2024-2025年新教材高中生物第1章發(fā)酵工程2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)學(xué)案+練習(xí)含解析新人教版選擇性必修3

PAGE26-微生物的基本培育技術(shù)必備學(xué)問·素養(yǎng)奠基一、培育基的配制1.培育基的概念:人們依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)——培育基,用以培育、分別、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2.培育基的分類:依據(jù)物理性質(zhì)不同分為兩類。(1)液體培育基:呈液體狀態(tài)的培育基,不加入凝固劑(如瓊脂)。(2)固體培育基:呈固體狀態(tài)的培育基,加入凝固劑(如瓊脂)。3.養(yǎng)分組成:各種培育基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,此外還須要滿意微生物生長對pH、特殊養(yǎng)分物質(zhì)以及O2的需求。4.培育基特殊需求:(1)培育乳酸桿菌時,在培育基中添加維生素。(2)培育霉菌時,將培育基調(diào)至酸性。(3)培育細(xì)菌時,將培育基調(diào)至中性或弱堿性。(4)培育厭氧微生物時,須要供應(yīng)無氧的條件。有同學(xué)認(rèn)為液體培育基含有水,而固體培育基是沒有水的,這種想法對嗎?為什么?提示:不對。液體培育基和固體培育基都含有水分,它們的區(qū)分為是否添加凝固劑。二、無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)關(guān)鍵:防止雜菌污染。2.消毒與滅菌:(1)概念:①消毒:運(yùn)用較為溫柔的物理、化學(xué)或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。②滅菌:運(yùn)用猛烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物(包括芽孢和孢子)。(2)類型與方法:連一連:將無菌技術(shù)類型、常用方法和適用對象用線連起來。在無菌技術(shù)中,為什么很多試驗(yàn)操作都要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行?提示:酒精燈火焰四周溫度高,細(xì)菌少,甚至無菌,這樣可以避開四周環(huán)境中微生物的污染。三、微生物的純培育1.微生物純培育的概念:由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培育物,獲得純培育物的過程就是純培育。2.酵母菌的純培育:(1)純培育的原理:設(shè)法在培育基上得到由單個微生物繁殖形成的純培育物(單菌落)。(2)純培育方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)純培育過程:①制備培育基:配制培育基→滅菌→倒平板②接種和分別酵母菌:用平板劃線法在馬鈴薯培育基表面接種酵母菌。下列接種過程正確的依次是baefcgd③培育酵母菌:待菌液被培育基汲取,將接種后的平板和一個未接種的平板倒置,放入28℃左右恒溫箱中培育24～48(4)結(jié)果分析與評價:結(jié)合酵母菌純培育的過程,推斷下列分析的正誤:①未接種的平板上沒有菌種,此試驗(yàn)沒有必要培育。 (×)提示:培育未接種的平板起到比照作用,可以檢驗(yàn)培育基的制備是否合格。②在未接種的培育基表面長出了菌落,說明培育基制備不合格。 (√)③若無菌操作合格,在接種酵母菌的培育基上應(yīng)視察到不同形態(tài)、不同顏色的酵母菌菌落。 (×)提示:應(yīng)當(dāng)是視察到形態(tài)、顏色一樣的酵母菌單菌落。④假如將酵母菌放置在35℃恒溫箱中培育,相同時間后視察,菌落會比28℃條件下的大提示:酵母菌相宜生長溫度為28℃,35⑤某同學(xué)運(yùn)用平板劃線法純化酵母菌,培育48h后,只在培育基的第一劃線區(qū)域長出密集的菌落,其他區(qū)域未長出菌落,可能是這位同學(xué)其次次灼燒接種環(huán)未冷卻就干脆劃線導(dǎo)致的。 (√)將接種后的平板放在恒溫培育箱中培育有必要嗎?為什么?提示:有必要。恒溫培育箱可以供應(yīng)微生物生長的相宜溫度。關(guān)鍵實(shí)力·素養(yǎng)形成學(xué)問點(diǎn)一培育基的配制1.培育基的成分及功能:養(yǎng)分要素來源功能碳源(供應(yīng)碳元素的物質(zhì))無機(jī)碳源NaHCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物;②有機(jī)碳既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等氮源(供應(yīng)氮元素的物質(zhì))無機(jī)氮源銨鹽、硝酸鹽等將無機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子(生長必不可少的微量有機(jī)物)維生素、氨基酸、堿基①酶和核酸的組成成分;②參加代謝過程中的酶促反應(yīng)水外界攝入①良好的溶劑②維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無機(jī)鹽無機(jī)物為微生物供應(yīng)除碳、氮以外的各種重要元素【特殊提示】有關(guān)培育基養(yǎng)分物質(zhì)的三點(diǎn)提示(1)培育不同的微生物所須要的養(yǎng)分物質(zhì)可能不同。①自養(yǎng)型微生物的培育基主要以無機(jī)養(yǎng)分為主。②異養(yǎng)型微生物的培育基主要以有機(jī)養(yǎng)分為主。(2)微生物須要補(bǔ)充生長因子,是由于缺乏合成這些物質(zhì)所須要的酶或合成實(shí)力有限。(3)微生物須要量最大的是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型,反之則為異養(yǎng)型。2.培育基的種類:分類標(biāo)準(zhǔn)培育基種類培育基特點(diǎn)作用物理性質(zhì)固體培育基加凝固劑,如瓊脂微生物的分別與鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種半固體培育基容器放倒不致流出,猛烈振動則破散視察微生物的運(yùn)動、分類鑒定液體培育基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培育基依據(jù)某種微生物的特殊養(yǎng)分要求配制選擇、分別鑒別培育基加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑鑒定成分來源自然培育基含化學(xué)成分不明確的自然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培育基用已知的化學(xué)物質(zhì)配制分類鑒定微生物種類繁多,培育條件也各不相同。下列關(guān)于微生物培育基的描述正確的是 ()A.同一物質(zhì)不行能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能供應(yīng)能量,氮源有些也能供應(yīng)能量C.牛肉膏蛋白胨培育基是培育細(xì)菌、病毒等常用的培育基D.培育硝化細(xì)菌,可用無機(jī)碳源的培育基【解題導(dǎo)引】

【解析】選D。對異養(yǎng)微生物來說,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源,如牛肉膏,A錯誤;有機(jī)碳源能供應(yīng)能量,無機(jī)碳源不能供應(yīng)能量,有些氮源也能供應(yīng)能量,B錯誤;病毒必需寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能生活,不能用一般培育基培育,必需先培育細(xì)胞再培育病毒,C錯誤;硝化細(xì)菌是自養(yǎng)微生物,可以通過化能合成作用合成含碳有機(jī)物,D正確。【誤區(qū)警示】微生物的碳源、氮源和能源物質(zhì)的兩個相識“誤區(qū)”(1)誤認(rèn)為全部碳源和氮源都可供應(yīng)能量:有機(jī)碳源和有機(jī)氮源是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)。(2)誤認(rèn)為全部微生物的能源都是有機(jī)碳源:自養(yǎng)微生物的碳源一般是CO2,光能自養(yǎng)微生物的能源是光能,例如藍(lán)細(xì)菌等;化能自養(yǎng)微生物的能源是化學(xué)物質(zhì),例如硝化細(xì)菌的能源物質(zhì)是NH3?！舅仞B(yǎng)·探究——母題追問】(1)科學(xué)思維——分析與推理結(jié)合病毒的特點(diǎn),試分析如何培育病毒,寫出簡要思路。提示:可以先在特定培育基上培育病毒的宿主細(xì)胞,然后讓病毒侵染宿主細(xì)胞,從而達(dá)到培育病毒的目的。(2)科學(xué)思維——演繹與推理結(jié)合相關(guān)學(xué)問,推斷下面培育基的各種成分能供應(yīng)的營養(yǎng)物質(zhì)類別:成分蔗糖(NH4)2SO4FeSO4維生素供應(yīng)的養(yǎng)分____

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提示:碳源氮源(無機(jī)鹽)無機(jī)鹽生長因子【素養(yǎng)·遷移】下表是某微生物培育基成分,請據(jù)此回答:編號成分含量①粉狀硫10②(NH4)2SO40.4③K2HPO44.0④MgSO49.25⑤FeSO40.5⑥CaCl20.5⑦H2O100mL(1)上表培育基可培育的微生物類型是__________________________。

(2)若除去成分②,加入(CH2O),該培育基可用于培育________________。

(3)表中養(yǎng)分成分共有________類。

(4)不論何種培育基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是________________________。

(5)若上表培育基用于菌種鑒定,應(yīng)當(dāng)增加的成分是________________。

【解析】(1)由題表可知,該培育基中沒有碳源,說明培育的微生物是從外界環(huán)境中獲得碳源的,因此培育的微生物是自養(yǎng)型微生物。(2)該培育基若加入(CH2O),培育基中就有了碳源,但除去成分②,培育基中就沒有了氮源,該培育基就只能用于培育固氮微生物。(3)題表中的養(yǎng)分物質(zhì)有水、無機(jī)鹽、無機(jī)氮源三類,缺乏碳源和特殊養(yǎng)分物質(zhì)。(4)微生物生長須要肯定的pH,所以培育基裝瓶前須要調(diào)整pH。(5)該培育基中無凝固劑,為液體培育基。菌種的純化和鑒定通常利用固體平板培育基以獲得單細(xì)胞菌落,因此須要加入凝固劑,如瓊脂,將液體培育基轉(zhuǎn)變成固體培育基。答案:(1)自養(yǎng)型微生物(2)固氮微生物(3)3(4)調(diào)整pH(5)瓊脂(或凝固劑)【補(bǔ)償訓(xùn)練】下列關(guān)于培育基的敘述,錯誤的是 ()A.氮源、無機(jī)鹽、水等是微生物生長不行缺少的養(yǎng)分物質(zhì)B.依據(jù)微生物自身的特點(diǎn),運(yùn)用不同碳源的培育基C.可在培育基中加入磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀,用于維持pH的相對穩(wěn)定D.若要將微生物擴(kuò)大培育,應(yīng)運(yùn)用固體培育基【解析】選D。微生物的養(yǎng)分物質(zhì)主要有碳源、氮源、無機(jī)鹽、水和生長因子,A正確;依據(jù)微生物自身的特點(diǎn),運(yùn)用含不同碳源的培育基,例如培育自養(yǎng)型的細(xì)菌,在培育基中不需加入碳源,B正確;微生物培育基調(diào)整pH時可以用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀,C正確;若要將微生物擴(kuò)大培育,一般用液體培育基,D錯誤。學(xué)問點(diǎn)二無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念:防止外來雜菌的入侵,并保持已滅菌物品及無菌區(qū)域不再被污染的方法,稱為無菌技術(shù)。2.無菌技術(shù)的目的:(1)可防止試驗(yàn)室的培育物被其他微生物污染。(2)有效避開操作者自身被微生物感染。3.無菌技術(shù)的選擇原則:(1)考慮效果:滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受實(shí)力:活體生物材料、操作者的手等只能采納消毒的方法,而不能采納滅菌的方法。4.無菌技術(shù)的方法——消毒與滅菌:方法條件應(yīng)用范圍消毒煮沸消毒法在100℃一般物品,如家庭餐具等生活用品巴氏消毒法62～6530min或80～90℃處理30s～1一些不耐高溫的液體,如牛奶、啤酒、果酒和醬油等化學(xué)藥物消毒法70%～75%的酒精、碘酒、氯氣、石炭酸、煤酚皂溶液等用于雙手、皮膚、傷口、動植物組織表面消毒和空氣、水源、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等消毒紫外線消毒法30W紫外燈照耀30min接種室、接種箱、超凈工作臺滅菌灼燒滅菌在酒精燈火焰充分燃燒層灼燒涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等;接種過程中的試管口或瓶口滅菌干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi)160～170℃下滅菌2～3h玻璃器皿、金屬用具等不相宜用其他方法滅菌須要保持干燥和能耐高溫的物品濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌鍋:100kPa、121℃條件下15～30培育基及容器的滅菌【特殊提示】消毒和滅菌的兩點(diǎn)提示(1)作用原理是借助理化因素,通過使蛋白質(zhì)變性來抑制微生物生命活動或殺死微生物。(2)最根本區(qū)分是芽孢和孢子是否滅活,滅菌能殺死芽孢和孢子,因而滅菌更徹底。防止雜菌入侵,獲得純凈的培育物,是探討和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是 ()A.試驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒B.在試驗(yàn)室中,不行吃東西、喝水,離開試驗(yàn)室時肯定要洗手,以防止被微生物感染C.接種環(huán)、接種針等金屬用具,干脆在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌D.運(yùn)用后的培育基丟棄前肯定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境【解題導(dǎo)引】明確以下三個關(guān)鍵點(diǎn):(1)對操作空間消毒的方法:紫外線消毒、化學(xué)藥物消毒。(2)適于灼燒滅菌的物品:接種環(huán)、接種針等金屬用具。(3)防止微生物感染:做好自身防護(hù),對運(yùn)用后的培育基進(jìn)行滅菌。【解析】選C。為防止雜菌污染,探討和應(yīng)用微生物時應(yīng)進(jìn)行消毒和滅菌,試驗(yàn)室可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒,A正確;在試驗(yàn)室中,不行吃東西、喝水,離開試驗(yàn)室時肯定要洗手,以防止被微生物感染,B正確;接種環(huán)、接種針等金屬用具,干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌,C錯誤;運(yùn)用后的培育基丟棄前肯定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境,D正確?！痉椒ㄒ?guī)律】灼燒滅菌的適用范圍和方法(1)灼燒滅菌適用于接種工具和試管口、瓶口的滅菌。(2)接種工具灼燒滅菌:用酒精燈外焰按依次充分燃燒;試管口、瓶口滅菌:快速通過酒精燈外焰。

【素養(yǎng)·探究——母題追問】(1)科學(xué)思維——分析與綜合某同學(xué)在試驗(yàn)過程中不當(dāng)心將滅菌的培育皿和未滅菌的培育皿混合了,那么這些培育皿還能用于試驗(yàn)嗎?為什么?提示:不能。已滅菌的材料物品不能與四周物品接觸,以防止污染。所以這位同學(xué)應(yīng)將培育皿再次滅菌后才能用于試驗(yàn)。(2)科學(xué)思維——演繹與推理題中A項(xiàng)的化學(xué)藥物消毒時,某同學(xué)想酒精濃度越高,消毒效果可能越好,于是他就用了95%的酒精進(jìn)行消毒,他的這種做法對嗎?說明緣由。提示:不對。用酒精消毒時,體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒效果最好,緣由是濃度過高,菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層愛護(hù)膜,酒精不能滲入其中?！舅仞B(yǎng)·遷移】在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}:(1)在試驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具_(dá)_________(填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。

(2)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是

______________________________________________。

(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒,其緣由是紫外線能__________。在照耀前,適量噴灑____________________________,可強(qiáng)化消毒效果。

(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過__________________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。

(5)某同學(xué)在運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的緣由是

______________________________________。

【解析】(1)玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具可以通過干熱滅菌的方法來滅菌。(2)巴氏消毒法是在70～75℃煮30min或在80(3)紫外線有消毒、滅菌的作用,在照耀前,適量噴灑消毒液,可以強(qiáng)化消毒效果。(4)自來水消毒通常采納“氯氣”或“紫外線”等方法。(5)運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達(dá)到設(shè)定要求,但沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的緣由是鍋內(nèi)冷空氣沒有排盡。答案:(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時,養(yǎng)分物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【補(bǔ)償訓(xùn)練】高溫滅菌的原理是 ()A.每種微生物生長的最適溫度是肯定的B.微生物對高溫環(huán)境不適應(yīng)C.高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度【解析】選C。高溫滅菌的目的是利用高溫殺死包括芽孢和孢子在內(nèi)的一切微生物。原理是高溫能使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性,同時破壞核酸的結(jié)構(gòu),從而影響其正常的生命活動。學(xué)問點(diǎn)三酵母菌的純培育1.制備馬鈴薯瓊脂培育基:(1)配制培育基:(2)滅菌:培育基轉(zhuǎn)移至錐形瓶,加棉塞,包上牛皮紙,如圖所示,然后放入高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌,培育皿包扎后放入干熱滅菌箱內(nèi)滅菌。(3)倒平板:待培育基冷卻到50℃左右時,【特殊提示】關(guān)于制備培育基的四點(diǎn)提示(1)假如須要調(diào)整培育基的pH,應(yīng)當(dāng)在定容完成后,滅菌之前進(jìn)行操作。(2)滅菌之后,倒平板時培育基的溫度是50℃左右。因?yàn)槟虅┉傊?8℃以上熔化,在44℃以下凝固,倒平板時高于50(3)倒平板的整個操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行,避開雜菌的污染。(4)倒平板時不要將培育基濺在皿蓋與皿底之間,否則此培育基不能用來培育微生物,因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培育基上滋生。2.平板劃線法接種和分別酵母菌:(1)平板劃線法:通過接種環(huán)在固體培育基表面連續(xù)劃線操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培育基表面。(2)平板劃線法結(jié)果:平板劃線示意圖(A)及培育后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。(3)幾次灼燒的目的:灼燒時期目的第一次操作(取菌種前)殺死接種環(huán)上原有的微生物,避開污染培育物每次劃線之前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種干脆來源于上次劃線的末端,使每次劃線菌種數(shù)目削減劃線結(jié)束殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避開微生物污染環(huán)境和感染操作者【特殊提示】(1)灼燒接種環(huán)后,要冷卻后才能進(jìn)行操作,以免溫度太高殺死菌種。(2)其次次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端起先,能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減,最終得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落。(3)劃線用力大小要適當(dāng),防止用力過大將培育基劃破。(4)最終一次的劃線不要與第一次的劃線相連。3.培育酵母菌:接種和未接種的平板在溫度相宜的恒溫箱中培育。4.結(jié)果分析與評價:(1)培育未接種的培育基的目的是檢查培育基制備是否合格。未接種的培育基表面若有菌落生長,則說明培育基被污染,應(yīng)當(dāng)重新制備;若無菌落生長,則說明未被污染。(2)在接種酵母菌的培育基上可視察到獨(dú)立的菌落,這些菌落在顏色、形態(tài)和大小上相像,酵母菌菌落一般表面光滑,多呈乳白色。(3)若在培育基中視察到不同形態(tài)的菌落,緣由可能是菌液不純,混入其他雜菌,或在試驗(yàn)操作過程中被雜菌污染。如圖表示酵母菌純培育的部分操作步驟,下列有關(guān)敘述正確的是 ()A.步驟①操作時,待倒入的培育基冷卻凝固后,蓋上培育皿蓋,將其倒置B.步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒消毒,接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液C.步驟③沿多個方向劃線,使接種物漸漸稀釋,最終一次的劃線不能與第一次的相連D.步驟④是將培育皿放在培育箱中培育,也需倒置,一段時間后所得到的都是酵母菌的菌落【解題導(dǎo)引】本題的解題思路是:【解析】選C。分析步驟①,倒完平板后馬上蓋上培育皿蓋,冷卻凝固后將平板倒過來放置,A錯誤;分析步驟②,接種環(huán)和試管口須要先在火焰上灼燒滅菌,待冷卻后才可以蘸取菌液進(jìn)行平板劃線,B錯誤;分析步驟③,沿多個方向劃線,使接種物漸漸稀釋,最終一次的劃線不能與第一次的相連,培育后可出現(xiàn)單個的菌落,C正確;步驟④是將培育皿放在培育箱中培育,也需倒置,假如操作過程受到污染,一段時間后所得到的不肯定都是酵母菌的菌落,D錯誤?！菊`區(qū)警示】本題常見誤區(qū)有以下兩種(1)誤認(rèn)為需將培育基冷卻后再蓋上培育皿蓋:倒完平板后馬上蓋上培育皿,而不是等培育基冷卻凝固后蓋上培育皿蓋。(2)誤認(rèn)為只要有菌落,就是純培育物:培育結(jié)果不肯定是純培育物,只有無菌操作合格時培育的微生物才是純培育物。

【素養(yǎng)·探究——母題追問】(1)科學(xué)思維——分析與綜合若要依據(jù)如圖④的區(qū)域進(jìn)行劃線,那么在接種劃線的操作過程中,共灼燒了幾次接種環(huán)?提示:圖中共劃了5個區(qū)域,在每次劃線前后均須要對接種環(huán)灼燒滅菌,因此共須要灼燒接種環(huán)6次。(2)科學(xué)思維——演繹與推理在劃線操作時,假如接種環(huán)不慎劃破培育基,可以接著正常進(jìn)行操作嗎?為什么?提示:不能接著運(yùn)用。因?yàn)閯澠婆嘤鶗斐蓜澗€不勻稱,難以分別單菌落,可能導(dǎo)致微生物的無氧呼吸或雜菌污染等?！舅仞B(yǎng)·遷移】微生物的分別和培育是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。如圖甲、乙、丙是酵母菌分別和培育過程中部分操作和試驗(yàn)結(jié)果示意圖,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)上圖甲所示的是制備固體培育基時的試驗(yàn)操作步驟之一,它稱為________,若用該培育基培育大腸桿菌,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮________、________和滲透壓等條件。

(2)培育酵母菌時,在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是________________________________。

(3)上圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作依次是A→B→__________________(用字母和箭頭表示);找出圖乙中兩處錯誤的操作(用字母表示):________、________。

(4)上圖丙是某同學(xué)用平板劃線法接種后的培育基培育12h后的試驗(yàn)結(jié)果,假如培育基上

______________,則說明無菌操作基本符合要求。

【解析】(1)圖甲所示操作為倒平板,須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作。培育基中除養(yǎng)分成格外,還應(yīng)考慮pH、氧氣、無菌、溫度、滲透壓等條件。(2)檢測培育基是否被污染的方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生,如有菌落,說明該培育基已被污染。(3)平板劃線法的操作依次為灼燒接種環(huán),冷卻,挑取菌種,劃線,灼燒接種環(huán),劃線,灼燒接種環(huán),平板倒置培育,即A→B→G→F→E→C→D→H。圖乙中C操作應(yīng)在酒精燈旁邊進(jìn)行,D中劃線的首尾不應(yīng)當(dāng)相連。(4)同一菌種的菌落顏色、形態(tài)、大小基本一樣,如有雜菌污染,會有異樣菌落出現(xiàn),可依據(jù)菌落的特征確定該菌落是否為酵母菌。答案:(1)倒平板溫度(氧氣)pH(無菌)(2)將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生(3)G→F→E→C→D→HCD(4)生長的菌落顏色、形態(tài)、大小基本一樣,并符合酵母菌菌落的特點(diǎn)【補(bǔ)償訓(xùn)練】在酵母菌的純培育試驗(yàn)中,劃線接種(甲)、培育結(jié)果(乙)如圖所示,且甲、乙的對應(yīng)位置不變。下列有關(guān)敘述錯誤的是 ()A.配制培育基時需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置C.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落D.圖示試驗(yàn)過程中接種環(huán)灼燒了5次【解析】選B。為了能徹底滅菌,配制的培育基需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,A正確;起始劃線的區(qū)域長出的菌落多且密,依據(jù)甲、乙對應(yīng)區(qū)域?qū)Ρ?甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的結(jié)束位置,B錯誤;連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落,C正確;由于每次運(yùn)用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌,從圖示甲中4次劃線接種就可推出,接種過程中接種環(huán)灼燒了5次,D正確?！菊n堂回眸】課堂檢測·素養(yǎng)達(dá)標(biāo)【概念·診斷】1.防止雜菌入侵,獲得純凈的微生物培育物是探討和應(yīng)用微生物的前提。請分析下列關(guān)于微生物的純培育操作,錯誤的是________。

①無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅試驗(yàn)室中全部的微生物②干熱滅菌可以殺死微生物的養(yǎng)分細(xì)胞和部分芽孢③經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底殲滅,所以不能在常溫下長期保存④培育基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌⑤將接種環(huán)干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以快速徹底地滅菌⑥無菌技術(shù)中,若處理對象為液體,則只能消毒,不能滅菌⑦為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落【解析】選①②⑥⑦。無菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌的污染,①錯誤;滅菌能殺滅環(huán)境中一切微生物,包括孢子和芽孢,②錯誤;經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底殲滅,所以不能在常溫下長期保存,③正確;培育基用高壓蒸汽滅菌,④正確;將接種環(huán)干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以快速徹底地滅菌,⑤正確;無菌技術(shù)中,若處理對象為液體,可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌,⑥錯誤。接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后冷卻后才能挑取菌落,⑦錯誤。2.培育下列微生物,培育基中不用添加有機(jī)碳源的是 ()A.藍(lán)細(xì)菌 B.酵母菌 C.醋酸菌 D.乳酸菌【解析】選A。酵母菌、醋酸菌、乳酸菌是異養(yǎng)微生物,藍(lán)細(xì)菌是自養(yǎng)微生物,培育基不須要添加有機(jī)碳源。3.下列有關(guān)常見無菌操作的敘述,錯誤的是 ()A.用酒精擦拭雙手B.用氯氣對水源消毒C.試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行D.玻璃器皿(吸管、培育皿)可用酒精擦拭【解析】選D。用酒精擦拭雙手屬于運(yùn)用化學(xué)藥劑消毒;用氯氣消毒水源也屬于運(yùn)用化學(xué)藥劑消毒;試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行,因?yàn)楦邷乜煞乐闺s菌污染;玻璃器皿(吸管、培育皿)等應(yīng)用干熱滅菌法滅菌,利用酒精擦拭不能將全部微生物殺滅。4.2024年,疫情中的最美逆行者,在給患者治療時,要充分消毒并防護(hù),以下說法中正確的是 ()A.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身滅菌B.接種疫苗前要對注射區(qū)域進(jìn)行消毒C.消毒與滅菌的含義本質(zhì)是相同的D.常用的消毒方法有灼燒法和高壓蒸汽法【解析】選B。醫(yī)務(wù)人員進(jìn)入工作區(qū)要全身消毒,A錯誤;接種疫苗前要對注射區(qū)域進(jìn)行消毒,B正確;滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅,在經(jīng)過滅菌后的物體中,不再存在任何活著的生命;消毒是僅殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物,C錯誤;常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等,D錯誤。5.(2024·江蘇高考)為純化菌種,在鑒別培育基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌,培育結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是 ()A.倒平板后需間歇晃動,以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多,應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該試驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多,不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落四周的纖維素被降解后,可被剛果紅染成紅色【解析】選B。本題主要考查平板劃線法的相關(guān)運(yùn)用技巧。倒平板后不須要晃動,A錯誤;Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒有出現(xiàn)單菌落,說明細(xì)菌數(shù)量太多,故應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落,B正確;出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純化的目的,C錯誤;剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),D錯誤?！舅季S·躍遷】6.生長圖形法是一種測定微生物養(yǎng)分需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,探討小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需養(yǎng)分物質(zhì)的培育基混合后倒成平板,然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域,培育結(jié)果如圖所示,下列說法正確的是 ()A.倒成平板后干脆培育可推斷有無污染B.倒成平板后須要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌須要生長因子乙或丙D.生長圖形法不能用于某些菌種的篩選【解析】選A。倒成平板后干脆培育若有雜菌生長說明已被污染,若無雜菌生長說明沒有污染,A正確;滅菌應(yīng)在倒平板之前,B錯誤;圖示結(jié)果表明須要兩種生長因子乙和丙,C錯誤;依據(jù)某些菌種須要特殊的生長因子,可用生長圖形法進(jìn)行篩選,D錯誤。7.無菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物分別、純化、應(yīng)用過程均要無菌操作?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)消毒和滅菌是兩個不同的概念,下列哪些事物適用于消毒處理________。

①皮膚②飲用水③牛奶④注射器⑤培育皿⑥接種環(huán)⑦培育基⑧果汁⑨醬油⑩手術(shù)刀A.①②③⑧⑨B.④⑤⑥⑦⑩C.①②③④⑤ D.④⑤⑥⑧⑨(2)如下圖所示,利用________法進(jìn)行酵母菌接種。

如圖A、B、C、D所示的四種劃線方法,正確的是________。

(3)培育酵母菌常用的培育基是______________,此培育基的氮源是______________。氮源進(jìn)入酵母菌細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有______________、______________等。在接種前須要檢測培育基是否被污染。對培育基的檢測方法是____________________________________________,

視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生?！窘馕觥?1)皮膚可用70%酒精消毒,飲用水用氯氣消毒,牛奶、果汁、醬油用巴氏消毒法進(jìn)行消毒,注射器、培育基可用高壓蒸汽滅菌,培育皿、手術(shù)刀用干熱滅菌或高壓蒸汽滅菌,接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌,①②③⑧⑨應(yīng)采納消毒,④⑤⑥⑦⑩應(yīng)采納滅菌。(2)題圖是采納平板劃線法接種,須要留意的是連續(xù)劃線時,每次劃線前后要灼燒接種環(huán),同時最終一次劃線不能與第一次相連。A圖很難得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落,A錯誤;B圖劃線從上次劃線末端起先,簡單得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落,B正確;C圖劃線沒有從上次劃線的末端起先,接種環(huán)上沒有菌種,不能得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落,C錯誤;D圖劃線不是從上次劃線末端起先,不簡單得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落,D錯誤。(3)培育酵母菌常用的培育基是馬鈴薯瓊脂培育基,供應(yīng)氮源的是馬鈴薯,細(xì)胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸等,氮源可參加以上物質(zhì)的合成。檢測培育基是否被污染,方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置適當(dāng)時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生。答案:(1)A(2)平板劃線B(3)馬鈴薯瓊脂培育基馬鈴薯蛋白質(zhì)核酸將未接種的培育基在相宜的溫度下放置適當(dāng)時間【拓展·探究】8.我國中科院的科研人員從污水處理廠的活性污泥中分別了一種獨(dú)特的微生物——“惠芳中科微菌”,它是全世界科學(xué)家“最想要”的28個活性污泥核心微生物類群之一。微生物是活性污泥有效清除各種污染物的“主力軍”,每克活性污泥中有1012個微生物細(xì)胞。這些困難的微生物與廢水中的有機(jī)養(yǎng)分物形成了困難的“生態(tài)網(wǎng)”?！盎莘季背朔纸飧鞣N有機(jī)污染物(如碳水化合物、芳香族化合物和短鏈脂肪酸)外,還具有還原硝酸鹽和積累磷的實(shí)力,所以它的脫氮除磷效果遠(yuǎn)高于其他微生物。(1)下列關(guān)于分別和培育“惠芳中科微菌”的過程,描述不正確的是________。

A.分別和培育過程的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵B.培育“惠芳菌”的培育基應(yīng)滅菌后才能運(yùn)用C.接種過程要將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)的金屬絲燒紅D.用平板劃線法接種后,肯定會得到“惠芳菌”的單菌落(2)“惠芳菌”在生態(tài)系統(tǒng)中屬于________,培育“惠芳菌”的培育基中應(yīng)含有__________________等養(yǎng)分物質(zhì)。

(3)“惠芳菌”還有哪些方面的應(yīng)用?試舉例說明?！窘馕觥?1)分別和培育微生物過程的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,A正確;培育基應(yīng)滅菌后才能運(yùn)用,B正確;接種環(huán)放在火焰上灼燒,為了滅菌充分,應(yīng)當(dāng)將接種環(huán)的金屬絲燒紅,C正確;用平板劃線法接種,由于操作過程和劃線次數(shù)等緣由,不肯定會得到單菌落,D錯誤。(2)由材料可知“惠芳菌”是分解者。培育基中一般含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源等養(yǎng)分物質(zhì)。(3)從題干中可分析出“惠芳菌”具有還原硝酸鹽和積累磷的實(shí)力,脫氮除磷效果遠(yuǎn)高于其他微生物,所以可以用于汲取環(huán)境中的氮和磷。答案:(1)D(2)分解者水、無機(jī)鹽、碳源、氮源(3)“惠芳菌”脫氮除磷效果好,還可以應(yīng)用于治理水體富養(yǎng)分化等(合理即可)。二微生物的基本培育技術(shù)(20分鐘·70分)一、選擇題(共8小題,每小題5分,共40分)1.下表為某培育基的配方,下列敘述正確的是 ()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量101020.40.0651000mLA.從物理性質(zhì)看該培育基屬于固體培育基B.該培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培育基缺少供應(yīng)生長因子的物質(zhì)D.該培育基不能培育異養(yǎng)微生物【解析】選B。分析表中成分可知,該培育基中沒有凝固劑,為液體培育基,A錯誤;該培育基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是絕大多數(shù)生物最常利用的碳源,B正確;該培育基中存在的蛋白胨中的某些物質(zhì)可以看作是生長因子,C錯誤;該培育基中含有有機(jī)碳源,能用于培育異養(yǎng)微生物,D錯誤?！狙a(bǔ)償訓(xùn)練】將相同的大腸桿菌樣液分別接種于成分不同的三種培育基中,36小時后統(tǒng)計菌落數(shù),結(jié)果如下表。下列敘述不正確的是 ()培育皿培育基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長因子250Ⅲ瓊脂、生長因子0A.葡萄糖是培育基中的碳源也是能源B.配制培育基過程中應(yīng)先滅菌后倒平板C.Ⅰ和Ⅱ比照,說明生長因子不利于大腸桿菌的生長D.Ⅱ和Ⅲ比照,說明大腸桿菌的生長須要葡萄糖【解析】選C。葡萄糖是培育基中的碳源也是能源,A正確;配制培育基過程中應(yīng)先滅菌后倒平板,B正確;Ⅰ和Ⅱ比照,說明大腸桿菌的生長須要生長因子,C錯誤;Ⅱ和Ⅲ比照,說明大腸桿菌的生長須要葡萄糖,D正確。2.(2024·徐州高二檢測)不同的微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的須要各不相同。一種自養(yǎng)微生物在以CO2為唯一碳源的培育基中培育,下列說法不正確的是 ()A.氮源物質(zhì)為該微生物供應(yīng)必要的氮素B.碳源物質(zhì)也為該微生物供應(yīng)能量C.無機(jī)鹽是該微生物不行缺少的養(yǎng)分物質(zhì)D.水是該微生物的養(yǎng)分要素之一【解析】選B。培育基中的氮源物質(zhì)可以為該微生物供應(yīng)必要的氮素,A正確;該微生物只能以二氧化碳作為唯一碳源,二氧化碳不能為該微生物供應(yīng)能量,B錯誤;無機(jī)鹽可以為微生物供應(yīng)碳、氮以外的重要元素,是該微生物不行缺少的養(yǎng)分物質(zhì),C正確;水是生物體新陳代謝不行缺少的物質(zhì),是該微生物的養(yǎng)分要素之一,D正確。3.金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力,常引起骨髓炎等,還可能引起食物中毒。下列試驗(yàn)結(jié)束后的做法錯誤的是 ()A.對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B.帶菌培育基必需經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C.做完試驗(yàn)后,在試驗(yàn)室內(nèi)可以飲水D.接種后雙手必需經(jīng)肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭【解析】選C。試驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)將金黃色葡萄球菌殺死,以免使人致病,接種環(huán)應(yīng)用灼燒滅菌,A正確;帶菌的培育基要經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉,以免污染環(huán)境,B正確;在微生物培育的試驗(yàn)室中,不能吃東西、飲水等,C錯誤;接種后雙手必需用肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭,D正確。4.關(guān)于酵母菌的純培育試驗(yàn)操作,下列說法正確的是 ()A.配制培育基、倒平板、接種須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B.倒平板時,倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C.劃線接種時,灼燒接種環(huán)后馬上進(jìn)行再次劃線D.劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培育箱中培育【解析】選D。配制培育基不須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,A錯誤。倒平板時,應(yīng)馬上蓋上培育皿的皿蓋,B錯誤。劃線接種時,灼燒接種環(huán)冷卻后進(jìn)行再次劃線,C錯誤。劃線接種結(jié)束后,需將平板倒置后放入培育箱中培育,D正確。5.下列依次表示倒平板、接種的位置,以及平板劃線法接種的路徑示意圖,其中錯誤的是 ()【解析】選D。倒平板時,用左手的拇指和食指將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培育基倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋,防止空氣中的雜菌污染,A正確;左手將培育皿打開一條縫隙,右手將蘸有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),B正確;不同區(qū)域內(nèi)劃線,而且每次轉(zhuǎn)換劃線角度后再進(jìn)行劃線,讓菌種來源于上一次劃線末端,C正確;下一次劃線沒有從上一次劃線末端起先,D錯誤。6.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的最初數(shù)目和培育基分別是 ()A.同種少數(shù)細(xì)菌,液體培育基B.很多細(xì)菌,液體培育基C.同種少數(shù)細(xì)菌,固體培育基D.很多細(xì)菌,固體培育基【解析】選C。菌落是一個細(xì)菌或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,形成于固體培育基上,有肯定的形態(tài)結(jié)構(gòu),所以肉眼可見。同種細(xì)菌形成的菌落,形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的;假如有很多細(xì)菌形成的菌落,就不行能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài),所以C項(xiàng)正確。7.(2024·鄭州高二檢測)下列有關(guān)微生物培育及培育基的描述錯誤的是 ()A.培育基必需包含的成分有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子及瓊脂B.依據(jù)物理性質(zhì)不同,培育基可分為固體培育基和液體培育基C.培育細(xì)菌時須要把培育基的pH調(diào)至中性或微堿性D.平板劃線法接種時須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作【解析】選A。各種培育基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽,此外還要滿意微生物生長對pH、特殊養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求,A錯誤;依據(jù)物理性質(zhì)不同,培育基可分為固體培育基和液體培育基,B正確;培育細(xì)菌時須要把培育基的pH調(diào)至中性或微堿性,C正確;平板劃線法接種時須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作,防止雜菌污染,D正確。8.接種是微生物培育和分別等過程的必要步驟之一。下列關(guān)于接種的敘述不正確的是 ()A.接種通常指無菌條件下將微生物接入培育基的操作B.接種前須要對接種環(huán)灼燒滅菌,接種后則無須滅菌C.接種通常在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行D.接種環(huán)不能將培育基的表面劃破【解析】選B。無菌條件下將微生物接入培育基的操作過程稱為接種,A正確;接種前須要對接種環(huán)灼燒滅菌,接種后也需滅菌,防止污染環(huán)境和感染操作者,B錯誤;為避開雜菌污染,接種通常在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行,C正確;接種時接種環(huán)不能將培育基的表面劃破,D正確。二、非選擇題(共2小題,共30分)9.(12分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸至馬鈴薯軟爛,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量葡萄糖和瓊脂,用蒸餾水定容后滅菌,得到馬鈴薯瓊脂培育基?；卮鹣铝袉栴}:(1)馬鈴薯瓊脂培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì),養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有______________________(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有________________________(答出兩點(diǎn)即可)。

(2)分別培育酵母菌通常運(yùn)用馬鈴薯瓊脂培育基,該培育基在進(jìn)行接種前要進(jìn)行______________。將酵母菌菌種劃線接種在平板上,培育一段時間后可視察到菌落,菌落的含義是__

______________________________________。

(3)該培育基按物理性質(zhì)劃分屬于________培育基,若要對酵母菌進(jìn)行擴(kuò)大培育,此培育基中不應(yīng)加入的物質(zhì)是________。

【解析】(1)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無機(jī)鹽、水等多種物質(zhì),因此,除氮源外其中還有微生物生長所須要的碳源、無機(jī)鹽等養(yǎng)分要素。進(jìn)入細(xì)胞的氮源可參加合成蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(2)培育基在運(yùn)用前常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;菌落概念見答案。(3)該培育基中有凝固劑,屬于固體培育基,對微生物進(jìn)行擴(kuò)大培育,一般用液體培育基。答案:(1)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(2)(高壓蒸汽)滅菌分散的微生物在相宜的固體培育基表面或內(nèi)部可以繁殖形成的肉眼可見的、有肯定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體(3)固體瓊脂10.(18分)自然界中有多種微生物,將其進(jìn)行合理篩選、培育和應(yīng)用,能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益?；卮鹣铝袉栴}。(1)對培育基進(jìn)行滅菌時,多實(shí)行____________法,即將培育基置于____________條件下維持15～30分鐘,目的是殺死培育基中的____________。對接種環(huán)滅菌時則用____________法。

(2)若要將微生物采納平板劃線法進(jìn)行分別操作,在固體培育基表面連續(xù)進(jìn)行了4次劃線,則須要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做其次次及其后的劃線操作時,要從上次劃線的____________起先劃線,最終一次劃的線不能與第一次劃的線____________。

(3)將接種后的固體培育基和一個未接種的固體培育基放入恒溫箱中____________培育,以削減培育基中的水分揮發(fā)。其中,培育未接種的固體培育基是為了__________________________________________________。

【解析】(1)對培育基進(jìn)行滅菌時,多實(shí)行高壓蒸汽滅菌法,即將培育基置于壓力100kPa、溫度121℃條件下維持15～30分鐘,目的是殺死培育基中的全部微生物(微生物和芽孢、孢子)。對接種環(huán)滅菌用灼燒滅菌法。(2)接種環(huán)在每次接種前都要灼燒滅菌,最終一次接種完也要滅菌,所以在固體培育基表面連續(xù)進(jìn)行了4次劃線,則須要對接種環(huán)灼燒5次。平板劃線在做其次次及其后的劃線操作時,要從上次劃線的末端起先劃線,使菌體的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減,最終獲得由單個菌體形成的單個菌落。最終一次劃的線不能與第一次劃的線相連。(3)將接種后的固體培育基和一個未接種的固體培育基放入恒溫箱中倒置培育,以削減培育基中的水分揮發(fā)。培育未接種的固體培育基是為了作為比照組答案:(1)高壓蒸汽滅菌壓力100kPa、溫度121℃全部微生物(微生物和芽孢、孢子)灼燒滅菌(2)5末端相連(或相接、相交等意思正確即可)(3)倒置作為比照組,解除培育基被雜菌污染【互動探究】在平板劃線法操作過程中,為什么在其次次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端起先?提示:目的是將聚集的菌種逐步稀釋,以便得到單菌落。(10分鐘·30分)1.(5分)下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培育微生物的三種培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖;甲能在Ⅰ中正常生長繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生長繁殖,甲、丙都不能。下列說法正確的是 ()粉狀硫10K2HPO44FeSO40.5蔗糖10(NH4)2SO40.4H2O1