2025年青海省黃南市重點中學(xué)高三下學(xué)期第四次周考（線上）生物試題試卷含解析

2025年青海省黃南市重點中學(xué)高三下學(xué)期第四次周考（線上）生物試題試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．miRNA是一種小分子RNA，某miRNA能抑制W基因控制的蛋白質(zhì)（W蛋白）的合成，某真核細胞內(nèi)形成該miRNA及其發(fā)揮作用的過程示意圖如下。下列敘述錯誤的是A．RNA聚合酶在miRNA基因轉(zhuǎn)錄時發(fā)揮作用B．miRNA與W基因mRNA結(jié)合遵循堿基互補配對原則，即C與G、A與U配對C．miRNA在細胞核中轉(zhuǎn)錄合成后進入細胞質(zhì)中加工，用于翻譯D．miRNA抑制W蛋白的合成發(fā)生在翻譯過程中2．下列關(guān)于遺傳與變異的敘述，正確的是（）A．染色體斷裂后必導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)變異B．果蠅的復(fù)眼由橢圓形變成“棒眼”是基因突變的結(jié)果C．不同個體任何細胞內(nèi)均可發(fā)生基因突變，體現(xiàn)了其普遍性特點D．AAaa自交出現(xiàn)35:1的性狀分離比，這是基因重組和配子隨機結(jié)合的結(jié)果3．科學(xué)家在新西蘭某無鼠的小型島嶼上投放某種家鼠以研究某種群數(shù)量的變化規(guī)律，一段時間后，調(diào)查該家鼠種群數(shù)量變化的結(jié)果如下表：月份1月2月3月4月5月6月7月N（估算家鼠數(shù)）3143744686869下列相關(guān)敘述錯誤的是A．2月鼠群的年齡組成為增長型B．分析表中數(shù)據(jù)可知，家鼠的種群數(shù)量增長曲線呈“S”型C．1-5月，家鼠種群數(shù)量上升說明該島嶼群落的豐富度增加D．5-7月，該小島所能維持的鼠種群最大數(shù)量稱為環(huán)境容納量4．圖甲表示某二倍體昆蟲（AaBBDd）細胞分裂某時期圖象，圖乙表示其細胞分裂過程中mRNA含量和每條染色體中DNA分子數(shù)的變化．下列說法正確的是（）A．圖甲細胞有2個染色體組，處于圖乙e時期B．圖甲細胞的變異發(fā)生在圖乙中的b或d時期C．圖乙c時期最可能是減數(shù)第一次分裂分裂前期D．等位基因的分開一定發(fā)生在減數(shù)第一次分裂的后期5．腎上腺素對肝細胞的調(diào)節(jié)過程如圖所示，下列關(guān)于腎上腺素的敘述，正確的是A．腎上腺素與肝細胞膜上的糖蛋白結(jié)合后，直接參與細胞中肝糖原的分解B．肝糖原分解過程中不需要消耗ATP，腺苷酸環(huán)化酶可以催化一系列酶促反應(yīng)C．腎上腺素隨著體液定向運輸?shù)桨屑毎l(fā)揮作用D．腎上腺素除了可以作為激素發(fā)揮圖示調(diào)節(jié)作用外，在神經(jīng)調(diào)節(jié)中還可以作為神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮作用6．兔的白色（M）對黑色（m）為顯性?，F(xiàn)有兩籠兔子，甲籠中是一只白色雌兔和一只白色雄兔，乙籠中是一只白色雌兔和一只黑色雄兔。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A．若M/m位于常染色體上且乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中兩只白色兔的基因型均為MmB．若M/m位于常染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則乙籠中白色兔的基因型為MM或MmC．若M/m位于X染色體上且乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則乙籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為1/2D．若M/m位于X染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則甲籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為3/4二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某植物光合作用、呼吸作用和有機物積累速率與溫度的關(guān)系如下圖所示。據(jù)此，回答下列問題：（1）圖中代表光合速率和呼吸速率的曲線依次_________、_________。光合速率為0時，凈光合速率為_________mg/h。（2）白天溫度為_________℃植物積累有機物最多，若夜間植物生長最適溫度為20℃，一天12小時充足光照，則該種一晝夜積累有機物的量為_________mg。（3）該植物能生長的溫度范圍是_________℃。8．（10分）微生物發(fā)酵在生產(chǎn)實踐中具有重要應(yīng)用價值?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）分解玉米秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由至少3種組分組成的復(fù)合酶，其中葡萄糖苷酶的作用是______________________。（2）對土壤中分解纖維素的某種細菌進行活菌計數(shù)，常采用________法進行接種培養(yǎng)，對接種工具滅菌的操作是________。（3）酵母菌可以將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，在釀酒中具有重要作用。家庭制作葡萄酒過程中，葡萄汁為酵母菌繁殖提供的營養(yǎng)物質(zhì)有_____________。隨著發(fā)酵的進行，發(fā)酵液逐漸變?yōu)樯罴t色，這是因為________________。（4）在制作葡萄酒的基礎(chǔ)上可以制作葡萄醋，制作過程中要適時向發(fā)酵液中通入空氣，原因是___________；在缺少糖源時，醋酸菌產(chǎn)生醋酸的代謝過程是_______________________。9．（10分）2019諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎讓我們獲知細胞適應(yīng)氧氣變化的分子機制。人們對氧感應(yīng)和氧穩(wěn)態(tài)調(diào)控的研究開始于一種糖蛋白激素——促紅細胞生成素(EPO)，EPO作用機理如圖1所示：當氧氣缺乏時，腎臟分泌EPO刺激骨髓生成新的紅細胞，調(diào)控該反應(yīng)的“開關(guān)”是一種蛋白質(zhì)——缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)。研究還發(fā)現(xiàn)，正常氧氣條件下，細胞內(nèi)的HIF會被蛋白酶降解，缺氧環(huán)境下，HIF會促進缺氧相關(guān)基因的表達，使人體細胞適應(yīng)缺氧環(huán)境?；卮鹣铝袉栴}。（1）據(jù)圖分析，紅細胞數(shù)量與EPO的分泌量之間存在______調(diào)節(jié)機制。（2）人體劇烈運動一段時間后，人體細胞產(chǎn)生HIF______(填增多或減少)，引起缺氧相關(guān)基因的表達，這個過程需要的原料有_____________________。（3）青海多巴國家高原體育訓(xùn)練基地海拔2366米，中長跑運動員在比賽前常常到該基地訓(xùn)練一段時間，從氧穩(wěn)態(tài)調(diào)控角度分析中長跑運動員前去訓(xùn)練的原因是：該訓(xùn)練基地海拔較高氧氣稀薄，刺激運動員__________________________，保證比賽時細胞得到足夠的氧氣和能量供給。（4）腫瘤的生長需要生成大量的血管以供應(yīng)營養(yǎng)，腫瘤快速生長使內(nèi)部缺氧，誘導(dǎo)HIF的合成，從而促進血管生成和腫瘤長大。請據(jù)此提出治療腫瘤的措施：____________________。10．（10分）下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：（1）EcoRⅤ酶切位點為，EcoRⅤ酶切出來的線性載體P1為_______末端。（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得目的基因片段，其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸，載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為_______的脫氧核苷酸，形成P2，P2和目的基因片段在_______酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。PCR技術(shù)中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點是_____________________________________。

（3）PCR技術(shù)可以臨床用于診斷感染性疾病、腫瘤及遺傳病等，它是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，其標準步驟為_______、退火、__________。（4）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________。若該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中，然后在_______為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。11．（15分）以廣東科學(xué)家領(lǐng)銜的國際研究團隊歷時四年，利用基因編輯技術(shù)（CRISPR/Cas9）和體細胞核移植技術(shù)，成功地將亨廷頓舞蹈病基因（HTT基因）導(dǎo)入豬的受精卵中，從而培育出首例患亨廷頓舞蹈病轉(zhuǎn)基因的豬，精準地模擬出人類神經(jīng)退行性疾病，標志我國大動物模型研究走在了世界前列。具體操作過程如圖。（1）利用基因編輯技術(shù)，將人突變的HTT基因插入到豬的內(nèi)源性HTT基因的表達框中，可能用到的基因工程工具酶有___________。目的基因能否在成纖維細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是_______________________。（2）欲獲取單個的成纖維細胞，需用________酶處理豬的相應(yīng)組織，放置于混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的主要作用是___________________。過程①得到去核卵細胞普遍采用__________的方法。（3）為獲得更多的患亨廷頓舞蹈病豬，可在胚胎移植前對胚胎進行__________，若操作對象是囊胚階段的胚胎，要注意______________________。（4）比起果蠅、線蟲、小鼠，豬作為人類疾病模型的優(yōu)勢有______________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

分析題圖：miRNA基因在細胞核中轉(zhuǎn)錄形成后進行加工，然后通過核孔進入細胞質(zhì)，再加工后與W基因的mRNA結(jié)合形成復(fù)合物，進而阻礙翻譯過程的進行?！驹斀狻緼、miRNA基因轉(zhuǎn)錄時，RNA聚合酶與該基因首端的啟動子相結(jié)合，開始轉(zhuǎn)錄，A正確；B、miRNA與W基因mRNA結(jié)合遵循堿基互補配對原則，即A與U、C與G配對，B正確；C、真核生物中W基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA后，首先在細胞核內(nèi)加工，再進入細胞質(zhì)中用于翻譯，C錯誤；D、mRNA是翻譯的直接模板，miRNA通過與W基因的mRNA結(jié)合成雙鏈來抑制mRNA的翻譯，D正確；故選C。2、C【解析】

1、染色體結(jié)構(gòu)的變異：指細胞內(nèi)一個或幾個染色體發(fā)生片段的缺失、增添、倒位或易位等改變。2、染色體數(shù)目的變異：指細胞內(nèi)染色體數(shù)目增添或缺失的改變。3、基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，基因突變具有普遍性、低頻性、隨機性、不定向性、多害少利性?！驹斀狻緼、染色體的斷裂若發(fā)生在同源染色體上的非姐妹染色單體之間，則不會引起其結(jié)構(gòu)的變異，A錯誤；B、果蠅X染色體上某個區(qū)段發(fā)生重復(fù)，增加了某個相同的片段，導(dǎo)致其復(fù)眼由正常的橢圓形變成條形的“棒眼”，這屬于染色體結(jié)構(gòu)變異中的重復(fù)，B錯誤；C、基因突變在生物個體發(fā)育的不同階段、不同個體的任何細胞內(nèi)均可發(fā)生，這說明基因突變具有普遍性，C正確；D、AAaa自交出現(xiàn)35:1的性狀分離比，這是染色體數(shù)目變異的結(jié)果，D錯誤。故選C。3、C【解析】

A、由表格分析可知，2月份到3月份，鼠群數(shù)量在增加，說明2月鼠群的年齡組成為增長型，A正確；

BD、據(jù)數(shù)據(jù)分析，家鼠的種群數(shù)量增長曲線呈S型，在5月到7月小島所能維持的鼠群最大數(shù)量稱為環(huán)境容納量，即K值，BD正確；

C、豐富度是指物種的數(shù)目，1-5月，家鼠種群數(shù)量上升，只是種群數(shù)量特征，不是豐富度，C錯誤。

故選C。4、A【解析】

題圖分析：圖甲中，細胞中無同源染色體，并且著絲點分裂，細胞處于減數(shù)第二次分裂后期，并且B/b、D/d位于同一對同源染色體上。

圖乙中，根據(jù)染色體所含DNA分子數(shù)的變化可以確定，e時期表示有絲分裂的后期和末期或減數(shù)第二次分裂的后末期，而mRNA的合成發(fā)生在間期的G1期和G2期，因此a、b、c、d分別對應(yīng)G1期、S期、G2期、有絲分裂的前中期或減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂的前中期?！驹斀狻坑煞治隹芍珹、圖甲細胞有2個染色體組，處于圖乙e時期，即減數(shù)第二次分裂的后期，A正確；B、由于二倍體昆蟲細胞的基因型為AaBBDd，所以圖甲細胞的變異只能是基因突變，因而發(fā)生在圖乙中的b時期，即DNA分子復(fù)制時，B錯誤；C、由分析可知，圖乙c時期最可能是有絲分裂間期或減數(shù)第一次分裂前的間期（其中的G2期），C錯誤；D、由于圖中的細胞發(fā)生了基因突變，故等位基因的分開既可以發(fā)生在減數(shù)第一次分裂的后期，也可以發(fā)生在減數(shù)第二次分裂后期，D錯誤。故選A。5、D【解析】

分析題圖，圖中腎上腺素與受體蛋白結(jié)合引發(fā)G蛋白與GTP結(jié)合，激活腺苷酸活化酶，進而引發(fā)一系列酶促反應(yīng)，導(dǎo)致肝糖原水解成葡萄糖，引起血糖濃度升高?！驹斀狻緼、腎上腺素屬于激素，激素不能直接參與細胞代謝，只是起調(diào)節(jié)作用，A錯誤；B、酶具有專一性，故腺苷酸環(huán)化酶不能催化一系列酶促反應(yīng)，由圖可知腺苷酸環(huán)化酶可以引發(fā)一系列酶促反應(yīng)，B錯誤；C、激素隨體液運輸?shù)饺砀魈帲粚Π衅鞴倩虬屑毎鹱饔?，C錯誤；D、腎上腺素既可作為升高血糖的激素，也可在神經(jīng)調(diào)節(jié)中作為神經(jīng)遞質(zhì)，D正確。故選D。激素調(diào)節(jié)的特點：微量高效；通過體液運輸；作用于靶器官、靶細胞。6、D【解析】

1、若基因在常染色體上，甲籠白色雌兔和白色雄兔的基因型均可表示為M_；乙籠中白色雌兔基因型為M_，黑色雄兔基因型為mm。2、若基因在性染色體上，甲籠白色雌兔的基因型為XMX-，白色雄兔的基因型為XMY；乙籠中白色雌兔基因型為XMX-，黑色雄兔基因型為XmY?！驹斀狻緼、若M/m位于常染色體上，則甲籠兔的基因型為M_，乙籠兔的基因型為M_和mm，若乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中的兩只白色兔子都應(yīng)含有基因m，故其基因型均為Mm，A正確；B、若M/m位于常染色體上，且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則乙籠中的兔子要提供基因M即可，故其基因型可以為Mm，也可以為MM，B正確；C、若M/m位于X染色體上，則甲籠兔的基因型為XMX-和XMY，乙籠兔的基因型為XMX-和XmY，若乙籠兔是甲籠兔的雜交后代，則甲籠中的白色雌兔應(yīng)含有基因m，其基因型應(yīng)為XMXm，故乙籠中白色雌兔基因型為XMXm的概率為1/2，C正確；D、若M/m位于X染色體上且甲籠兔是乙籠兔的雜交后代，則甲籠雌兔含乙籠黑兔的Xm，又因其為白色，必含XM，故甲籠中白色雌兔的基因型為XMXm的概率為1，D錯誤。故選D。本題考查基因分離定律的實質(zhì)及應(yīng)用，解題關(guān)鍵是根據(jù)甲、乙兩籠兔的表現(xiàn)型、基因的位置和親子代關(guān)系推斷它們的基因型及比例。二、綜合題：本大題共4小題7、①③0和-1620108-5~40【解析】

分析題圖：有機物的積累是凈光合速率，凈光合速率=光合速率?呼吸速率。一般情況下，呼吸作用的最適溫度高于光合作用，所以圖中①代表光合速率，②代表有機物的積累（凈光合速率），③代表呼吸速率。圖中10～40℃光合作用速率大于呼吸速率，同時光合速率的最適溫度約為30℃；呼吸速率最適溫度大約為45℃。在－5℃和40℃時，凈光合速率為0，此時光合速率等于呼吸速率。據(jù)此答題?！驹斀狻浚?）有機物累積速率等于光合作用速率減去呼吸作用速率，由此推測①為光合速率，②為有機物累積速率，③為呼吸速率。凈光合速率可以用有機物累積速率表示，由圖得光合作用速率為0時，對應(yīng)的溫度為-5℃和50℃，此時呼吸速率為0和16mg/h，根據(jù)凈光合速率=光合速率?呼吸速率，可得凈光合速率為0和-16mg/h。（2）有機物累積最多時為②線最高點時，對應(yīng)溫度為20℃；20℃時凈光合速率為14mg/h，呼吸速率為5mg/h,一天光照時間為12小時，故一晝夜有機物積累量為（14×12?5×12)=108mg。（3）植物能生長需要保證凈光合速率大于0，故能生長的溫度范圍是－5~40℃。解答本題的關(guān)鍵是分析圖中的曲線可以進行的生理反應(yīng)及其大小關(guān)系，明確真正光合速率=凈光合速率+呼吸速率，凈光合速率小于或等于0時，植物無法生長。8、將纖維二糖分解成葡萄糖稀釋涂布平板沾少量酒精，在火焰上引燃碳源（葡萄糖也可）、氮源（蛋白質(zhì)、氨基酸等也可）、水、無機鹽發(fā)酵過程中隨著酒精度的升高，紅葡萄皮中的色素進入發(fā)酵液醋酸菌是好氧細菌C2H5OH+O2CH3COOH+H2O（“乙醇→乙醛→醋酸”或“乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷保窘馕觥?/p>

果酒發(fā)酵是利用酵母菌的無氧呼吸，果醋發(fā)酵是利用醋酸菌的有氧呼吸，代謝類型不同，所需條件【詳解】（1）纖維素酶至少是由C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分組成，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。（2）若要對土壤中分解纖維素的某種細菌進行活菌計數(shù)，常采用稀釋涂布平板法進行接種，此過程所用的接種工具是涂布器，將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10s后進行接種。（3）家庭制作葡萄酒時，葡萄汁為酵母菌的發(fā)酵提供碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。隨著發(fā)酵的進行，發(fā)酵液顏色逐漸變?yōu)樯罴t色，其原因是發(fā)酵過程中隨著酒精度的升高，紅葡萄皮中的色素進入發(fā)酵液。（4）醋酸菌是好氧細菌，因此發(fā)酵過程中需要通入空氣。在氧氣和糖源充足時，醋酸菌能將葡萄汁中的糖分解為醋酸，缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。題相對簡單，要對課本基本知識進行準確記憶是得分的關(guān)鍵。9、反饋增多核糖核苷酸、氨基酸產(chǎn)生更多的促紅細胞生成素，促進機體產(chǎn)生更多的紅細胞，提高血液運輸氧氣的能力研制藥物降低癌細胞內(nèi)HIF的含量【解析】

題意分析，促紅細胞生成素(EPO)是由腎臟分泌的一種糖蛋白激素；當氧氣缺乏時，在缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)

的調(diào)控下，腎臟分泌EPO刺激骨髓生成新的紅細胞；正常氧氣條件下，細胞內(nèi)的HIF會被蛋白酶降解，缺氧環(huán)境下，HIF會促進缺氧相關(guān)基因的表達，使人體細胞適應(yīng)缺氧環(huán)境。【詳解】（1）據(jù)圖分析，當紅細胞數(shù)量增多時，血液中氧分壓升高會抑制腎臟中氧感受器產(chǎn)生產(chǎn)生興奮，進而抑制了EPO的分泌量，顯然紅細胞數(shù)量與EPO的分泌量之間存在反饋調(diào)節(jié)機制。（2）人體劇烈運動一段時間后，由于缺少氧氣，則細胞產(chǎn)生的HIF增多，引起缺氧相關(guān)基因的表達，即基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯指導(dǎo)蛋白質(zhì)生成的過程，在該過程中需要的原料依次為核糖核苷酸、氨基酸。（3）根據(jù)題意分析，中長跑運動員在比賽前常常到海拔較高的訓(xùn)練基地訓(xùn)練，可能是因為該地海拔較高，氧氣稀薄，刺激運動員產(chǎn)生更多的促紅細胞生成素，促進機體產(chǎn)生更多的紅細胞，提高血液運輸氧氣的能力，保證比賽時細胞得到足夠的氧氣和能量供給。（4）根據(jù)題意分析，誘導(dǎo)HIF的合成會促進血管生成和腫瘤長大，則可以研制藥物降低癌細胞內(nèi)HIF的含量，進而達到治療腫瘤的目的。認真閱讀題干獲取有效信息是解答本題的關(guān)鍵，能夠根據(jù)題干信息弄清楚缺氧條件下、促紅細胞生成素(EPO)

、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)

與生成新的紅細胞之間的關(guān)系是解答本題的另一關(guān)鍵！10、平胸腺嘧啶（T）DNA連接酶耐高溫變性延伸鑒別和篩選含目的基因的細胞蔗糖【解析】

1、基因表達載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。其中標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來，常用的標記基因是抗生素抗性基因。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可以用檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因（tetr）。2、PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意分析，EcoRV酶識別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在識別序列的堿基的中軸線T與A之間進行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。（2）據(jù)圖分析，目的基因兩側(cè)為粘性末端，且漏出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要個加一個胸腺嘧啶堿基T形成具有粘性末端的載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。由于在PCR擴增技術(shù)中采用高溫使其變形解旋，因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特點。（3）根據(jù)以上分析可知，PCR技術(shù)的標準步驟包括變性、退火、延伸。（4）根據(jù)以上分析可知，重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因?qū)儆跇擞浕?，其作用是鑒別和篩選含目的基因的細胞。根據(jù)題意可知，該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中，在個體水平上鑒定目的基因是否表達，可以在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，如果大腸桿菌細胞內(nèi)目的基因表達出了蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白，該大腸桿菌能夠進行正常的生長和繁殖，則說明目的基因完成了表達過程。本題考查基因工程的知識點，要求學(xué)生掌握限制酶的特點和切割后形成的末端類型，把握基因表達載體的構(gòu)成過程和組成，識記標記基因的作用，掌握基因工程在中PCR擴增目的基因的過程和特點，理解目的基因的檢測和鑒定方法，特別是能夠根據(jù)題意把握在個體水平上的鑒定方法，這是該題考查的重點。11、限制酶和DNA連接酶