2023-2024學(xué)年福建省福州市高二下學(xué)期期末聯(lián)考生物試題（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1福建省福州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試題第Ⅰ卷（選擇題）一、選擇題（每小題只有一個(gè)正確的選項(xiàng)，1—12題每題2分，13—16每題4分，共40分）1.人類(lèi)利用微生物發(fā)酵制作食品已經(jīng)有幾千年的歷史。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.釀造米酒的過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸B.酸奶制作過(guò)程中先通氣后密封，可以促進(jìn)乳酸菌繁殖C.果醋發(fā)酵過(guò)程中打開(kāi)發(fā)酵瓶主要是為了排出產(chǎn)生的CO2D.泡菜制作過(guò)程中，發(fā)酵罐和蔬菜洗凈后用酒精消毒30秒〖答案〗A【詳析】A、釀造米酒的過(guò)程中，酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，后進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，A正確；B、酸奶制作過(guò)程中用到的菌種是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，因此，酸奶制作過(guò)程中不需要通氣，而需要密封，B錯(cuò)誤；C、醋酸菌是好氧菌，果醋發(fā)酵過(guò)程中打開(kāi)發(fā)酵瓶主要是為醋酸菌提供O2，C錯(cuò)誤；D、泡菜腌制過(guò)程中，發(fā)酵罐可以用70%的酒精消毒，但蔬菜洗凈后不需要用酒精消毒，只需要晾干即可，D錯(cuò)誤。故選A。2.青霉菌的部分代謝途徑如圖所示。青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中遇到兩個(gè)問(wèn)題，首先青霉素發(fā)酵需要大量氧氣，其次發(fā)酵過(guò)程中總會(huì)產(chǎn)生頭孢霉素、下列敘述不正確的是（）A.將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對(duì)氧的吸收和利用率B.發(fā)酵過(guò)程中，環(huán)境條件變化會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程C.菌種選育時(shí)，敲除青霉菌中控制酶B合成的基因可使其只產(chǎn)青霉素D.由于青霉素、頭孢霉素具有抗菌作用，通入發(fā)酵罐中的空氣無(wú)需滅菌〖答案〗D〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過(guò)現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對(duì)人類(lèi)有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配置、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵過(guò)程一般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡(jiǎn)單、污染小，反應(yīng)專(zhuān)一性強(qiáng)，因而可以得到較為專(zhuān)一的產(chǎn)物。【詳析】A、青霉菌是需氧型微生物，血紅蛋白能運(yùn)輸氧氣，將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對(duì)氧的吸收和利用率，A正確；B、微生物的生長(zhǎng)繁殖需要適宜的溫度、pH和溶解氧等培養(yǎng)條件，發(fā)酵過(guò)程中，環(huán)境條件變化會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程，B正確；C、結(jié)合圖示可以看出，若能將控制酶B合成的基因敲除，則青霉菌能大量生產(chǎn)青霉素，因此選育菌種時(shí)，可對(duì)青霉菌株中控制酶B合成的基因進(jìn)行敲除，使其只產(chǎn)青霉素，C正確；D、青霉素、頭孢霉素本身具有殺菌作用，但不能殺滅所有的微生物，故發(fā)酵罐需要嚴(yán)格滅菌，D錯(cuò)誤。故選D。3.“太空玫瑰”直徑與大拇指寬度相當(dāng)，花期長(zhǎng)，最初的種子搭載神舟四號(hào)飛船進(jìn)入太空，返回地球后經(jīng)過(guò)多年的選育，利用植物組織培養(yǎng)等技術(shù)培育而成。下列敘述正確的是（）A.太空中的宇宙射線輻射，微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因重組B.接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，在同一個(gè)錐形瓶?jī)?nèi)完成C.外植體脫分化和再分化時(shí)均存在基因的選擇性表達(dá)D.以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型相同〖答案〗C【詳析】A、太空中的宇宙射線輻射、微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因突變，A錯(cuò)誤；B、接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，該過(guò)程中所需要的培養(yǎng)基中的成分和激素等含量不同，故不能在同一個(gè)錐形瓶?jī)?nèi)完成，B錯(cuò)誤；C、外植體的脫分化和再分化過(guò)程均存在基因的選擇性表達(dá)過(guò)程，C正確；D、葉片是體細(xì)胞，花藥里的花粉是生殖細(xì)胞，故以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型一般不同，D錯(cuò)誤。故選C。4.有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一種方法。將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋?zhuān)罱K調(diào)整密度為5個(gè)/mL：將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL；24h后在顯微鏡下挑選符合要求的孔，補(bǔ)加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)液中需含有蔗糖、血清等物質(zhì)B.96孔板需置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理D.24h后觀察，只含有一個(gè)細(xì)胞的孔符合要求〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可得單克隆抗體?！驹斘觥緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)添加的有機(jī)碳源是葡萄糖，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，B正確；C、貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理以獲得單個(gè)細(xì)胞，C正確；D、24h后觀察，只含有一個(gè)細(xì)胞的孔符合要求，因?yàn)橹挥羞@樣才能獲得單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的抗體，進(jìn)而可以篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。5.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞B.制備單克隆抗體時(shí)，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出能產(chǎn)所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.培育耐鹽植株時(shí)，檢測(cè)耐鹽基因表達(dá)的蛋白質(zhì)活性，即可篩選耐鹽植株D.在臨床試管嬰兒技術(shù)中，取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)診斷篩選出所需的胚胎〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【詳析】A、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因?yàn)橥N融合細(xì)胞也會(huì)再生出細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、制備單克隆抗體時(shí)，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，用抗體篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、培育耐鹽植株時(shí)，需要先將試管苗移植到含有一定鹽分的培養(yǎng)基中，逐漸適應(yīng)鹽分環(huán)境，再逐步增加鹽分濃度，最終篩選出耐鹽植株，C錯(cuò)誤；D、胚胎植入前篩查能夠避免嚴(yán)重遺傳疾病的患兒出生，在臨床試管嬰兒術(shù)中，需利用遺傳學(xué)診斷的方法篩選出所需的胚胎進(jìn)行移植，該過(guò)程中通常用囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞作為遺傳學(xué)診斷篩選的材料，D正確。故選D。6.卡鉑能夠抑制DNA復(fù)制，為廣譜抗腫瘤藥，通過(guò)靜脈注射給藥。卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會(huì)促進(jìn)其分解。相關(guān)實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路如下圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）A.本實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑試劑有無(wú)、DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)B.癌癥患者注射的卡鉑試劑溶于生理鹽水，以維持內(nèi)環(huán)境滲透壓C.本實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果為①與④組數(shù)據(jù)接近，②與③組數(shù)據(jù)接近D.培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖〖答案〗A〖祥解〗題意分析，本實(shí)驗(yàn)的目的是研究卡鉑引發(fā)癌細(xì)胞數(shù)量減少的具體機(jī)理；在實(shí)驗(yàn)思路中，用DNA復(fù)制抑制劑和卡鉑甘露醇溶液添加到宮頸癌細(xì)胞懸液中，研究它們單獨(dú)和共同作用下宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，因此該實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑試劑和DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)，因變量是宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，藥劑濃度、Cl-和其他影響細(xì)胞代謝的因素為無(wú)關(guān)變?！驹斘觥緼、結(jié)合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑、DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)，A正確；B、卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會(huì)促進(jìn)其分解，因此，癌癥患者注射的卡鉑試劑不能溶于生理鹽水，否則會(huì)影響效果，B錯(cuò)誤；C、①組不會(huì)抑制DNA的復(fù)制，④組會(huì)抑制DNA的復(fù)制，所以預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果不相近，C錯(cuò)誤；D、培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特征，不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。故選A。7.以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)，以下敘述正確的是（）A.實(shí)驗(yàn)必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.DNA可溶于冷酒精溶液C.DNA在2mol/L的NaCl溶液中析出D.DNA經(jīng)沸水浴與二苯胺反應(yīng)后呈現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D【詳析】A、細(xì)胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，B錯(cuò)誤；C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，故DNA不能在2mol/L的NaCl溶液中析出，C錯(cuò)誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選D。8.限制酶A與限制酶B識(shí)別的序列分別為：—CATG↓—和—G↓GATCC—（箭頭表示切割位點(diǎn)）。下列敘述正確的是（）A.用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有1個(gè)B.微生物中的限制酶可破壞入侵的RNA病毒核酸C.限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端之間不能連接D.DNA連接酶催化黏性末端間形成氫鍵〖答案〗C〖祥解〗限制酶：（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)；（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。【詳析】A、DNA是雙鏈，限制酶能識(shí)別DNA分子特定序列并在特定位點(diǎn)切割，用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)，A錯(cuò)誤；B、微生物中的限制酶可破壞入侵的DNA病毒核酸，B錯(cuò)誤；C、限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端不同，不能連接，C正確；D、DNA連接酶催化黏性末端間形成磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選C。9.在重組DNA技術(shù)中，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，通常是利用質(zhì)粒作為載體。下列關(guān)于質(zhì)粒的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.質(zhì)粒是獨(dú)立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子B.質(zhì)粒上必須具有一個(gè)至多個(gè)限制酶位點(diǎn)，否則無(wú)法自我復(fù)制C.有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制D.質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA的篩選〖答案〗B〖祥解〗作為運(yùn)載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)?！驹斘觥緼、質(zhì)粒是獨(dú)立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子，天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)人工改造的，A正確；B、質(zhì)粒一般有一至多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，以便于目的基因插入，B錯(cuò)誤；C、有的質(zhì)粒可以整合到受體DNA中，隨受體DNA同步復(fù)制，正因?yàn)槿绱速|(zhì)?？梢宰鳛槟康幕虻倪\(yùn)載工具，便于目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存，C正確；D、載體上需要具有某些標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，常見(jiàn)的標(biāo)記基因有抗生素抗性基因等，D正確。故選B。10.抗蟲(chóng)作物對(duì)害蟲(chóng)的生存產(chǎn)生壓力，會(huì)使害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲(chóng)效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉保持抗蟲(chóng)效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會(huì)采取一系列措施。以下措施不能實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A.在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子B.制備抗蟲(chóng)棉時(shí)將兩種抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁ㄖ蠧.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植D.單獨(dú)種植抗蟲(chóng)棉，并擴(kuò)大抗蟲(chóng)棉種植面積〖答案〗D〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！驹斘觥緼、在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子，則常規(guī)種子長(zhǎng)成的普通植株能敏感性（不抗蟲(chóng)）個(gè)體提供生存空間，增加與抗蟲(chóng)個(gè)體的競(jìng)爭(zhēng)，避免抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，A不符合題意；B、制備抗蟲(chóng)棉時(shí)將兩種抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁ㄖ?，則兩種抗蟲(chóng)基因相互作用，能在一定程度上減緩害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高的趨勢(shì)，B不符合題意；C、將轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植可以使敏感型個(gè)體存活，敏感性個(gè)體能與抗性強(qiáng)的棉鈴蟲(chóng)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，不會(huì)導(dǎo)致抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，C不符合題意；D、單獨(dú)種植抗蟲(chóng)棉，并擴(kuò)大抗蟲(chóng)棉種植面積會(huì)進(jìn)一步選擇并保存抗性強(qiáng)的個(gè)體，導(dǎo)致敏感性個(gè)體死亡，從而加快害蟲(chóng)種群抗性基因頻率提高，不利于抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，D符合題意。故選D。11.我國(guó)科研人員將寒帶地區(qū)海魚(yú)中的抗凍基因轉(zhuǎn)入千禧果（番茄品種）細(xì)胞中，成功培育出抗凍千禧果。下圖為培育過(guò)程使用的Ti質(zhì)粒示意圖，Vir區(qū)的基因活化能促進(jìn)T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶ⅢB.利用PCR從海魚(yú)基因組中擴(kuò)增抗凍基因需要添加一對(duì)特異性引物C.用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的受體細(xì)胞D.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：利用熱變性的原理，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、限制酶Ⅰ會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選，限制酶Ⅱ有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，會(huì)影響目的基因連接在正確的位置，因此選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶Ⅲ，A正確；B、利用PCR從海魚(yú)基因組中擴(kuò)增抗凍基因需要添加一對(duì)特異性引物，目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，B正確；C、由于四環(huán)素基因在T-DNA片段中，該基因會(huì)隨著目的基因進(jìn)入到受體細(xì)胞中，因此，要用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基篩選含抗凍基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、基因的表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，故可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量，D正確。故選C。12.美國(guó)科學(xué)家將螢火蟲(chóng)的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，長(zhǎng)成的植物通體光亮，堪稱(chēng)自然界的奇跡。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.基因工程的三大工具是限制性?xún)?nèi)切核酸酶、DNA聚合酶、運(yùn)載體B.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等C.熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時(shí)可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.該項(xiàng)成果說(shuō)明螢火蟲(chóng)與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的關(guān)鍵步驟，基因工程中，一個(gè)完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始。終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選?！驹斘觥緼、基因工程的原理是基因重組，基因工程需要用到限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體等工具，A錯(cuò)誤；B、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，一個(gè)完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子及目的基因、終止子和標(biāo)記基因，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，故熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時(shí)可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、將螢火蟲(chóng)的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，說(shuō)明螢火蟲(chóng)與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源，D正確。故選A。13.草甘膦殺死雜草的同時(shí)也能殺死農(nóng)作物。草甘膦可與植物體內(nèi)的PEP競(jìng)爭(zhēng)EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響細(xì)胞正常代謝?？茖W(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.可通過(guò)轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對(duì)含量來(lái)起作用B.PCR擴(kuò)增基因時(shí)每一輪循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次升溫處理C.基因表達(dá)載體中的終止子位于目的基因下游，是翻譯停止的信號(hào)D.將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可避免基因向近緣雜草擴(kuò)散〖答案〗C〖祥解〗題意分析，草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時(shí)也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝?！驹斘觥緼、外源EPSP基因可以指導(dǎo)EPSP合酶的合成，所以可通過(guò)轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對(duì)含量來(lái)起作用，A正確；B、體外擴(kuò)增GR79基因時(shí)每一輪循環(huán)包括高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸過(guò)程，可見(jiàn)每一個(gè)循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次目的不同的升溫處理，B正確；C、基因表達(dá)載體中的終止子是轉(zhuǎn)錄停止的信號(hào)，C錯(cuò)誤；D、將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可有效避免GR79基因向近緣雜草擴(kuò)散，這是因?yàn)閿U(kuò)散是通過(guò)花粉傳播，而花粉的精子中幾乎不攜帶質(zhì)基因，D正確。故選C。14.我國(guó)科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，利用富集培養(yǎng)基獲得含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，經(jīng)純培養(yǎng)后進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）A.制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，滅菌后調(diào)整培養(yǎng)基pHB.對(duì)擬桿菌的純培養(yǎng)物采用平板劃線法可獲得如圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果C.據(jù)圖分析，擬桿菌菌株在以纖維素為氮源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好D.分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性〖答案〗D【詳析】A、為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作，制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，防止調(diào)pH時(shí)造成雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、平板劃線法可分離菌種但不能用于計(jì)數(shù)，圖示接種方法能夠?qū)ξ⑸镞M(jìn)行計(jì)數(shù)，屬于稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；C、分析圖中曲線可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源（纖維素的元素組成是CHO，不能作為氮源）時(shí)生長(zhǎng)狀況最好，C錯(cuò)誤；D、深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存，或者只能在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活，故在沉積物樣品中分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性，D正確。故選D。15.CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA使其形成兩個(gè)末端，如圖所示。這兩個(gè)末端通過(guò)“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)，在細(xì)胞中加入大量用于修復(fù)的模板，可以將需要改變的堿基序列引入到基因組中，但該技術(shù)有時(shí)也存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B.對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，要使用不同的Cas9蛋白C.若只替換基因的一個(gè)堿基對(duì)，基因表達(dá)產(chǎn)物最多改變一個(gè)氨基酸D.若目標(biāo)DNA存在多個(gè)與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶〖答案〗D〖祥解〗題意分析，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過(guò)程中容易隨機(jī)引起一些堿基對(duì)的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變?！驹斘觥緼、Cas9蛋白識(shí)別并切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵--磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；B、在對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)不同基因的編輯，B錯(cuò)誤；C、若只替換基因的一個(gè)堿基對(duì)，一般情況下基因表達(dá)產(chǎn)物只改變一個(gè)氨基酸，也可能堿基的替換引起終止密碼提前出現(xiàn)，則會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)中更多的氨基酸缺失，C錯(cuò)誤；D、若目標(biāo)DNA存在多個(gè)與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶，且能夠與向?qū)NA配對(duì)的序列越多，脫靶的幾率越高，D正確。故選D。16.中國(guó)科學(xué)院團(tuán)隊(duì)對(duì)雌性獼猴進(jìn)行克隆，成功獲得“中中”和“華華”兩姐妹，突破了現(xiàn)有技術(shù)無(wú)法用體細(xì)胞克隆非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的世界難題。如圖為“中中”和“華華”培育的流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.圖中的卵子實(shí)際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞B.②過(guò)程是動(dòng)物胚胎的體外培養(yǎng)過(guò)程，需無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境C.③過(guò)程的胚胎受體需要用促性腺激素超數(shù)排卵處理D.中中、華華的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：圖示為“中中”和“華華”培育的流程，其中①為核移植過(guò)程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程，③表示胚胎移植過(guò)程?！驹斘觥緼、圖中的卵子實(shí)際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞，因?yàn)槿ズ说穆鸭?xì)胞內(nèi)存在激活細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)，A正確；B、②過(guò)程是動(dòng)物胚胎的早期培養(yǎng)過(guò)程，需無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，B正確；C、③過(guò)程的胚胎受體需要用雌激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，使其處于相同的生理狀態(tài)，C錯(cuò)誤；D、中中、華華的細(xì)胞核基因來(lái)自成纖維細(xì)胞，因此它們的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定，D正確。故選C。第Ⅱ卷（非選擇題）二、非選擇題（6大題，共60分）17.魚(yú)茶味酸而微咸，甘香可口，是海南黎族的一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品。其制作方法是：將生魚(yú)開(kāi)膛洗凈，去頭去尾，加鹽、姜、蒜等處理后，拌入煮熟的米飯，在特定條件下發(fā)酵一段時(shí)間。已知魚(yú)茶的發(fā)酵菌群主要是乳酸菌。回答下列有關(guān)問(wèn)題：（1）寫(xiě)出乳酸菌分解葡萄糖產(chǎn)生乳酸的反應(yīng)簡(jiǎn)式：__________________。根據(jù)乳酸菌的代謝特點(diǎn)，制作魚(yú)茶時(shí)發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)______（填“打開(kāi)”或“關(guān)閉”）。（2）不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚(yú)混合并攪拌，原因是__________________。（3）圖1是某生物科研小組繪制的魚(yú)茶發(fā)酵過(guò)程中各菌種數(shù)量及發(fā)酵液pH的變化曲線。①魚(yú)茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降與溶液中______（寫(xiě)出兩種）等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，原因是圖1中__________________等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌種數(shù)量時(shí)，發(fā)現(xiàn)其中1個(gè)平板的菌落分布如圖2所示。該平板不能用于計(jì)數(shù)，原因是________________________。與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，推測(cè)該平板接種時(shí)可能的操作失誤是____________?！即鸢浮剑?）①.②.關(guān)閉（2）溫度過(guò)高會(huì)殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗（3）①.乳酸、醋酸、二氧化碳②.醋酸菌、酵母菌③.部分菌落過(guò)于密集，菌落相互連接，無(wú)法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)④.涂布不均勻〖祥解〗乳酸菌，代謝類(lèi)型是異養(yǎng)厭氧型，在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟茄趸癁槿樗帷！拘?wèn)1詳析】乳酸菌在無(wú)氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，其反應(yīng)簡(jiǎn)式為：C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量。乳酸菌是厭氧菌，制作魚(yú)茶時(shí)發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)關(guān)閉?！拘?wèn)2詳析】高溫會(huì)殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗，故不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚(yú)混合并攪拌，應(yīng)自然冷卻后再混勻裝入壇中?！拘?wèn)3詳析】①魚(yú)茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降，說(shuō)明酸性物質(zhì)增多，這主要與發(fā)酵所產(chǎn)生的乳酸、醋酸、二氧化碳等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，這主要與其生存所需要的氧氣含量有關(guān)，該時(shí)期醋酸菌、酵母菌等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②圖2所示平板不能用于計(jì)數(shù)，這是由于部分菌落過(guò)于密集，菌落相互連接，無(wú)法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，而與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，據(jù)此可推知該平板接種時(shí)涂布不均勻，導(dǎo)致菌落分布不均勻。18.油菜是重要的經(jīng)濟(jì)作物，用黑芥和蕓薹為材料培育芥菜型油菜的方法如圖所示，不考慮發(fā)生其他變異?；卮鹣铝袉?wèn)題：注：A、B分別表示不同植物的一個(gè)染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。（1）方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為_(kāi)_____，可通過(guò)物理方法______人工誘導(dǎo)______，得到芥菜型油菜。（2）由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：__________________。（3）方法2應(yīng)用______技術(shù)，打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用______處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為_(kāi)_____。（4）步驟②可通過(guò)______法（寫(xiě)出一種），促進(jìn)甲、乙融合。該過(guò)程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因?yàn)椴襟E②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)，從而篩選出雜種細(xì)胞，理由是______?！即鸢浮剑?）①.18②.低溫處理③.染色體加倍（2）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜（3）①.植物體細(xì)胞雜交②.纖維素酶、果膠酶③.黑芥原生質(zhì)體（4）①.電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等②.未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，不同類(lèi)型細(xì)胞的染色體數(shù)量存在差異〖祥解〗秋水仙素作用的機(jī)理：人工誘導(dǎo)多倍體的方法很多，如低溫處理，目前最常用且最有效的方法是用秋水仙素來(lái)處理萌發(fā)的種子或幼苗，當(dāng)秋水仙素作用于正在分裂的細(xì)胞時(shí)，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂，將來(lái)可能發(fā)育成多倍體植株?！拘?wèn)1詳析】A、B分別表示不同植物的一個(gè)染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。因此，方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為18，可通過(guò)物理方法如低溫人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，得到芥菜型油菜，這是因?yàn)榈蜏貤l件下會(huì)抑制紡錘體的形成，因而會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍，進(jìn)而獲得芥菜型油菜，其中染色體數(shù)目為36。【小問(wèn)2詳析】由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，該過(guò)程的原理是植物細(xì)胞的全能性，所用得勁激素是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。具體實(shí)驗(yàn)思路為：以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜。【小問(wèn)3詳析】方法2應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動(dòng)性，該方法打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用纖維素酶、果膠酶處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為黑芥原生質(zhì)體，乙為蕓薹體細(xì)胞原生質(zhì)體。【小問(wèn)4詳析】步驟②可通過(guò)電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等法促進(jìn)甲、乙融合獲得雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是融合成功的關(guān)鍵。該過(guò)程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因?yàn)椴襟E②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞。可通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)，從而篩選出雜種細(xì)胞，該方法的原理是利用不同融合細(xì)胞中染色體不同實(shí)現(xiàn)的，即未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，據(jù)此做出判斷。19.為降低人乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體藥物偶聯(lián)物（ADC），過(guò)程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，向小鼠注射取自______的特定抗原，其目的是____________。（2）步驟①是指______，實(shí)現(xiàn)該過(guò)程依賴(lài)于細(xì)胞膜具有______的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（3）經(jīng)過(guò)步驟②、③篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)是__________________。（4）步驟④將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過(guò)接頭結(jié)合在一起，形成____________，實(shí)現(xiàn)對(duì)乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比，該治療方法具有的明顯優(yōu)點(diǎn)是________________________?！即鸢浮剑?）①.人乳腺癌細(xì)胞②.獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的/與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合的）抗體的B淋巴細(xì)胞（2）①.（動(dòng)物）細(xì)胞的融合②.一定的流動(dòng)性（3）能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體（4）①.生物導(dǎo)彈/抗體藥物偶聯(lián)物/ADC②.單克隆抗體能使藥物精準(zhǔn)地作用于乳腺癌（靶）細(xì)胞，避免其他細(xì)胞受損〖祥解〗由于單克隆抗體的特異性強(qiáng)，能特異性識(shí)別抗原，因此可以把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、藥物等相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”。借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，在原位殺死癌細(xì)胞。療效高，副作用小，位置準(zhǔn)確?！拘?wèn)1詳析】向小鼠注射特定的抗原應(yīng)取自人的乳腺癌細(xì)胞，目的是使小鼠體內(nèi)能產(chǎn)生獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的）抗體的B淋巴細(xì)胞。【小問(wèn)2詳析】步驟①是指動(dòng)物細(xì)胞的融合，其依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。【小問(wèn)3詳析】步驟②是指篩選雜交瘤細(xì)胞，步驟③是進(jìn)行第二次篩選——抗體檢測(cè)，篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)是能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體?！拘?wèn)4詳析】步驟④是指將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過(guò)接頭結(jié)合在一起，從而形成ADC，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比較，ADC能降低乳腺癌治療藥物的副作用，原因是單克隆抗體能使藥物精準(zhǔn)地作用于乳腺癌（靶）細(xì)胞，避免對(duì)其他細(xì)胞造成受損。20.番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類(lèi)單鏈環(huán)狀DNA病毒，能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測(cè)某番茄幼苗是否感染該病毒，實(shí)驗(yàn)人員操作過(guò)程如圖所示。完成下列問(wèn)題：（1）PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為_(kāi)_____退火、延伸三步。（2）步驟③中使用的酶是______，步驟②中的樣本DNA在步驟③中作為_(kāi)_____。步驟③需加入根據(jù)______的堿基序列設(shè)計(jì)的引物。（3）PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳后的結(jié)果如下：①實(shí)驗(yàn)中，DNAmarker是一組已知長(zhǎng)度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，DNAmarker的作用是作為_(kāi)_____的參照物。已知在該緩沖液中DNA帶負(fù)電，圖中代表正極的電極是______。②健康番茄幼苗的DNA是陰性對(duì)照組，______是陽(yáng)性對(duì)照組。由電泳圖中條帶情況可知：該樣品植株______（填“感染”或“未感染”）病毒?！即鸢浮剑?）變性（2）①.Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）②.PCR的模板③.TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA（3）①.指示DNA分子大?、?電極2③.TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA④.感染〖祥解〗PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制。【小問(wèn)1詳析】PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為變性、退火和延伸三步。【小問(wèn)2詳析】步驟③是指利用PCR擴(kuò)增DNA片段，需要使用耐高溫的DNA聚合酶，步驟②中的樣本DNA在PCR擴(kuò)增中充當(dāng)模板。結(jié)合題干信息，在步驟③中需加入引物，該引物應(yīng)是根據(jù)TYLCV（番茄黃化曲葉病毒）的DNA設(shè)計(jì)的。【小問(wèn)3詳析】①DNAmarker是一組已知長(zhǎng)度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，起參照作用，能大致估算目的DNA片段的大小。依據(jù)條帶位置，已知在該緩沖液中DNA帶負(fù)電，則圖中代表正極的電極是電極2。②健康番茄幼苗的DNA中不會(huì)含有黃化曲葉病毒（TYLCV）的DNA，以此作為陰性對(duì)照組，則含有TYLCV的DNA作為陽(yáng)性對(duì)照。依據(jù)電泳條帶比對(duì)可知，該樣品植株含有含有TYLCV的DNA，故該樣品植株感染了病毒。21.金屬硫蛋白（MT）是一類(lèi)廣泛存在于動(dòng)植物中具有金屬結(jié)合能力的蛋白質(zhì)，決定該蛋白質(zhì)合成的基因結(jié)構(gòu)如圖1所示?？蒲腥藛T利用圖2所示質(zhì)粒構(gòu)建棗樹(shù)的MT基因重組DNA分子并導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，獲得對(duì)重金屬鎘（Cd）具有吸附能力和耐受能力的MT工程菌?；卮鹣铝袉?wèn)題：?jiǎn)?dòng)子（注：XhoⅠ、KpnⅠ、PstⅠ為不同限制酶的識(shí)別位點(diǎn)：LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以催化無(wú)色物質(zhì)X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色：amp基因?yàn)榘逼S青霉素抗性基因。）（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增MT基因時(shí)應(yīng)選擇的引物組合是______，并在其5′末端分別添加限制酶______和______的識(shí)別序列。（2）構(gòu)建重組DNA分子：?jiǎn)?dòng)子是_________________識(shí)別并結(jié)合的部位。（3）導(dǎo)入、篩選和鑒定MT工程菌。①將得到的混合物導(dǎo)入到用______處理的大腸桿菌完成轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。②將菌液稀釋并涂布在含____________的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)后，隨機(jī)挑取______色的單菌落可獲得MT工程菌。③欲進(jìn)一步對(duì)MT工程菌進(jìn)行鑒定，可將挑取出的MT工程菌與普通大腸桿菌分別接種至含一定濃度的重金屬鎘的LB液體培養(yǎng)基中，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，適宜時(shí)間后檢測(cè)菌種數(shù)量和培養(yǎng)基中的鎘濃度，預(yù)期結(jié)果為_(kāi)_______________________?！即鸢浮剑?）①.引物Ⅲ和引物Ⅱ②.XhoⅠ③.KpnⅠ（2）RNA聚合酶（3）①.①Ca2+②.X-gal和氨芐青霉素③.白④.與接種普通大腸桿菌相比，接種MT工程菌的培養(yǎng)基中，菌種數(shù)量更高，培養(yǎng)基中的鎘濃度更低【小問(wèn)1詳析】PCR過(guò)程中，引物與模板鏈的3'端結(jié)合，因此應(yīng)當(dāng)選擇引物Ⅱ和引物Ⅲ，這樣才能使DNA聚合酶從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。構(gòu)建目的基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將MT基因的插入到啟動(dòng)子和終止子之間，由于目的基因中含有PstⅠ的識(shí)別序列，若在基因兩側(cè)添加PstⅠ識(shí)別序列，將來(lái)對(duì)MT基因進(jìn)行切割時(shí)會(huì)破壞目的基因，同時(shí)為了保證MT基因正向連接到質(zhì)粒上，應(yīng)當(dāng)在MT基因兩側(cè)連上不同的限制酶識(shí)別序列，故添加的限制酶序列分別是XhoⅠ和KpnⅠ限制酶序列，并且應(yīng)添加在基因的外側(cè)，才能不影響基因的序列，故添加在引物的5'端?！拘?wèn)2詳析】啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出人類(lèi)需要的蛋白質(zhì)?！拘?wèn)3詳析】①大腸桿菌是原核生物，需要Ca2+處理，使其處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，完成將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，即轉(zhuǎn)化過(guò)程。②在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入了空白質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌都可以形成菌落，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌LacZ基因被破壞，不能催化無(wú)色物質(zhì)X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，是白色菌落，故應(yīng)挑取白色單菌落進(jìn)行培養(yǎng)，即篩選受體菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入X-gal和氨芐青霉素這兩種物質(zhì)。③操作獲得的是對(duì)重金屬鎘（Cd)具有吸附能力和耐受能力的MT工程菌，因此欲進(jìn)一步對(duì)MT工程菌進(jìn)行鑒定，可將挑取出的MT工程菌與普通大腸桿菌分別接種到含有(一定濃度的重金屬)鎘的LB液體培養(yǎng)基中，工程菌符合要求的實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)為：與接種普通大腸桿菌相比，接種MT工程菌的培養(yǎng)基中，菌種數(shù)量更高，培養(yǎng)基中的鎘濃度更低。22.水蛭是我國(guó)傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性，蛋白質(zhì)工程流程如圖所示。回答下列問(wèn)題：（1）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，區(qū)別在于基因工程原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以通過(guò)改造或合成______來(lái)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白。（2）圖中物質(zhì)a是______物質(zhì)b是______，在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是________________________。（3）研究者運(yùn)用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，構(gòu)建水蛭肽嵌合蛋白（TNHH），以大鼠為材料研究發(fā)現(xiàn)TNHH對(duì)腦出血后腦水腫具有一定的治療效果。完善以下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)處理A組B組C組只進(jìn)針，不在腦中注入血液________________________靜脈注射生理鹽水________實(shí)驗(yàn)結(jié)果00001.752.752.371.371.251.621.650.87處理后時(shí)間（h）624721686247216862472168注：實(shí)驗(yàn)結(jié)果為大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分，缺損評(píng)分越高，神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重〖答案〗（1）①.自然界已經(jīng)存在的②.基因（2）①.（具有一定氨基酸序列的）多肽鏈②.mRNA##信使RNA③.密碼子的簡(jiǎn)并性（或一種氨基酸可能有多種密碼子與之對(duì)應(yīng)）（3）①.在腦中注入血液②.在腦中注入血液③.靜脈注射生理鹽水④.靜脈注射TNHH溶液【小問(wèn)1詳析】基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已經(jīng)存在的的蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)工程可通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求?！拘?wèn)2詳析】蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)圖可知，物質(zhì)a是具有一定氨基酸序列的多肽鏈，物質(zhì)b是mRNA。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是密碼子的簡(jiǎn)并性，即一種氨基酸可能有幾個(gè)密碼子?！拘?wèn)3詳析】據(jù)表可知，該實(shí)驗(yàn)是研究TNHH對(duì)腦出血的治療效果，實(shí)驗(yàn)前先制備腦出血模擬鼠，所以①②均在腦中注入血液（適量且等量）。該實(shí)驗(yàn)的自變量是是否使用TNHH和處理時(shí)間，因變量是大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分，結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，③為靜脈注射生理鹽水，A組為空白對(duì)照組，B組為對(duì)照組，④為靜脈注射TNHH溶液，C組為實(shí)驗(yàn)組。福建省福州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試題第Ⅰ卷（選擇題）一、選擇題（每小題只有一個(gè)正確的選項(xiàng)，1—12題每題2分，13—16每題4分，共40分）1.人類(lèi)利用微生物發(fā)酵制作食品已經(jīng)有幾千年的歷史。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.釀造米酒的過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸B.酸奶制作過(guò)程中先通氣后密封，可以促進(jìn)乳酸菌繁殖C.果醋發(fā)酵過(guò)程中打開(kāi)發(fā)酵瓶主要是為了排出產(chǎn)生的CO2D.泡菜制作過(guò)程中，發(fā)酵罐和蔬菜洗凈后用酒精消毒30秒〖答案〗A【詳析】A、釀造米酒的過(guò)程中，酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，后進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，A正確；B、酸奶制作過(guò)程中用到的菌種是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，因此，酸奶制作過(guò)程中不需要通氣，而需要密封，B錯(cuò)誤；C、醋酸菌是好氧菌，果醋發(fā)酵過(guò)程中打開(kāi)發(fā)酵瓶主要是為醋酸菌提供O2，C錯(cuò)誤；D、泡菜腌制過(guò)程中，發(fā)酵罐可以用70%的酒精消毒，但蔬菜洗凈后不需要用酒精消毒，只需要晾干即可，D錯(cuò)誤。故選A。2.青霉菌的部分代謝途徑如圖所示。青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中遇到兩個(gè)問(wèn)題，首先青霉素發(fā)酵需要大量氧氣，其次發(fā)酵過(guò)程中總會(huì)產(chǎn)生頭孢霉素、下列敘述不正確的是（）A.將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對(duì)氧的吸收和利用率B.發(fā)酵過(guò)程中，環(huán)境條件變化會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程C.菌種選育時(shí)，敲除青霉菌中控制酶B合成的基因可使其只產(chǎn)青霉素D.由于青霉素、頭孢霉素具有抗菌作用，通入發(fā)酵罐中的空氣無(wú)需滅菌〖答案〗D〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過(guò)現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對(duì)人類(lèi)有用的產(chǎn)品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配置、滅菌，接種，發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵過(guò)程一般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡(jiǎn)單、污染小，反應(yīng)專(zhuān)一性強(qiáng)，因而可以得到較為專(zhuān)一的產(chǎn)物?！驹斘觥緼、青霉菌是需氧型微生物，血紅蛋白能運(yùn)輸氧氣，將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中有可能提高菌體對(duì)氧的吸收和利用率，A正確；B、微生物的生長(zhǎng)繁殖需要適宜的溫度、pH和溶解氧等培養(yǎng)條件，發(fā)酵過(guò)程中，環(huán)境條件變化會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程，B正確；C、結(jié)合圖示可以看出，若能將控制酶B合成的基因敲除，則青霉菌能大量生產(chǎn)青霉素，因此選育菌種時(shí)，可對(duì)青霉菌株中控制酶B合成的基因進(jìn)行敲除，使其只產(chǎn)青霉素，C正確；D、青霉素、頭孢霉素本身具有殺菌作用，但不能殺滅所有的微生物，故發(fā)酵罐需要嚴(yán)格滅菌，D錯(cuò)誤。故選D。3.“太空玫瑰”直徑與大拇指寬度相當(dāng)，花期長(zhǎng)，最初的種子搭載神舟四號(hào)飛船進(jìn)入太空，返回地球后經(jīng)過(guò)多年的選育，利用植物組織培養(yǎng)等技術(shù)培育而成。下列敘述正確的是（）A.太空中的宇宙射線輻射，微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因重組B.接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，在同一個(gè)錐形瓶?jī)?nèi)完成C.外植體脫分化和再分化時(shí)均存在基因的選擇性表達(dá)D.以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型相同〖答案〗C【詳析】A、太空中的宇宙射線輻射、微重力和弱地磁等因素，可誘發(fā)種子發(fā)生基因突變，A錯(cuò)誤；B、接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→生成試管苗，該過(guò)程中所需要的培養(yǎng)基中的成分和激素等含量不同，故不能在同一個(gè)錐形瓶?jī)?nèi)完成，B錯(cuò)誤；C、外植體的脫分化和再分化過(guò)程均存在基因的選擇性表達(dá)過(guò)程，C正確；D、葉片是體細(xì)胞，花藥里的花粉是生殖細(xì)胞，故以同一植物的葉片或花藥為外植體培育的植株基因型一般不同，D錯(cuò)誤。故選C。4.有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一種方法。將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋?zhuān)罱K調(diào)整密度為5個(gè)/mL：將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL；24h后在顯微鏡下挑選符合要求的孔，補(bǔ)加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)液中需含有蔗糖、血清等物質(zhì)B.96孔板需置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理D.24h后觀察，只含有一個(gè)細(xì)胞的孔符合要求〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，即可得單克隆抗體。【詳析】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)添加的有機(jī)碳源是葡萄糖，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，B正確；C、貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理以獲得單個(gè)細(xì)胞，C正確；D、24h后觀察，只含有一個(gè)細(xì)胞的孔符合要求，因?yàn)橹挥羞@樣才能獲得單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的抗體，進(jìn)而可以篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。5.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁可篩選異種融合細(xì)胞B.制備單克隆抗體時(shí)，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出能產(chǎn)所需抗體的雜交瘤細(xì)胞C.培育耐鹽植株時(shí)，檢測(cè)耐鹽基因表達(dá)的蛋白質(zhì)活性，即可篩選耐鹽植株D.在臨床試管嬰兒技術(shù)中，取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)診斷篩選出所需的胚胎〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【詳析】A、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，觀察是否再生細(xì)胞壁不能用于篩選異種融合細(xì)胞，因?yàn)橥N融合細(xì)胞也會(huì)再生出細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、制備單克隆抗體時(shí)，可利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，用抗體篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、培育耐鹽植株時(shí)，需要先將試管苗移植到含有一定鹽分的培養(yǎng)基中，逐漸適應(yīng)鹽分環(huán)境，再逐步增加鹽分濃度，最終篩選出耐鹽植株，C錯(cuò)誤；D、胚胎植入前篩查能夠避免嚴(yán)重遺傳疾病的患兒出生，在臨床試管嬰兒術(shù)中，需利用遺傳學(xué)診斷的方法篩選出所需的胚胎進(jìn)行移植，該過(guò)程中通常用囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞作為遺傳學(xué)診斷篩選的材料，D正確。故選D。6.卡鉑能夠抑制DNA復(fù)制，為廣譜抗腫瘤藥，通過(guò)靜脈注射給藥。卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會(huì)促進(jìn)其分解。相關(guān)實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路如下圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）A.本實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑試劑有無(wú)、DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)B.癌癥患者注射的卡鉑試劑溶于生理鹽水，以維持內(nèi)環(huán)境滲透壓C.本實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果為①與④組數(shù)據(jù)接近，②與③組數(shù)據(jù)接近D.培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖〖答案〗A〖祥解〗題意分析，本實(shí)驗(yàn)的目的是研究卡鉑引發(fā)癌細(xì)胞數(shù)量減少的具體機(jī)理；在實(shí)驗(yàn)思路中，用DNA復(fù)制抑制劑和卡鉑甘露醇溶液添加到宮頸癌細(xì)胞懸液中，研究它們單獨(dú)和共同作用下宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，因此該實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑試劑和DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)，因變量是宮頸癌細(xì)胞數(shù)量變化，藥劑濃度、Cl-和其他影響細(xì)胞代謝的因素為無(wú)關(guān)變?！驹斘觥緼、結(jié)合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是卡鉑、DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)，A正確；B、卡鉑溶于水，溶液中的Cl-會(huì)促進(jìn)其分解，因此，癌癥患者注射的卡鉑試劑不能溶于生理鹽水，否則會(huì)影響效果，B錯(cuò)誤；C、①組不會(huì)抑制DNA的復(fù)制，④組會(huì)抑制DNA的復(fù)制，所以預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果不相近，C錯(cuò)誤；D、培養(yǎng)液中的宮頸癌細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特征，不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。故選A。7.以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)，以下敘述正確的是（）A.實(shí)驗(yàn)必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.DNA可溶于冷酒精溶液C.DNA在2mol/L的NaCl溶液中析出D.DNA經(jīng)沸水浴與二苯胺反應(yīng)后呈現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D【詳析】A、細(xì)胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，B錯(cuò)誤；C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，故DNA不能在2mol/L的NaCl溶液中析出，C錯(cuò)誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選D。8.限制酶A與限制酶B識(shí)別的序列分別為：—CATG↓—和—G↓GATCC—（箭頭表示切割位點(diǎn)）。下列敘述正確的是（）A.用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有1個(gè)B.微生物中的限制酶可破壞入侵的RNA病毒核酸C.限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端之間不能連接D.DNA連接酶催化黏性末端間形成氫鍵〖答案〗C〖祥解〗限制酶：（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)；（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、DNA是雙鏈，限制酶能識(shí)別DNA分子特定序列并在特定位點(diǎn)切割，用限制酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)，A錯(cuò)誤；B、微生物中的限制酶可破壞入侵的DNA病毒核酸，B錯(cuò)誤；C、限制酶A、B切割DNA產(chǎn)生的末端不同，不能連接，C正確；D、DNA連接酶催化黏性末端間形成磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選C。9.在重組DNA技術(shù)中，將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，通常是利用質(zhì)粒作為載體。下列關(guān)于質(zhì)粒的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.質(zhì)粒是獨(dú)立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子B.質(zhì)粒上必須具有一個(gè)至多個(gè)限制酶位點(diǎn)，否則無(wú)法自我復(fù)制C.有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制D.質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA的篩選〖答案〗B〖祥解〗作為運(yùn)載體必須具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)。【詳析】A、質(zhì)粒是獨(dú)立于真核細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子，天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)人工改造的，A正確；B、質(zhì)粒一般有一至多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)，以便于目的基因插入，B錯(cuò)誤；C、有的質(zhì)?？梢哉系绞荏wDNA中，隨受體DNA同步復(fù)制，正因?yàn)槿绱速|(zhì)?？梢宰鳛槟康幕虻倪\(yùn)載工具，便于目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存，C正確；D、載體上需要具有某些標(biāo)記基因，以便于重組DNA分子的篩選，常見(jiàn)的標(biāo)記基因有抗生素抗性基因等，D正確。故選B。10.抗蟲(chóng)作物對(duì)害蟲(chóng)的生存產(chǎn)生壓力，會(huì)使害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲(chóng)效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉保持抗蟲(chóng)效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會(huì)采取一系列措施。以下措施不能實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A.在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子B.制備抗蟲(chóng)棉時(shí)將兩種抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁ㄖ蠧.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植D.單獨(dú)種植抗蟲(chóng)棉，并擴(kuò)大抗蟲(chóng)棉種植面積〖答案〗D〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！驹斘觥緼、在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子，則常規(guī)種子長(zhǎng)成的普通植株能敏感性（不抗蟲(chóng)）個(gè)體提供生存空間，增加與抗蟲(chóng)個(gè)體的競(jìng)爭(zhēng)，避免抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，A不符合題意；B、制備抗蟲(chóng)棉時(shí)將兩種抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁ㄖ校瑒t兩種抗蟲(chóng)基因相互作用，能在一定程度上減緩害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高的趨勢(shì)，B不符合題意；C、將轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植可以使敏感型個(gè)體存活，敏感性個(gè)體能與抗性強(qiáng)的棉鈴蟲(chóng)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，不會(huì)導(dǎo)致抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，C不符合題意；D、單獨(dú)種植抗蟲(chóng)棉，并擴(kuò)大抗蟲(chóng)棉種植面積會(huì)進(jìn)一步選擇并保存抗性強(qiáng)的個(gè)體，導(dǎo)致敏感性個(gè)體死亡，從而加快害蟲(chóng)種群抗性基因頻率提高，不利于抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，D符合題意。故選D。11.我國(guó)科研人員將寒帶地區(qū)海魚(yú)中的抗凍基因轉(zhuǎn)入千禧果（番茄品種）細(xì)胞中，成功培育出抗凍千禧果。下圖為培育過(guò)程使用的Ti質(zhì)粒示意圖，Vir區(qū)的基因活化能促進(jìn)T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶ⅢB.利用PCR從海魚(yú)基因組中擴(kuò)增抗凍基因需要添加一對(duì)特異性引物C.用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的受體細(xì)胞D.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：利用熱變性的原理，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、限制酶Ⅰ會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因影響后續(xù)的篩選，限制酶Ⅱ有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，會(huì)影響目的基因連接在正確的位置，因此選擇圖示Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選擇限制酶Ⅲ，A正確；B、利用PCR從海魚(yú)基因組中擴(kuò)增抗凍基因需要添加一對(duì)特異性引物，目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，B正確；C、由于四環(huán)素基因在T-DNA片段中，該基因會(huì)隨著目的基因進(jìn)入到受體細(xì)胞中，因此，要用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基篩選含抗凍基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、基因的表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，故可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因在轉(zhuǎn)基因千禧果中的表達(dá)量，D正確。故選C。12.美國(guó)科學(xué)家將螢火蟲(chóng)的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，長(zhǎng)成的植物通體光亮，堪稱(chēng)自然界的奇跡。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.基因工程的三大工具是限制性?xún)?nèi)切核酸酶、DNA聚合酶、運(yùn)載體B.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等C.熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時(shí)可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.該項(xiàng)成果說(shuō)明螢火蟲(chóng)與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的關(guān)鍵步驟，基因工程中，一個(gè)完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始。終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選?！驹斘觥緼、基因工程的原理是基因重組，基因工程需要用到限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體等工具，A錯(cuò)誤；B、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，一個(gè)完整的表達(dá)載體包含復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子及目的基因、終止子和標(biāo)記基因，B正確；C、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，故熒光素基因?qū)霟煵葜参锛?xì)胞時(shí)可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，C正確；D、將螢火蟲(chóng)的熒光素基因轉(zhuǎn)入煙草植物細(xì)胞，獲得高水平的表達(dá)，說(shuō)明螢火蟲(chóng)與煙草植物共用一套密碼子，體現(xiàn)了生物具有共同的起源，D正確。故選A。13.草甘膦殺死雜草的同時(shí)也能殺死農(nóng)作物。草甘膦可與植物體內(nèi)的PEP競(jìng)爭(zhēng)EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響細(xì)胞正常代謝?？茖W(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.可通過(guò)轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對(duì)含量來(lái)起作用B.PCR擴(kuò)增基因時(shí)每一輪循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次升溫處理C.基因表達(dá)載體中的終止子位于目的基因下游，是翻譯停止的信號(hào)D.將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可避免基因向近緣雜草擴(kuò)散〖答案〗C〖祥解〗題意分析，草甘膦是一種非選擇性除草劑，殺死雜草的同時(shí)也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝?！驹斘觥緼、外源EPSP基因可以指導(dǎo)EPSP合酶的合成，所以可通過(guò)轉(zhuǎn)入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相對(duì)含量來(lái)起作用，A正確；B、體外擴(kuò)增GR79基因時(shí)每一輪循環(huán)包括高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸過(guò)程，可見(jiàn)每一個(gè)循環(huán)中均需經(jīng)歷兩次目的不同的升溫處理，B正確；C、基因表達(dá)載體中的終止子是轉(zhuǎn)錄停止的信號(hào)，C錯(cuò)誤；D、將外源基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組中可有效避免GR79基因向近緣雜草擴(kuò)散，這是因?yàn)閿U(kuò)散是通過(guò)花粉傳播，而花粉的精子中幾乎不攜帶質(zhì)基因，D正確。故選C。14.我國(guó)科學(xué)家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，利用富集培養(yǎng)基獲得含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，經(jīng)純培養(yǎng)后進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（）A.制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，滅菌后調(diào)整培養(yǎng)基pHB.對(duì)擬桿菌的純培養(yǎng)物采用平板劃線法可獲得如圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果C.據(jù)圖分析，擬桿菌菌株在以纖維素為氮源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好D.分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性〖答案〗D【詳析】A、為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作，制備富集培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，防止調(diào)pH時(shí)造成雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、平板劃線法可分離菌種但不能用于計(jì)數(shù)，圖示接種方法能夠?qū)ξ⑸镞M(jìn)行計(jì)數(shù)，屬于稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；C、分析圖中曲線可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細(xì)胞數(shù)量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源（纖維素的元素組成是CHO，不能作為氮源）時(shí)生長(zhǎng)狀況最好，C錯(cuò)誤；D、深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質(zhì)才能生存，或者只能在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活，故在沉積物樣品中分離獲得的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫、耐鹽的特性，D正確。故選D。15.CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA使其形成兩個(gè)末端，如圖所示。這兩個(gè)末端通過(guò)“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)，在細(xì)胞中加入大量用于修復(fù)的模板，可以將需要改變的堿基序列引入到基因組中，但該技術(shù)有時(shí)也存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶。下列敘述正確的是（）A.Cas9蛋白能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B.對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，要使用不同的Cas9蛋白C.若只替換基因的一個(gè)堿基對(duì)，基因表達(dá)產(chǎn)物最多改變一個(gè)氨基酸D.若目標(biāo)DNA存在多個(gè)與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶〖答案〗D〖祥解〗題意分析，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過(guò)程中容易隨機(jī)引起一些堿基對(duì)的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變?！驹斘觥緼、Cas9蛋白識(shí)別并切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵--磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；B、在對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)不同基因的編輯，B錯(cuò)誤；C、若只替換基因的一個(gè)堿基對(duì)，一般情況下基因表達(dá)產(chǎn)物只改變一個(gè)氨基酸，也可能堿基的替換引起終止密碼提前出現(xiàn)，則會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)中更多的氨基酸缺失，C錯(cuò)誤；D、若目標(biāo)DNA存在多個(gè)與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列，可能導(dǎo)致基因編輯脫靶，且能夠與向?qū)NA配對(duì)的序列越多，脫靶的幾率越高，D正確。故選D。16.中國(guó)科學(xué)院團(tuán)隊(duì)對(duì)雌性獼猴進(jìn)行克隆，成功獲得“中中”和“華華”兩姐妹，突破了現(xiàn)有技術(shù)無(wú)法用體細(xì)胞克隆非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的世界難題。如圖為“中中”和“華華”培育的流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.圖中的卵子實(shí)際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞B.②過(guò)程是動(dòng)物胚胎的體外培養(yǎng)過(guò)程，需無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境C.③過(guò)程的胚胎受體需要用促性腺激素超數(shù)排卵處理D.中中、華華的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定〖答案〗C〖祥解〗題圖分析：圖示為“中中”和“華華”培育的流程，其中①為核移植過(guò)程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程，③表示胚胎移植過(guò)程。【詳析】A、圖中的卵子實(shí)際上是發(fā)育到MⅡ期的卵母細(xì)胞，因?yàn)槿ズ说穆鸭?xì)胞內(nèi)存在激活細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)，A正確；B、②過(guò)程是動(dòng)物胚胎的早期培養(yǎng)過(guò)程，需無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，B正確；C、③過(guò)程的胚胎受體需要用雌激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，使其處于相同的生理狀態(tài)，C錯(cuò)誤；D、中中、華華的細(xì)胞核基因來(lái)自成纖維細(xì)胞，因此它們的性別由纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)決定，D正確。故選C。第Ⅱ卷（非選擇題）二、非選擇題（6大題，共60分）17.魚(yú)茶味酸而微咸，甘香可口，是海南黎族的一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品。其制作方法是：將生魚(yú)開(kāi)膛洗凈，去頭去尾，加鹽、姜、蒜等處理后，拌入煮熟的米飯，在特定條件下發(fā)酵一段時(shí)間。已知魚(yú)茶的發(fā)酵菌群主要是乳酸菌?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問(wèn)題：（1）寫(xiě)出乳酸菌分解葡萄糖產(chǎn)生乳酸的反應(yīng)簡(jiǎn)式：__________________。根據(jù)乳酸菌的代謝特點(diǎn)，制作魚(yú)茶時(shí)發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)______（填“打開(kāi)”或“關(guān)閉”）。（2）不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚(yú)混合并攪拌，原因是__________________。（3）圖1是某生物科研小組繪制的魚(yú)茶發(fā)酵過(guò)程中各菌種數(shù)量及發(fā)酵液pH的變化曲線。①魚(yú)茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降與溶液中______（寫(xiě)出兩種）等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，原因是圖1中__________________等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌種數(shù)量時(shí)，發(fā)現(xiàn)其中1個(gè)平板的菌落分布如圖2所示。該平板不能用于計(jì)數(shù)，原因是________________________。與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，推測(cè)該平板接種時(shí)可能的操作失誤是____________?！即鸢浮剑?）①.②.關(guān)閉（2）溫度過(guò)高會(huì)殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗（3）①.乳酸、醋酸、二氧化碳②.醋酸菌、酵母菌③.部分菌落過(guò)于密集，菌落相互連接，無(wú)法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)④.涂布不均勻〖祥解〗乳酸菌，代謝類(lèi)型是異養(yǎng)厭氧型，在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟茄趸癁槿樗??！拘?wèn)1詳析】乳酸菌在無(wú)氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，其反應(yīng)簡(jiǎn)式為：C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量。乳酸菌是厭氧菌，制作魚(yú)茶時(shí)發(fā)酵裝置的充氣口應(yīng)關(guān)閉?！拘?wèn)2詳析】高溫會(huì)殺死乳酸菌，造成發(fā)酵失敗，故不能將煮熟的米飯立即與處理后的生魚(yú)混合并攪拌，應(yīng)自然冷卻后再混勻裝入壇中?！拘?wèn)3詳析】①魚(yú)茶發(fā)酵初期，發(fā)酵液pH下降，說(shuō)明酸性物質(zhì)增多，這主要與發(fā)酵所產(chǎn)生的乳酸、醋酸、二氧化碳等物質(zhì)增多有關(guān)。發(fā)酵3天后醋酸菌逐漸減少，這主要與其生存所需要的氧氣含量有關(guān)，該時(shí)期醋酸菌、酵母菌等微生物進(jìn)行有氧呼吸消耗了發(fā)酵裝置中的氧氣。②圖2所示平板不能用于計(jì)數(shù)，這是由于部分菌落過(guò)于密集，菌落相互連接，無(wú)法準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，而與該平板相同稀釋倍數(shù)的其他平板未出現(xiàn)該現(xiàn)象，據(jù)此可推知該平板接種時(shí)涂布不均勻，導(dǎo)致菌落分布不均勻。18.油菜是重要的經(jīng)濟(jì)作物，用黑芥和蕓薹為材料培育芥菜型油菜的方法如圖所示，不考慮發(fā)生其他變異?；卮鹣铝袉?wèn)題：注：A、B分別表示不同植物的一個(gè)染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。（1）方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為_(kāi)_____，可通過(guò)物理方法______人工誘導(dǎo)______，得到芥菜型油菜。（2）由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：__________________。（3）方法2應(yīng)用______技術(shù)，打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用______處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為_(kāi)_____。（4）步驟②可通過(guò)______法（寫(xiě)出一種），促進(jìn)甲、乙融合。該過(guò)程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因?yàn)椴襟E②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)，從而篩選出雜種細(xì)胞，理由是______?！即鸢浮剑?）①.18②.低溫處理③.染色體加倍（2）用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜（3）①.植物體細(xì)胞雜交②.纖維素酶、果膠酶③.黑芥原生質(zhì)體（4）①.電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等②.未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，不同類(lèi)型細(xì)胞的染色體數(shù)量存在差異〖祥解〗秋水仙素作用的機(jī)理：人工誘導(dǎo)多倍體的方法很多，如低溫處理，目前最常用且最有效的方法是用秋水仙素來(lái)處理萌發(fā)的種子或幼苗，當(dāng)秋水仙素作用于正在分裂的細(xì)胞時(shí)，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂，將來(lái)可能發(fā)育成多倍體植株?！拘?wèn)1詳析】A、B分別表示不同植物的一個(gè)染色體組，兩者的染色體數(shù)目分別為10、8。因此，方法1中F1體細(xì)胞的染色體數(shù)目為18，可通過(guò)物理方法如低溫人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，得到芥菜型油菜，這是因?yàn)榈蜏貤l件下會(huì)抑制紡錘體的形成，因而會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍，進(jìn)而獲得芥菜型油菜，其中染色體數(shù)目為36?！拘?wèn)2詳析】由于黑芥和蕓薹間的生殖限制，方法1中產(chǎn)生的F1代幼苗數(shù)量有限。如果要提高育種效率，可用F1的葉片為材料培育芥菜型油菜，該過(guò)程的原理是植物細(xì)胞的全能性，所用得勁激素是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。具體實(shí)驗(yàn)思路為：以F1葉片為外植體，脫分化形成愈傷組織，用秋水仙素處理（或者低溫誘導(dǎo)）愈傷組織，之后再分化形成植株，即有可能獲得芥菜型油菜?！拘?wèn)3詳析】方法2應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞膜的流動(dòng)性，該方法打破了黑芥與蕓薹之間的生殖隔離。步驟①需要用纖維素酶、果膠酶處理以去除細(xì)胞壁，獲得的甲為黑芥原生質(zhì)體，乙為蕓薹體細(xì)胞原生質(zhì)體?！拘?wèn)4詳析】步驟②可通過(guò)電融合/離心/PEG融合/高Ca2+-高pH等法促進(jìn)甲、乙融合獲得雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是融合成功的關(guān)鍵。該過(guò)程獲得雜種細(xì)胞的概率較低，因?yàn)椴襟E②的產(chǎn)物除雜種細(xì)胞外還可能有未融合的細(xì)胞、融合的具有相同核的細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞中的染色體數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)，從而篩選出雜種細(xì)胞，該方法的原理是利用不同融合細(xì)胞中染色體不同實(shí)現(xiàn)的，即未融合細(xì)胞中的染色體數(shù)量為20或者16，融合的具有相同核的細(xì)胞中染色體數(shù)量為40或者32，而雜種細(xì)胞的染色體數(shù)量為36，據(jù)此做出判斷。19.為降低人乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建抗體藥物偶聯(lián)物（ADC），過(guò)程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，向小鼠注射取自______的特定抗原，其目的是____________。（2）步驟①是指______，實(shí)現(xiàn)該過(guò)程依賴(lài)于細(xì)胞膜具有______的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（3）經(jīng)過(guò)步驟②、③篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)是__________________。（4）步驟④將獲得的a單克隆抗體和b治療乳腺癌的藥物這2部分，通過(guò)接頭結(jié)合在一起，形成____________，實(shí)現(xiàn)對(duì)乳腺癌的治療。與常規(guī)化療方法相比，該治療方法具有的明顯優(yōu)點(diǎn)是________________________?！即鸢浮剑?）①.人乳腺癌細(xì)胞②.獲得能產(chǎn)生特定（治療乳腺癌的/與乳腺癌細(xì)胞特異性結(jié)合的）抗體的B淋巴細(xì)胞（2）①.（動(dòng)物）細(xì)胞的融合②.一定的流動(dòng)性（3）能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體（4）①