DB15-T 1055-2024 黑木耳菌種制作技術(shù)規(guī)程

15I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)果蔬標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（SAM/TC25）歸口。本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)技術(shù)推廣中心、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)、克什克騰旗農(nóng)牧局、呼倫貝爾學(xué)院。本文件主要起草人：龐杰、于傳宗、穆宗杰、于鳳玲、鮑紅春、包妍妍、趙宏宇、孫國(guó)琴、李小雷、李亞嬌、王海燕、狄潔增、肖強(qiáng)、賈文姝、張慧、張立華、康立茹、喬慧蕾、解亞杰、于靜、孟虎、王勇。——2016年首次發(fā)布為DB15/T11黑木耳菌種制作技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了黑木耳（Auriculariaauricula）母種、原種和栽培種有關(guān)的定義、菌種制作技術(shù)流程N(yùn)Y/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程GB/T6192界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于3.13.2通過(guò)生產(chǎn)試驗(yàn)驗(yàn)證具有特異性、均一性和穩(wěn)定性，豐產(chǎn)性好、抗性強(qiáng)的黑木耳菌株或品種，培養(yǎng)3.3經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以試管或培養(yǎng)皿為培養(yǎng)容23.43.5生產(chǎn)所需要的技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)，掌握黑木耳基礎(chǔ)知識(shí)及黑木耳菌種生4.2場(chǎng)地、廠房要求菌種生產(chǎn)應(yīng)選擇地勢(shì)高、通風(fēng)良好、空氣清新、水源近、排水通暢、交通便利的場(chǎng)所。300m之內(nèi)4.3生產(chǎn)設(shè)備超凈工作臺(tái)或接種箱、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、搖床、液體菌種罐（30L～250L）、冰箱、顯微鏡等設(shè)5.2容器試管選用18mm×180mm或20mm×200mm；培養(yǎng)皿選用直徑7cm～9cm玻璃培養(yǎng)皿或一次性塑料5.3分裝和滅菌分裝培養(yǎng)基至試管1/4處，用棉塞或硅膠塞子封閉試管口，每5支試管為1把，牛皮紙包棉塞3抽取3%～5%的試管，在28℃下培養(yǎng)72h，無(wú)微生物長(zhǎng)出為滅一起在121℃~124℃（0.11MPa～0.12MPa）下滅菌25min。滅菌后溫度降到50℃~55℃時(shí)，在超凈工作臺(tái)內(nèi)將三角瓶中的培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基占5.4接種在超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)接種，接種前用紫外燈照射30min，然后用75%酒精進(jìn)行表面消毒。將3mm～5mm的菌塊接，接種在培養(yǎng)皿或試管的中部，接種箱內(nèi)需在1h內(nèi)完成接種工作。培養(yǎng)皿用石臘膜密封。接種過(guò)程按照NY/T528的規(guī)定執(zhí)行，接種后及時(shí)貼好標(biāo)簽。5.5培養(yǎng)接種后第4d、第7d和長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后分別進(jìn)4枝條規(guī)格可選用125mm×5mm×7mm或125mm×3mm×7mm；枝條需要提前浸泡12h以上，需要水全部漫過(guò)枝條，待內(nèi)部無(wú)白芯撈出控水，枝條表面無(wú)水漬即枝條菌種人工裝袋，每袋裝入枝條110～120根，頂端可放30g～50g糧食菌種或棉籽殼菌原種、栽培種在超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)接種，接種前打開(kāi)紫外燈照射30min，接種時(shí)用75%酒精對(duì)應(yīng)少于15g。菌種都應(yīng)從容器開(kāi)口處接種，不應(yīng)打孔多點(diǎn)接要嚴(yán)格按無(wú)菌操作接種，每批接種應(yīng)為單一品種，如中途換品種時(shí)采用75%酒精對(duì)超凈工作臺(tái)或接溫度在24℃~26℃,空氣濕度在75%以下，通風(fēng)避光培養(yǎng)。原種和栽培種在10℃~15℃下貯存，貯存期不超過(guò)20d；在1℃~6℃下貯存，貯存期不超過(guò)506.2液體菌種生產(chǎn)采用150mL～500mL三角瓶，培養(yǎng)基添加至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后滅菌。滅菌條25℃、振蕩頻率（攪拌速度）140r/min～填裝配好的培養(yǎng)基至液體菌種罐2/3處，按照液體菌種罐說(shuō)明書要求對(duì)液體菌種罐和液體培養(yǎng)基滅5將培養(yǎng)好的三角瓶液體菌種接入到液體菌種0.04MPa，通風(fēng)量0.7N·m3/h，培養(yǎng)格執(zhí)行無(wú)菌操作，每袋接種10mL～15離無(wú)6無(wú)7.2入庫(kù)生產(chǎn)環(huán)節(jié)，庫(kù)房溫度1℃~6℃,避光，適當(dāng)通風(fēng)但應(yīng)該對(duì)空氣進(jìn)行殺菌處理。7.3留樣母種應(yīng)留樣，每批次留樣3支試管，1℃~6℃貯存至購(gòu)買者購(gòu)買后正常生產(chǎn)條件下出第一潮菇。7A.1.1麥麩100g加水600mL煮沸20min，濾液定容至500mL；新鮮無(wú)病去皮馬鈴薯200g加水600mL葡萄糖10g、蔗糖10g、瓊脂粉10g～15g，煮沸至瓊脂粉完全溶化，pH調(diào)至5.5～6A.1.2新鮮無(wú)病去皮馬鈴薯200g加水1200mL煮沸15min，濾液定容至1000mL，加入蛋白胨1g、酵g～15g，煮沸至瓊脂粉完全溶化，pH調(diào)至5.氫鉀（KH2PO4）1g、蛋白胨5g、蔗糖10gA.1.4新鮮無(wú)病去皮馬鈴薯200g加水600mL煮沸15min，濾液定容至500mL；新鮮無(wú)霉變小麥粒100H2PO4）1g、蔗糖10g、瓊脂粉1g、磷酸二氫鉀（KH2PO4）1g、葡萄糖10g、8谷粒、麥粒或玉米粒90%，檸條粉、棉籽殼、木屑、玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏1%，石灰水調(diào)至pHB.2.1鋸沫79%、麩子20%、石膏1%、石灰水調(diào)至pH6～7、水分含量（6B.2.2檸條粉60%、玉米芯20%、麩子19%、石膏1%、石灰水調(diào)至pH6～7、水分含量B.2.3豆秸粉60%、玉米芯20%、麩子19%、石