TCIRA 59-2023 白紋伊蚊雄蚊規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)要求

白紋伊蚊雄蚊規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)要求發(fā)布IT/CIRA59—2023 Ⅲ1范圍 1 13術(shù)語和定義 14蚊品系建立 2 2 2 28蚊蛹雌雄分離 2 310關(guān)鍵指標(biāo) 311注意事項 3 4 5Ⅲ1白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求本文件適用于在工廠條件下規(guī)模化生產(chǎn)白紋伊蚊雄蚊。對規(guī)?；a(chǎn)埃及伊蚊(Aedesaegypti)2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文NY/T1964.3—2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲劑室內(nèi)試驗試蟲養(yǎng)殖方法第3部分：白紋伊蚊3術(shù)語和定義孵化出幼蟲的數(shù)量與孵化蚊卵初始總數(shù)量的比值。蚊蛹雌雄分離sexseparationatpupalstage24.1從野外采集蚊幼蟲，實驗室飼養(yǎng)至成蚊，經(jīng)形態(tài)學(xué)與基因型(線粒體細(xì)胞色素氧化酶I基因)鑒定4.2蚊品系應(yīng)在實驗室穩(wěn)定傳代6代以上，所產(chǎn)蚊卵轉(zhuǎn)移至工廠進行規(guī)?；趸?。5蚊卵規(guī)?；趸?.1.2配制0.09%酵母蛋白胨溶液，在(28±2)℃靜置發(fā)酵24h,得到蚊卵孵化液。5.2.1稱取10mg蚊卵(1mg約有131個蚊卵)于15mL的離心管中，加入8mL蚊卵孵化液，放置在(29±1)℃的恒溫培養(yǎng)箱中孵化1.5h。5.3.1根據(jù)幼蟲飼養(yǎng)盤的表面積與孵化率之積計算所需的蚊卵質(zhì)量，控制幼蟲密度(2～3)條/cm2。6幼蟲規(guī)?；曫B(yǎng)6.2將孵化出的幼蟲轉(zhuǎn)移至幼蟲飼養(yǎng)盤，幼蟲飼養(yǎng)盤放置在幼蟲飼養(yǎng)架上，每千條幼蟲飼養(yǎng)每日投食參考量見附錄A。6.3幼蟲飼養(yǎng)條件設(shè)定溫度(27±2)℃,相對濕度(75±10)%,光照周期12L:12D(L表示光照，D表示7化蛹及蛹幼分離7.1以蚊卵孵化當(dāng)天作為第1天，飼養(yǎng)至第8天左右，或觀察約50%幼蟲形成蚊蛹時，可開始蛹幼分7.3將蚊蛹及幼蟲轉(zhuǎn)移至含有15%鹽水(氯化鈉)溶液中，浸泡1h至幼蟲全部死亡并沉底。8蚊蛹雌雄分離8.1根據(jù)雌雄蚊蛹的大小差異利用雌雄分離器進行分離。8.2雄蛹平均獲得率，即實際獲得的雄蛹數(shù)量與理論雄蛹數(shù)量的比值應(yīng)≥65%。39雄蚊羽化與喂食9.1把羽化籠轉(zhuǎn)移至溫度(26±2)℃,相對濕度(75±10)%的羽化間。9.2約24h后，在羽化籠上放置經(jīng)10%葡萄糖溶液浸泡的棉球，供羽化的雄蚊吸食。9.4約48h,將收集容器從羽化籠中取出，存余的1日齡～2日齡雄蚊在羽化籠中繼續(xù)飼養(yǎng)24h。規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)能應(yīng)具有每天生產(chǎn)不低于50萬只雄蚊的能力。單只雄蚊平均質(zhì)量應(yīng)達(dá)到1.0mg～1.4mg,計算方法見附錄B的B飛離測試筒的樣品雄蚊數(shù)量占測試雄蚊數(shù)量的比值應(yīng)≥85%,計算方法見B.2。羽化雄蚊樣品中雌蚊所占的比值應(yīng)≤0.3%,計算方法見B.3。11.1幼蟲飼料可用魚飼料等進行飼養(yǎng)，蛋白質(zhì)含量應(yīng)達(dá)到20%～40%。4(資料性)白紋伊蚊幼蟲飼養(yǎng)每日投食參考量見表A.1。天數(shù)/d1234567食物量/g注：該投食量是根據(jù)每千條幼蟲計算所得。5T/CIRA59—2023(資料性)關(guān)鍵指標(biāo)的計算方法將9.4羽化籠中雄蚊，轉(zhuǎn)移至(10±2)℃的冷庫進行凍麻。隨機挑選雄蚊并稱重，記錄總質(zhì)量M。然后將雄蚊轉(zhuǎn)移于-20℃冰箱，放置30min～60min直至雄蚊全部死亡，再進行計數(shù)，記錄雄蚊數(shù)量n。單只雄蚊平均質(zhì)量m,按公式(B.1)計算：將9.4羽化籠中雄蚊，轉(zhuǎn)移至(10±2)℃的冷庫進行凍麻。隨機挑選部分雄蚊，記錄雄蚊總數(shù)N。將雄蚊轉(zhuǎn)移至室溫，立即放在直徑12cm和高度60cm的測試筒底部。約30min,用蓋子蓋住測試筒，記錄仍停留在測試筒的雄蚊數(shù)量n?。雄蚊飛行率Fb(%),按公式(B.2)計算：B.3混雌率將9.4羽化籠中雄蚊，轉(zhuǎn)移至(10±2)℃的冷庫進行凍麻。隨機挑選部分樣品雄蚊，