《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)題及參考答案

《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)題及參考答案

一、填空題

1.核酸分子中糖環(huán)與堿基之間為_JL型的糖昔鍵，核昔與核昔之間通過_磷

酸二酯鍵連接成多聚體。

2.DNA變性后，紫外吸收增加,粘度下降，浮力密度升高，生物活

性喪失.

3.DNA雙螺旋直徑為2nm，每隔3.4nm上升一圈，相當(dāng)于竺_個(gè)堿基對(duì)。

4.Z-DNA為左手螺旋。

5.hn-RNA是真核生物mRNA的前體。

6.用Sanger的鏈末端終止法測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)時(shí)鏈終止劑是雙脫氧核昔三磷酸。

7.維系DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力主要有氫鍵和堿基堆積力。

8.在堿性條件下，核糖核酸比脫氧核糖核酸更容易降解,其原因是因?yàn)椤?/p>

核糖核酸的每個(gè)核甘酸上-0H的緣故。

9.DNA復(fù)制時(shí)，連續(xù)合成的鏈稱為前導(dǎo)鏈；不連續(xù)合成的鏈稱為通叢鏈。

10.DNA合成的原料是四種脫氧核糖核苜三磷酸；復(fù)制中所需要的引物是

RNA。

11.DNA合成時(shí)，先由引物酶合成RNA引物，再由DNA聚合酶HI在其3,

端合成DNA鏈然后由DNA聚合酶工切除引物并填補(bǔ)空隙最后由DNA連接酶連

接成完整的鏈。

12.細(xì)菌的DNA連接酶以NAD為能量來源,動(dòng)物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶

以ATP為能源。

13.大腸桿菌RNA聚合酶的全酶由a2四'。組成,其核心酶的組成為。2口

14.RNA轉(zhuǎn)錄過程中識(shí)別轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子的是g因子，協(xié)助識(shí)別轉(zhuǎn)錄終止部位的是—

p_因子。

15.真核細(xì)胞mRNA合成后的成熟過程包括戴帽、加尾、剪接、_里

基化修飾.

16.遺傳信息由RNA傳遞到DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄，由逆轉(zhuǎn)錄酶催化。

17.反密碼子第1位堿基和密碼子第3堿基的配對(duì)允許有一定的擺動(dòng),稱為

變偶性。

18.在原核細(xì)胞翻譯起始時(shí)，小亞基16SrRNA的3'端與mRNA5'端的SD序列之

間互補(bǔ)配對(duì)，確定讀碼框架，fMet-tRNAf占據(jù)核糖體的P位點(diǎn)位置。

19.細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從N端到C端，而閱讀mRNA的方向是從

5端到3'端。

20.在形成氨酰-tRNA時(shí),由氨基酸的竣基與tRNA3'末端的羥基形成

酯鍵。為保證蛋白質(zhì)合成的正確性氨酰tRNA合成酶除了對(duì)特定氨基酸有很強(qiáng)的專一性之

外，還能將"錯(cuò)誤"氨基酸從氨?；?tRNA復(fù)合物上水解下來。

21.轉(zhuǎn)肽酶催化生成的化學(xué)鍵是肽鍵,該酶還具有酯酶活性。

22.肽鏈延伸包括：進(jìn)位、成肽、和移位。

23.翻譯延長(zhǎng)階段的進(jìn)位，是指氨酰-tRNA進(jìn)入A位。翻譯延長(zhǎng)階段的

轉(zhuǎn)位是指mRNA與核糖體做相對(duì)運(yùn)動(dòng)。

24.體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)形成正確的構(gòu)象需要的幫助，某些蛋白質(zhì)的折疊還

需要二硫鍵互換酶和脯氨酰肽酰異構(gòu)酶的催化。

25.正調(diào)控和負(fù)調(diào)控是基因表達(dá)的兩種最基本的調(diào)節(jié)形式，其中原核細(xì)胞常用負(fù)調(diào)

控模式，而真核細(xì)胞常用正調(diào)控模式。

26.在原核細(xì)胞中，由同一調(diào)控區(qū)控制的一群功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成一個(gè)基因表達(dá)調(diào)控

單位,稱為啟動(dòng)子,其調(diào)控區(qū)包括啟動(dòng)基因和操縱基因。

27.有些基因的表達(dá)較少受環(huán)境的影響，在一個(gè)生物體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，因此

被稱為管家基因；另有一些基因表達(dá)極易受環(huán)境的影響，在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，相應(yīng)

的基因被激活,基因表達(dá)產(chǎn)物增加，這種基因是可誘導(dǎo)的基因,相反，如果基因?qū)Νh(huán)境

信號(hào)應(yīng)答時(shí)被抑制，這種基因是可阻遏的基因。

28.在基因重組技術(shù)中，切割DNA用限制性核酸內(nèi)切酶,連接DNA用DNA連

接酶。

29.除噬菌體外，質(zhì)粒和病毒也是分子克隆的常用載體。

30.用動(dòng)物病毒DNA改造的基因載體有腺病毒載體和反轉(zhuǎn)錄病載體。用于植物

基因工程的常用載體是Ti質(zhì)粒.

31.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)化,將噬菌體DNA轉(zhuǎn)入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)導(dǎo).

32.Southern印跡法、Northern印跡法和Western印跡法是分別用于研究DNA、

RNA和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和鑒定的幾種常規(guī)技術(shù)。

二、選擇題

1.有關(guān)核酸的雜交（A,C,D）

A.DNA變性的方法常用加熱和堿變性

B.相同來源的核酸才能通過變性而雜交

C.不同來源的核酸復(fù)性時(shí)，若全部或部分堿基互補(bǔ)就可以雜交

D.雜交可以發(fā)生在DNA與DNA之間,RNA與DNA,RNA與RNA之間

E.把待測(cè)DNA標(biāo)記成探針進(jìn)行雜交

2.DNA的復(fù)性速度與以下哪些有關(guān)（E）

A.溫度B.分子內(nèi)的重復(fù)序列C.pHD.變性DNA的起始濃度E以上全部

3.某DNA分子中腺瞟聆的含量為15%,則胞嚓碇的含量應(yīng)為（D）

A.15%B.30%C.40%D.35%E.70%

4.DNA變性是指(D)

A.分子中磷酸二酯鍵斷裂B.多核昔酸鏈解聚

C.DNA分子由超螺旋一雙螺旋D.互補(bǔ)堿基之間氫鍵斷裂

E.DNA分子中堿基丟失

5.寡聚dT-纖維素柱層析用于(D)

A.從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNAB.從總核蛋白中分離DNP

C.除去雜蛋白D.從總RNA中純化mRNA

6.關(guān)于雙螺旋結(jié)構(gòu)學(xué)說的敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的(C)

A.由兩條反向平行的脫氧多核甘酸鏈組成

B.堿基在螺旋兩側(cè)，磷酸與脫氧核糖在外圍

C.兩條鏈間的堿基配對(duì)非常嚴(yán)格，A與T間形成三個(gè)氫鍵，G與C間形成兩個(gè)氫鍵

D.堿基對(duì)平面垂直于中心軸，堿基對(duì)之間的作用力為范德華力

E.螺旋每轉(zhuǎn)一圈包含10個(gè)堿基對(duì)

7.下列關(guān)于雙鏈DNA堿基含量關(guān)系，哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(B)

A.A=T,G=CB.A+T=G+CC.A+G=C+TD.A+C=G+T

8.下列是幾種DNA分子的堿基組成比例。哪一種的Tm值最高(A)

A.A+T=15%B,G+C=25%C.G+C=40%D.A+T=80%

9.DNA復(fù)制時(shí)，下列哪一種酶是不需要的(E)

A.DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶B.DNA連接酶C.拓樸異構(gòu)酶D.解鏈酶

E.限制性內(nèi)切酶

10.DNA復(fù)制中的引物是(C)

A.由DNA為模板合成的DNA片段B.由RNA為模板合成的RNA片段

C.由DNA為模板合成的RNA片段D.由RNA為模板合成的RNA片段

E.引物仍存在于復(fù)制完成的DNA鏈中

11.DNA復(fù)制時(shí)，子鏈的合成是(C)

A.一條鏈5'一3',另一條鏈3'一5'B.兩條鏈均為3'-5'

C.兩條鏈均為5'-3'D.兩條鏈均為連續(xù)合成E.兩條鏈均為不連續(xù)合成

12在細(xì)胞中DNA聚合酶I的作用主要是(C)

A.DNA復(fù)制B.E.coliDNA合成的起始C.切除RNA引物D.岡崎片段的連接

13.需要DNA連接酶參與的過程有(A)

A.DNA復(fù)制B.DNA體外重組C.DNA損傷的切除修復(fù)D.RNA逆轉(zhuǎn)錄

14.DNA損傷的光修復(fù)作用是一種高度專一的修復(fù)方式,它只作用于紫外線引起的(A)

A.喀咤二聚體B.瞟吟二聚體C.喀咤-璞吟二聚體D.為兩個(gè)單獨(dú)的喀咤堿基

15.真核細(xì)胞RNA聚合酶II催化合成的是(B)

A.18SRNAB.mRNAC.tRNAD.5SRNAE.rRNA

16.轉(zhuǎn)錄指下列哪一過程(B)

A.以RNA為模板合成DNAB.以DNA為模板合成RNA

C.以RNA為模板合成蛋白質(zhì)D.以DNA為模板合成DNA

17.hnRNA是(B)

A.存在于細(xì)胞核內(nèi)的tRNA前體B.存在于細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體

C.存在于細(xì)胞核內(nèi)的rRNA前體D.存在于細(xì)胞核內(nèi)的snRNA前體

18.基因有兩條鏈，與mRNA序列相同(T代替U)的鏈叫做(A)

A.有義鏈B.反義鏈C.重鏈D.cDNA鏈

19.下列關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄酶的敘述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(D)

A.它以RNA為模板指導(dǎo)DNA的合成B.它也可以DNA為模板指導(dǎo)DNA的合成

C.它具有RNaseH活性D.逆轉(zhuǎn)錄酶的作用不需要引物

20.多肽鏈的氨基酸序列取決于(D)

A.tRNAB.18SrRNAC.28SrRNAD.mRNAE.氨基酰-mRNA合成

21.密碼GGC的對(duì)應(yīng)反密碼子是(A)

A.GCCB.CCGC.CCCD.CGCE.GGC

22.關(guān)于密碼子，錯(cuò)誤的敘述是(C)

A.每一密碼子代表一種氨基酸B.某些密碼子不代表氨基酸

C.一種氨基酸只有一種密碼子D.甲硫氨酸只有一種密碼子

E.密碼子有種族特異性

23.一個(gè)N端為丙氨酸的20肽，其開放的閱讀框架至少應(yīng)該由多少個(gè)核甘酸殘基組成?(C)

A.60個(gè)B.63個(gè)C.66個(gè)D.57個(gè)E.69個(gè)

24.氨基酰-tRNA中，tRNA與氨基酸的結(jié)合鍵是(E)

A.鹽鍵B.磷酸二酯鍵C.肽鍵D.糖昔鍵E.酯鍵

25.原核生物和真核生物翻譯起始不同之處(B)

A.真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA與核糖體結(jié)合

B.真核生物帽子結(jié)合蛋白是翻譯起始因子之一

C.IF比elF種類多

D.原核生物和真核生物使用不同起始密碼

E.原核生物有TATAAT作為翻譯起始序列，真核生物則是TATA

26.關(guān)于核蛋白體轉(zhuǎn)肽酶，錯(cuò)誤的敘述是(C)

A.轉(zhuǎn)肽不需要GTPB.轉(zhuǎn)肽不需要ATPC.活性中心在小亞基

D.活性中心'在大亞基E.活性中心與rRNA有關(guān)

27?一個(gè)氨基酸參入多肽鏈，需要(B)

A.兩個(gè)ATP分子B.TATP分子，兩個(gè)GTP分子

C.一個(gè)ATP分子，一個(gè)GTP分子D.兩個(gè)ATP分子，一個(gè)GTP分子

E.兩個(gè)GTP分子

28.信號(hào)肽段的作用是(C)

A.指導(dǎo)DNA合成的啟動(dòng)B.指導(dǎo)多肽鏈糖基化C.引導(dǎo)多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

D.指導(dǎo)RNA合成的啟動(dòng)E.指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的啟動(dòng)

29多肽鏈合成后，其Ser可(B)

A.乙酰化B.糖基化C.磷酸化D,甲基化E.硫酸化

30.蛋白質(zhì)合成后加工不包括(D)

A.蛋白質(zhì)的磷酸化B.信號(hào)肽的切除C.蛋白質(zhì)的糖基化

D.酶的構(gòu)像變化E.蛋白質(zhì)的乙?；?/p>

31.以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物的蛋白質(zhì)合成（C）

A.氯霉素B.紅霉素C.放線菌酮D.噤畛霉素E.四環(huán)素

32.一個(gè)操縱子通常含有（B）

A.一個(gè)啟動(dòng)序列和一個(gè)編碼基因B.一個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因

C.數(shù)個(gè)啟動(dòng)序列和一個(gè)編碼基因D.數(shù)個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因

E兩個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)編碼基因

33.有關(guān)操縱子學(xué)說的論述，正確的是（B）

A.操縱子調(diào)控系統(tǒng)是真核生物基因調(diào)控的主要方式

B.操縱子調(diào)控系統(tǒng)是原核生物基因調(diào)控的主要方式

C.操縱子調(diào)控系統(tǒng)由調(diào)節(jié)基因、操縱基因、啟動(dòng)子和結(jié)構(gòu)基因組成

D.誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

E.誘導(dǎo)物與啟動(dòng)子結(jié)合而啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

34.轉(zhuǎn)錄因子是（C）

A.調(diào)節(jié)DNA結(jié)合活性的小分子代謝效應(yīng)物B.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄延伸速度的蛋白質(zhì)

C.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄起始速度的蛋白質(zhì)D.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分解速度的雷白質(zhì)

E.促進(jìn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工的蛋白質(zhì)

35.阻遏蛋白（阻抑蛋白）識(shí)別操縱子中的（C）

A.啟動(dòng)基因B.結(jié)構(gòu)基因C.操縱基因D.內(nèi)含子E.調(diào)節(jié)基因

36.在下列哪種情況下，乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高（A）

A.高乳糖，低葡萄糖B.高孚牖，高葡萄糖C.低乳糖，低葡萄糖

D.低乳糖，高葡萄糖E.不一定

37.順式作用元件是指（E）

A.基因的5'側(cè)翼序列B.基因的3'側(cè)翼序列C.基因的5'和3'側(cè)翼序列

D.基因的5'和3'側(cè)翼序列以外的序列E.具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的特異DNA序列

38.反式作用因子是指（E）

A.具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白B.具有抑制功能的調(diào)節(jié)蛋白

C.對(duì)自身基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白D.對(duì)另一基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白

E.對(duì)另一基因有調(diào)節(jié)功能的蛋白質(zhì)因子

39.下列關(guān)于限制性內(nèi)切酶的敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的（C）

A.它能識(shí)別DNA特定的堿基順序，并在特定的位點(diǎn)切斷DNA

B.切割點(diǎn)附近的堿基順序一般呈回文結(jié)構(gòu)

C.它能專一性降解經(jīng)甲基化修飾的DNA

D.是重組DNA的重要工具酶

E.主要從細(xì)菌中獲得

40.基因工程中，不常用到的酶是（C）

A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA聚合酶C.DNA解鏈酶D.DNA連接酶E.反轉(zhuǎn)錄

41下列哪項(xiàng)不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法？（D）

A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染B.電穿孔C.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染D.氯化鈣轉(zhuǎn)染E.顯微注射

42.重組體的篩選方法有（A）

A.抗藥標(biāo)志篩選B.標(biāo)記補(bǔ)救C.分子雜交D.免疫化學(xué)E.酶聯(lián)免疫檢測(cè)

43.CDNA是指（D）

A.在體內(nèi)合成的與病毒DNA或RNA互補(bǔ)的DNA

B.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補(bǔ)的DNA

C.在體外經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補(bǔ)的RNA

D.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補(bǔ)的DNA

E.在體內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補(bǔ)的RNA

44.建cDNA文庫時(shí)，首先需分離細(xì)胞的(C)

A.染色體DNAB.線粒體DNAC.總mRNAD.tRNAE.rRNA

三、判斷題

”)1.生物體內(nèi)，天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。

")2.RNA分子可以發(fā)生熱變性，并有增色效應(yīng)。

(x)3.水分子可以插入天然DNA分子雙螺旋空隙中。

(x)4.從結(jié)構(gòu)基因中的DNA序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。

")54是高鹽濃度可使DNA分子的熔點(diǎn)(Tm)升高。

(V)6.RNA的局部螺旋區(qū)中,兩條鏈之間的方向也是反向平行的。

(x)7.在細(xì)胞和真核細(xì)胞中都是由DNA聚合酶I切除RNA引物。

(x)8.逆轉(zhuǎn)錄酶催化RNA指導(dǎo)的DNA合成不需要RNA引物。

(x)9.RNA病毒不含DNA基因組，根據(jù)中心法則它必須先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，才能復(fù)制和增殖。

(x)10.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的RNA聚合酶都能夠直接識(shí)別啟動(dòng)子。

(x)ll.大腸桿菌染色體DNA由兩條鏈組成,其中一條鏈充當(dāng)模板鏈，另外一條鏈充當(dāng)編碼

鏈。

(x)12.由于遺傳密碼的通用性，用原核生物表達(dá)真核基因不存在技術(shù)障礙。表達(dá)出的蛋白

質(zhì)通常是有功能的。

(x)13.氨酰-tRNA合成酶可以通過合成反應(yīng)的逆反應(yīng)切除誤載的氨基酸。

(x)14.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸連接在tRNA末端核糖的3'-羥基上。

(x)15.在核糖體上形成肽鏈所需的能量，由水解GTP來提供。

(x)16.生物合成蛋白質(zhì)時(shí)A位的氨基酸轉(zhuǎn)移到P位，使P位的肽鏈延長(zhǎng)A位空載的-tRNA

隨后便脫落。

(x)17.蛋白質(zhì)能夠折疊成何種三維結(jié)構(gòu)，主要是由分子伴侶決定的。

”)18.高等真核生物的大部分DNA是不為蛋白質(zhì)編碼的。

”)19.大多數(shù)管家基因編碼低豐度的mRNA.

(x)20.乳糖可以誘導(dǎo)乳糖操縱子的表達(dá)，所以乳糖對(duì)乳糖操縱子的調(diào)控屬于正調(diào)控系統(tǒng)。

”)21.某些蛋白質(zhì)既可以作為阻遏蛋白又可以作為激活蛋白參與基因表達(dá)的調(diào)控。

”)22.準(zhǔn)備用原核生物表達(dá)真核基因時(shí)，最好通過cDNA獲取目的基因。

”)23.用原核生物表達(dá)真核生物的糖蛋白，其表達(dá)產(chǎn)物不會(huì)有正常的生物學(xué)功能。

(x)24.Ti質(zhì)?？梢噪S土壤農(nóng)桿菌進(jìn)入植物細(xì)胞。

(x)25.用人噬菌體作克隆載體時(shí)，外源DNA片斷越小，克隆的成功率越高。

”)26.基因克隆選擇的宿主細(xì)胞必須無限制性核酸內(nèi)切酶。

(x)27.采用藍(lán)白斑選擇法時(shí)，藍(lán)色菌落或噬菌斑是含有重組載體的克隆。

(V)28.若1個(gè)氨基酸有3個(gè)遺傳密碼,則這3個(gè)遺傳密碼的前兩個(gè)核苗酸通常是相同的。

四、名詞解釋(每題2分，共20分)

1.增色效應(yīng)(hyperchromiceffect);核酸從雙鏈變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時(shí)，在260nm

處的吸光度增加，稱"增色效應(yīng)"。

2.分子雜交(molecularhybridization);不同的DNA片段之間，DNA片段與RNA片

段之間，如果彼此間的核昔酸排列順序互補(bǔ)也可以復(fù)性，形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補(bǔ)堿

基配對(duì)而使不完全互補(bǔ)的兩條多核甘酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。

3.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是擴(kuò)增樣品中的DNA量和富集眾多

DNA分子中的一個(gè)特定的DNA序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中，使用與目的DNA序列互補(bǔ)的寡

核昔酸作為引物，進(jìn)行多輪的DNA合成。其中包括DNA變性，弓|物退火和在TapDNA聚合酶

催化下的DNA合成。

4.DNA的變性與復(fù)性(denaturationandrenaturationofDNA);DNA的變性是指DNA

雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成單鏈并不涉及共價(jià)鍵的斷裂。DNA的復(fù)性是指變性DNA在適當(dāng)條件

下，又可使兩條彼此分開的鏈重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)。

5.Tm;通常把加熱變性DNA使增色效應(yīng)達(dá)到最大增量一半時(shí)的的溫度稱為該DNA的熔

點(diǎn)或熔解溫度，用Tm表示。

6.內(nèi)含子與外顯子:內(nèi)含子是指結(jié)構(gòu)基因中存在于外顯子之間的非編碼序列，也是基因中不

表達(dá)的序列，屬插入序列。外顯子是指基因中編碼蛋白質(zhì)的序列。

7.半保留復(fù)制；DNA復(fù)制的一種方式。每條鏈都可用作合成互補(bǔ)鏈的模板，合成出兩分子

的雙鏈DNA,每個(gè)分子都是由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。

8.岡崎片段；相對(duì)比較短的DNA鏈（大約1000核昔酸殘基）,是在DNA的滯后鏈的不連

續(xù)合成期間生成的片段，這是ReijiOkazaki在DNA合成實(shí)驗(yàn)中添加放射性的脫氧核昔酸前體觀

察到的。

9.復(fù)制體；一種多蛋白復(fù)合體，包含DNA聚合酶，引發(fā)酶，解旋酶，單鏈結(jié)合蛋白和其它

輔助因子。復(fù)制體位于每個(gè)復(fù)制叉處，進(jìn)行染色體DNA復(fù)制的聚合反應(yīng)。

10.編碼鏈；雙鏈DNA中，不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的那一條DNA鏈，其核昔酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的

RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T\

11.內(nèi)含子；

在轉(zhuǎn)錄后的加工中，從最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物除去的內(nèi)部的核甘酸序列。術(shù)語內(nèi)含子也指DNA中

編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。

12.外顯子（exon）溉存在于最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，也存在于成熟的RNA分子中的核甘酸序

列。術(shù)語外顯子也指DNA中編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。

13.遺傳密碼；DNA編碼鏈或mRNA上的核甘酸,以3個(gè)為一組（三聯(lián)體）決定1個(gè)氨基

酸的種類，稱為三聯(lián)體密碼。mRNA的三聯(lián)體密碼是連續(xù)排列的，因此，mRNA的核苜酸序列

可以決定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。

14.擺動(dòng)假說；mRNA上的密碼子與tRNA上的反密碼子相互辯認(rèn)，大多數(shù)情況是遵從堿基

配對(duì)規(guī)律的。但也可出現(xiàn)不嚴(yán)格的配對(duì)，這種現(xiàn)象就是遺傳密碼的擺動(dòng)性，tRNA分子上有相當(dāng)

多的稀有堿基，例如次黃噂吟（inosinej）常出現(xiàn)于三聯(lián)體反密碼子的5'端第一位，它和mRNA

密碼子第3位的A、C、U都可以配對(duì)。

15.SD序列；位于mRNA分子AUG起始密碼子上游約8~13個(gè)核昔酸處，由4~6個(gè)核

昔酸組成的富含噤吟的序列，以-AG-GA-為核心。SD序列同16srRNA近3'-末端的序列互補(bǔ)，

在核糖體與mRNA的結(jié)合過程中起重要作用。

16.信號(hào)肽；是未成熟的分泌性蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)識(shí)別的特征性氨基酸序列。有堿

性N-末端區(qū)、疏水核心區(qū)及加工區(qū)三個(gè)區(qū)段。蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的一定部位后，信號(hào)肽即被切

除。

17.多聚核糖體;是由1個(gè)mRNA分子與一定數(shù)目的單個(gè)核糖體結(jié)合而成的串珠狀排列。每個(gè)

核糖體可以獨(dú)立完成一條肽鏈的合成，所以多個(gè)核糖體上可以同時(shí)進(jìn)行多條肽鏈的合成，可以加

速蛋白質(zhì)的合成速度，提高模板mRNA的利用率。

18.操縱子；原核生物的幾個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起,轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA,

然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過程的酶，或共同完成某種功

能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動(dòng)子，操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位，稱操縱子。

19.啟動(dòng)子；是RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件，包括至少一個(gè)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。

在真核基因中增強(qiáng)子和啟動(dòng)子常交錯(cuò)覆蓋或連續(xù)。有時(shí)，將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無法區(qū)分的啟動(dòng)子、

增強(qiáng)子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱啟動(dòng)子。

20.增強(qiáng)子；是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件，最早是在SV40病毒中發(fā)現(xiàn)的長(zhǎng)約

200bp的一段DNA,可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高100倍，其后在多種真核生物，甚至在原核生物

中都發(fā)現(xiàn)了增強(qiáng)子。增強(qiáng)子通常占100~200bp長(zhǎng)度，也和啟動(dòng)子一樣由若干組件構(gòu)成，基本核

心組件常為8~12bp,可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。

21.衰減子；在原核生物的Trp操縱子結(jié)構(gòu)中，第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因與啟動(dòng)子P之間有一個(gè)區(qū)域

含Trp密碼子，稱衰減子。當(dāng)環(huán)境中Trp濃度很高時(shí)，它可通過編碼并翻譯，使正在轉(zhuǎn)錄的mRNA

形成終止信號(hào)，從而終止Trp操縱子的表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄衰減實(shí)質(zhì)上是轉(zhuǎn)錄與一個(gè)前導(dǎo)肽翻譯過程

的偶聯(lián)，它是原核生物特有的一種基因調(diào)控機(jī)制。

22.反式作用因子；大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達(dá)后，通過與特異的順式作用元

件相互作用（DNA-蛋白質(zhì)相互作用）,或通過與基它調(diào)節(jié)因子的相互作用（蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互

作用），反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄，故稱反式作用蛋白或反式作用因子。

23.順式調(diào)控元件：指可影響自身基因表達(dá)活性的真核DNA序列。根據(jù)順式作用元件在基因

中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式，分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子及沉默子等。

24.降解物基因活化蛋白；也就是cAMP受體蛋白（cAMPreceptorprotein,CRP）,它與

cAMP的復(fù)合物可以促進(jìn)某些原核操縱子（如孚牖操縱子）的轉(zhuǎn)錄。

25.克隆技術(shù)；"克隆"作為名詞指相同的分子或細(xì)胞構(gòu)成的群體，或一個(gè)共同的祖先通過

無性繁殖所得到的群體，作為動(dòng)詞指獲取"克隆"的過程?？寺〖夹g(shù)特指獲取"克隆"的過程，

包括分子克隆，細(xì)胞克隆等技術(shù)。

26.限制性核酸內(nèi)切酶；就是識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA

的一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細(xì)菌體內(nèi)，與相伴存在的甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的

限制、修飾體系，限制外源DNA，保護(hù)自身DNA,對(duì)保持細(xì)菌遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定具有重要意義。

限制性核酸內(nèi)切酶分為三類，其中的口類酶能特異性在一定的核苗酸序列處切割雙鏈DNA,因

而在基因工程中得到廣泛的應(yīng)用。

27基因組DNA文庫；利用限制性核酸內(nèi)切酶將染色體DNA切割成一定大小的片段，將這

些片段分子與適當(dāng)?shù)目寺≥d體拼接成重組DNA分子，繼而轉(zhuǎn)入受體菌，使每個(gè)細(xì)菌內(nèi)都攜帶一

種重組DNA分子。不同細(xì)菌中的重組DNA分子可能包含不同的染色體DNA片段，這樣，只要

得到的轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的重組DNA分子種類足夠多，則全部轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的各種染色體片段

就代表了染色體的整個(gè)基因組。存在于轉(zhuǎn)化細(xì)菌內(nèi)，由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA片段

的集合稱基因組DNA文庫?；蚪MDNA文庫涵蓋了基因組的全部基因信息。

28.cDNA文庫以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)?shù)妮d體

（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA,并能繁殖擴(kuò)增，這

樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫?；蚪M含有的

基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá)，而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時(shí)期的細(xì)胞其基因

表達(dá)的種類和強(qiáng)度也不盡相同，所以cDNA文庫具有組織細(xì)胞特異性。cDNA文庫顯然比基因組

DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。另外，對(duì)真核細(xì)胞來

說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶

有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接，去除了內(nèi)含子的

cDNA。T殳來說，從cDNA文庫獲得的基因，因不含內(nèi)含子而片段較小，更適合于用作基因工

程的目的基因。由于原核生物不存在將hnRNA加工成mRNA的酶系統(tǒng)，若用原核生物表達(dá)真

核基因，則目的基因一定要通過cDNA獲取。

五、分析計(jì)算題

L簡(jiǎn)述B-DNA的結(jié)構(gòu)特征。

(1)兩條反向平行的多核昔酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞形成右手螺旋;

(2)噤吟和喀陡堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸和核糖在夕剛U，彼此通過3',5'磷酸二酯鍵相

連接，形成DNA分子的骨架。堿基平面和縱軸垂直，糖環(huán)的平面則和縱軸平行；

(3)雙螺旋的平均直徑為2nm,兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間相距的高度，堿基堆積距離為

0.34nm,兩個(gè)核甘酸之間的夾角為36度；

(4)兩條核昔酸鏈依靠彼此堿基之間形成的氫鍵相聯(lián)系而結(jié)合在一起；

(5)堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。

2.何謂Tm?影響Tm大小的因素有哪些？在實(shí)驗(yàn)中如何計(jì)算Tm值？

DNA的變性從開始解鏈到完全解鏈，是在一個(gè)相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成的，在這一范圍內(nèi)，

紫外線吸收值的增加量達(dá)到最大增加量的50%時(shí)的溫度為DNA的解鏈溫度(溶解溫度,melting

temperature,Tm\Tm值大小主要與GC含量有關(guān)，GC含量越高，Tm值越大；另外核酸分子

越大，Tm值也越大，溶液pH值大于11.3,核酸完全變性，小于5.0則核酸容易脫噤吟。降低

溶液的離子強(qiáng)度會(huì)使Tm值下降，尿素等變性劑也會(huì)使Tm值下降。在實(shí)驗(yàn)中，Tm值計(jì)算公式:

Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡轆酸：Tm=4(G+C)+2(A+TX

3.如果人體有IO1，個(gè)細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的DNA含量為6.4x109個(gè)堿基對(duì)。試計(jì)算人體DNA

的總長(zhǎng)度是多少？是太陽-地球之間距離（2.2x109公里）的多少倍？已知雙鏈DNA每1000個(gè)

核昔酸重lxl0-i8g,求人體的DNA的總質(zhì)量。

每個(gè)體細(xì)胞的DNA的總長(zhǎng)度為：6.4xl09x0.34nm=2.176xl09nm=2.176m,

3.人體內(nèi)所有體細(xì)胞的DNA的總長(zhǎng)度為：2.176mx10^=2.176xionkm

這個(gè)長(zhǎng)度與太陽-地球之間距離（2.2x109公里）相比為：2.176x1011/2.2x109=99倍，每

個(gè)核昔酸重lxlOi8g/iooo=io-2ig，所以，總DNA6.4x1023x10-21=6.4x102=640g

4.什么是DNA變性？DNA變性后理化性有何變化？

DNA雙鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過程成變性。引起DNA變性的因素很多，如高溫、超聲波、強(qiáng)酸、

強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑和某些化學(xué)試劑（如尿素，酰胺）等都能引起變性。DNA變性后的理化性質(zhì)變化

主要有：（1）天然DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無規(guī)則線團(tuán)，生物學(xué)活性喪失；（2）

天然的線型DNA分子直徑與長(zhǎng)度之比可達(dá)1:10,其水溶液具有很大的黏度。變性后，發(fā)生了

螺旋-線團(tuán)轉(zhuǎn)變，黏度顯著降低；（3）在氯化鈉溶液中進(jìn)行密度梯度離心，變性后的DNA浮力密

大大增加；（4）沉降系數(shù)S增加；（5）DNA變性后，堿基的有序堆積被破壞，堿基被暴露出來，

因此，紫外吸收值明顯增加，產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。（6）DNA分子具旋光性，旋光方向?yàn)橛倚?/p>

由于DNA分子的高度不對(duì)稱性，因此旋光性很強(qiáng)，其[a]=150。當(dāng)DNA分子變性時(shí)，比旋光值

就大大下降。

5.什么是核酸雜交？有何應(yīng)用價(jià)值？

熱變性后的DNA片段在進(jìn)行復(fù)性時(shí)，不同來源的變性核酸（DNA或RNA）只要有一定數(shù)

量的堿基互補(bǔ)（不必全部堿基互補(bǔ)），就可形成雜化的雙鏈結(jié)構(gòu)。此種使不完全互補(bǔ)的單鏈在復(fù)

性的條件下結(jié)合成雙鏈的技術(shù)稱為核酸雜交。用被標(biāo)記的已知堿基序列的單鏈核酸小分子作為探

針，可確定待檢測(cè)的DNA,RNA分子中是否有與探針同源的堿基序列。用此原理，制作探針，

再通過雜交，可用于細(xì)菌，病毒，腫瘤和分子病的診斷（基因診斷X也可用于基因定位，目的

基因篩選，基因表達(dá)狀況的分析等研究工作。

6.若使15N標(biāo)記的大腸桿菌在"N培養(yǎng)基中生長(zhǎng)三代提取DNA，并用平衡沉降法測(cè)定DNA

密度，其"N-DNA分子與MN-15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？

15N標(biāo)記的大腸桿菌利用培養(yǎng)基中的14N合成DNA,第一代DNA雙鏈都是14N-雜合

DNA分子。第二代分別是以第一代中的UN和15N鏈作為母鏈合成新的DNA,所以i4N-DNA

分子與14N-15N雜合DNA分子之比為1:1。第三代中的MN和母鏈的分子之比是3:1,

所以MN-DNA分子與MN-15N雜合DNA分子之比應(yīng)為3:10

7.真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？

真核生物的DNA聚合酶有小瓜丫、8、￡五種，均具有5'一3'聚合酶活性，DNA聚合酶

丫、講口￡有3'-5'外切酶活性,DNA聚合酶a和口無外切酶活性。DNA聚合酶a用于合成引物，

DNA聚合酶6用于合成細(xì)胞核DNA,DNA聚合酶p和￡主要起修復(fù)作用，DNA聚合酶丫用于線

粒體DNA的合成。

8.真核細(xì)胞中有幾種RNA聚合酶？它們的主要功能是什么？

真核生物的RNA聚合酶，按照對(duì)a-鵝膏蕈堿的敏感性不同進(jìn)行分類：RNA聚合酶I基本不

受a-鵝膏蕈堿的抑制，在大于10-3moi/L時(shí)才有輕微的抑制。RNA聚合酶口對(duì)a-鵝膏蕈堿最為

敏感，在l(Hmol/L以下就會(huì)被抑制。RNA聚合酶m對(duì)a-鵝膏蕈堿的敏感性介于聚合酶I和聚

合酶n之間，在10-5mol/L到lCHmol/L才會(huì)有抑制現(xiàn)象。RNA聚合酶I存在于核仁中，其功

能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA0RNA聚合酶口存在于核質(zhì)中，其功能是合成

mRNA、snRNA.RNA聚合酶m也存在于核質(zhì)中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及轉(zhuǎn)錄Alu

序列。

9.真核生物三類啟動(dòng)子各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？

真核生物三類啟動(dòng)子分別由RNA聚合酶I、II、III進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。類別I啟動(dòng)子包括核心啟動(dòng)子

和上游控制元件兩部分，需要UBF1和SL1因子參與作用。類別II啟動(dòng)子包括四類控制元件：基

本啟動(dòng)子、起始子、上游元件和應(yīng)答元件。識(shí)別這些元件的反式作用因子由通用轉(zhuǎn)錄因子、上游

轉(zhuǎn)錄因子和可誘導(dǎo)的因子。類別III啟動(dòng)子有兩類：上游啟動(dòng)子和基因內(nèi)啟動(dòng)子，分別由裝配因子

和起始因子促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成和轉(zhuǎn)錄。

10.論述遺傳密碼的特點(diǎn)。

（1）遺傳密碼為三聯(lián)體：模板從mRNA5'端的起始密碼子開始，到3'端的終止密碼稱為開

放讀碼框架。在框架內(nèi)每3個(gè)堿基組成1個(gè)密碼子，決定1個(gè)氨基酸。（2）遺傳密碼的種類：遺

傳密碼共64個(gè)，其中61個(gè)密碼子分別代表各種氨基酸。3個(gè)為肽鏈合成的終止信號(hào)。位于5,

端的AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，還是肽鏈合成的起始信號(hào)。（3）遺傳密碼的連續(xù)性:對(duì)mRNA

分子上密碼子的閱讀方法叫讀碼。正確讀碼是每3個(gè)相鄰堿基一組，不間斷地連續(xù)讀下去，直到

出現(xiàn)終止密碼為止。mRNA上堿基的插入和缺失，可導(dǎo)致框移突變。（4）遺傳密碼的簡(jiǎn)并性：有

61個(gè)密碼子代表20種氨基酸，每個(gè)密碼子只代表一種氨基酸，而多數(shù)氨基酸都有2~4個(gè)密碼

子，這種由幾個(gè)密碼子編碼同一氨基酸的現(xiàn)象稱為簡(jiǎn)并性。從密碼表上可看出密碼子的第3位堿

基通常是簡(jiǎn)并的。（5）遺傳密碼的擺動(dòng)性：指密碼子與反密碼子配對(duì)不遵從堿基配對(duì)規(guī)律，此不

嚴(yán)格的配對(duì)關(guān)系稱為擺動(dòng)性。如丙氨酰-tRNA反密碼子的第1位堿基I可以與密碼子第3位的A、

C或U配對(duì)。遺傳密碼的擺動(dòng)性使一種tRNA可以識(shí)別幾種代表同一種氨基酸的密碼子。（6）遺

傳密碼的通用性：從細(xì)菌到人的遺傳密碼都市通用的，但近年發(fā)現(xiàn)哺乳類動(dòng)物線粒體的蛋白質(zhì)合

成體系中有個(gè)別例外。如UAG不代表終止密碼子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表

蘇氨酸。（7）遺傳密碼的防錯(cuò)系統(tǒng)：由于遺傳密碼的簡(jiǎn)并性，有4個(gè)密碼的氨基酸，其第三位的

堿基被替換，仍編碼同一種氨基酸，從遺傳密碼表可以看出，只要遺傳密碼的第二位是U,則第

一位和第三位不論怎么變化，其編碼的氨基酸總是疏水性的，如第二位是C,則其編碼的氨基酸

是非極性的或極性不帶電荷的，若第二位為A或G,則編碼的氨基酸R基是親水性的，第一位是

A或C,第二位是A或G,則編碼的氨基酸R基是堿性的，若前兩位是AG則編碼的氨基酸R基

是酸性的。這些規(guī)律使某些核甘酸的替換可以不引起肽鏈中氨基酸的變化，或被替換的氨基酸理

化性質(zhì)相似。這便是密碼的防錯(cuò)系統(tǒng)。

11.如果mRNA上的閱讀框已被確定，它將只編碼一種多肽的氨基酸順序。從一蛋白質(zhì)的已

知氨基酸順序，是否能確定唯一的一種mRNA的核甘酸序列？為什么？

由于1個(gè)密碼子只能編碼一種氨基酸，在mRNA的開放閱讀框確定后，用遺傳密碼可以推

出其相應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列。由于mRNA是由DNA轉(zhuǎn)錄而來的，如果基因(DNA)編碼區(qū)

的序列已知，也可由此推出相應(yīng)表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列。但是，由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18

種氨基酸均有一種以上的密碼子，由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推斷相應(yīng)mRNA的核昔酸序列時(shí)，我

們會(huì)面臨多種選擇。比如，由7個(gè)氨基酸的序列推測(cè)其可能的mRNA編碼區(qū)序列，若其中有5

個(gè)氨基酸有2個(gè)密碼，則能夠與其相對(duì)應(yīng)的核甘酸序列會(huì)有25種，即有32種。

12.如果E.Coli染色體DNA的75%可用來編碼蛋白質(zhì)，假定蛋白質(zhì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為

60000,以三個(gè)堿基編碼一個(gè)氨基酸計(jì)算,(1)若該染色體DNA大約能編碼2000種蛋白質(zhì)，

求該染色體DNA的長(zhǎng)度？(2)該染色體DNA的相對(duì)分子質(zhì)量大約是多少？(氨基酸殘基的平

均相對(duì)分子質(zhì)量是120，核甘酸對(duì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量是6401

(1)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為60000,氨基酸殘基的平均相對(duì)分子質(zhì)量為120,

則蛋白質(zhì)的平均氨基酸殘基的個(gè)數(shù)為60000/120=500個(gè)編碼2000種蛋白至少需要2000x500

x3個(gè)密碼子，而DNA堿基的75%用來編碼這2000個(gè)蛋白，則該染色體DNA的長(zhǎng)度為:2000

x500x3/75%=4000000bpo若該DNA為B-DNA,每個(gè)bp使螺旋軸延伸0.34nm，則其長(zhǎng)度

應(yīng)為i).34x4000000=1360000nm(2該染色體DNA的相對(duì)分子質(zhì)量大約是640x4000000=

2560000000=2.56xl09Da。

13.原核生物與真核生物翻譯起始階段有何異同？

相同之處：（1）都需生成翻譯起始復(fù)合物；（2）都需多種起始因子參加；（3）翻譯起始的第

一步都需核糖體的大、小亞基先分開；（4）都需要mRNA和氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的小亞基

上（5）mRNA在小亞基上就位都需一定的結(jié)構(gòu)成分協(xié)助。（6亞基結(jié)合mRNA和起始者tRNA

后，才能與大亞基結(jié)合。（7）都需要消耗能量。

不同之處：（1）真核生物核糖體是80S（40S+60S）;eIF種類多（10多種）;起始氨酰-tRNA

是met-tRNA（不需甲酰化），mRNA沒有SD序列；mRNA在小亞基上就位需5'端帽子結(jié)構(gòu)和

帽結(jié)合蛋白以及eIF2;mRNA先于met-tRNA結(jié)合到小亞基上。（2）原核生物核糖體是70S

（30S+50S）;IF種類少（3種）；起始氨酰-tRNA是fmet-tRNA（需甲?；恍鑃D序列與

16S4RNA配對(duì)結(jié)合，rps-1辯認(rèn)識(shí)別序列；小亞基與起始氨酰-tRNA結(jié)合后，才與mRNA結(jié)

合。

14.簡(jiǎn)述信號(hào)肽假說的基本內(nèi)容。

蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送原理，有幾種不同的學(xué)說，信號(hào)肽假說是目前被普遍接受的學(xué)說之

-?分泌性蛋白質(zhì)的初級(jí)產(chǎn)物N-端多有信號(hào)肽結(jié)構(gòu)，信號(hào)肽一旦合成（蛋白質(zhì)合成未終止），即

被胞漿的信號(hào)肽識(shí)別蛋白（SRP）結(jié)合，SRP與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的內(nèi)側(cè)面的受體即對(duì)接蛋白（DP）結(jié)合,

組成一個(gè)輸送系統(tǒng)，促使膜通道開放，信號(hào)肽帶動(dòng)合成中的蛋白質(zhì)沿通道穿過膜，信號(hào)肽在沿通

道折回時(shí)被膜上的信號(hào)肽酶切除，蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體經(jīng)進(jìn)一步修飾（如糖基化）后，即

可被分選到細(xì)胞的不同部位。

15.肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？

蛋白質(zhì)合成后的加工修飾內(nèi)容有:（1）肽鏈的剪切：如切除N端的Met,切除信號(hào)肽，切

除蛋白質(zhì)前體中的特定肽段。（2）氨基酸側(cè)鏈的修飾，如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3）二

硫鍵的形成。（4）與輔基的結(jié)合。

16.簡(jiǎn)述操縱子的基本結(jié)構(gòu)。

操縱子的調(diào)控區(qū)有一個(gè)操縱序列，一個(gè)啟動(dòng)序列及一個(gè)CAP位點(diǎn)，調(diào)控區(qū)下游有幾個(gè)結(jié)構(gòu)基

因，還有一個(gè)調(diào)節(jié)基因編碼阻遏蛋白，阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合，使操縱子受阻遏而處于關(guān)閉狀

態(tài)。若cAMP與CAP結(jié)合，形成的復(fù)合物與CAP位點(diǎn)結(jié)合，可增大操縱子的轉(zhuǎn)錄活性。阻遏

蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)和CAP的正性調(diào)節(jié)共同調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)操縱子機(jī)制在原核基因表達(dá)調(diào)控中

具有較善遍的意義，因其多是幾個(gè)功能相關(guān)基因串聯(lián)于同一操縱子上，故在同一啟動(dòng)序列控制下,

可轉(zhuǎn)錄出能為多種蛋白質(zhì)編碼的mRNA,即多順反子mRNA。

17.舉例說明基因表達(dá)的誘導(dǎo)與阻遏，正調(diào)控與負(fù)調(diào)控。

在特定的環(huán)境信號(hào)刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，則這種基因是可誘導(dǎo)的。

可誘導(dǎo)基因在特定的環(huán)境中表達(dá)增強(qiáng)的過程稱為誘導(dǎo)。例如有DNA損傷時(shí)，修復(fù)酶基因就會(huì)在

細(xì)菌內(nèi)被誘導(dǎo)激活，使修復(fù)酶的活性增加。相反，如果基因?qū)Νh(huán)境信號(hào)應(yīng)答時(shí)被抑制則這種基因

是可阻遏的，可阻遏基因表達(dá)產(chǎn)物水平降低的過程稱為阻遏，例如，當(dāng)培養(yǎng)液中色氨酸供應(yīng)充分

時(shí)，在細(xì)菌內(nèi)編碼色氨酸合成相關(guān)酶的基因表達(dá)會(huì)被抑制。如果某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時(shí)

是表達(dá)的，加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性便被關(guān)閉，這樣的控制為負(fù)調(diào)控。例如，乳糖操縱

子。相反，若某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時(shí)是關(guān)閉的，加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因活性就被開啟,

這種控制稱為正調(diào)控。例如代謝物阻遏。

18.概述原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。

原核基因表達(dá)調(diào)控與真核存在很多共同之處，但因原核生物沒有細(xì)胞核和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其基

因組結(jié)構(gòu)要比真核生物簡(jiǎn)單，基因表達(dá)的調(diào)控因此而比較簡(jiǎn)單。雖然原核基因的表達(dá)也受轉(zhuǎn)錄起

始、轉(zhuǎn)錄終止、翻譯調(diào)控及RNA、蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性等多級(jí)調(diào)控，但其表達(dá)開、關(guān)的關(guān)鍵機(jī)制主要

發(fā)生在轉(zhuǎn)錄起始。其特點(diǎn)包括以下3方面：（1）。因子決定RNA聚合酶的識(shí)別特異性：原核生物

只有一種RNA聚合酶，核心酶催化轉(zhuǎn)錄的延長(zhǎng),。亞基識(shí)別特異啟動(dòng)序列，即不同的。因子協(xié)助

啟動(dòng)不同基因的轉(zhuǎn)錄。（2）操縱子模型的普遍性：除個(gè)別基因外，原核生物絕大數(shù)基因按功能相

關(guān)性成簇地連續(xù)排列在染色體上，共同觸一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位即操縱子，如乳糖操縱子等。一個(gè)操縱

子含一個(gè)啟動(dòng)序列及數(shù)個(gè)編碼基因。在同一個(gè)啟動(dòng)序列控制下，轉(zhuǎn)錄出多順反子mRNA。（3）阻

遏蛋白與阻遏機(jī)制的普遍性：在很多原核操縱子系統(tǒng)，特異的阻遏蛋白是控制啟動(dòng)序列活性的重

要因素。當(dāng)阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合或解離時(shí)，結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄被阻遏或去阻遏。

19.概述真核生物基因組的特點(diǎn)。

（1）基因組結(jié)構(gòu)龐大：哺乳動(dòng)物基因組DNA由約3x109bp的核甘酸組成。大約有3萬個(gè)左

右的基因，90%以上的DNA不為蛋白質(zhì)編碼。真核細(xì)胞DNA與組蛋白結(jié)合形成復(fù)雜的染色質(zhì)

結(jié)構(gòu)，基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制更加復(fù)雜。（2）單順反子：真核基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子，即一個(gè)編碼

基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈。許多蛋白質(zhì)由幾條不同的多肽鏈組成,

因此存在多個(gè)基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。（3）重復(fù)序列：重復(fù)序列在真核DNA中普遍存在，重復(fù)序列長(zhǎng)

短不一，短的在10個(gè)核甘酸以下，長(zhǎng)的達(dá)數(shù)百，乃至上千個(gè)核甘酸。據(jù)重復(fù)頻率不同分為高度

重復(fù)序列、中度重復(fù)序列及單拷貝序列。（4）基因的不連續(xù)性：結(jié)構(gòu)基因的兩側(cè)有不被轉(zhuǎn)錄的非

編碼序列，往往是基因表達(dá)的調(diào)控區(qū)。在編碼基因內(nèi)部有一些不為蛋白質(zhì)編碼的間隔序列，稱內(nèi)

含子，而編碼序列稱外顯子，因此真核基因是不連續(xù)的。

20.概述真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。

同原核生物一樣，真核基因表達(dá)調(diào)控的最基本環(huán)節(jié)也是轉(zhuǎn)錄起始，而且某些機(jī)制是相同的，

但也存在明顯差別：（1）RNA聚合酶：真核有3種RNA聚合酶，分別負(fù)責(zé)3種RNA轉(zhuǎn)錄。（2）

活性染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化：當(dāng)基因被激活時(shí)，可觀察到染色體相應(yīng)區(qū)域發(fā)生結(jié)構(gòu)和性質(zhì)變化。包括對(duì)

核酸酶敏感,DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化，DNA堿基修飾變化和組蛋白變化。（3）正調(diào)節(jié)占主導(dǎo)地位：

真核RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的親和力極小或根本沒有實(shí)質(zhì)性的親和力，二者的結(jié)合必須依賴一種

或多種激活蛋白。盡管發(fā)現(xiàn)少量基因存在負(fù)性順式作用元件，但普遍存在的是正性調(diào)節(jié)機(jī)制。（4）

轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進(jìn)行：真核細(xì)胞有胞核及胞質(zhì)等區(qū)間分布，轉(zhuǎn)錄與翻譯在不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中進(jìn)行。

（5）轉(zhuǎn)錄后加工：真核基因的內(nèi)含子和外顯子均被轉(zhuǎn)錄，內(nèi)含子在轉(zhuǎn)錄后要被剪接去除，使外

顯子連接在一起，形成成熟的mRNA。不同剪接方式可形成不同的mRNA,翻譯出不同的多肽

鏈。因此，轉(zhuǎn)錄后加工是真核基因表達(dá)調(diào)控的另一重要環(huán)節(jié)。

21.簡(jiǎn)答真核生物基因表達(dá)的調(diào)控方式。

（1）DNA水平的調(diào)控：a.基因丟失，即DNA片段或部分染色體的丟失，如蛔蟲胚胎發(fā)育

過程有27%的DNA丟失。b.基因擴(kuò)增，即特定基因在特定階段的選擇性擴(kuò)增，如非洲爪蟾卵母

細(xì)胞中的rDNA是體細(xì)胞的4000倍。c.DNA序列的重排，如哺乳動(dòng)物免疫球蛋白各編碼區(qū)的

連接。d.染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化，通過異染色質(zhì)關(guān)閉某些基因的表達(dá)。e.DNA的修飾，如DNA的甲

基化關(guān)閉某些基因的活性。（2）轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控。a.染色質(zhì)的活化，如核小體結(jié)構(gòu)的解開、非組

蛋白的作用等。b.轉(zhuǎn)錄因子的作用，轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶及特定