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第2章細(xì)胞工程細(xì)胞工程的發(fā)展歷程1.1960年,科金用真菌的___________分解番茄根的細(xì)胞壁,成功獲得了原生質(zhì)體。(P32)2.1971年,卡爾森誘導(dǎo)煙草種間___________融合,獲得了第一株體細(xì)胞種間雜種植株。(P32)3.1974年,土壤農(nóng)桿菌的___質(zhì)粒被發(fā)現(xiàn)。之后,該質(zhì)粒應(yīng)用于植物分子生物學(xué)領(lǐng)域,促進(jìn)了植物細(xì)胞工程與分子生物學(xué)技術(shù)緊密結(jié)合。(P32)4.1951年,張明覺等發(fā)現(xiàn)了______________________現(xiàn)象。(P33)5.1958年,格登用非洲爪蟾進(jìn)行___________實(shí)驗(yàn),成功培育出性成熟個(gè)體。同一時(shí)期,我國(guó)科學(xué)家童第周等開展了魚類細(xì)胞核移植工作。(P33)6.1975年,米爾斯坦和科勒等創(chuàng)立了___________技術(shù)。(P33)7.2017年,我國(guó)科學(xué)家首次培育了______________________。(P33)8.細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過_________、_________或_________水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品的一門綜合性的生物工程。(P31)第1節(jié)植物細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1.________________________________________________________________________,即細(xì)胞具有全能性。但是,在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過程中,并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性,比如,芽原基的細(xì)胞只能發(fā)育為芽,葉原基的細(xì)胞只能發(fā)育為葉。這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的_____________________。(P34)2.植物組織培養(yǎng)是指_____________________________________________________________________________________________________(如圖)。(P35)植物組織培養(yǎng)流程圖3.植物細(xì)胞一般具有全能性。在一定的______________等條件的誘導(dǎo)下,已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過_______,即_______________________________________________________________,這稱為愈傷組織。愈傷組織能___________________________________,該過程稱為_______。植物激素中_______和______________是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素,它們的濃度、比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。(P35“探究·實(shí)踐”)4.誘導(dǎo)愈傷組織期間一般_______光照,在后續(xù)的培養(yǎng)過程中,每日需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照。(P36“探究·實(shí)踐”)5.在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前,必須先利用______________和______________去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。(P37)6.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法基本可以分為兩大類——物理法和化學(xué)法。物理法包括______________、_______等;化學(xué)法包括______________融合法、______________融合法等,融合后得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過誘導(dǎo)可形成愈傷組織,并可進(jìn)一步發(fā)育成完整的雜種植株(如圖)。(P37~38)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖7.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在打破______隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物新品種等方面展示出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。(P38)二、植物細(xì)胞工程的應(yīng)用1.用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),被人們形象地稱為植物的____________技術(shù),也叫作微型繁殖技術(shù)。它不僅可以高效、快速地實(shí)現(xiàn)種苗的_____繁殖,還可以______________________________。(P39)2.單倍體育種可以先通過__________培養(yǎng)獲得__________,然后經(jīng)過_______________,當(dāng)年就能培育出遺傳性狀__________的純合二倍體植株,這極大地_______________,節(jié)約了______________________。(P40)3.植物細(xì)胞培養(yǎng)是指____________________________________________________________。(P41)第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指_______________________________________________________________________________________________________________________。(P43)2.一般來(lái)說,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件。(P43)在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),必須保證環(huán)境是___________的,即需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行_____處理以及在_____環(huán)境下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液還需要_____更換,以便清除________,防止________________________________________________。(P44)4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有________________。O2是________________________,CO2的主要作用是________________________________。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有________________________的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(P44)5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上,這種現(xiàn)象稱為________________。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因________________、________________和________________等因素而分裂受阻。貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖時(shí),除受上述因素的影響外,還會(huì)發(fā)生________________現(xiàn)象,即________________________________________________________________________。(P44)6.人們通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng),即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為_____培養(yǎng),將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為_____培養(yǎng)。在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集;貼壁細(xì)胞需要重新用__________等處理,使之分散成單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集。之后,將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,分瓶培養(yǎng)(如圖)。(P45)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖7.在一定條件下,干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中,包括_____干細(xì)胞和_____干細(xì)胞等。(P46)8.2006年,科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞,獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,將它稱為__________干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞),并用iPS細(xì)胞治療了小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血。(P46)9.科學(xué)家已嘗試采用多種方法來(lái)制備iPS細(xì)胞,包括借助載體將__________導(dǎo)入細(xì)胞中,直接將__________導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由________細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的,后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的________、________等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。(P46“相關(guān)信息”)iPS細(xì)胞用于治療人類疾病示意圖抽默3:細(xì)胞工程:指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品的一門綜合性的生物工程。2.植物組織培養(yǎng):是指將的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。3.全能性:細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生或分化成其他的潛能。4.脫分化:在一定的和營(yíng)養(yǎng)條件的誘導(dǎo)下,使已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞的過程。5.動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為培養(yǎng),將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為培養(yǎng)。6.在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過程中,并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性,這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)。7.在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前,必須先利用酶和酶去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。8.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法基本可以分為兩大類——物理法和化學(xué)法。物理法包括、等;化學(xué)法包括融合法、高Ca2+—高pH融合法等,融合后得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過誘導(dǎo)可形成愈傷組織,并可進(jìn)一步發(fā)育成完整的雜種植株。9.在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),必須保證環(huán)境是的,即需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。10.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單抗隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(cellfusiontechnique)就是________________________________________。融合后形成的雜交細(xì)胞具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的________________。(P48)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有_____融合法、_____融合法和_______________法等。(P48)3.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使_____雜交成為可能。(P48)4.制備單克隆抗體需要的技術(shù)手段:_______________和_______________。制備單克隆抗體的原理:_______________和__________。(P49)5.單克隆抗體制備過程示意圖。(P49)米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過程的示意圖6.第一次篩選的目的是_______________,方法是______________________________。經(jīng)過______后未融合的細(xì)胞或者融合后具有同種核型的細(xì)胞都會(huì)______,只有融合的____________才能生長(zhǎng)。(P49)7.第二次篩選的目的是__________________,方法是____________。(P49)8.抗體——藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的____________結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。(P50“思考·討論”)三、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是__________________________________________________________________________________________________________。(P52)2.減數(shù)分裂Ⅱ中期(MⅡ期)卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是____________復(fù)合物。文中所說的“去核”是去除該復(fù)合物。(P52“相關(guān)信息”)3.哺乳動(dòng)物核移植可以分為_____細(xì)胞核移植和_____細(xì)胞核移植。由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度_____,表現(xiàn)全能性相對(duì)_____,而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度_____,表現(xiàn)全能性__________,因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯_____胚胎細(xì)胞核移植。(P52)4.下面以克隆高產(chǎn)奶牛為例,來(lái)說明體細(xì)胞核移植的大致過程(如圖)。(P53)5.目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是__________。也有人采用__________、______________和________________等方法。這些方法是在_____________________________的情況下去核或使其中的____變性。(P54“相關(guān)信息”)抽默4:1.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有法、電融合法和法等。2.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限,使雜交成為可能。3.制備單克隆抗體需要的技術(shù)手段:動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。制備單克隆抗體的原理:和細(xì)胞增殖。4.一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體,B淋巴細(xì)胞在體外(填“能”或“不能”)無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能;B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的細(xì)胞,既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。5.單克隆抗體的制備過程:6.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):_______________________________________________________________________________________________________________________________7.制備單克隆抗體過程中,若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合后產(chǎn)生的細(xì)胞有3種類型,出現(xiàn)不同種類型是因?yàn)椤?.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是________________________________________________________________________________________________________________________。9.體細(xì)胞核移植過程核移植技術(shù)中必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是________________________________________________________________________________________________________________________。第3節(jié)胚胎工程一、胚胎工程的理論基礎(chǔ)1.胚胎工程是指____________________________________________________________________________________________________________________。胚胎工程技術(shù)包括__________、__________和__________等。(P56)2.在自然條件下,哺乳動(dòng)物的受精在__________內(nèi)完成。(P56)3.掌握哺乳動(dòng)物受精的過程(下圖)(P57)4.在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,卵細(xì)胞膜外的________會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng),阻止______________________。然后,精子入卵。精子入卵后,________也會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng),________________________________。(P57)5.精子入卵后,尾部______,原有的____________并形成一個(gè)新的核膜,最后形成一個(gè)比原來(lái)精子的核還大的核,叫作____________。與此同時(shí),精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ,排出____________后,形成雌原核。(P57)6.多數(shù)哺乳動(dòng)物的第一極體不進(jìn)行減數(shù)分裂Ⅱ,因而不會(huì)形成兩個(gè)第二極體。在實(shí)際胚胎工程操作中,常以觀察到____________或者_(dá)___________作為受精的標(biāo)志。(P58“相關(guān)信息”)7.聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來(lái)發(fā)育成胎兒的____________;而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞,稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞,它們將來(lái)發(fā)育成____________。(P58)二、胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用1.哺乳動(dòng)物的體外受精技術(shù)主要包括__________________、____________和______等步驟。(P60)2.采集到的卵母細(xì)胞和精子,要分別對(duì)它們進(jìn)行____________和___________,然后才能用于體外受精。(P60)3.胚胎移植是指__________________________________________________________________________________________________________________。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“______”,接受胚胎的個(gè)體叫“______”。通過任何一項(xiàng)技術(shù)(如轉(zhuǎn)基因、核移植和體外受精等)獲得的胚胎,都必須移植給受體才能獲得后代。(P61)4.以牛的胚胎移植為例,胚胎移植主要包括________________________,______________________________,______________________________,____________,以及__________________等步驟(下圖)。(P61)5.胚胎移植實(shí)質(zhì)上是______________________________________________________。(P62“思考·討論”)6.進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是__________________________________________。(62)7.超數(shù)排卵是指應(yīng)用__________________,誘發(fā)_______________________________________。(P62“相關(guān)信息”)8.胚胎分割所需要的主要儀器設(shè)備為______________和______________。在進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的______________,將它移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中,然后在顯微鏡下用______________分割。在分割囊胚階段的胚胎時(shí),要注意將______________均等分割。(P62)9.牛胚胎性別鑒定和分割示意圖。(P63)抽默5:1.胚胎工程:指對(duì)、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理,然后將獲得的胚胎移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足

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