2025屆新教材高考生物一輪復(fù)習(xí)第10單元生物技術(shù)與工程第32講第2課時(shí)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用學(xué)案新人教版

PAGE16-第2課時(shí)微生物的培育技術(shù)及應(yīng)用必備學(xué)問固本夯基一、培育基1.概念:人們依據(jù)微生物對的不同需求,配制出供其的養(yǎng)分基質(zhì)。

2.養(yǎng)分組成:一般都含有和無機(jī)鹽。此外,還須要滿意微生物生長對、以及氧氣的要求。

3.種類①依據(jù)物理性質(zhì)可分為培育基、固體培育基。

②依據(jù)成分的來源可分為自然培育基和培育基。

③依據(jù)功能用途可分為選擇培育基、培育基等。

二、無菌技術(shù)1.含義:在培育微生物的操作中,全部防止的方法。

2.常用方法三、酵母菌的純培育1.步驟:微生物的純培育包括、滅菌、倒平板、、和培育等步驟。

2.倒平板(1)請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程:。

(2)乙中的滅菌方法是。

(3)丁中的操作須要在后才能進(jìn)行。

3.接種和分別酵母菌通過接種環(huán)在固體培育基表面的操作,將聚集的菌種逐步到培育基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培育,可以分別得到。

平板劃線操作流程:4.培育酵母菌完成平板劃線后,待菌液被培育基汲取,將接種后的平板和一個(gè)的平板倒置,放入℃左右的恒溫培育箱中培育24~48h。

四、微生物的選擇培育和計(jì)數(shù)1.篩選目的菌株的思路類型自然界中目的菌株的篩選試驗(yàn)室中目的菌株的篩選原理依據(jù)目的菌株對的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋

人為供應(yīng)有利于目的菌株的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等),同時(shí)其他微生物生長

實(shí)例從熱泉中篩選水生棲熱菌提取出耐高溫的DNA聚合酶從土壤中篩選出能分解尿素的細(xì)菌2.稀釋涂布平板法3.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(1)方法:統(tǒng)計(jì)樣品中微生物數(shù)量的方法有和。常用來統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目的方法是。

(2)統(tǒng)計(jì)依據(jù):當(dāng)樣品的足夠高時(shí),培育基表面生長的一個(gè)單菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推想出樣品中大約含有多少活菌。

(3)操作①設(shè)置重復(fù)組,增加試驗(yàn)的勸服力與精確性。為保證結(jié)果精確,一般選擇菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

②統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用數(shù)表示。

概念檢測1.試驗(yàn)室培育微生物,一方面要制備合適的培育基,另一方面要確保無雜菌感染。基于培育基的制備和無菌技術(shù)的相識(shí),推斷下列表述是否正確。(1)培育基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,有時(shí)還須要加入一些特別的物質(zhì)。()(2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又削減消毒劑對細(xì)胞的損害。()(3)培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度越高,對微生物的生長越有利。()2.基于酵母菌的純培育的流程及原理,推斷下列表述是否正確。(1)倒平板就是等待培育基冷卻凝固后,將培育皿倒過來放置。()(2)倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上。()(3)為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落。()(4)將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板都放入恒溫箱的目的是鑒定平板是否生有雜菌。()3.利用選擇培育基對微生物進(jìn)行篩選,采納稀釋涂布平板法可以進(jìn)行計(jì)數(shù)。推斷下列關(guān)于微生物的選擇與計(jì)數(shù)的表述是否正確。(1)選擇培育基可以鑒定某種微生物的種類。()(2)對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采納稀釋涂布平板法,而不能用平板劃線法。()(3)篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培育基中,尿素是唯一的氮源。()(4)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí),可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨,使得培育基的酸堿度降低。()(5)用稀釋涂布平板法純化酵母菌時(shí),只要稀釋度足夠高,就能在培育基表面形成單個(gè)菌落。()教材拓展(人教版選擇性必修3P20“拓展應(yīng)用”第2題改編)材料1地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸,其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用,這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。對這些微生物的探討與應(yīng)用,使人們能夠利用秸稈等生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面料等。材料2已知?jiǎng)偣t是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培育基中加入剛果紅時(shí),剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物;而當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后,復(fù)合物就無法形成,培育基中會(huì)出現(xiàn)以這些菌為中心的透亮圈。請依據(jù)材料回答下列問題。1.從什么環(huán)境中去找尋纖維素分解菌?為什么?2.要從土壤中分別纖維素分解菌,請你給出試驗(yàn)方案。3.在分別纖維素分解菌的試驗(yàn)過程中,須要染色環(huán)節(jié)。有人提出兩種染色法:第一種是先培育微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng);其次種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。經(jīng)探討后認(rèn)為運(yùn)用其次種方法有缺點(diǎn),你是否認(rèn)同?說出你的理由。核心考點(diǎn)實(shí)力提升考點(diǎn)一微生物的純培育技術(shù)合作探究探究1進(jìn)行純培育須要依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求配制培育基已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號(hào)培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45g/L)。回答下列問題。(1)在Ⅰ號(hào)培育基中,哪些成分為微生物供應(yīng)氮源?Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基中為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是什么?(2)從物理狀態(tài)分析,上述三個(gè)培育基屬于哪種類型?試驗(yàn)室中最常用的是哪種類型?(3)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培育基中,培育一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)菌比例有什么改變?從功能分析,Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基屬于哪種類型的培育基?歸納總結(jié)選擇培育基與鑒別培育基的比較種類原理用途選擇培養(yǎng)基依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好、抗性而設(shè)計(jì)從眾多微生物中分別出所需的微生物鑒別培養(yǎng)基依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培育基中的特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征改變而設(shè)計(jì)鑒別不同種類的微生物探究2防止雜菌污染是微生物純培育的關(guān)鍵在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。消毒和滅菌工作主要包括兩個(gè)方面:對操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒;將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等進(jìn)行滅菌。(1)消毒和滅菌的原理、實(shí)質(zhì)相同嗎?(2)濕熱滅菌和干熱滅菌相比哪種效果更好?嘗試分析緣由。(3)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法有什么優(yōu)點(diǎn)?探究3平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物純培育的重要方法采納平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個(gè)微生物分散在固體培育基上,之后經(jīng)培育得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培育物。如圖是采納純化微生物培育的兩種接種方法接種后培育的效果圖,請分析下列問題。(1)獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么?(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí),發(fā)覺培育基上的菌落連成了一片,最可能的緣由是什么?應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避開此種現(xiàn)象?(3)接種操作為什么肯定要在火焰旁邊進(jìn)行?圖B所示操作過程中須要灼燒接種環(huán)幾次?歸納比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培育基表面連續(xù)劃線①系列的梯度稀釋;②涂布平板法操作留意事項(xiàng)每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高,為確保試驗(yàn)勝利可以增加稀釋度的范圍菌體獲得在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取菌體在相宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點(diǎn)可以視察菌落特征,對混合菌進(jìn)行分別可以計(jì)數(shù),可以視察菌落特征,可以分別混合菌缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)操作較麻煩,平板不干燥效果不好名師點(diǎn)睛運(yùn)用平板劃線法的留意事項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒:①第一次劃線前,避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育基;②再次劃線前,殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使再次劃線的菌種干脆來源于上次劃線的末端;③劃線結(jié)束后,殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避開菌種污染環(huán)境和感染操作者。(2)接種環(huán)灼燒后,要冷卻后才能接觸菌液,以免溫度太高殺死菌種。(3)在進(jìn)行其次次及以后的劃線操作時(shí),要從上一次劃線的末端起先劃線。(4)劃線時(shí)用力要大小適當(dāng),防止用力過大將培育基劃破?？枷蛲黄瓶枷?培育基的制備方法和無菌技術(shù)1.在生物技術(shù)上常利用大腸桿菌制成“工程菌”。某生物小組的同學(xué),利用試驗(yàn)室供應(yīng)的大腸桿菌品系及其他必要材料,對該品系大腸桿菌進(jìn)行了培育。請分析回答下列問題。(1)微生物在生長過程中對各種成分的需求量不同,故制備培育基時(shí)各成分要有合適的。培育基中含有的蛋白胨、淀粉可分別為微生物供應(yīng)。

(2)配制培育基時(shí),各種成分在溶化后分裝前必需調(diào)整,接種前要進(jìn)行處理。

(3)對培育基進(jìn)行滅菌,應(yīng)當(dāng)采納的方法是。

(4)在制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的倒平板操作時(shí),平板冷凝后,應(yīng)將平板放置,這樣做的目的是防止皿蓋上的水珠落入而造成污染。

(5)甲同學(xué)采納平板劃線法接種,獲得單個(gè)菌落后接著篩選,在每次劃線之前都要灼燒,他這樣做的目的是

。

在劃線操作結(jié)束時(shí),仍舊須要灼燒接種環(huán)嗎?,為什么?

。

(6)試驗(yàn)結(jié)束時(shí),運(yùn)用過的培育基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉,這樣做的目的是。

歸納總結(jié)幾種典型微生物的養(yǎng)分及能量來源微生物類型碳源氮源能源大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物硝化細(xì)菌CO2NH3NH3根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物固氮藍(lán)細(xì)菌CO2N2光能考向2酵母菌的純培育2.自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精,科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分別篩選出這種酵母菌。請回答下列相關(guān)問題。(1)獲得純凈培育物的關(guān)鍵是。試驗(yàn)室篩選微生物的原理是

。

制備的酵母菌培育基在進(jìn)行倒平板操作時(shí),為防止培育皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染,應(yīng)。

(2)用平板劃線法純化菌株時(shí),劃線的某個(gè)平板培育后,第一劃線區(qū)域的第一條線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他線上有菌落,造成這種現(xiàn)象的緣由可能是。

(3)若要統(tǒng)計(jì)土樣中的酵母菌數(shù)量,應(yīng)采納稀釋涂布平板法。在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培育基培育一段時(shí)間,這樣做的目的是。

(4)關(guān)于試驗(yàn)室培育和純化酵母菌過程中的部分操作,下列說法正確的是()A.配培育基、倒平板、接種須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.倒平板時(shí),倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C.劃線接種時(shí),灼燒接種環(huán)后馬上進(jìn)行再次劃線D.劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培育箱中培育考點(diǎn)二微生物的選擇培育與計(jì)數(shù)合作探究探究可利用選擇培育基篩選出能夠分解尿素的細(xì)菌幽門螺桿菌感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素,該菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型,能將尿素分解為氮,在細(xì)胞四周形成“氨云”以愛護(hù)細(xì)胞免受胃酸侵蝕。某探討小組在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進(jìn)行分別培育。試驗(yàn)基本步驟如下:配制培育基→滅菌、倒平板→接種→培育→視察請?zhí)接懛治鱿铝袉栴}。(1)培育病人體內(nèi)采集的樣本要用到選擇培育基。利用選擇培育基篩選幽門螺桿菌的原理是什么?尿素能否為幽門螺桿菌供應(yīng)碳源?(2)請嘗試結(jié)合生物、化學(xué)等方面的學(xué)問提出鑒定尿素分解菌的思路。(3)顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法也是一種常用的快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。利用該方法獲得的結(jié)果精確嗎?聯(lián)系所學(xué)學(xué)問嘗試改進(jìn)。名師點(diǎn)睛分別尿素分解菌的操作要點(diǎn)(1)在試驗(yàn)操作中,每個(gè)步驟都要留意無菌操作,以防培育基被污染,影響試驗(yàn)效果。(2)樣品稀釋液的最佳濃度為培育后每個(gè)平板上有30~300個(gè)菌落的濃度。細(xì)菌一般選104、105、106倍稀釋液進(jìn)行培育,放線菌一般選103、104、105倍稀釋液進(jìn)行培育,真菌一般選102、103、104倍稀釋液進(jìn)行培育。(3)為解除非測試因素(培育基)的干擾,試驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培育基進(jìn)行空白比照。(4)每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個(gè)平板,作為重復(fù)試驗(yàn),求其平均值,若其中有菌落數(shù)與其他平板相差很大的,須要對該平板重新制作。考向突破考向1微生物的篩選1.(2024山東萊州一中月考)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,W在培育基中達(dá)到肯定量時(shí)培育基表現(xiàn)為不透亮。某小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌,結(jié)果如圖。下列說法錯(cuò)誤的是()A.透亮圈的形成是因?yàn)閃物質(zhì)被分解B.所用的選擇培育基應(yīng)當(dāng)是以物質(zhì)W為唯一氮源C.甲菌落中的細(xì)菌可能是利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈碊.乙菌落中的細(xì)菌都能降解W,不須要進(jìn)一步純化歸納總結(jié)選擇培育基四種常見制備方法或?qū)嵗枷?微生物的計(jì)數(shù)2.(2024江蘇)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)探討。請回答下列問題。(1)常規(guī)微生物試驗(yàn)中,下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是(填編號(hào))。

編號(hào)①②③④物品培育基接種環(huán)培育皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)后,獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培育基上,其中10倍稀釋的菌懸液培育后平均長出了46個(gè)酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌個(gè)。

(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶實(shí)力,對分別所得的菌株,采納射線輻照進(jìn)行育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以為唯一碳源的固體培育基上,培育一段時(shí)間后,依據(jù)菌落直徑大小進(jìn)行初篩,選擇直徑的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。

(4)在處理含油廢水的同時(shí),可獲得單細(xì)胞蛋白,實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能,進(jìn)行了培育探討,結(jié)果如上圖。據(jù)圖分析,應(yīng)選擇菌株進(jìn)行后續(xù)相關(guān)探討,理由是

。

第2課時(shí)微生物的培育技術(shù)及應(yīng)用必備學(xué)問·固本夯基一、1.養(yǎng)分物質(zhì)生長繁殖2.水、碳源、氮源pH特別養(yǎng)分物質(zhì)3.液體合成鑒別二、1.雜菌污染2.化學(xué)藥物消毒干熱滅菌濕熱滅菌外來雜菌三、1.配制培育基接種分別2.(1)丙→乙→甲→丁(2)灼燒滅菌(3)培育基冷卻凝固3.連續(xù)劃線稀釋分散單菌落灼燒冷卻打開一條縫隙三至五末端第一次4.未接種28四、1.生存環(huán)境生長抑制或阻擋2.9等比0.1冷卻3.(1)稀釋涂布平板法顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法稀釋涂布平板法(2)稀釋度活菌(3)30~300少菌落【概念檢測】1.(1)√(2)√(3)×2.(1)×(2)×(3)×(4)√3.(1)×(2)×(3)√(4)×(5)√【教材拓展】1.提示要在富含纖維素的環(huán)境中找尋。由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對較高,因此從這種環(huán)境中獲得目的微生物的概率要高于一般環(huán)境。2.提示土壤取樣→選擇培育→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上→選擇產(chǎn)生透亮圈的菌落。3.提示認(rèn)同。運(yùn)用其次種方法有兩個(gè)明顯缺點(diǎn),①產(chǎn)生淀粉酶的微生物也產(chǎn)生模糊透亮圈,②有些微生物能降解色素,形成明顯的透亮圈,所以依據(jù)透亮圈的狀況獲得的纖維素分解菌的純度不是100%。核心考點(diǎn)·實(shí)力提升考點(diǎn)一【合作探究】探究1(1)提示Ⅰ號(hào)培育基中供應(yīng)氮源的是牛肉膏、蛋白胨;Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是X。(2)提示從物理狀態(tài)分析,三個(gè)培育基不含凝固劑(如瓊脂)、呈液體狀態(tài),所以屬于液體培育基。在液體培育基中加入瓊脂后制成的瓊脂固體培育基,是試驗(yàn)室中最常用的培育基之一。(3)提示不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖,因此不能降解X的細(xì)菌比例下降;Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基屬于選擇培育基。探究2(1)提示二者的原理相同,都是使微生物的蛋白質(zhì)變性,借此殺死微生物;實(shí)質(zhì)不同,滅菌可以殺死物體內(nèi)外的全部微生物(包括芽孢和孢子),而消毒僅殺死部分微生物。(2)提示濕熱滅菌效果好。蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要擔(dān)當(dāng)者,要?dú)⑺牢⑸?首先要破壞蛋白質(zhì);加熱可使蛋白質(zhì)變性凝固,蛋白質(zhì)的含水量越大,加熱時(shí)就越易凝固,因此濕熱滅菌效果好。(3)提示在達(dá)到消毒目的的同時(shí),養(yǎng)分物質(zhì)損失較少。探究3(1)提示獲得圖A效果的接種方法為稀釋涂布平板法,獲得圖B效果的接種方法為平板劃線法。(2)提示最可能的緣由是菌液濃度過高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌;實(shí)行的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。(3)提示火焰旁邊存在著無菌區(qū)域。須要灼燒6次。【考向突破】1.答案(1)濃度和比例氮源和碳源、碳源(2)pH滅菌(3)高壓蒸汽滅菌(4)倒過來培育基(5)接種環(huán)殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種須要防止接種環(huán)上殘留的菌種對環(huán)境造成污染或感染操作者(6)防止污染環(huán)境解析(1)培育基中各成分要有合適的濃度和比例,保證微生物既有足夠的養(yǎng)分,又不會(huì)因外界養(yǎng)分物質(zhì)濃度過大而失水。淀粉供應(yīng)碳源,而蛋白胨含C、N等元素,既能供應(yīng)碳源,又能供應(yīng)氮源。(2)各種成分溶化后分裝前要調(diào)整pH,接種前對培育基滅菌,防止雜菌污染。(3)培育基滅菌用高壓蒸汽滅菌法。(4)倒平板時(shí),平板冷凝后應(yīng)倒置,否則皿蓋上的水珠會(huì)落入培育基造成污染。(5)每次劃線前都要灼燒接種環(huán),將上次劃線殘留的菌種殺死,使細(xì)菌盡快分散成單個(gè)。操作結(jié)束后灼燒接種環(huán)是為了防止殘留的菌種污染環(huán)境或感染操作者。(6)運(yùn)用過的培育基要徹底滅菌后再倒掉,否則培育基中的微生物會(huì)污染環(huán)境。2.答案(1)防止外來雜菌污染供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件,同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長將平板倒置(2)接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端起先(3)檢測培育基平板滅菌是否合格(4)D解析(1)獲得微生物純凈培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染。試驗(yàn)室篩選微生物的原理是供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件,同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長。制備的酵母菌培育基在進(jìn)行倒平板操作時(shí),為防止培育皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染,應(yīng)將平板倒置。(2)在其次次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端起先劃線,這樣做的目的是將聚集的菌種逐步削減以獲得單個(gè)菌落。劃線的某個(gè)平板培育后,第一劃線區(qū)域的第一條劃線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落,造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端起先。(3)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法,其中只有稀釋涂布平板法可以對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培育基先行培育一段時(shí)間,這樣做的目的是檢測培育基平板滅菌是否合格。(4)配培育基不須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,A項(xiàng)錯(cuò)誤。倒平板時(shí),應(yīng)馬上蓋上培育皿的皿蓋,B項(xiàng)錯(cuò)誤。劃線接種時(shí),灼燒接種環(huán)冷卻后進(jìn)行再次劃線,C項(xiàng)錯(cuò)誤。劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培育箱中培育,D項(xiàng)正確?？键c(diǎn)二【合作探究】探究(1)提示分別分解尿素的細(xì)菌的培育基中以尿素為唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖,從而受到抑制,所以用此培育基就能夠選擇出幽門螺桿菌。尿素被幽門螺桿菌分解成NH3和CO2,幽門螺桿菌的代謝類型是異養(yǎng)型,CO2不能被利用,因此尿素