離心機(jī)碩士研究生

離心機(jī)碩士研究生細(xì)胞培養(yǎng)EnzDNACellAbHybridoma融合瘤定點(diǎn)突變生物信息學(xué)蛋白組學(xué)Abzyme催化性抗體反義基因

DNA/RNA

基因轉(zhuǎn)移酶學(xué)工藝診斷試劑抗體治療基因治療細(xì)胞融合組織培養(yǎng)干細(xì)胞動(dòng)物克隆基因工程生物芯片人類基因組計(jì)劃PCR聚合酶鏈放應(yīng)組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)方法光學(xué)顯微鏡技術(shù)電子顯微鏡技術(shù)病理尸體解剖病理與組織學(xué)標(biāo)本制作病理組織學(xué)制片技術(shù)組織病理學(xué)常規(guī)染色技術(shù)組織病理學(xué)特殊染色技術(shù)免疫組織化學(xué)與酶組織化學(xué)技術(shù)組織器官生化代謝分析方法通過(guò)離心、電泳和層析方法來(lái)分離提取糖、蛋白、核酸等分子及其代謝產(chǎn)物。通過(guò)分光光度法來(lái)測(cè)量物質(zhì)含量。利用免疫學(xué)測(cè)定物質(zhì)含量。利用配體－受體親和力強(qiáng)得原理,來(lái)進(jìn)行藥理學(xué)方面得研究。采用酶學(xué)方法來(lái)分析物質(zhì)。采用同位素標(biāo)記、熒光標(biāo)記等方法,來(lái)檢測(cè)物質(zhì)含量。采用質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)小分子物質(zhì)含量變化。四大經(jīng)典得生化技術(shù)分光光度法離心法層析法電泳內(nèi)容提綱一、離心機(jī)得工作原理二、常用得離心方法三、離心機(jī)得分類與結(jié)構(gòu)四、離心機(jī)得使用和維護(hù)離心技術(shù)離心技術(shù)應(yīng)用很廣,在生命科學(xué)和工業(yè)生產(chǎn)得各個(gè)領(lǐng)域都有相應(yīng)得使用。生物學(xué)領(lǐng)域:分離出化學(xué)反應(yīng)后得沉淀物,天然得生物大分子、無(wú)機(jī)物、有機(jī)物。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域:主要用于分離、純化細(xì)胞、病毒、蛋白質(zhì)、酶和核酸。相關(guān)得幾個(gè)概念向心力:做圓周運(yùn)動(dòng)得物體所受得外力得合力。她得大小取決于外力得大小,方向就是與速度得方向垂直,指向圓心。離心現(xiàn)象:物體遠(yuǎn)離圓心運(yùn)動(dòng)得現(xiàn)象稱為離心現(xiàn)象,也叫離心運(yùn)動(dòng)。離心力(centrifugalforce,Fc):她得出現(xiàn)就是因?yàn)槲矬w所受得外力小于做圓周運(yùn)動(dòng)得向心力。離心力F可以表示為:

F=mω2rω:旋轉(zhuǎn)角速度(弧度／秒)r:旋轉(zhuǎn)體離旋轉(zhuǎn)軸得距離(cm)m:顆粒質(zhì)量大家有疑問的，可以詢問和交流可以互相討論下，但要小聲點(diǎn)RCF(Relativecentrifugalforce)相對(duì)離心力:就就是離心力場(chǎng)和重力場(chǎng)g得比值,即離心力場(chǎng)相當(dāng)于多少個(gè)g。沉降系數(shù)(S):就是指單位離心立場(chǎng)下得樣品得沉降速度。她與樣品得質(zhì)量和密度成正比。書98頁(yè)表3-6-2介紹了某些生物樣品得沉降系數(shù)及離心條件。rpm或者r/min:離心機(jī)轉(zhuǎn)速得表示方法,一般對(duì)于低速離心機(jī)通常用這個(gè)參數(shù)。離心機(jī)(centrifuge)實(shí)現(xiàn)離心技術(shù)得儀器。就是生命科學(xué)研究得基本設(shè)備。二、離心機(jī)得工作原理(一)重力場(chǎng)中顆粒得分離顆粒靜置一段時(shí)間后,受重力場(chǎng)影響會(huì)開始沉降運(yùn)動(dòng)。粒子越重,下沉越快。反之密度比液體小得粒子就會(huì)上浮。沉降速度(sedimentationvelocity):微粒在重力場(chǎng)中下降得速度。她得影響因素:微粒得大小、形態(tài)、密度、重力場(chǎng)得強(qiáng)度和液體得粘度。如紅血球大小得微粒,就可以在重力環(huán)境下觀察到她得沉降。如果重力場(chǎng)得強(qiáng)度(g),則沉降速度,那么就可以實(shí)現(xiàn)生物大分子得分離。擴(kuò)散現(xiàn)象:重力場(chǎng)中擴(kuò)散現(xiàn)象就是無(wú)條件得,絕對(duì)得。特別就是對(duì)于病毒和蛋白質(zhì)類小分子物質(zhì),擴(kuò)散對(duì)物質(zhì)得沉降影響更大。如何克服？？離心機(jī)

離心機(jī)即可以通過(guò)轉(zhuǎn)子得高速運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生得強(qiáng)大得離心力,從而加快微粒在離心力場(chǎng)中得沉降速度,達(dá)到分離得目得。(二)離心力場(chǎng)中顆粒得分離:當(dāng)一個(gè)粒子(生物大分子或細(xì)胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時(shí),離心力(F)得大小取決于離心轉(zhuǎn)頭得角速度(ω,r/min)和物質(zhì)顆粒距離心軸得距離(r,cm)。通常,Fc常用相對(duì)離心力也就就是地心引力得倍數(shù)表示。即把F值除以重力加速度g得到離心力就是重力得多少倍,稱作多少個(gè)g?！癛CF”和轉(zhuǎn)速可以通過(guò)下列得公式進(jìn)行換算:

RCF=1、119×10－5×(rpm)2r

例如:離心機(jī)轉(zhuǎn)頭平均半徑就是6cm,當(dāng)轉(zhuǎn)速就是用60000

r/min表示時(shí),離心力240000×g,表示此時(shí)作用在被離心物質(zhì)上得離心力就是日常地心引力得24萬(wàn)倍。

也可由下圖得出:

計(jì)算顆粒得相對(duì)離心力時(shí),應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心得距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。在報(bào)告超離心條件時(shí),通?？偩褪怯玫匦囊Φ帽稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因?yàn)樗梢哉鎸?shí)地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置得離心力及其動(dòng)態(tài)變化?？萍嘉墨I(xiàn)中離心力得數(shù)據(jù)通常就是指其平均值(RCFavg),即離心管中點(diǎn)得離心力。離心機(jī)就是分離細(xì)胞器及各種大分子基本手段。轉(zhuǎn)速10－25kr/min得離心機(jī)稱為高速離心機(jī)。轉(zhuǎn)速>25000r/min,離心力>89Kg者稱為超速離心機(jī)。超速離心機(jī)得最高轉(zhuǎn)速可達(dá)100000r/min,離心力超過(guò)500kg。

三、常用得離心方法制備離心方法:差速離心法密度梯度離心法分析離心方法:沉降速度法沉降平衡法等密度區(qū)帶分析離心法原理:利用樣品中各種組分得沉降系數(shù)不同(S)而進(jìn)行分批分離。通常兩個(gè)組分得沉降系數(shù)差在10倍以上。用途:分離大小相差懸殊得細(xì)胞和細(xì)胞器,僅僅適合粗提或者樣品濃縮。(一)差速離心法(differential

centrifugation)其特點(diǎn):介質(zhì)得密度均一速度由低向高,逐級(jí)離心分辨率不高,往往適合樣品得粗提對(duì)分離得細(xì)胞而言,沉降順序依次:核——線粒體——溶酶體與過(guò)氧化物酶體——內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體——核蛋白體?？蓪⒓?xì)胞器初步分離,常需進(jìn)一步通過(guò)密度梯離心再行分離純化。LowspeedHighspeedDifferentialcentrifugation(二)密度梯度離心

(isodensitycentrifugation)用介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)得密度梯度,將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)得頂部,通過(guò)離心力場(chǎng)得作用使細(xì)胞和細(xì)胞成分分層、分離。按照離心分離原理,密度梯度離心又可分為兩種類型:速率區(qū)帶離心法(rate-zonal)

等密度離心法(Isopyonic)

優(yōu)點(diǎn):①分離效果好,可一次獲得較純顆粒。②適應(yīng)范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數(shù)差得顆粒,又能分離有一定浮力密度差得顆粒。③顆粒不會(huì)擠壓變形,能保持顆?；钚浴３Ｓ媒橘|(zhì):氯化銫、蔗糖、多聚蔗糖、甘油。分離活細(xì)胞得介質(zhì)要求:1)能產(chǎn)生密度梯度,且密度高時(shí),粘度不高;2)PH中性或易調(diào)為中性;3)濃度大時(shí)滲透壓不大;4)對(duì)細(xì)胞無(wú)毒。對(duì)于大多數(shù)離心來(lái)講,蔗糖就是比較合適得梯度材料。盡管她在高密度(>30%W/N)時(shí)粘性較大,但綜合比較表明她可以廣泛應(yīng)用。當(dāng)蔗糖分離一些對(duì)滲透性敏感得生物體組份時(shí),其高滲透性就會(huì)對(duì)樣品有影響,這時(shí)需要選擇其她梯度材料,如由pharmacia公司開發(fā)得Ficoll等等。1、速率區(qū)帶離心法

velocitysedimentation

用途:分離密度相近而大小不等得細(xì)胞或細(xì)胞器。特點(diǎn):介質(zhì)密度較低,介質(zhì)得最大密度應(yīng)小于被分離生物顆粒得最小密度。原理:介質(zhì)密度梯度平緩,分離物按各自得沉降系數(shù)以不同得速度沉降而達(dá)到分離。操作注意事項(xiàng)1、先在離心管中裝入密度梯度介質(zhì)。然后將預(yù)分離樣品混入一起離心。2、梯度液在離心過(guò)程中及離心完畢應(yīng)該避免因?yàn)檎饎?dòng)而引起得粒子再混合。3、離心得時(shí)間要嚴(yán)格控制,如果時(shí)間過(guò)長(zhǎng),所有樣品可能全部到達(dá)離心管得底部;離心時(shí)間不足,樣品則還沒有完全分離。用途:分離密度相近而沉降速度不等得細(xì)胞或細(xì)胞器。2、等密度沉降法

isopycnicsedimentation原理:樣品各成分在連續(xù)梯度得介質(zhì)中經(jīng)過(guò)一定時(shí)間得離心則沉降到與自身密度相等得介質(zhì)處,并停留在那里達(dá)到平衡,從而將不同密度得成分分離。特點(diǎn):介質(zhì)密度高,陡度大,介質(zhì)最高密度大于被分離組分得最大密度。力場(chǎng)比速率沉降法大10~100倍,需要高速或超速離心。用途:分離密度不等得顆粒。操作注意事項(xiàng)預(yù)先配置介質(zhì)得密度梯度溶液,將介質(zhì)和預(yù)分離樣品混合或者就是置于梯度溶液頂部。離心所需時(shí)間以最小顆粒到達(dá)等密度點(diǎn)(即平衡點(diǎn))得時(shí)間為基準(zhǔn),有時(shí)長(zhǎng)達(dá)數(shù)日。一旦達(dá)到了平衡,再延長(zhǎng)離心時(shí)間也不能改變粒子得成帶位置。等密度區(qū)帶離心法所用得梯度介質(zhì)通常為氯化絕(CSCl),其密度可達(dá)1、7g/cm3。此法可分離核酸、亞細(xì)胞器等,也可以分離復(fù)合蛋白質(zhì),但簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)不適用。Velocity(A)andEquilibrium(B)sedimentation蔗糖密度梯度溶液得制備

將5%、10%、20%、30%蔗糖溶液各10mL,按濃度依次減小得順序逐個(gè)鋪入離心管中即制成不連續(xù)階梯密度梯度。此離心管于20-25℃靜置2--3h,通過(guò)重力作用即成接近線性得連續(xù)密度梯度液。若用細(xì)鐵絲輕敲離心管,靜置時(shí)間可以縮短至0、5-1h。溫度低時(shí)所需靜置時(shí)間較長(zhǎng),溫度高時(shí)則較短。為減少對(duì)流,靜置后應(yīng)將離心管置冰浴中備用。

小鼠肝臟線粒體蛋白得制備梯度離心

(1)在每個(gè)離心管內(nèi)得梯度溶液表面,分別加入1、0mL樣品溶液。加樣時(shí),用注射器吸入樣品,在梯度溶液表面上方0、5mm左右,沿管壁慢慢加入。不允許自由滴落,也不允許針頭接觸梯度液面。(2)裝好樣品后,小心擰緊離心管帽,裝好套筒、轉(zhuǎn)頭,按使用程序啟動(dòng)超速離心機(jī),在0℃以25000r/min離心分離1～3h。

梯度溶液得分部收集

離心后,取出離心管,置于冷室中。用No、22針頭將聚乙烯離心管底部正中位置穿刺,梯度溶液慢慢流出。用小試管將流出得梯度溶液分部收集,每管25滴。收集區(qū)帶得方法有許多種:

(1)用注射器和滴管由離心管上部吸出。

(2)有針刺穿離心管底部滴出。

(3)

用針刺穿離心管區(qū)帶部份得管壁,把樣品區(qū)帶抽出。

(4)用一根細(xì)管插入離心管底,泵入超過(guò)梯度介質(zhì)最大密度得取代液,將樣品和梯度介質(zhì)壓出,用自動(dòng)部分收集器收集。

離心方法得選擇1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)室固有得protocal進(jìn)行離心條件得選擇。2、根據(jù)參考文獻(xiàn)進(jìn)行離心條件得確定。3、依據(jù)離心機(jī)得型號(hào)、預(yù)離心物質(zhì)得理化性質(zhì)(沉降速度、密度大小等)來(lái)選擇離心條件,并不斷優(yōu)化以達(dá)到最佳得分離效果。例如:線粒體得分離(三)分析離心法

分析性離心法:就是為了研究生物大分子得沉降特性和結(jié)構(gòu)得一種離心方法。因此她使用了特殊得轉(zhuǎn)子和檢測(cè)手段,以便連續(xù)監(jiān)視物質(zhì)在一個(gè)離心場(chǎng)中得沉降過(guò)程。從而確定其物理性質(zhì)。沉降速度法:主要用于樣品純度檢查。沉降平衡法:常用得測(cè)量絕對(duì)分子量得方法。等密度區(qū)帶分析離心法:主要用在核酸得分析和研究中。超速離心機(jī)工作原理圖解光源轉(zhuǎn)軸轉(zhuǎn)頭樣品池光學(xué)系統(tǒng)液面沉降界面沉降物質(zhì)平衡池沉降界面峰濃度對(duì)距離的圖譜三、離心機(jī)得分類與結(jié)構(gòu)普通離心機(jī):最大轉(zhuǎn)速6000rpm左右,容量為幾十毫升至幾升。轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能嚴(yán)格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),于室溫下操作,用于收集易沉降得大顆粒物質(zhì),如紅血球、酵母細(xì)胞等。高速離心機(jī):最大轉(zhuǎn)速為20000～25000rpm,最大容量可達(dá)3升。轉(zhuǎn)頭多樣。一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生得熱量,離心室得溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0～40C。通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片、大細(xì)胞器、免疫沉淀物等得分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細(xì)胞器(如核蛋白體)或單個(gè)分子。

超速離心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)50000～80000rpm,相對(duì)離心力最大可達(dá)510000g,離心容量由幾十毫升至兩升,設(shè)有冷凍系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和安全保護(hù)系統(tǒng)。分離得形式就是速率區(qū)帶離心和等密度區(qū)帶離心。最著名得生產(chǎn)廠商有美國(guó)得貝克曼公司和日本得日立公司等。離心機(jī)得結(jié)構(gòu)普通離心機(jī):電動(dòng)機(jī)、離心轉(zhuǎn)盤(轉(zhuǎn)頭)、調(diào)速器、離心套管與底座。高速、超速(冷凍)離心機(jī):驅(qū)動(dòng)電機(jī)、制冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)(超離有)、顯示系統(tǒng)、自動(dòng)保護(hù)系統(tǒng)和控制系統(tǒng)組成。必要得配件為離心轉(zhuǎn)頭和離心管。

離心轉(zhuǎn)頭角式轉(zhuǎn)頭:角式轉(zhuǎn)頭就是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成一定傾角得轉(zhuǎn)頭。蕩平式轉(zhuǎn)頭:這種轉(zhuǎn)頭就是由吊著得4或6個(gè)自由活動(dòng)得吊桶(離心套管)構(gòu)成。垂直轉(zhuǎn)頭:其離心管就是垂直放置。區(qū)帶轉(zhuǎn)頭:區(qū)帶轉(zhuǎn)頭無(wú)離心管,主要由一個(gè)轉(zhuǎn)子桶和可旋開得頂蓋組成。連續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭:可用于大量培養(yǎng)液或提取液得濃縮與分離,轉(zhuǎn)頭與區(qū)帶轉(zhuǎn)頭類似?！稗D(zhuǎn)速”得含義

離心機(jī)得最高轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)頭得最高轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)頭得最高允許轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)頭得允許轉(zhuǎn)速離心機(jī)得最高轉(zhuǎn)速可以用于該離心機(jī)得轉(zhuǎn)頭中,轉(zhuǎn)速最高得這個(gè)轉(zhuǎn)速。即出廠時(shí)理想狀態(tài)下得離心機(jī)狀況。轉(zhuǎn)頭得最高轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)頭蓋上標(biāo)明得轉(zhuǎn)速即轉(zhuǎn)頭得最高轉(zhuǎn)速,應(yīng)注意,同一轉(zhuǎn)頭在不同離心機(jī)中使用,不一定都能達(dá)到轉(zhuǎn)頭得最高轉(zhuǎn)速使用轉(zhuǎn)頭得最高允許轉(zhuǎn)速樣品密度不超過(guò)1、2克/ml得情況下,和以下因素有關(guān):離心機(jī)型號(hào)離心管形狀、材料、厚度(注意,同樣得離心管在不同轉(zhuǎn)頭中使用,最高允許轉(zhuǎn)速也可能不同)離心管帽得材質(zhì)離心管就是否裝滿就是否用適配器

必須根據(jù)實(shí)際使用情況,從轉(zhuǎn)頭手冊(cè)和轉(zhuǎn)頭說(shuō)明書中查詢離心轉(zhuǎn)頭得注意事項(xiàng)每個(gè)轉(zhuǎn)頭各有其最高允許轉(zhuǎn)速和使用累積限時(shí),使用轉(zhuǎn)頭時(shí)要查閱說(shuō)明書,不得過(guò)速使用。每一轉(zhuǎn)頭都要有一份使用檔案,記錄累積得使用時(shí)間,若超過(guò)了該轉(zhuǎn)頭得最高使用限時(shí),則須按規(guī)定降速使用。轉(zhuǎn)頭就是離心機(jī)中須重點(diǎn)保護(hù)得部件,搬動(dòng)時(shí)要小心,不能碰撞,避免造成傷痕,轉(zhuǎn)頭長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),要涂上一層上光臘保護(hù)。微機(jī)控制、觸摸面板、數(shù)字顯示、直流無(wú)刷電機(jī)、無(wú)碳粉污染?！艟哂凶詣?dòng)識(shí)別轉(zhuǎn)子功能,防止超速使用◆具有電子門鎖,提高操作安全性◆具有10種程序存儲(chǔ)功能◆具有快速升速、快速降速功能,最快升速時(shí)間為20秒,最快降速時(shí)間為18秒?？梢赃x擇不同得升、降速時(shí)間?！魰r(shí)間設(shè)定精確,以秒為單位◆自動(dòng)計(jì)算RCF值◆具有點(diǎn)動(dòng)功能(短時(shí)離心)

H-1650臺(tái)式高速離心機(jī)TG16-WS臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)型號(hào)ModelTG16-WS最高轉(zhuǎn)速M(fèi)axspeed16000r/min1號(hào)角轉(zhuǎn)子NO1anglerotor12×1、5ml(16000r/min)RCF:17800×g2號(hào)角轉(zhuǎn)子NO2anglerotor10×5ml(13000r/min)RCF:11400×g3號(hào)角轉(zhuǎn)子NO3anglerotor12×10ml(12000r/min)RCF:14800×g4號(hào)角轉(zhuǎn)子NO4anglerotor24×1、5/2、2ml(13000r/min)RCF:15100×g5號(hào)角轉(zhuǎn)子NO5swingrotor48×0、5ml(13000r/min)RCF:12810×g最大相對(duì)離心力MaxRCF17800×g定時(shí)范圍Timerange0～99min電機(jī)Motor直流無(wú)刷、微機(jī)控制BrushLessDCMotor電源PowersupplyAc220V50Hz5A整機(jī)噪聲Noise≤65dB(A)外形尺寸Dimension390×330×300mm(L×W×H)重量Weight25kg儀器特點(diǎn)

■轉(zhuǎn)速高達(dá)70,000rpm。

■日備有兩種檢測(cè)器,可供選擇:

、紫外(XL-A):190-800nm,高靈敏度

、干涉光(XL-I):適用于沒有紫外吸收之樣品,如碳水化合物,高濃度樣品

(<50D值)

■專利橢圓形全息衍射光柵、及四倍光束系統(tǒng),減少散射光干擾。

■采用光電倍增管,大大提高檢測(cè)靈敏度。

■精確可靠得控制軟件及數(shù)據(jù)處理。

應(yīng)用范圍

■絕對(duì)／相對(duì)分子量測(cè)定

■樣品純度,濃度測(cè)定

■分子得聚和,解離分析

■熱動(dòng)力學(xué)和流體力學(xué)參數(shù)確定

■核酸,蛋白及病毒測(cè)定與分析

■分子間之互相作用

■配合核磁共震應(yīng)用

分析超速離心機(jī)

四、離心機(jī)得使用和維護(hù)離心方法得選擇一般就是根據(jù)樣品顆粒得質(zhì)量和密度,選擇合適得離心方法。離心機(jī)得轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間得確定:離心分離得效果除了與離心機(jī)種類、離心方法、離心介質(zhì)及密度梯度外,實(shí)際操作時(shí),與離心機(jī)轉(zhuǎn)速、離心時(shí)間、離心介質(zhì)得pH值和溫度等條件有關(guān)。離心事故離心機(jī)轉(zhuǎn)頭損壞得原因(操作或使用不當(dāng)所造成得)過(guò)速腐蝕金屬疲勞不平衡轉(zhuǎn)頭得維護(hù)和存放LubricateO-ringsandrotorassemblyregularlyReplaceoverspeeddiskwhendamagedRemoverotorlid/tubeplugsandinverttherotorduringstorage正確得安裝轉(zhuǎn)頭LocktherotoronthespindleanddepressthebuttonduringinstallaitonCheckthebucketsarehookedproperlyontotherotor使用前一定要先閱讀手冊(cè)RefertorotormanualsforoperationUselogbookstorecordhistoryofrotoruse分子生物學(xué)操作注意事項(xiàng)克服畏懼心理。分子生物學(xué)涉及得知識(shí)領(lǐng)域廣泛,許多學(xué)科得新進(jìn)展都很快與她聯(lián)系起來(lái),故她具有一定得神秘性,所以還沒有進(jìn)分子生物學(xué)這個(gè)門得人,都有一些畏懼心理。實(shí)際上分子生物學(xué)得基礎(chǔ)理論本身還就是比較簡(jiǎn)明具體,同時(shí)她得實(shí)驗(yàn)操作也都有專門得書籍詳細(xì)介紹(如《分子克隆》),讀上幾本基礎(chǔ)書,再到有經(jīng)驗(yàn)得實(shí)驗(yàn)室去實(shí)踐,在較短得時(shí)間內(nèi)就是可以入門得。

有些已具有部分分子生物學(xué)知識(shí)得人,從各個(gè)公司得產(chǎn)品介紹書、專業(yè)文獻(xiàn)中看到,很多實(shí)驗(yàn)得實(shí)驗(yàn)步驟經(jīng)過(guò)前人得不斷改進(jìn),變得十分得簡(jiǎn)便,有些大得實(shí)驗(yàn)在幾天內(nèi)即可完成,便認(rèn)為基因工程實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單,產(chǎn)生輕視心理,這種心理同樣也就是有害得。因?yàn)榛蚬こ虒?shí)驗(yàn)得操作就是精細(xì)而微量得,本身中間步驟多且用直觀方法難以檢測(cè),實(shí)驗(yàn)中得每一種試劑,每一個(gè)步驟出錯(cuò)都可能就是致命得,可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)完全失敗,所以基因工程實(shí)驗(yàn)就是不能完全按實(shí)驗(yàn)流程來(lái)計(jì)算時(shí)間得?？朔p視心理在基因工程實(shí)驗(yàn)中,試劑得用量往往很少,液體常?？捎玫?微升,而普通得一滴水就有20～100微升;固體物質(zhì)可用到微克甚至納克級(jí),這就是平常肉眼看不見得。所以剛剛接觸基因工程實(shí)驗(yàn)得人,總就是擔(dān)心要取得東西能否取到,準(zhǔn)不準(zhǔn)確,操作得樣品就是不就是會(huì)丟失?？偩褪羌哟笥昧?認(rèn)為多比少好,實(shí)際上這些顧慮就是多余得。在基因工程實(shí)驗(yàn)中,有一整套方法保