PCR基礎知識單選題100道及答案解析

PCR基礎知識單選題100道及答案解析1.PCR技術的全稱是（）A.聚合酶鏈式反應B.聚合酶反應C.鏈式聚合反應D.核酸聚合反應答案：A解析：PCR技術的全稱是聚合酶鏈式反應。2.PCR反應中使用的酶是（）A.DNA連接酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.解旋酶答案：B解析：PCR反應中使用的酶是耐高溫的DNA聚合酶。3.PCR反應的基本步驟不包括（）A.變性B.退火C.延伸D.轉(zhuǎn)錄答案：D解析：PCR反應的基本步驟包括變性、退火、延伸，轉(zhuǎn)錄不是PCR的步驟。4.PCR反應中，使雙鏈DNA解鏈的溫度通常為（）A.50-60℃B.70-75℃C.90-95℃D.100℃答案：C解析：使雙鏈DNA解鏈的溫度通常為90-95℃。5.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應體系的必需成分（）A.模板DNAB.dNTPC.蛋白酶D.引物答案：C解析：PCR反應體系的必需成分包括模板DNA、dNTP、引物和DNA聚合酶等，不需要蛋白酶。6.PCR反應中引物的作用是（）A.提供3'-OH末端B.解旋DNAC.連接DNA片段D.識別特定序列答案：A解析：引物的作用是提供3'-OH末端，使DNA聚合酶能夠啟動DNA合成。7.以下關于PCR退火溫度的描述，正確的是（）A.低于引物的Tm值5℃左右B.高于引物的Tm值5℃左右C.與引物的Tm值相同D.隨機設定答案：A解析：PCR退火溫度通常低于引物的Tm值5℃左右。8.PCR產(chǎn)物的長度主要由（）決定A.引物長度B.模板長度C.延伸時間D.循環(huán)次數(shù)答案：A解析：PCR產(chǎn)物的長度主要由引物決定。9.以下哪種因素會影響PCR反應的特異性（）A.引物濃度B.鎂離子濃度C.退火溫度D.循環(huán)次數(shù)答案：C解析：退火溫度對PCR反應的特異性影響較大。10.在PCR反應中，鎂離子的作用是（）A.穩(wěn)定DNA結構B.激活DNA聚合酶C.降低反應溫度D.增加產(chǎn)物產(chǎn)量答案：B解析：鎂離子可以激活DNA聚合酶的活性。11.實時熒光定量PCR中，用于檢測產(chǎn)物量的是（）A.熒光強度B.吸光度C.電導率D.折射率答案：A解析：實時熒光定量PCR通過檢測熒光強度來反映產(chǎn)物量。12.以下哪種PCR技術可以用于檢測基因突變（）A.常規(guī)PCRB.巢式PCRC.等位基因特異性PCRD.以上均可答案：C解析：等位基因特異性PCR常用于檢測基因突變。13.PCR反應中，每經(jīng)過一個循環(huán)，DNA量大約增加（）A.1倍B.2倍C.4倍D.8倍答案：B解析：每經(jīng)過一個循環(huán)，DNA量大約增加1倍，即2倍。14.以下哪種方法可以提高PCR反應的效率（）A.增加引物長度B.降低退火溫度C.減少dNTP濃度D.增加模板量答案：D解析：增加模板量可以提高PCR反應的效率。15.多重PCR是指（）A.同時擴增多個基因片段B.多次進行PCR反應C.使用多種引物D.以上都不是答案：A解析：多重PCR是指在一個反應體系中同時擴增多個基因片段。16.以下哪種PCR技術可以降低非特異性擴增（）A.熱啟動PCRB.降落PCRC.不對稱PCRD.以上都是答案：D解析：熱啟動PCR、降落PCR等都可以降低非特異性擴增。17.PCR反應中使用的dNTP包括（）A.dATP、dGTP、dCTP、dTTPB.dAMP、dGMP、dCMP、dTMPC.ATP、GTP、CTP、TTPD.AMP、GMP、CMP、TMP答案：A解析：PCR反應中使用的dNTP包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP。18.以下哪種情況可能導致PCR反應失?。ǎ〢.引物設計不合理B.模板DNA濃度過高C.延伸時間過長D.以上都有可能答案：D解析：引物設計不合理、模板DNA濃度過高或過低、延伸時間過長或過短等都可能導致PCR反應失敗。19.以下關于PCR緩沖液的描述，錯誤的是（）A.提供適宜的pH環(huán)境B.穩(wěn)定反應體系C.直接參與反應D.有助于酶的活性答案：C解析：PCR緩沖液不直接參與反應，主要是提供適宜的環(huán)境和穩(wěn)定體系。20.以下哪種PCR技術常用于基因表達分析（）A.逆轉(zhuǎn)錄PCRB.原位PCRC.甲基化特異性PCRD.以上都不是答案：A解析：逆轉(zhuǎn)錄PCR常用于基因表達分析。21.PCR反應中，延伸的溫度一般為（）A.50-55℃B.60-65℃C.70-75℃D.80-85℃答案：C解析：延伸的溫度一般為70-75℃。22.以下哪種物質(zhì)可以增加PCR反應的特異性（）A.甘油B.DMSOC.甲酰胺D.以上都是答案：D解析：甘油、DMSO、甲酰胺等都可以增加PCR反應的特異性。23.巢式PCR的優(yōu)點是（）A.提高特異性B.增加靈敏度C.減少非特異性擴增D.以上都是答案：D解析：巢式PCR具有提高特異性、增加靈敏度和減少非特異性擴增等優(yōu)點。24.不對稱PCR主要用于（）A.制備單鏈DNAB.定量分析C.檢測基因突變D.以上都不是答案：A解析：不對稱PCR主要用于制備單鏈DNA。25.以下關于PCR循環(huán)次數(shù)的描述，正確的是（）A.越多越好B.越少越好C.根據(jù)模板量確定D.固定為30次答案：C解析：PCR循環(huán)次數(shù)需要根據(jù)模板量等因素確定，不是固定的，也不是越多或越少越好。26.PCR實驗中，防止污染的措施不包括（）A.分區(qū)操作B.使用一次性耗材C.操作人員不戴手套D.定期對實驗室消毒答案：C解析：操作人員應戴手套以防止污染，其他選項都是防止污染的措施。27.以下哪種模板不適合用于PCR反應（）A.基因組DNAB.cDNAC.蛋白質(zhì)D.mRNA答案：C解析：PCR反應的模板是核酸，蛋白質(zhì)不適合用于PCR。28.以下哪種PCR技術可以用于檢測微生物（）A.隨機擴增多態(tài)性DNAPCRB.重組PCRC.長片段PCRD.以上都可以答案：A解析：隨機擴增多態(tài)性DNAPCR可以用于檢測微生物。29.PCR反應體系中，引物的濃度通常為（）A.0.1-0.5μmol/LB.0.5-1.0μmol/LC.1.0-2.0μmol/LD.2.0-5.0μmol/L答案：A解析：引物的濃度通常為0.1-0.5μmol/L。30.以下關于實時熒光定量PCR標準曲線的描述，錯誤的是（）A.用于定量分析B.反映起始模板量與熒光強度的關系C.可以無限延伸D.需繪制多個已知濃度的標準品答案：C解析：標準曲線是有限的，不是可以無限延伸的。31.以下哪種因素不會影響PCR產(chǎn)物的純度（）A.引物的特異性B.模板的質(zhì)量C.反應時間D.實驗室的溫度答案：D解析：實驗室的溫度一般不會直接影響PCR產(chǎn)物的純度。32.PCR反應中，模板DNA變性不完全可能導致（）A.產(chǎn)物量增加B.非特異性擴增C.特異性擴增增強D.無影響答案：B解析：模板DNA變性不完全可能導致非特異性擴增。33.以下哪種PCR技術可以用于DNA測序（）A.末端終止法PCRB.熱不對稱交錯PCRC.重疊延伸PCRD.以上都不是答案：B解析：熱不對稱交錯PCR可以用于DNA測序。34.以下關于PCR反應體系優(yōu)化的描述，錯誤的是（）A.一次優(yōu)化一個因素B.同時優(yōu)化多個因素C.以產(chǎn)物量和特異性為指標D.無需考慮成本答案：D解析：PCR反應體系優(yōu)化需要考慮成本等因素。35.以下哪種情況可能導致PCR產(chǎn)物出現(xiàn)彌散帶（）A.退火溫度過高B.延伸時間過短C.模板量過少D.引物濃度過低答案：B解析：延伸時間過短可能導致PCR產(chǎn)物出現(xiàn)彌散帶。36.實時熒光定量PCR中，SYBRGreen法的原理是（）A.特異性結合雙鏈DNAB.特異性結合單鏈DNAC.與引物結合D.與dNTP結合答案：A解析：SYBRGreen法的原理是特異性結合雙鏈DNA。37.以下哪種PCR技術可以用于擴增已知一端序列的未知DNA片段（）A.反向PCRB.原位PCRC.連接酶鏈反應D.以上都不是答案：A解析：反向PCR可以用于擴增已知一端序列的未知DNA片段。38.PCR產(chǎn)物的檢測方法不包括（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳C.酶聯(lián)免疫吸附測定D.測序答案：C解析：酶聯(lián)免疫吸附測定不是PCR產(chǎn)物的檢測方法。39.以下關于PCR實驗室布局的描述，錯誤的是（）A.分為試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)和擴增區(qū)B.各區(qū)之間無需隔離C.氣流應單向流動D.避免交叉污染答案：B解析：PCR實驗室各區(qū)之間需要嚴格隔離。40.以下哪種情況可能導致PCR出現(xiàn)假陽性結果（）A.引物二聚體B.模板污染C.退火溫度過低D.延伸時間過長答案：B解析：模板污染可能導致PCR出現(xiàn)假陽性結果。41.以下哪種PCR技術可以用于檢測DNA甲基化（）A.甲基化特異性PCRB.多重連接依賴式探針擴增C.等位基因特異性PCRD.以上都是答案：A解析：甲基化特異性PCR用于檢測DNA甲基化。42.PCR反應中，dNTP的濃度通常為（）A.50-200μmol/LB.20-200μmol/LC.5-50μmol/LD.0.5-5μmol/L答案：A解析：dNTP的濃度通常為50-200μmol/L。43.以下關于PCR引物設計的原則，錯誤的是（）A.引物長度一般為15-30bpB.G+C含量應在40%-60%C.避免引物自身互補D.無需考慮引物的Tm值答案：D解析：引物設計需要考慮引物的Tm值。44.以下哪種情況可能導致PCR出現(xiàn)假陰性結果（）A.引物設計不當B.反應體系中存在抑制劑C.模板量過多D.以上都是答案：D解析：引物設計不當、反應體系中存在抑制劑、模板量過多等都可能導致PCR出現(xiàn)假陰性結果。45.以下哪種PCR技術可以用于快速診斷病原體（）A.實時熒光定量PCRB.巢式PCRC.多重PCRD.以上都是答案：D解析：實時熒光定量PCR、巢式PCR、多重PCR等都可用于快速診斷病原體。46.PCR反應中，鎂離子濃度過高可能導致（）A.特異性增強B.非特異性擴增C.產(chǎn)物量減少D.無影響答案：B解析：鎂離子濃度過高可能導致非特異性擴增。47.以下關于PCR產(chǎn)物保存的描述，正確的是（）A.室溫保存B.4℃保存C.-20℃保存D.以上均可答案：C解析：PCR產(chǎn)物一般應-20℃保存。48.以下哪種PCR技術可以用于基因突變的定量分析（）A.數(shù)字PCRB.等位基因特異性PCRC.甲基化特異性PCRD.以上都不是答案：A解析：數(shù)字PCR可以用于基因突變的定量分析。49.PCR反應中，使用的模板DNA量通常為（）A.1-100ngB.10-100ngC.100-1000ngD.1000-10000ng答案：A解析：PCR反應中，使用的模板DNA量通常為1-100ng。50.以下哪種情況可能影響PCR反應的重復性（）A.移液器不準確B.反應條件不穩(wěn)定C.試劑質(zhì)量差異D.以上都是答案：D解析：移液器不準確、反應條件不穩(wěn)定、試劑質(zhì)量差異等都可能影響PCR反應的重復性。51.以下關于PCR技術的應用，錯誤的是（）A.基因克隆B.親子鑒定C.蛋白質(zhì)合成D.疾病診斷答案：C解析：PCR技術用于核酸的擴增，不能直接用于蛋白質(zhì)合成。52.實時熒光定量PCR中，Ct值的含義是（）A.熒光信號達到設定閾值時的循環(huán)數(shù)B.產(chǎn)物量達到最大值時的循環(huán)數(shù)C.反應結束時的循環(huán)數(shù)D.以上都不是答案：A解析：Ct值是熒光信號達到設定閾值時的循環(huán)數(shù)。53.PCR反應中，退火時間通常為（）A.5-15sB.15-30sC.30-60sD.60-90s答案：B解析：退火時間通常為15-30s。54.以下哪種PCR技術可以用于分析基因拷貝數(shù)變異（）A.比較基因組雜交PCRB.等位基因特異性PCRC.多重PCRD.以上都不是答案：A解析：比較基因組雜交PCR可用于分析基因拷貝數(shù)變異。55.以下關于PCR實驗室質(zhì)量管理的描述，錯誤的是（）A.定期進行儀器校準B.無需對實驗人員進行培訓C.對試劑進行質(zhì)量控制D.建立完善的記錄制度答案：B解析：PCR實驗室需要對實驗人員進行培訓。56.PCR反應中，使用的DNA聚合酶具有（）A.3'-5'外切B.5'-3'外切C.3'-5'內(nèi)切D.5'-3'內(nèi)切答案：A解析：PCR反應中使用的DNA聚合酶具有3'-5'外切活性，有助于保證擴增的準確性。57.以下哪種情況可能導致PCR擴增效率降低（）A.引物濃度過高B.模板DNA純度高C.鎂離子濃度適宜D.退火溫度過低答案：A解析：引物濃度過高可能會導致PCR擴增效率降低，還可能增加非特異性擴增。58.巢式PCR中，第二輪PCR所用的引物位于（）A.第一輪引物的外側B.第一輪引物的內(nèi)側C.與第一輪引物相同D.隨機位置答案：B解析：巢式PCR中，第二輪PCR所用的引物位于第一輪引物的內(nèi)側。59.以下關于PCR產(chǎn)物純化的方法，錯誤的是（）A.乙醇沉淀B.凝膠電泳后切膠回收C.過柱純化D.無需純化，可直接用于后續(xù)實驗答案：D解析：PCR產(chǎn)物通常需要純化以去除雜質(zhì)和引物二聚體等，不能直接用于后續(xù)實驗。60.實時熒光定量PCR中，TaqMan探針法的原理是（）A.探針與模板結合后被水解B.探針與產(chǎn)物結合發(fā)出熒光C.探針自身發(fā)出熒光D.以上都不是答案：A解析：TaqMan探針法的原理是探針與模板結合后被水解，從而產(chǎn)生熒光信號。61.以下哪種因素會影響PCR反應的退火溫度（）A.引物的長度和堿基組成B.模板的濃度C.延伸時間D.循環(huán)次數(shù)答案：A解析：引物的長度和堿基組成會影響PCR反應的退火溫度。62.不對稱PCR中，兩種引物的比例通常為（）A.1:1B.1:50-1:100C.50:1-100:1D.隨機比例答案：B解析：不對稱PCR中，兩種引物的比例通常為1:50-1:100。63.以下哪種PCR技術可以用于病毒的檢測（）A.普通PCRB.實時熒光定量PCRC.多重PCRD.以上均可答案：D解析：普通PCR、實時熒光定量PCR和多重PCR等都可以用于病毒的檢測。64.PCR反應中，延伸時間取決于（）A.產(chǎn)物長度B.引物長度C.模板長度D.反應體系體積答案：A解析：PCR反應中，延伸時間主要取決于產(chǎn)物長度。65.以下關于PCR反應體系中各成分作用的描述，錯誤的是（）A.模板提供擴增的目標序列B.引物決定擴增的特異性和起始位置C.dNTP是合成新鏈的原料D.緩沖液主要提供能量答案：D解析：緩沖液主要是維持反應體系的pH和離子強度等，不是提供能量。66.以下哪種情況可能導致PCR產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶（）A.引物特異性差B.退火溫度過高C.模板量過少D.鎂離子濃度過低答案：A解析：引物特異性差可能導致PCR產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶。67.熱啟動PCR的主要目的是（）A.提高擴增效率B.增加產(chǎn)物特異性C.縮短反應時間D.降低成本答案：B解析：熱啟動PCR的主要目的是增加產(chǎn)物特異性，減少非特異性擴增。68.以下關于PCR技術的局限性，描述錯誤的是（）A.對模板質(zhì)量要求高B.容易出現(xiàn)假陽性和假陰性結果C.不能檢測點突變D.不能定量分析答案：C解析：PCR技術可以通過特定的方法檢測點突變，如等位基因特異性PCR等。69.以下哪種PCR技術可以用于檢測基因重排（）A.長片段PCRB.反向PCRC.多重PCRD.以上都不是答案：A解析：長片段PCR可以用于檢測基因重排。70.PCR反應中，若出現(xiàn)非特異性擴增，可采取的措施不包括（）A.提高退火溫度B.減少引物濃度C.增加模板量D.更換DNA聚合酶答案：C解析：增加模板量一般不能解決非特異性擴增的問題。71.以下哪種情況可能導致PCR反應無法進行（）A.缺少dNTPB.引物設計合理C.鎂離子濃度適宜D.模板DNA濃度適中答案：A解析：缺少dNTP會導致PCR反應無法進行。72.實時熒光定量PCR中，熒光閾值的設定原則是（）A.超過陰性對照的熒光值B.低于陽性對照的熒光值C.處于指數(shù)擴增期D.以上都不是答案：A解析：熒光閾值的設定原則是超過陰性對照的熒光值。73.以下關于PCR技術的發(fā)展歷程，描述正確的是（）A.從定性檢測到定量檢測B.從低通量到高通量C.從單一技術到多種技術融合D.以上都是答案：D解析：PCR技術在發(fā)展過程中，實現(xiàn)了從定性到定量、從低通量到高通量、多種技術融合等轉(zhuǎn)變。74.以下哪種PCR技術可以用于SNP分型（）A.高分辨率熔解曲線分析B.等位基因特異性PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：高分辨率熔解曲線分析和等位基因特異性PCR都可以用于SNP分型。75.PCR反應中，若產(chǎn)物量過少，可采取的措施不包括（）A.延長延伸時間B.降低退火溫度C.減少循環(huán)次數(shù)D.增加引物濃度答案：C解析：減少循環(huán)次數(shù)會導致產(chǎn)物量更少，而不是解決產(chǎn)物量過少的問題。76.以下關于PCR技術在法醫(yī)學中的應用，錯誤的是（）A.個體識別B.親子鑒定C.毒物分析D.犯罪現(xiàn)場勘查答案：C解析：PCR技術在法醫(yī)學中主要用于個體識別、親子鑒定和犯罪現(xiàn)場勘查等，不用于毒物分析。77.以下哪種PCR技術可以用于微生物群落分析（）A.變性梯度凝膠電泳PCRB.溫度梯度凝膠電泳PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：變性梯度凝膠電泳PCR和溫度梯度凝膠電泳PCR都可以用于微生物群落分析。78.PCR反應中，若出現(xiàn)引物二聚體，可能的原因是（）A.引物濃度過高B.退火溫度過低C.延伸時間過長D.鎂離子濃度過高答案：A解析：引物濃度過高容易導致引物二聚體的形成。79.以下關于PCR技術在基因治療中的應用，描述錯誤的是（）A.構建基因載體B.檢測治療效果C.直接修復基因缺陷D.以上都不是答案：C解析：PCR技術在基因治療中主要用于構建基因載體和檢測治療效果，不能直接修復基因缺陷。80.實時熒光定量PCR中，常用的熒光染料除了SYBRGreen還有（）A.EvaGreenB.ROXC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：EvaGreen也是實時熒光定量PCR中常用的熒光染料，ROX通常作為參比熒光。81.以下哪種情況可能導致PCR反應的重復性差（）A.操作不規(guī)范B.儀器不穩(wěn)定C.試劑批次不同D.以上都是答案：D解析：操作不規(guī)范、儀器不穩(wěn)定、試劑批次不同等都可能導致PCR反應的重復性差。82.以下關于PCR技術在農(nóng)業(yè)領域的應用，錯誤的是（）A.作物品種鑒定B.病蟲害檢測C.土壤成分分析D.以上都不是答案：C解析：PCR技術在農(nóng)業(yè)領域可用于作物品種鑒定和病蟲害檢測，一般不用于土壤成分分析。83.以下哪種PCR技術可以用于檢測基因融合（）A.融合PCRB.重疊延伸PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：融合PCR和重疊延伸PCR都可以用于檢測基因融合。84.PCR反應中，若模板DNA存在雜質(zhì)，可能的影響是（）A.抑制酶活性B.降低擴增效率C.導致非特異性擴增D.以上都是答案：D解析：模板DNA存在雜質(zhì)可能抑制酶活性、降低擴增效率和導致非特異性擴增。85.以下關于PCR技術在臨床診斷中的優(yōu)勢，描述錯誤的是（）A.快速B.靈敏C.特異性高D.成本高答案：D解析：PCR技術在臨床診斷中的優(yōu)勢包括快速、靈敏、特異性高，成本相對并不高。86.以下哪種PCR技術可以用于蛋白質(zhì)表達分析（）A.逆轉(zhuǎn)錄PCRB.實時熒光定量PCRC.以上都是D.以上都不是答案：A解析：逆轉(zhuǎn)錄PCR可以將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，從而用于蛋白質(zhì)表達分析。87.PCR反應中，若鎂離子濃度過低，可能的結果是（）A.產(chǎn)物量減少B.非特異性擴增增加C.引物退火不完全D.以上都是答案：D解析：鎂離子濃度過低可能導致產(chǎn)物量減少、非特異性擴增增加、引物退火不完全等。88.以下關于PCR技術在食品安全檢測中的應用，錯誤的是（）A.檢測轉(zhuǎn)基因成分B.檢測食品中的致病菌C.檢測食品的營養(yǎng)成分D.以上都不是答案：C解析：PCR技術在食品安全檢測中可用于檢測轉(zhuǎn)基因成分和致病菌，一般不用于檢測食品的營養(yǎng)成分。89.以下哪種PCR技術可以用于構建基因文庫（）A.隨機引物PCRB.簡并引物PCRC.以上都是D.以上都不是答案：C解析：隨機引物PCR和簡并引物PCR都可以用于構建基因文庫。90.PCR反應中，若退火溫度過高，可能的影響是（）A.引物與模板結合不充分B.產(chǎn)物特異性降低C.延伸效率下降D.以上都是答案：A解析：退火溫度過高會導致引物與模板結合不充分。91.以下關于PCR技術在環(huán)境監(jiān)測中的應用，描述正確的是（）A.檢測水體中的污染物B.監(jiān)測土壤