具上述特性。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理芽孢的特點(diǎn)耐熱80℃下長(zhǎng)期存活100℃下有相當(dāng)高的存活率100℃以上死亡過(guò)程符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程影響芽孢耐熱性的因素芽孢存在的介質(zhì)受熱時(shí)的濕度無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理生物指示劑（BI）的定義對(duì)特定滅菌工藝具有一定耐受性并能用于定量測(cè)定滅菌效力的微生物制劑（USP28）生物指示劑均為革蘭氏陽(yáng)性菌，滅菌用BI為非致病菌。特點(diǎn)用于制備生物指示劑的微生物應(yīng)具有相當(dāng)?shù)哪褪苄?、穩(wěn)定性、易培養(yǎng)、及非致病性適用于被驗(yàn)證產(chǎn)品、滅菌工藝、生產(chǎn)工藝符合有關(guān)法規(guī)的要求無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

無(wú)菌藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素控制

無(wú)論采用何種方法生產(chǎn)無(wú)菌藥品，都需要嚴(yán)格控制藥品中的細(xì)菌內(nèi)毒素。通常液體藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素，采用超過(guò)濾或活性碳吸附來(lái)去除液體中的細(xì)菌內(nèi)毒素，粉未分裝藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素則由無(wú)菌原料生產(chǎn)過(guò)程中的除熱原措施（例如有機(jī)溶酶處理或超濾等工藝）來(lái)解決；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理生產(chǎn)工藝過(guò)程中可能接觸無(wú)菌藥品的工具，器械的熱原，不耐高溫的器械通常采用無(wú)熱原的注射用水洗滌的方法稀釋去除，耐高溫的器械則用干熱滅菌（180℃以上）方法去除。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

藥品的內(nèi)包材料的熱原去除，通常分為兩類(lèi)，一類(lèi)耐高溫的內(nèi)包材，例如玻璃瓶或金屬桶，可使用溫度大于180℃的干熱滅菌方法，高溫分解包材表面的細(xì)菌內(nèi)毒素，金屬容器表面的熱原物質(zhì)也可通過(guò)使用雙氧水等化學(xué)藥品來(lái)除去熱原；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理塑料容器和膠塞在處理和貯存過(guò)程中應(yīng)控制可能產(chǎn)生的熱原污染，因此應(yīng)作去熱原處理，由于膠塞或塑料容器不耐高溫，不能用180℃以上干熱滅菌去除，常用無(wú)熱原注射用水，將膠塞或塑料容器表面熱原物質(zhì)洗滌稀釋至0.25EU/ml鱟試劑檢測(cè)靈敏度以下。同時(shí)，應(yīng)盡可能縮短洗塑料容器和膠塞和滅菌之間的時(shí)間間隔；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理小結(jié)：無(wú)菌藥品中細(xì)菌內(nèi)毒素的去除方法：超濾（液體原料）；高溫（大于180℃）；酸堿處理（重鉻酸鉀硫酸溶液等）；注射用水洗滌（膠塞處理）；活性炭吸附等。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

細(xì)菌內(nèi)毒素控制重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

藥品采用何種除熱原方法？如果采用的是干熱法，要求了解一個(gè)周期的時(shí)間/溫度。使用注射用水洗滌方式去除熱原嗎？如果使用腐蝕性清洗劑除熱原，是什么品種的清洗劑？使用了超濾裝置除熱原嗎？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理上述除熱原方法用于下述那類(lèi)物品的熱原去除：①原料的熱原去除？②制劑用容器的熱原去除？③制劑用容器的封口材料的熱原去除？④接觸無(wú)菌藥品的表面的熱原去除？⑤生產(chǎn)設(shè)備的熱原去除？⑥制劑的熱原去除？用什么方法測(cè)定內(nèi)毒素：家兔法或鱟試劑（LAL）法？所有的除熱原方法都經(jīng)過(guò)驗(yàn)證已證明內(nèi)毒素濃度至少有三個(gè)對(duì)數(shù)單位的下降嗎？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第一節(jié)

1.3最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌檢查的局限性歷史的教訓(xùn)：1962年，美國(guó)FDA頒布第一部GMP1970-1975年，美國(guó)輸液污染至敗血癥400多起

--有問(wèn)題的產(chǎn)品全部通過(guò)了無(wú)菌檢查無(wú)菌檢查的風(fēng)險(xiǎn)取樣量為20瓶時(shí)污染率與通過(guò)無(wú)菌檢查概率的關(guān)系批產(chǎn)品污染率％5101520通過(guò)無(wú)菌檢查的概率％361241無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥典對(duì)無(wú)菌保證的定量標(biāo)準(zhǔn)1973年的英國(guó)藥典和1980年USP增補(bǔ)版提到了無(wú)菌的量化標(biāo)準(zhǔn)Fo不小于8分鐘經(jīng)滅菌后，產(chǎn)品中污染菌存活的概率不大于百萬(wàn)分之一。中國(guó)藥典在2000版起，收載了此標(biāo)準(zhǔn)。無(wú)菌保證值：污染菌存活概率的負(fù)對(duì)數(shù)，經(jīng)滅菌后，產(chǎn)品的無(wú)菌保證值不小于6無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理普遍接受的標(biāo)準(zhǔn)是，滅菌后，最終滅菌注射劑或其它關(guān)鍵設(shè)備微生物存活的概率達(dá)到10-6，即保證一百萬(wàn)個(gè)已滅菌物品或制劑中存活的微生物數(shù)低于一。FDA在“最終滅菌產(chǎn)品參數(shù)放行”文件中要求將產(chǎn)品中的污染菌降至一個(gè)菌以下，并在此基礎(chǔ)上使產(chǎn)品的無(wú)菌安全系數(shù)再增加六個(gè)對(duì)數(shù)單位USP、歐洲藥典、BP及中國(guó)藥典現(xiàn)行版：最終濕熱滅菌水針劑的標(biāo)準(zhǔn)滅菌條件是121℃15分鐘。也可用采用其它溫度及時(shí)間參數(shù)，只要能有效地證明……所采用的工藝和監(jiān)控措施應(yīng)能確保無(wú)菌保證水平小于10-6。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

最終滅菌方法生產(chǎn)無(wú)菌藥品

最終滅菌的無(wú)菌藥品（大容量注射劑、小容量注射劑、部分口服液劑等）制品通常是耐熱的，能通過(guò)熱處理的方式來(lái)去除制品中可能存在的微生物；保證產(chǎn)品無(wú)菌性的主要措施是內(nèi)包完畢的制品在工藝進(jìn)程的最終有一個(gè)可靠的滅菌措施，通常采用濕熱滅菌。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

藥品無(wú)菌性形成的基本原則

隨著藥品的品種及工藝的開(kāi)發(fā)，可最終滅菌產(chǎn)品首選的辦法是最終滅菌，保證產(chǎn)品的無(wú)菌特性；當(dāng)滅菌可能會(huì)造成副產(chǎn)物等問(wèn)題時(shí)，盡可能從工藝上創(chuàng)造條件，使滅菌成為可行；非最終滅菌無(wú)菌灌裝工藝的基本特征是：低安全+高成本，應(yīng)盡可能避免采用；不得以化學(xué)的硬指標(biāo)來(lái)壓無(wú)菌的軟指標(biāo)；無(wú)菌產(chǎn)品必須達(dá)到規(guī)定的無(wú)菌保證水平。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理對(duì)熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品而言，應(yīng)采用過(guò)度殺滅法（過(guò)度殺滅程序，滅菌程序應(yīng)大大超過(guò)達(dá)到10-6所需的時(shí)間，F(xiàn)o>12）。然而，長(zhǎng)期受熱時(shí)，可能對(duì)產(chǎn)品有破壞作用，過(guò)度殺滅法難以采用。此時(shí)，滅菌程序的制訂，很大程度上取決于微生物污染的情況，這需要在一段時(shí)間內(nèi)，對(duì)很多批產(chǎn)品滅菌前的微生物污染進(jìn)行測(cè)定。存活概率法--theapproachofsurvivorprobability（Fo在8至12之間）無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理重點(diǎn)關(guān)注水溶液產(chǎn)品滅菌工藝的符合性無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理“無(wú)菌”保障與成品檢查“每批產(chǎn)品中，污染品概率不得超過(guò)一百萬(wàn)分之一”，用無(wú)菌檢查法可行否?每瓶產(chǎn)品微生物存活的概率可否計(jì)算?需要測(cè)試產(chǎn)品滅菌前微生物污染數(shù)、D值，使用對(duì)數(shù)規(guī)則，并用生物指示劑試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。量化指標(biāo)+計(jì)算+試驗(yàn)，無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)成為工業(yè)界可執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理是否當(dāng)生產(chǎn)超過(guò)100萬(wàn)瓶或者超過(guò)100萬(wàn)批時(shí),是否就允許有污染的產(chǎn)品了呢?SAL＝F0/D–lgN0無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

無(wú)菌概念的理解

某產(chǎn)品批量為1萬(wàn)瓶，10ml安瓿，每瓶1000個(gè)孢子，D121=1分鐘，不同滅菌時(shí)間下的結(jié)果？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌3分鐘，從批看，所有產(chǎn)品有菌，100%污染。從每一瓶看，有1個(gè)菌，二者等同；滅菌4分鐘，從批看，批產(chǎn)品孢子總數(shù)為1000個(gè)，有一瓶應(yīng)是無(wú)菌的，污染概率10-1。從每瓶看，也是10-1。滅菌6分鐘時(shí)，從整批看，還有10個(gè)菌，分布在10瓶中，污染品為10，因批量為一萬(wàn)，污染概率為千分之一。從每瓶看，二者等同；滅菌8分鐘時(shí)，從整批看，根據(jù)計(jì)算還有十分之一個(gè)菌，分布在一萬(wàn)瓶中，污染概率為十萬(wàn)分之一。從每瓶看，二者等同；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

“每批產(chǎn)品中，污染品的數(shù)量不得超過(guò)一百萬(wàn)分之一”或“一瓶產(chǎn)品中微生物存活的概率低于百萬(wàn)分之一”，是無(wú)菌合格標(biāo)準(zhǔn)的不同表述方式?無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第二節(jié)

滅菌基本原理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理熱對(duì)微生物的作用當(dāng)高溫破壞了細(xì)胞中起生命作用的蛋白質(zhì)、酶及核酸時(shí)，細(xì)胞死亡。生命基本物質(zhì)的破壞本質(zhì)上是化學(xué)變化實(shí)驗(yàn)證明微生物受熱死亡速度符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理2.1對(duì)數(shù)規(guī)則無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程式dN/dt＝K(N0－Nt)N0為t＝0時(shí)，存活的微生物數(shù)；

Nt為t時(shí)被殺滅的微生物數(shù)；

N為t時(shí)存活的微生物數(shù)

K為常數(shù)。對(duì)數(shù)規(guī)則無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理微生物存活數(shù)與滅菌時(shí)間關(guān)系圖tlgN102030123Y軸及X軸均為普通座標(biāo)（示意）tN102030101001000Y軸：微生物取對(duì)數(shù)X軸：時(shí)間為10進(jìn)制普通座標(biāo)半對(duì)數(shù)座標(biāo)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

2.2D

指一定溫度下將微生物殺滅90％或下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位所需要的時(shí)間。lgNt1234t1t2D無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌溫度對(duì)D值的影響115℃121℃125℃lgNt△lgN=1D125D121D115滅菌溫度低時(shí)，達(dá)到同一滅菌效果的時(shí)間就長(zhǎng)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

2.3滅菌溫度系數(shù)-Z值

使D值變更一個(gè)對(duì)數(shù)單位滅菌溫度需升高或下降的度數(shù)；實(shí)測(cè)細(xì)菌孢子的Z值在8-12℃之間，但計(jì)算滅菌率時(shí)，Z通常取10℃；在干熱滅菌計(jì)算中，Z通常取20℃；物理意義：Z大時(shí)，用升高溫度的辦法來(lái)改善滅菌效果時(shí)，收效不明顯。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理2.4F0值：達(dá)到同一滅菌效果的概念

F0值即標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間指產(chǎn)品在滅菌過(guò)程中獲得的與標(biāo)準(zhǔn)參照條件（121℃）相同滅菌效果的曝?zé)釙r(shí)間lgNtLgNoLgNt121℃117℃△LgNFTFo無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

滅菌過(guò)程的Fo示意

Fo系指當(dāng)滅菌溫度為121.1℃，生物指示菌的D121值為1分，Z值為10.0℃時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（121.1℃下計(jì)算的微生物等效滅活率）（USP28《1222》中的Fo）滅菌程序賦予產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間，可理解滅菌率L的意義總標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間是累計(jì)的無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

2.5標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間-滅菌率L

Lethality滅菌率

L=10(Ti－TR)/Z?某一溫度下滅菌一分鐘殺滅微生物達(dá)到同一滅菌效果所需的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（121℃下受熱的分鐘數(shù)）；

L沒(méi)有單位；

TotalLethality：總滅菌時(shí)間，常指Fo，國(guó)內(nèi)學(xué)者將它翻譯成殺菌力。在英、美藥典中，長(zhǎng)期以來(lái)，以標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間為8作標(biāo)準(zhǔn)，用Fo與之比較。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理不同滅菌溫度下的滅菌率滅菌溫度℃滅菌率L1000.0081050.0251120.1261150.2511160.3161180.5011200.7941211.0001221.251231.59滅菌率：為達(dá)到與某一溫度下滅菌1分鐘相同的滅菌效果，在121℃下滅菌所需要的滅菌時(shí)間

100℃滅菌時(shí)1分鐘，相當(dāng)于121℃滅菌0.008分鐘，即Fo值為0.008分鐘。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

流通蒸汽滅菌產(chǎn)品的安全隱患

不同溫度下的滅菌率-低溫滅菌

表中Z取10℃；100℃滅菌時(shí)，F(xiàn)o達(dá)8時(shí)，需?分鐘，產(chǎn)品會(huì)受到破壞105℃滅菌30分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為?，幾乎沒(méi)有100℃滅菌30分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為?，安全性？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

流通蒸汽滅菌產(chǎn)品的安全隱患

不同溫度下的滅菌率-低溫滅菌表中Z取10℃；100℃滅菌時(shí)，F(xiàn)o達(dá)8時(shí)，需1000分鐘，近17個(gè)小時(shí)產(chǎn)品會(huì)受到破壞105℃滅菌30分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為0.75，幾乎沒(méi)有100℃滅菌30分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為0.24，安全性？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理105℃滅菌40分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為?分鐘，能使D值為1分鐘的芽孢數(shù)量下降?個(gè)對(duì)數(shù)單位無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理105℃滅菌40分鐘時(shí)，F(xiàn)o約為1分鐘，能使D值為1分鐘的芽孢數(shù)量下降1個(gè)對(duì)數(shù)單位無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理2.6SAL無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理產(chǎn)品滅菌完全的必要措施-1

從公式

SAL＝F0/D–lgN0看滅菌完全的必要措施足夠的F0值產(chǎn)品滅菌前污染菌檢測(cè)需氧菌總計(jì)數(shù)（微生物污染水平）污染菌耐熱性無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理產(chǎn)品滅菌完全的必要措施-2通常采用的中間控制手段：對(duì)每批的灌封開(kāi)始和結(jié)束階段，分別對(duì)灌裝好的半成品取樣檢測(cè)。樣品須作需氧菌總計(jì)數(shù)將檢品液置于100℃下加熱10分鐘，檢查是否有耐熱芽孢存活須對(duì)微生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行趨勢(shì)分析。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理產(chǎn)品滅菌完全的必要措施-3FDA要求－

“對(duì)于在滅菌前產(chǎn)品污染菌檢測(cè)中所發(fā)現(xiàn)的耐熱孢子，必須與驗(yàn)證滅菌工藝所用生物指示劑的耐熱性進(jìn)行對(duì)比”無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理產(chǎn)品滅菌完全的必要措施-4具體要求：如經(jīng)熱處理后檢出的微生物是芽孢類(lèi)微生物。需將其培養(yǎng)并收集芽孢，測(cè)定其的耐熱性，將之與驗(yàn)證滅菌工藝用生物指示劑的耐熱性進(jìn)行對(duì)比。如果所分離的污染菌耐熱性高于生物指示劑的耐熱性，則必須使用耐熱性更強(qiáng)的生物指示劑對(duì)滅菌工藝重新進(jìn)行驗(yàn)證(可以使用生產(chǎn)中的分離菌)。如果在生產(chǎn)全過(guò)程中，對(duì)微生物污染嚴(yán)格控制，那么，這種情況發(fā)生的概率是非常小的。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌保證水平舉例假定滅菌開(kāi)始時(shí)產(chǎn)品中的污染微生物總數(shù)（N0）為100cfu/瓶，污染微生物的耐熱參數(shù)（D）為1分鐘，要達(dá)到藥典規(guī)定的SAL不小于6的標(biāo)準(zhǔn)，滅菌F0值應(yīng)達(dá)到多少？相當(dāng)于121℃和115℃下滅菌多少分鐘？換算成115℃下的滅菌時(shí)間是：F0=?分鐘。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理答：F0=（SAL＋lgN0）×D=（6+lg100）×1=8分鐘，需在121℃下滅菌8分鐘。換算成115℃下的滅菌時(shí)間是：F0/L115=8/0.25=32分鐘。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌保證水平舉例二某復(fù)方氨基酸注射液采用110℃，30分鐘的滅菌程序，起始污染微生物仍為100cfu/瓶，D值為0.5分鐘，請(qǐng)計(jì)算無(wú)菌保證值和殘存微生物污染的概率。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理答：其SAL為：SAL=F0/D-lgN0=L110×t/D-lg100=0.08×30/0.5-2=2.8殘存微生物的概率為10-2.8＝0.158％通過(guò)無(wú)菌檢查的概率為(1-0.158％)20=96.9%。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第三節(jié)

常見(jiàn)滅菌方法無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理最終滅菌無(wú)菌藥品滅菌方式的選擇

濕熱滅菌是首選的滅菌方法

按產(chǎn)品熱穩(wěn)定性分為二種：過(guò)度殺滅法；存活概率法。合格標(biāo)準(zhǔn)滅菌后產(chǎn)品均應(yīng)至少達(dá)到百萬(wàn)分之一的無(wú)菌保證水平。不能在100℃以上滅菌時(shí)，注意：強(qiáng)化環(huán)境控制，可能時(shí)灌裝環(huán)境達(dá)到（Ｂ＋Ａ）；對(duì)設(shè)備容器具滅菌；藥液除菌過(guò)濾；可能條件下采用巴氏消毒。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

滅菌方式的選擇？--滅菌和化學(xué)指標(biāo)的平衡點(diǎn)？

以葡萄糖輸液為例，有關(guān)物質(zhì)5-羥甲基糠醛，它與滅菌溫度及藥液中的含氧量有關(guān)；蒸汽滅菌是首選的滅菌方法加熱能導(dǎo)致氧化、降解；不同組分間的縮合、形成沉淀為了解決副產(chǎn)物問(wèn)題，因此，?滅菌溫度、?滅菌時(shí)間產(chǎn)品安全應(yīng)在產(chǎn)品開(kāi)發(fā)階段完成，在品種投產(chǎn)階段進(jìn)行驗(yàn)證無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理3.1濕熱滅菌無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌的作用濕熱滅菌的作用是能使細(xì)胞中有一些對(duì)其生命起決定性作用的類(lèi)蛋白質(zhì)及酶，水分對(duì)殺滅細(xì)菌芽孢起重要作用，RH高于50％或低于20％時(shí)，芽孢的耐熱性迅速下降，容易殺滅。濕熱滅菌加速細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和酶發(fā)生熱變性或凝固，使其死亡；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌程序賦予產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間為Fo值，滅菌率L與Fo的關(guān)系為：無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

濕熱滅菌的基本要求

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌的基本要求了解藥品滅菌柜容量計(jì)算，理論批次量和實(shí)際的生產(chǎn)批量，檢查能否在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成滅菌。一天生產(chǎn)多個(gè)批號(hào)或一批需多次滅菌時(shí)，每批產(chǎn)品零頭包裝如何滅菌，如何處理？滅菌柜應(yīng)有自動(dòng)監(jiān)測(cè)和記錄裝置。自動(dòng)監(jiān)測(cè)記錄應(yīng)納入批生產(chǎn)記錄；滅菌設(shè)備升溫、降溫速度符合生產(chǎn)工藝要求。能夠適應(yīng)于生產(chǎn)工藝的不同功能要求；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌概念濕熱滅菌通常指一定壓力下的蒸汽滅菌，也包括過(guò)熱水滅菌（水浴式或噴淋式）實(shí)際上只要微生物處于達(dá)到水－水蒸氣平衡狀態(tài)下的滅菌過(guò)程，都是濕熱滅菌例：實(shí)驗(yàn)室給微生物取樣瓶滅菌時(shí)通常加入1ml水并密封。水分的存在有利于滅菌無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌特點(diǎn)蒸汽有利于蛋白質(zhì)的變性和酶的失活，從而殺滅細(xì)胞蒸汽熱穿透性強(qiáng)滅菌效率高溫度相對(duì)較低滅菌時(shí)間相對(duì)短滅菌過(guò)程不產(chǎn)生任何化學(xué)物理污染滅菌設(shè)備控制參數(shù)少，運(yùn)行穩(wěn)定，方便管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌工藝之一美國(guó)FDA規(guī)定的殘存概率法滅菌過(guò)程8≤F0<12分鐘適用于熱穩(wěn)定性不很好的產(chǎn)品通過(guò)控制工藝過(guò)程的微生物污染和滅菌工藝參數(shù)使產(chǎn)品無(wú)菌無(wú)菌保證值不小于6無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理濕熱滅菌工藝之二過(guò)度殺滅法F0不低于12熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品以徹底殺滅任何污染的微生物為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌的手段無(wú)菌保證值不小于6無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理其它濕熱滅菌工藝？F0值低于8的滅菌工藝熱穩(wěn)定性很差的產(chǎn)品以無(wú)菌生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，滅菌是提高無(wú)菌保證水平的輔助手段不計(jì)算F0值，污染概率不大于0.1%除血液制品外，發(fā)達(dá)國(guó)家這類(lèi)大容量注射劑幾乎沒(méi)有小容量注射劑也少見(jiàn)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌灌裝與流通蒸汽滅菌PDA《參數(shù)放行》-1999-10-21文件中指出：如果產(chǎn)品在最終滅菌前采取無(wú)菌灌裝，那么該產(chǎn)品的滅菌工藝可以采用較小的F0值（如F0≤8min）這當(dāng)然是對(duì)熱穩(wěn)定差的產(chǎn)品采用的方法此提法和歐盟GMP無(wú)菌藥品附錄一致這一原則還沒(méi)有被我國(guó)制藥行業(yè)所認(rèn)可，我國(guó)企業(yè)只認(rèn)可流通蒸汽滅菌，卻忽視了無(wú)菌制造工藝的關(guān)鍵要求無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理不同工藝無(wú)菌保證比較表過(guò)度殺滅法Fo>1210-6熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品以殺滅微生物作為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌的手段殘存概率法Fo>810-6熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品工藝過(guò)程將防止產(chǎn)品被耐熱菌污染放在首位，而不是僅依賴最終滅菌去消除污染

流通蒸汽法不計(jì)算Fo0.1%熱不穩(wěn)定產(chǎn)品加熱是無(wú)菌生產(chǎn)工藝（除菌過(guò)濾）的補(bǔ)充手段除菌過(guò)濾法LRV>70.1%不能加熱的產(chǎn)品LRV=logreductionvalue過(guò)濾對(duì)數(shù)下降值，一般上游為107下游為1，則LRV=7由于后續(xù)無(wú)菌操作較多，最終產(chǎn)品達(dá)到的無(wú)菌保證水平遠(yuǎn)低于除菌過(guò)濾的本身的能力無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

濕熱滅菌程序的驗(yàn)證

濕熱滅菌設(shè)備應(yīng)具有進(jìn)行熱均勻性驗(yàn)證并符合要求的必要條件；滅菌程序驗(yàn)證應(yīng)有熱分布(滅菌設(shè)備空載無(wú)負(fù)荷熱分布試驗(yàn))、熱穿透(負(fù)載熱分布試驗(yàn))和細(xì)菌挑戰(zhàn)的三個(gè)必要的試驗(yàn)，且試驗(yàn)結(jié)果符合工藝生產(chǎn)要求；對(duì)滅菌設(shè)備構(gòu)造、其組成部分功能、輔助系統(tǒng)的概述(包括生產(chǎn)商和型號(hào))。設(shè)備運(yùn)行控制系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)的功能等所使用的滅菌方式(如飽和蒸汽、水浴、水噴淋式等)；滅菌的工藝參數(shù)和運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)(如溫度、壓力、時(shí)間、最大及最小F0值等)；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理待滅菌物的裝載情況(如裝載方式、產(chǎn)品處方、容器大小、灌裝體積、最大及最小裝載量等)；滅菌程序的監(jiān)控方法(如熱電偶、監(jiān)控溫度用產(chǎn)品模擬瓶、生物指示劑的數(shù)量、位置以及合格/不合格標(biāo)準(zhǔn))；關(guān)鍵參數(shù)允許的變化范圍(最大及最小值)；產(chǎn)品所能承受的F0值限度；對(duì)滅菌工藝波動(dòng)情況所作統(tǒng)計(jì)分析的評(píng)估報(bào)告；再驗(yàn)證計(jì)劃(如常規(guī)和非常規(guī)情況下再驗(yàn)證方案的詳細(xì)說(shuō)明、頻率等)；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

濕熱滅菌重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

滅菌介質(zhì)是什么？蒸汽（鍋爐蒸汽、純蒸汽）？過(guò)熱水？滅菌設(shè)備的過(guò)濾器滅菌機(jī)使用什么類(lèi)型的過(guò)濾器？多長(zhǎng)時(shí)間對(duì)過(guò)濾器進(jìn)行一次完整性測(cè)試？滅菌周期控制是手動(dòng)的還是程序自動(dòng)控制的？應(yīng)了解具體產(chǎn)品的高壓蒸汽滅菌機(jī)的滅菌參數(shù)情況？①時(shí)間；②溫度；③壓力；④壓力下降速度。設(shè)備滅菌周期控制用傳感器安裝的位置？上述參數(shù)是如何監(jiān)測(cè)的？如未監(jiān)測(cè)，應(yīng)要求說(shuō)明：滅菌機(jī)在每個(gè)滅菌周期內(nèi)均監(jiān)測(cè)驗(yàn)證確定的冷點(diǎn)溫度嗎？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理如果在蒸汽滅菌驗(yàn)證時(shí)使用了生物指示劑，應(yīng)確認(rèn)：①生物指示劑的類(lèi)型？②生物指示劑來(lái)源？③是哪種微生物？④濃度是多少？⑤生物指示劑的D值是多少？⑥生物指示劑以全部滅活方式還是對(duì)數(shù)減少方式使用的？如果檢測(cè)發(fā)現(xiàn)了不希望出現(xiàn)的生物指示劑陽(yáng)性，應(yīng)了解企業(yè)做出了什么反應(yīng)？現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督和檢查報(bào)告中應(yīng)包括該項(xiàng)目的記錄和反應(yīng)內(nèi)容。若發(fā)現(xiàn)驗(yàn)證時(shí)蒸汽滅菌機(jī)的熱分布或熱穿透試驗(yàn)數(shù)據(jù)不一致，應(yīng)了解偏差是如何糾正的，是否未糾正就接受了？蒸汽滅菌是否根據(jù)被滅菌物容器大小，待滅菌產(chǎn)品的粘稠性等確定有滅菌延滯時(shí)間，并且分別調(diào)整了滅菌周期？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

熱力滅菌工藝常用的生物指示劑

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

FDA對(duì)滅菌驗(yàn)證的要求－滅菌效果

最終濕熱滅菌程序的資料對(duì)產(chǎn)品及滅菌程序的說(shuō)明；滅菌程序的熱力學(xué)確認(rèn)；滅菌程序的滅菌效果；環(huán)境的微生物監(jiān)控；容器-膠塞及包裝的完好性；

……其它要求。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理FDA對(duì)滅菌程序物理驗(yàn)證的基本要求熱分布及熱穿透試驗(yàn)熱力學(xué)監(jiān)控記錄裝置（自動(dòng)記錄）裝載方式的熱力學(xué)影響批記錄中應(yīng)有的資料無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理3.2干熱滅菌

機(jī)理干熱滅菌與濕熱滅菌的動(dòng)力學(xué)特征相似，符合“對(duì)數(shù)規(guī)則”，但滅菌的機(jī)理卻并不相同。干熱滅菌為何需較高的溫度？水份的影響：濕度低機(jī)理不同：干熱滅菌是使微生物氧化而不是使蛋白質(zhì)變性無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理干熱滅菌要點(diǎn)干熱滅菌的介質(zhì)通常是熱空氣用對(duì)數(shù)規(guī)則描述微生物殺滅過(guò)程，準(zhǔn)確性較差溫度高，200℃以上，有可能到320℃用于玻璃容器、手術(shù)器械等無(wú)菌生產(chǎn)工藝中安瓿、西林瓶的滅菌和去熱源無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理干熱滅菌與去熱原的關(guān)系去熱原的工藝條件比孢子殺滅程序要苛刻得多，通常相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)干熱滅菌時(shí)間FH

的數(shù)十倍。如果干熱法去熱原工藝能使細(xì)菌內(nèi)毒素下降3個(gè)對(duì)數(shù)單位，就不必再進(jìn)行微生物的生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗(yàn)。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理干熱滅菌是使微生物氧化而不是象濕熱滅菌使蛋白質(zhì)變性；干熱滅菌時(shí)，以強(qiáng)制方式將空氣對(duì)流，高溫空氣將水分逐漸帶走，被滅菌物品及芽孢跟著失水，滅菌率也發(fā)生相應(yīng)的變化。去熱原的工藝條件比孢子殺滅程序要苛刻得多，通常相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)干熱滅菌時(shí)間FH的數(shù)十倍。170℃下滅菌時(shí)間用FH表示；干熱滅菌空氣應(yīng)經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾，并要控制層流方向。檢查生產(chǎn)中的時(shí)間，壓力是否與驗(yàn)證一致；最終滅菌無(wú)菌藥品生產(chǎn)中，干熱滅菌工藝主要用于生產(chǎn)過(guò)程中器具的滅菌與除熱原處理。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

箱式干熱滅菌柜

工作原理示意圖

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

干熱滅菌重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

滅菌設(shè)備通過(guò)風(fēng)機(jī)空氣循環(huán)還是僅靠熱空氣對(duì)流熱分布？滅菌后物品冷卻使用的空氣經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)濾處理嗎？有沒(méi)有進(jìn)行高效過(guò)濾器的完整性測(cè)試？多長(zhǎng)時(shí)間測(cè)定一次高效過(guò)濾器的完整性？了解干熱滅菌周期采用人工控制還是自動(dòng)控制？評(píng)估滅菌控制的可靠性。了解干熱滅菌參數(shù)是如何監(jiān)測(cè)的？如未監(jiān)測(cè)，要求予以說(shuō)明。干熱設(shè)備使用的是那類(lèi)監(jiān)測(cè)和控制傳感器了解干熱滅菌的周期參數(shù)和確定依據(jù)（將驗(yàn)證記錄和SOP中規(guī)定的參數(shù)與所抽取的產(chǎn)品的生產(chǎn)記錄進(jìn)行比較）？干熱滅菌時(shí)間和溫度的規(guī)定指標(biāo)和實(shí)際觀察到的參數(shù)有無(wú)偏差？偏差的處理？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理干熱設(shè)備使用的監(jiān)測(cè)和控制傳感器：①玻璃水銀溫度計(jì)？②熱電偶？③壓力表？④壓力傳感器？⑤多長(zhǎng)時(shí)間對(duì)監(jiān)測(cè)和控制傳感器校正一次？⑥滅菌周期控制傳感器裝在什么位置？了解干熱滅菌的周期參數(shù)和確定依據(jù)（將驗(yàn)證記錄和SOP中規(guī)定的參數(shù)與所抽取的產(chǎn)品的生產(chǎn)記錄進(jìn)行比較）？干熱滅菌時(shí)間和溫度的規(guī)定指標(biāo)和實(shí)際觀察到的參數(shù)有無(wú)偏差？偏差的處理？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

干熱滅菌重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

了解干熱滅菌的驗(yàn)證文件，文件是否包括：(1)空載熱分布試驗(yàn)；①設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)次數(shù)；②測(cè)定到冷點(diǎn)溫度了嗎；③根據(jù)冷點(diǎn)溫度確定允許的偏差和實(shí)際發(fā)現(xiàn)的偏差；(2)熱穿透試驗(yàn)：①對(duì)每種裝載方式/和所用的不同大小容器分別進(jìn)行試驗(yàn)嗎？②每種裝載方式的運(yùn)轉(zhuǎn)次數(shù)？③每種裝載方式均檢測(cè)測(cè)了冷點(diǎn)了嗎？(3)每次使用前后均對(duì)熱電偶校正了嗎？校正時(shí)用了冰點(diǎn)參照標(biāo)準(zhǔn)了嗎？(4)高溫參照標(biāo)準(zhǔn)是否均有NBS可追溯性？在驗(yàn)證時(shí)，如發(fā)現(xiàn)了熱分布或熱穿透研究不一致，應(yīng)了解偏差是如何糾正的，是否未糾正就接受了？干熱滅菌是否根據(jù)容器大小，產(chǎn)品粘性，等確定了延滯時(shí)間？是否分別調(diào)整了滅菌周期？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

3.3除菌過(guò)濾

工藝

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理過(guò)濾系統(tǒng)要求：過(guò)濾系統(tǒng)無(wú)泄漏；壓力、流速、溫度；化學(xué)性質(zhì)、pH值；溶劑溶出物；生物性質(zhì)應(yīng)確認(rèn)：微生物截留試驗(yàn)；毒性試驗(yàn)；通過(guò)起泡點(diǎn)試驗(yàn)，判斷確認(rèn)過(guò)濾孔徑與工藝要求相適應(yīng)。與其它滅菌方法相比，過(guò)濾滅菌法的風(fēng)險(xiǎn)更大，建議在緊挨“灌裝”的位置安裝第二只滅過(guò)菌的除菌過(guò)濾器，再過(guò)濾一次。此最終除菌過(guò)濾器應(yīng)盡可能接近灌裝點(diǎn)。為防止因時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)或穿透濾膜而污染濾液，應(yīng)在既定最大時(shí)間限度內(nèi)完成產(chǎn)品的過(guò)濾和灌裝。該時(shí)限還應(yīng)當(dāng)防止過(guò)濾器上游微生物數(shù)量的過(guò)份增加，微生物增多將導(dǎo)致熱原的產(chǎn)生。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

除菌過(guò)濾器完整性測(cè)試

“除菌過(guò)濾器的完整性應(yīng)當(dāng)通過(guò)適當(dāng)方法，在使用前驗(yàn)證，并在使用后立即重新確認(rèn)?！保‥UGMPGuideAnnexe1）“濾器的完整性測(cè)試可在使用前進(jìn)行，在使用后須按常規(guī)進(jìn)行”（FDA“SterileDrugProductsProducedbyAsepticProcessing”September,2004）0.2μm除菌過(guò)濾器須按ASTM方法，采用107/cm2濾膜面積缺陷假單胞菌進(jìn)行挑戰(zhàn)性試驗(yàn)（Brevundimonasdiminuta）。完整性測(cè)試說(shuō)明過(guò)濾器沒(méi)有損壞：運(yùn)輸安裝消毒/滅菌過(guò)濾器被正確安裝；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

完整性試驗(yàn)的方法

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

除菌過(guò)濾工藝重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

了解除菌過(guò)濾器的類(lèi)型，筒式或盤(pán)式？疏水性或親水性？工藝過(guò)程中是使用單個(gè)除菌濾器還是多個(gè)濾器？過(guò)濾裝置采用何種方法滅菌？①過(guò)濾裝置采用何種方法滅菌？②滅菌工藝經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證嗎？要求了解過(guò)濾器驗(yàn)證操作的SOP。③在同一批產(chǎn)品生產(chǎn)期間更換濾器嗎？過(guò)濾器更換的頻次經(jīng)過(guò)驗(yàn)證測(cè)試嗎？過(guò)濾器采用重新清洗滅菌和重新使用方式嗎？這種方法經(jīng)過(guò)驗(yàn)證嗎？要求了解過(guò)濾器重新清洗滅菌和重新使用方式驗(yàn)證操作的SOP該濾器供應(yīng)商是否對(duì)每批濾器介質(zhì)做過(guò)細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗(yàn)？企業(yè)對(duì)過(guò)濾器的供應(yīng)審計(jì)是如何進(jìn)行的？生產(chǎn)中的產(chǎn)品組合都進(jìn)行了物理和化學(xué)挑戰(zhàn)性試驗(yàn)嗎？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理過(guò)濾器的驗(yàn)證測(cè)試過(guò)濾器裝置在使用前后均測(cè)試起泡點(diǎn)壓力嗎？測(cè)試壓力與生產(chǎn)中使用的壓力有何關(guān)系？當(dāng)過(guò)濾器使用后測(cè)試壓力不符合要求時(shí)采取了什么措施？過(guò)濾器在測(cè)試不符合后有無(wú)進(jìn)行相應(yīng)的原因調(diào)查？生產(chǎn)中會(huì)遇到的產(chǎn)品組合都進(jìn)行了物理和化學(xué)挑戰(zhàn)性試驗(yàn)嗎？該測(cè)試的條件與實(shí)際使用條件相同嗎？跟蹤對(duì)一種用于給定的工藝和產(chǎn)品的專用濾器的驗(yàn)證，了解該驗(yàn)證的詳細(xì)情況，是否延伸至有著相似的性質(zhì)和工藝條件的相關(guān)產(chǎn)品，如果是，是否已將這種延伸的理由文件化？微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第四節(jié)滅菌工藝的驗(yàn)證無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌工藝的驗(yàn)證滅菌工藝驗(yàn)證資料是國(guó)外藥品（注射劑）注冊(cè)的必報(bào)材料滅菌工藝條件（滅菌介質(zhì)、溫度時(shí)間參數(shù)、裝載方式等）滅菌設(shè)備和滅菌工藝的驗(yàn)證（前者與后者不同）滅菌工藝驗(yàn)證資料包括滅菌設(shè)備的安裝確認(rèn)滅菌設(shè)備的運(yùn)行確認(rèn)滅菌工藝的驗(yàn)證先對(duì)設(shè)備溫度儀表和驗(yàn)證用儀表進(jìn)行校準(zhǔn)空載熱分布－找到滅菌過(guò)程中滅菌設(shè)備的最冷點(diǎn)不同裝載形式、不同裝量規(guī)格產(chǎn)品的熱穿透試驗(yàn)－產(chǎn)品獲得的F0生物指示劑驗(yàn)證-微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌過(guò)程的Fo示意無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理熱力滅菌常用生物指示劑滅菌方式微生物（孢子）D值范圍（分）濕熱121℃嗜熱脂肪芽孢桿菌Bacillusstearothermophilus

1.5-3.0枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis

0.3-0.7凝結(jié)芽孢桿菌Bacilluscoagulans

0.4-0.8梭狀芽孢桿菌Clostridiumsporogenes

0.4-0.8干熱150℃枯草芽孢桿菌黑色變種

Bacillussubtilisvar.niger

>1.0資料來(lái)源：參數(shù)放行專題材料無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第五節(jié)常見(jiàn)滅菌設(shè)備介紹無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理滅菌設(shè)備1、混合蒸汽滅菌柜2、下排式蒸汽滅菌柜3、脈動(dòng)真空蒸汽滅菌柜4、旋轉(zhuǎn)噴淋滅菌柜5、隧道式洗瓶滅菌柜工作原理圖無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理混合蒸汽滅菌柜SAM=steamairmixture蒸汽空氣混合滅菌柜混合汽體滅菌柜無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理進(jìn)蒸汽的管沒(méi)畫(huà)出頂上用一風(fēng)扇，使滅菌均勻無(wú)風(fēng)扇時(shí)，滅菌容易不均勻熱交換器控制冷卻速度無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理下排式蒸汽滅菌柜無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理脈動(dòng)真空蒸汽滅菌柜有高真空及脈動(dòng)真空二種形式第二種比較常見(jiàn)抽99%，剩1%3次真空，殘存的空氣為0.1%密封圈無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理旋轉(zhuǎn)噴淋滅菌柜無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理純化水或注射用水作傳熱介質(zhì)-過(guò)熱水滅菌加熱時(shí)開(kāi)工業(yè)蒸汽冷卻時(shí)，可用冷凍水或自來(lái)水冷卻產(chǎn)品轉(zhuǎn)動(dòng)，受熱均勻軟袋滅菌時(shí)，用過(guò)熱水較多，但需加壓縮空氣無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理干熱滅菌柜常見(jiàn)程序：180×2小時(shí)，細(xì)菌內(nèi)毒素下降3對(duì)數(shù)單位無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理隧道式洗瓶滅菌柜工作原理圖瓶清潔排水汽預(yù)熱去熱原冷卻干熱滅菌層流保護(hù)洗瓶及滅菌、去熱原為聯(lián)動(dòng)線B區(qū)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理冰浴0.01℃油浴121℃數(shù)據(jù)采集器參照儀驗(yàn)證儀校準(zhǔn)滅菌柜熱分布驗(yàn)證試驗(yàn)圖示無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理第六節(jié)容器密封可靠性驗(yàn)證無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

丁基膠塞清洗工藝

自動(dòng)洗塞機(jī)：裝塞＋清潔＋滅菌＋干燥已滅菌干燥的膠塞在層流下封入袋子無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

膠塞清洗原理

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

膠塞清洗、硅化、滅菌、干燥機(jī)示意

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

重點(diǎn)關(guān)注膠塞密封性-通過(guò)驗(yàn)證試驗(yàn)嗎？

輸液瓶的密封無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理膠塞清洗工藝重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法洗滌后最終淋洗水應(yīng)達(dá)到如下標(biāo)準(zhǔn)：菌落<10CFU/100ml;熱原<0.25EU/ml;氯化物、不溶性微粒、pH達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn);澄明度符合中國(guó)2005年版藥典注射劑通則的要求。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理軋蓋密封完好性試驗(yàn)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品密封系統(tǒng)完好性最終滅菌無(wú)菌藥品生產(chǎn)工藝應(yīng)對(duì)滅菌后的產(chǎn)品進(jìn)行檢查，看其液面高度是否與滅菌前的一致，或是否存在裂縫等其它痕跡。對(duì)軟袋類(lèi)包裝容器而言，在滅菌冷卻階段通常要加壓以防容器破裂。鹽水滲入檢查。向固定型容器中灌入注射用水，并按常規(guī)方法密封（壓塞并軋蓋），倒置于一盛有飽和鹽水的托盤(pán)內(nèi)，使膠塞及封蓋全部浸沒(méi)于溶液內(nèi)。將其放入滅菌設(shè)備并按常規(guī)的滅菌程序滅菌，爾后分析瓶中內(nèi)容物是否含有氯化鈉。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理密封系統(tǒng)完好性-物理法待確認(rèn)的密封口WFI支架氯化鈉溶液容器經(jīng)滅菌后，氯化鈉有否進(jìn)入瓶?jī)?nèi)？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素控制無(wú)論采用何種方法生產(chǎn)無(wú)菌藥品，都需要嚴(yán)格控制藥品中的細(xì)菌內(nèi)毒素。通常液體藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素，采用超過(guò)濾或活性碳吸附來(lái)去除液體中的細(xì)菌內(nèi)毒素，粉未分裝藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素則由無(wú)菌原料生產(chǎn)過(guò)程中的除熱原措施（例如有機(jī)溶酶處理或超濾等工藝）來(lái)解決；生產(chǎn)工藝過(guò)程中可能接觸無(wú)菌藥品的工具，器械的熱原，不耐高溫的器械通常采用無(wú)熱原的注射用水洗滌的方法稀釋去除，耐高溫的器械則用干熱滅菌（180℃以上）方法去除。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素控制(續(xù))藥品的內(nèi)包材料的熱原去除，通常分為兩類(lèi)，一類(lèi)耐高溫的內(nèi)包材，例如玻璃瓶或金屬桶，可使用溫度大于180℃的干熱滅菌方法，高溫分解包材表面的細(xì)菌內(nèi)毒素，金屬容器表面的熱原物質(zhì)也可通過(guò)使用雙氧水等化學(xué)藥品來(lái)除去熱原；塑料容器和膠塞在處理和貯存過(guò)程中應(yīng)控制可能產(chǎn)生的熱原污染，因此應(yīng)作去熱原處理，由于膠塞或塑料容器不耐高溫，不能用180℃以上干熱滅菌去除，常用無(wú)熱原注射用水，將膠塞或塑料容器表面熱原物質(zhì)洗滌稀釋至0.25EU/ml鱟試劑檢測(cè)靈敏度以下。同時(shí)，應(yīng)盡可能縮短洗塑料容器和膠塞和滅菌之間的時(shí)間間隔；無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品的細(xì)菌內(nèi)毒素控制(續(xù))小結(jié)：無(wú)菌藥品中細(xì)菌內(nèi)毒素的去除方法：超濾（液體原料）；高溫（大于180℃）；酸堿處理（重鉻酸鉀硫酸溶液等）；注射用水洗滌（膠塞處理）；活性炭吸附等。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理細(xì)菌內(nèi)毒素控制重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法藥品采用何種除熱原方法？如果采用的是干熱法，要求了解一個(gè)周期的時(shí)間/溫度。使用注射用水洗滌方式去除熱原嗎？如果使用腐蝕性清洗劑除熱原，是什么品種的清洗劑？使用了超濾裝置除熱原嗎？上述除熱原方法用于下述那類(lèi)物品的熱原去除：①原料的熱原去除？②制劑用容器的熱原去除？③制劑用容器的封口材料的熱原去除？④接觸無(wú)菌藥品的表面的熱原去除？⑤生產(chǎn)設(shè)備的熱原去除？⑥制劑的熱原去除？用什么方法測(cè)定內(nèi)毒素：家兔法或鱟試劑（LAL）法？所有的除熱原方法都經(jīng)過(guò)驗(yàn)證已證明內(nèi)毒素濃度至少有三個(gè)對(duì)數(shù)單位的下降嗎？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理小結(jié)細(xì)菌芽孢死亡規(guī)律符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程無(wú)菌檢查有明顯的局限性藥典規(guī)定最終滅菌產(chǎn)品的污染概率不超過(guò)百萬(wàn)分之一，即無(wú)菌保證值SAL不小于6SAL＝F0/D–lgN0F0值－標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間D值－微生物耐熱參數(shù)N0－滅菌開(kāi)始前微生物污染數(shù)無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理小結(jié)-續(xù)FDA將濕熱滅菌工藝分為二類(lèi)：過(guò)度殺滅法Fo不小于12殘存概率法Fo不小于8Fo值低于8時(shí)，應(yīng)采用無(wú)菌制造工藝，并用加熱方法提高無(wú)菌保證水平這是一種補(bǔ)充手段，可看作消毒非最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平為0.1%無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理思考題請(qǐng)解釋藥典的無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)除菌過(guò)濾的LRV指什么，生產(chǎn)中實(shí)際能達(dá)到何種無(wú)菌保證水平？無(wú)菌制造工藝的污染風(fēng)險(xiǎn)主要來(lái)自過(guò)濾，此理解對(duì)否？

LVP產(chǎn)品藥液是均一的，因此污染也是均一的，對(duì)否？說(shuō)明再由100℃30分鐘滅菌后，產(chǎn)品無(wú)菌檢查合格，該批是否符合無(wú)菌要求？熱力滅菌工藝最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌取決于什么？滅菌程序驗(yàn)證中，應(yīng)將耐熱性最強(qiáng)的芽孢，以106濃度接入產(chǎn)品中，并在滅菌后下降6D或12D，此理解對(duì)否？簡(jiǎn)述濕熱滅菌工藝的生物指示劑驗(yàn)證，BI的裝載要求使用殘存曲線法測(cè)定D值時(shí)，如何確定試驗(yàn)參數(shù)？滅菌時(shí)發(fā)生停電，第一次滅菌Fo為2，再次滅菌為6，問(wèn)滅菌是否完全？無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

第七章

GMP原則在藥品生產(chǎn)管理和質(zhì)量控制中的應(yīng)用

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理GMP的三個(gè)重要原則防止交叉污染；防止人為過(guò)失；優(yōu)良的質(zhì)量保證體系。

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

最終滅菌藥品生產(chǎn)中微生物污染控制

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

工藝生產(chǎn)中微生物污染控制重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理藥品生產(chǎn)潔凈區(qū)域管理

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

工藝衛(wèi)生管理

室內(nèi)污染的來(lái)源人員、機(jī)械、方法、材料、環(huán)境、工具=>純凈與潔凈度!制定有無(wú)相應(yīng)的衛(wèi)生管理規(guī)范工藝衛(wèi)生、環(huán)境衛(wèi)生、材料衛(wèi)生、設(shè)備衛(wèi)生、人員衛(wèi)生；生產(chǎn)區(qū)域衛(wèi)生的一般原則房間入口處須有“控制區(qū)”、“非控制區(qū)”標(biāo)志；應(yīng)有進(jìn)入各區(qū)域衣服的穿著指南；每個(gè)衛(wèi)生必須有自己的清潔設(shè)備，且不得在二區(qū)跨區(qū)使用；生產(chǎn)區(qū)域內(nèi)清潔不允許干掃；清潔工必須遵循生產(chǎn)人員同樣的衛(wèi)生規(guī)則。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理人員和物料進(jìn)入潔凈區(qū)域的要求

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

10,000級(jí)潔凈區(qū)更衣參考程序

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理工作服管理－清洗、整理與滅菌應(yīng)有專人負(fù)責(zé)工作服的領(lǐng)用、發(fā)放、收集，專人負(fù)責(zé)清洗、整理、滅菌；洗衣中心應(yīng)分為普通洗衣區(qū)和潔凈洗衣及整理區(qū)。不同潔凈度要求的工作服的清洗滅菌周期應(yīng)有明確的規(guī)定，清洗方法、清洗工具及場(chǎng)所嚴(yán)格分開(kāi)。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理工作服材質(zhì)與式樣選用防靜電、發(fā)塵量小、不脫落纖維、塵粒和光滑的材質(zhì)制成；不同潔凈級(jí)別及不同類(lèi)別的工作服顏色、式樣有明顯區(qū)別。無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

潔凈室內(nèi)衛(wèi)生潔具與生產(chǎn)的適應(yīng)性

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

潔凈室內(nèi)衛(wèi)生潔具與生產(chǎn)的適應(yīng)性

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

潔凈室內(nèi)容器清洗室與凈手設(shè)備

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

潔凈室內(nèi)地漏管理

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

潔凈室(區(qū))質(zhì)量控制項(xiàng)目

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

用空氣凈化技術(shù)控制滅菌產(chǎn)品的污染風(fēng)險(xiǎn)

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理空調(diào)凈化系統(tǒng)基本構(gòu)成（注意回風(fēng)與新風(fēng)）

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

重點(diǎn)關(guān)注－潔凈廠房壓差梯度控制

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

未來(lái)潔凈區(qū)域間壓差數(shù)值△P選取的趨勢(shì)

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

未來(lái)潔凈區(qū)域間壓差數(shù)值△P選取的趨勢(shì)(續(xù))

無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理

HVAC系統(tǒng)重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容和方法

向產(chǎn)品暴露和灌裝區(qū)域輸送的空氣是否經(jīng)過(guò)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾，并對(duì)其區(qū)域保持空氣正壓？輸送至關(guān)鍵控制點(diǎn)的空氣是單向流(層流)狀態(tài)嗎？單向空氣流的速度是多少？關(guān)鍵區(qū)域或過(guò)濾器表面風(fēng)速是否經(jīng)過(guò)測(cè)定？輸送至潔凈區(qū)域和無(wú)菌區(qū)域的空氣是如何過(guò)濾的？下列區(qū)域的空氣質(zhì)量等級(jí)是怎樣區(qū)分的：①產(chǎn)品暴露區(qū)域；②灌裝區(qū)域；③周?chē)鷧^(qū)域。高效空氣過(guò)濾器的效率及完整性經(jīng)過(guò)測(cè)定嗎？①多長(zhǎng)時(shí)間測(cè)定一次高效空氣過(guò)濾器的完整性？用什么方法測(cè)試？②多長(zhǎng)時(shí)間檢查一次高效空氣過(guò)濾器的空氣流速？潔凈室內(nèi)風(fēng)速的監(jiān)測(cè)結(jié)果是否符合相關(guān)SOP？濕