檢驗科淀粉酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-SH-034版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第1頁共4頁編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01淀粉酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清淀粉酶測定(縮寫AMY)，尿液淀粉酶測定；組合項目申請：血生化胰腺炎項目測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。尿液收集5-10ml放于干燥試管中送檢。2.1.2檢驗申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗申請單上填寫標(biāo)本采集時間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定12h，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定5天。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動，24h不飲酒和12h以上禁食空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2注意有無應(yīng)用影響測試項目的藥物。2.3.3不建議使用抗凝的血液標(biāo)本，常用的抗凝劑對AMY有抑制作用。3方法原理以Gal-G2-α-CNP為底物的酶連續(xù)監(jiān)測法。淀粉酶催化Gal-G2-α-CNP成CNP，CNP在410nm處有特異吸收峰，其生成的速度與血清中AMY的活性成正比。在410nm處連續(xù)監(jiān)測CNP的生成速率，推算出AMY活性。4試劑及其他用品4.1試劑盒名稱：淀粉酶連續(xù)監(jiān)測法測定試劑盒，由上海申能生化試劑廠出品。4.2試劑盒保存：未開瓶的試劑儲存在2～8℃可穩(wěn)定至有效期。試劑開瓶后，在儀器冰箱試劑倉中可保存28天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液體有沉淀，或起始吸光率>0.5時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：Gal-G2-α-CNP4.5mmol/L，醋酸鈣5.0mmol/L，氯化鈉51mmol/L，疊氮鈉152mmol/L，MES緩沖液（pH6.0）50mmol/L。5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式校準(zhǔn)品：不使用校準(zhǔn)品，以CNP的雙波長（410/480nm）摩爾吸光系數(shù)計算AMY活性。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器全自動生化分析儀器。8標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進行校準(zhǔn)→進行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測項目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。9主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計算計算公式：AMY(U/L)＝公式中ΔA/min即單位時間中吸光度降低的值，VT為總反應(yīng)體積ml（試劑總量＋標(biāo)本量），Vs為標(biāo)本體積ml，l為比色皿光徑cm，ε為CNP的410/480nm測定的毫摩爾消光系數(shù)。K值即因子，儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果。 11檢驗結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：5～1500U/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV<3.0%，批間CV<5.0%。12.2線性范圍：5～1500U/L。12.3方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物脂血4.5mmol/L、黃疸513μmol/L、抗壞血酸17mmol/L對測試結(jié)果無明顯影響。12.4靈敏度：淀粉酶濃度為158U/L時，吸光度變化率ΔA340nm/min為0.065～0.069。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考值：血清15-220U/L尿液80-1000U/L14臨床意義14.1淀粉酶包括兩種同工酶即胰淀粉酶和唾液淀粉酶，血清或尿液的總淀粉酶活性是診斷急性胰腺炎的重要指標(biāo)。14.2在急性胰腺炎發(fā)作期淀粉酶活性顯著增高。尿淀粉酶在發(fā)病后12～24h也會升高。某些慢性胰腺疾病，如慢性胰腺炎、胰腺腫瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化膿或腺管堵塞時，血清淀粉酶也會有所升高，而對于各種肝臟疾病，如肝炎、肝硬化、肝膿腫、肝癌及膽囊炎等，則淀粉酶活力下降。14.3淀粉酶由于其對底物的要求不同于一般的酶，所以測定方法繁多，結(jié)果的表示極不統(tǒng)一，各種結(jié)果不能相互對比。本法以符合參考方法要求的原理測定，結(jié)果以國際單位表示。14.4急性胰腺炎時，淀粉酶在血中和尿中的升高有時間規(guī)律，臨床應(yīng)注意采標(biāo)本的時間并在判斷結(jié)果時將這一因素結(jié)合考慮。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責(zé)檢驗結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項目：分析血清與尿液淀粉酶水平的關(guān)系。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16無威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2生化檢驗室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.3檢驗結(jié)果審核程序。17.4標(biāo)本送檢和接收程序。18參考文獻18.1陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗管理與技術(shù)