檢驗(yàn)科血清總膽紅素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-013版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第1頁(yè)共4頁(yè)編寫(xiě)制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清總膽紅素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清總膽紅素測(cè)定(縮寫(xiě)TBIL)；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血生化中肝功能測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中。或采用含分離膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫(xiě)標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專(zhuān)人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：血液膽紅素見(jiàn)光易分解，標(biāo)本注意避光保存。室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定2h，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定12h。-15～-25℃度可以穩(wěn)定3～4個(gè)月。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3方法原理釩酸鹽氧化法：釩酸鹽釩酸鹽pH3.0膽紅素膽綠素pH3.0測(cè)定釩酸鹽作用前后吸光度差異，可求得樣品中的直接膽紅素的濃度。4試劑及其他用品4.1試劑：釩酸鹽氧化法總膽紅素試劑盒（貨號(hào)TB6073），由北京利德曼生化技術(shù)有限公司出品。4.2試劑盒保存：保存于2～8℃，試劑未啟封情況下可穩(wěn)定至標(biāo)簽的失效期。啟封試劑在儀器的試劑倉(cāng)冰箱中至少穩(wěn)定14天。開(kāi)蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀，或空白吸光度＞0.5時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開(kāi)即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備4.4試劑盒主要成分：檸檬酸緩沖液100mmol/L，反應(yīng)促進(jìn)劑1mmol/L，表面活性劑2mmol/L，磷酸緩沖液10mmol/L，偏釩酸鈉10mmol/L，含有表面活性劑和保護(hù)劑。5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1校準(zhǔn)品：Beckman-CoulterSYNCHRONSystems膽紅素校準(zhǔn)液（P/N465915），其膽紅素濃度值可溯源至美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（NIST）標(biāo)準(zhǔn)參考材料。5.2校準(zhǔn)類(lèi)型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，1個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。5.3校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時(shí)間不限。但在：①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4校準(zhǔn)液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONSystems膽紅素校準(zhǔn)液即開(kāi)即用，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個(gè)不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開(kāi)即用，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開(kāi)始標(biāo)本檢測(cè)。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動(dòng)生化分析儀器。8標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測(cè)定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。9主要分析參數(shù)參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。10結(jié)果計(jì)算計(jì)算公式：總膽紅素濃度（μmol/L）＝儀器根據(jù)此公式自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。11檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1結(jié)果的報(bào)告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2報(bào)告范圍：0～680μmol/L。超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV5.0%，總CV6%。12.2準(zhǔn)確度：回收率98.7％～101.5％。12.3線性范圍：0～680μmol/L。12.4方法的有限性及干擾因素：甘油三酯達(dá)10.2mmol/L時(shí)影響小于6%，血紅蛋白達(dá)250mg/L時(shí)影響小于10%。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：5-22umol/L14臨床意義14.1血清總膽紅素和結(jié)合膽紅素多用于黃疸的診斷和黃疸性質(zhì)鑒別。由于膽紅素和肝臟功能密切相關(guān)，總膽紅素是重要的常規(guī)肝功能指標(biāo)。14.2各種原因引起的黃疽都有血清總膽紅素增高，如膽汁性肝硬化、膽道梗阻、阻塞性黃疸、肝細(xì)胞性黃疸，如肝炎、肝硬化，溶血性黃、新生兒黃疽或輸血錯(cuò)誤。14.3血清總膽紅素可作為暴發(fā)型肝衰竭（FHF）和自體免疫性肝炎（AIH）預(yù)后死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，TBIL＞255μmol/L預(yù)測(cè)FHF預(yù)后死亡的敏感性為77.5%，特異性為46.8%。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專(zhuān)業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，審核者對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與直接膽紅素（Dbil）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷胺酰轉(zhuǎn)移酶的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定此項(xiàng)未做規(guī)定。17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動(dòng)生化分