檢驗科脂肪酶測定標準操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-SH-035版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第1頁共4頁編寫制定日期審核審核日期：核準執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清脂肪酶測定標準操作規(guī)程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清脂肪酶(縮寫LPS)測定；組合項目申請：胰腺炎檢測。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1標本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標本試管標上統(tǒng)一且唯一的標識符。2.1.3急診標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間。2.1.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)，對不合格標本予以拒收。2.1.5下列標本為不合格標本2.1.5.1標本量不足：少于0.3ml的全血標本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血標本。2.1.5.3無法確認標本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂等。2.2標本保存 2.2.1接收標本后在30min內(nèi)將標本離心分離出血清。2.2.2標本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定1天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定7天。-20℃可保存數(shù)月；-70℃至少可保存半年；應(yīng)避免標本反復(fù)凍溶。為避免標本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹狀態(tài)。抽血前3天內(nèi)避免高脂飲食，24小時內(nèi)不飲酒。2.3.2如果使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。EDTA、草酸鹽、氟化鈉、枸櫞酸對酶有抑制作用。2.1.5抽血前最好停用影響血脂的藥物（如調(diào)脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應(yīng)記錄用藥情況。3方法原理采用1,2-鄰-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基試鹵靈）-酯作為底物，OH－脂肪酶1,2-鄰-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基試鹵靈)-酯1,2-鄰-二月桂宗甘油+戌二酸+甲基試鹵靈在570nm波長下，根據(jù)產(chǎn)物紅色的甲基試鹵靈生成速率測定脂肪酶的活性。4試劑及其他用品4.1試劑：脂肪酶測定試劑盒，由北京利德曼生化技術(shù)有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定30天。開蓋后避免污染。當試劑變混濁，或者試劑出現(xiàn)明顯的粉紅色，或空白吸光率>0.3時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準備。4.4試劑盒主要成分：組成R1:R2=2:1混合后溶液的濃度R1:緩沖液:100mmol/LPH=7.2牛磺脫氧膽酸34mmol/LNaCl40mmol/LR2:起動液酒石酸緩沖液9.5mmol/L，PH=4.0共脂肪酶500KU/L底物0.20mmol/L5校準品與校準模式5.1校準品：利德曼多項生化校準品。5.2校準類型和校準點數(shù)目：線性模式，1個校準點。5.3校準周期：校準間隔時間14天。但在：①更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；②儀器進行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進行一次校準。5.4校準液重建方法：校準品復(fù)溶液后分裝后-20℃保存。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開即用，無需特殊準備。6.3質(zhì)控品測定：在每一批標本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器全自動生化分析儀器。8標本檢測步驟裝載試劑→進行校準→進行質(zhì)控→輸入標本檢測項目→加載標本→標本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計算A標準c＝ΧCOA標準式中：c——測定血清LPS/LIP濃度，U/L；A測定——標本管吸光度；A標準——標準管吸光度；CO——校準液中LPS/LIP濃度，U/L；11檢驗結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認準確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學信息。11.1.3如收到標本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0.0～700U/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV<1.68%，批間CV<3.42%；12.2準確度：和質(zhì)控品的均值偏差<10%.12.3靈敏度：LPS濃度為：29U/L時，吸光度變化率ΔA570nm/min為0.0120-0.0140。12.4線性范圍：血清與試劑用量之比為1:100時，測定限度為4～700U/L。12.5方法的有限性及干擾因素內(nèi)源性干擾物溶血、脂血、黃疸對測試結(jié)果無明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學決定水平13.1參考范圍：5.6～51.3U/L14臨床意義作為急性胰腺炎的診斷,脂肪酶和淀粉酶二者均有很高的靈敏度,但脂肪酶的特異性要優(yōu)于淀粉酶。急性胰腺炎時，在4-8小時內(nèi)，脂肪酶的活性就會增高，24小時左右達到峰值，8-14天后降至正常。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責檢驗結(jié)果的審核。15.2認真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準確性和可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項目：審核與胰腺炎其他指標關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16無威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動