DB34∕T 3399-2019 水產(chǎn)動(dòng)物病原菌藥敏試驗(yàn)和耐藥性檢測技術(shù)規(guī)范

DB34DB34/T3399—2019水產(chǎn)動(dòng)物病原菌藥敏試驗(yàn)和耐藥性檢測技術(shù)規(guī)范StandardforDrugsensitivitytestanddrugresistancetestofaquaticpathogenicbacteria2019-11-04發(fā)布2019-12-04實(shí)施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)GB/T27623.1漁用抗菌藥物藥效試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范第1部分:常量肉湯WS/T639抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的技2全身系統(tǒng)性感染病例，體表經(jīng)75％酒精消毒后，剪除腹壁（魚類、兩棲類、爬3根據(jù)細(xì)菌鑒定結(jié)果，選擇相應(yīng)固體培養(yǎng)基（見附錄D），固體培養(yǎng)基厚度為4mm±0.測試菌株包括臨床分離病原菌和質(zhì)控參考菌株（大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌滅菌棉試子蘸取上述菌懸液均勻涂布在瓊脂表面。在15min之內(nèi)，將藥敏紙片（見附培養(yǎng)結(jié)束，取出培養(yǎng)皿，放在眼前30c抗菌藥物批號、效價(jià)、有效期和存儲(chǔ)條件，必須明確，并按要求存放在4～8℃的干燥器內(nèi)。給96孔微量培養(yǎng)板做好標(biāo)記。第A～H行，每兩行為一個(gè)重復(fù)。第1～10列為測試孔，加4平板計(jì)數(shù)。當(dāng)7.5中陽性對照孔計(jì)數(shù)結(jié)果為5試劑和培養(yǎng)基A.3水解酪蛋白（Meller-Hinton）肉湯A.6Middle-brook-ADH-enrichment-addedMiddlebro蛋白胨，0.001gZnSO4，0.001gCuSO4，0.5gL-谷氨酸鈉，0.04g檸檬酸鐵銨，0.001g鹽酸10min高壓蒸汽滅菌。冷卻到50～55℃時(shí)，加入過濾除菌的OADC添加劑100mL，混勻；然6革蘭氏陰性菌15℃~25℃弧菌屬（Vibrio）15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃革蘭氏陽性菌諾卡氏菌屬（Nocardia）7CCCCEEEEF注：A，藥敏紙片避光低溫（一般在-20℃)保存；-20℃存放的藥敏紙片用8革蘭氏陰性菌15℃~25℃弧菌屬（Vibrio）15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃15℃~25℃脂革蘭氏陽性菌諾卡氏菌屬（Nocardia）注：a,微量肉湯稀釋法使用的肉湯培養(yǎng)基與紙片擴(kuò)散法使用的瓊脂培養(yǎng)基9--8521458882844------8521458882844----24