JJF(京) 137-2024 快速核酸檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范

北京市地方計量技術(shù)規(guī)范JJF(京)137-2024北京市市場監(jiān)督管理局發(fā)布JJF(京)137-2024I 1核酸檢測儀校準(zhǔn)規(guī)范DB32/T3762－2020新型要的計算方式是以擴(kuò)增過程前（3～15）個循環(huán)的熒光值的103.2等溫擴(kuò)增技術(shù)isothermalamplificationte2特定基因在某一生物體基因組中所含的個數(shù)以及每個生快速核酸檢測儀（以下簡稱檢測儀）是基于實時熒—— ————JJF(京)137-202436校準(zhǔn)條件6.1環(huán)境條件6.1.2相對濕度：≤85%。6.2測量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備測量范圍：(0～120)℃,分辨力不低于0.01℃,最大允許誤差：±0.1℃,采樣間隔不大于0.1s。6.2.2核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)使用國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。包括：新型冠狀病毒核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或其他病原體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，相對不確定度不大于20%(k=2)。7校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法7.1校準(zhǔn)前準(zhǔn)備將溫度測量儀的溫度傳感器放置于檢測儀加熱模塊設(shè)定孔中。按圖1所示，獨立控溫檢測儀逐個對加熱模塊或同時對多個加熱模塊進(jìn)行檢測；按圖2所示，非獨立控溫的檢測儀加熱模塊作為一個整體進(jìn)行校準(zhǔn)，以16通道檢測儀為例，均勻選擇測量點，每增加8通道可增加2個測量點。7.1.2測量程序根據(jù)檢測儀說明書設(shè)定控溫程序，基于實時熒光PCR技術(shù)和基于等溫擴(kuò)增技術(shù)的411213646516171ΔTmax=Tmax-Ts（1）?Tmin=Tmin-Ts5——溫度設(shè)定值，℃?；诘葴財U(kuò)增技術(shù)的檢測儀溫度達(dá)到設(shè)定溫度2——第j個測量點；max——測量點j實測最高溫度，℃;min——測量點j實測最低溫度，℃。thiV=1thi——測量點數(shù)量；——第j個測量點；——循環(huán)次數(shù)，n=5；6基于等溫擴(kuò)增技術(shù)的檢測儀從常溫狀態(tài)升溫至95℃,截取(50±±0.5)℃的溫度范圍內(nèi)計算升溫速率(圖4),按式(6)計算： JJF(京)137-202477.2.4平均降溫速率基于實時熒光PCR技術(shù)的檢測儀，從95℃降溫至40℃的5次循環(huán)(圖5),截取從(90±0.5)℃降溫至(50±0.5)℃的溫度范圍內(nèi)計算降溫速率，按式(7)和(8) Va——平均降溫速率，℃s;Vdi第j個測量點降溫速率，℃/s;m——測量點數(shù)量；Ta(50±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;Th(90±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;7.2.5平均溫度過沖量檢測儀按設(shè)定程序運行，從(40±0.5)℃升溫至(95±0.5)℃時，溫度測量儀測定溫度值超出設(shè)定值的量(圖6),按式(9)計算平均溫度過沖量：8JJF(京)137-2024 AT平均溫度過沖量，℃;m—測量點數(shù)量；T.設(shè)定溫度值，℃;Timax——第j個測量點6次測得的最大過沖溫度值，℃;7.2.6溫度均勻度待檢測儀設(shè)定溫度達(dá)到穩(wěn)定后，均勻讀取將溫度測量儀測得的20組數(shù)據(jù)，溫度均勻度按式(10)計算：Timax第i個測量點測得的最高溫度，℃;Timin第i個測量點測得的最低溫度，℃。7.2.7樣本檢測重復(fù)性將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋到檢測儀標(biāo)稱的檢出限濃度(參照配套試劑盒說明書進(jìn)行稀釋),檢查其檢出限。再將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋到高于檢出限的一定濃度(例1000copies/mL)作為樣本，對同一模塊或通道進(jìn)行6次測量，分別記錄測量的Ct(18～27供參考，可根據(jù)不同檢測儀9SD=i(yi-M)2（11）MM）；），n)“校準(zhǔn)證書”的校準(zhǔn)人、核驗人、批準(zhǔn)A.1基于實時熒光PCR技術(shù)快速核酸檢測儀校準(zhǔn)123A1A8過沖量(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）平均降溫速率(℃/s）設(shè)定溫度(℃)均勻度(℃)A.2基于等溫擴(kuò)增技術(shù)快速核酸檢測儀校準(zhǔn)原始記錄123最大偏差(℃)最小偏差(℃)溫度波動度(℃)123過沖量(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）校準(zhǔn)證書內(nèi)頁格式(推薦)設(shè)定溫度點(℃)溫度上偏差(℃)溫度下偏差(℃)溫度波動度(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s)平均降溫速率(℃/s)溫度均勻度(℃)確定度(℃)數(shù)不同測量