變形桿菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告

變形桿菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告一、生物學(xué)特性（一）種類和細(xì)菌分型變形桿菌(Proteusspecies)是腸桿菌科（Enterobacteriaceae）革蘭氏陰性桿菌。變形桿菌包括變形桿菌屬、普羅菲登屬和摩根氏菌屬，變形桿菌屬包括5個(gè)已命名的種，即奇異變形桿菌（Proteusmirabilis）、普通變形桿菌（Proteusvulgaris）、潘氏變形桿菌(Pro-teuspenneri)、黏化變形桿菌(Proteusmyxofaciens)、豪氏變形桿菌(Proteushauseri)和3個(gè)未命名的種。其中，普通變形桿菌和奇異變形桿菌與臨床關(guān)系較密切，也最為常見(jiàn)。（二）來(lái)源變形桿菌廣泛存在于土壤、水、垃圾、腐敗有機(jī)物及人或動(dòng)物的腸道內(nèi)，為條件致病菌，多為繼發(fā)感染，如慢性中耳炎、創(chuàng)傷感染等，也可引起膀胱炎、嬰兒腹瀉、食物中毒等。以下介紹主要以食物中毒為主。（三）傳染性傳染源為帶有變形桿菌或被陔菌污染的介質(zhì)。變形桿菌主要通過(guò)糞—口途徑感染。（四）傳播途徑變形桿菌是一種條件致病菌。只有離開(kāi)了正常寄居的腸道而進(jìn)入人體其他部位時(shí)，才引起感染。在烹調(diào)的制作過(guò)程中處理生熟食品的工具、容器未嚴(yán)格分開(kāi)使用，使制成的熟食品受到嚴(yán)重污染，或者操作人員通過(guò)手污染食品從而引起食物中毒。變形桿菌與其他腐敗菌共同污染生食品，使生食品發(fā)生感官上的改變，但熟制品被變形桿菌污染通常無(wú)感官性狀的變化，極易被忽視而引起食物中毒。（五）易感性沒(méi)有明顯的季節(jié)性，全年均可發(fā)生，大多數(shù)發(fā)生在5-10月，以7-9月常見(jiàn)。（六）潛伏期變形桿菌引起的食物中毒起病急驟，食物中毒型潛伏期為3-20h，過(guò)敏型潛伏期為0.5-2h。（七）劑量一效應(yīng)關(guān)系食物被變形桿菌污染后，活菌在食品上大量繁殖，被人攝食后進(jìn)入人體，在條件適合時(shí)，就有可能引起食物中毒。所以，只從樣品中檢出變形桿菌并無(wú)實(shí)際意義。凡懷疑變形桿菌中毒時(shí)，應(yīng)取可疑食物、嘔吐物和糞便作細(xì)菌培養(yǎng)，分離出同型變形桿菌。分離出的變形桿菌，必須作血凝試驗(yàn)，才能確認(rèn)。普通變形桿菌對(duì)OXl9、奇異變形桿菌對(duì)OXK的凝集效價(jià)應(yīng)在4倍以上增長(zhǎng)者，才能被確診。人攝入變形桿菌是否發(fā)病及發(fā)病輕重與攝入的細(xì)菌數(shù)量（一般認(rèn)為達(dá)105個(gè)/g以上）、產(chǎn)生的毒素以及人體防御功能等因素有關(guān)。變形桿菌還可產(chǎn)生組氨脫羧酶，可使肉類中組氨酸脫羧基成為組胺，組胺攝入量超過(guò)lOOmg引起類似組胺中毒過(guò)敏癥狀。（八）致病性1．致病物質(zhì)變形桿菌致病物質(zhì)有鞭毛、菌毛、內(nèi)毒素、溶血毒素等。變形桿菌的致病力主要是細(xì)菌所產(chǎn)生的腸毒素，它可產(chǎn)生一種細(xì)胞結(jié)合溶血因子(Cell-boundhemolyticfactor)，對(duì)人類移行細(xì)胞具有很好的黏附力和較強(qiáng)侵襲力，有些菌株能產(chǎn)生α溶血素從而具有細(xì)胞毒效應(yīng)。變形桿菌還可產(chǎn)生組氨脫羧酶，引起類似組胺中毒過(guò)敏癥狀。2．所致疾病變形桿菌污染食物后，引起食物中毒的主要表現(xiàn)為以下2種類型。(1)胃腸炎型潛伏期為3-20h，起病急驟、伴有惡心、嘔吐、腹痛等癥狀，腹瀉為水樣、帶黏液惡臭、無(wú)膿血，一天數(shù)次至十余次。有1/3-1/2患者在胃腸道癥狀之后，發(fā)熱伴有畏寒，持續(xù)數(shù)小時(shí)后下降。嚴(yán)重者有脫水或休克。(2)過(guò)敏型潛伏期為0.5-2h，表現(xiàn)為全身充血、顏面潮紅、酒醉貌周身癢感，胃腸癥狀輕，少數(shù)患者可出現(xiàn)蕁麻疹。（九）變異性變形桿菌存在抗生素敏感性變異株。（十）環(huán)境中的穩(wěn)定性變形桿菌在自然界分布廣泛，在土壤、污水和垃圾中可檢測(cè)出該菌，亦可寄生于人和動(dòng)物的腸道。（十一）藥物敏感性臨床多選用氨基糖苷類抗生素如慶大霉素、卡那霉素，以及新霉素等治療。但近年來(lái)發(fā)現(xiàn)了不少耐藥菌株。氨基糖苷類抗生素仍為主要的抗變形桿菌藥物之一。其他有哌拉西林和第二、三代頭孢菌素。喹諾酮類等也有效。（十二）消毒劑敏感性變形桿菌的抵抗力中等，對(duì)巴氏滅菌及常用消毒劑敏感。（十三）物理滅活變形桿菌不耐干燥，60℃30min可被殺死。（十四）在宿主體外存活變形桿菌在體外需氧生長(zhǎng)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。（十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用變形桿菌在自然界中分布較廣泛，多數(shù)存在于水中、土壤中及污物上。食品中變形桿菌者的污染菌率為3.8%-100%不等，以熟肉、水產(chǎn)品等動(dòng)物性食品的污染菌率較高，涼拌菜、剩飯等也易被污染。（十六）預(yù)防和治療方案1．預(yù)防預(yù)防方法為注意環(huán)境衛(wèi)生，嚴(yán)格做好炊具食具及食物的清潔衛(wèi)生。禁食變質(zhì)食物。食物應(yīng)充分加熱，烹調(diào)后不宜放置過(guò)久，涼拌菜須進(jìn)行嚴(yán)格的衛(wèi)生操作。2．治療一般不必服抗生素，僅需補(bǔ)液、解癥等對(duì)癥處理。重者患者可服用氯霉素、諾氟沙星等抗菌藥物。(1)胃腸炎型主要為對(duì)癥治療。由于該病大多為自限性，不經(jīng)治療，一兩天內(nèi)能自行恢復(fù)。若吐瀉嚴(yán)重，可給予補(bǔ)液及解痙劑。對(duì)重癥者可采用抗菌藥物治療，選用諾氟沙星0.2g/次，4次/d，或用氯霉素0.25-0.5g/次，4次／d，口服。(2)過(guò)敏型以抗組胺療法為主，可選用氯苯那敏4mg/次，3次/d，口服。嚴(yán)重者應(yīng)用氫化可松或地塞米松靜脈滴注。二、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與控制（一）實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類、來(lái)源和危害1．感染性因子的種類根據(jù)其生物學(xué)特性和本中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力范圍，本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子為沙門菌病原體本身。2．感染性因子的來(lái)源(1)用于變形桿菌檢測(cè)的食品和水樣、不明原因腹瀉采集的糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物、血液等樣本。(2)樣本采集和檢測(cè)過(guò)程中涉及的所有實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所。(3)實(shí)驗(yàn)室操作中可能產(chǎn)生的含病原菌的氣溶膠。(4)實(shí)驗(yàn)相關(guān)廢棄物。3．感染性因子造成的危害(1)被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器皿等對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。(2)實(shí)驗(yàn)室含有病原菌的廢棄物對(duì)環(huán)境造成污染。(3)實(shí)驗(yàn)人員暴露后感染。(4)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)活動(dòng)工作中，各種原因?qū)е碌囊后w飛濺或微滴濺出及氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。變形桿菌主要通過(guò)糞一口途徑感染。變形桿菌被攝入后進(jìn)入胃腸道，引起食物中毒，或接觸染疫動(dòng)物而感染，傷口感染可引起敗血癥等疾病。一般不通過(guò)呼吸道途徑傳播。在對(duì)變形桿菌進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)操作時(shí)不會(huì)因氣溶膠的直接吸入造成人員感染。實(shí)驗(yàn)中各種原因?qū)е碌母腥拘砸后w飛濺及微滴濺出，從而污染地面、器物表面及工作人員的手，造成感染性物質(zhì)的意外食入感染；被可能存在感染性病原體的銳器刺傷、割傷可造成皮膚黏膜感染：這兩種是較可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染方式。（二）實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別與風(fēng)險(xiǎn)控制1．實(shí)驗(yàn)方法(l)風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別未采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)；使用新的或變更過(guò)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，未經(jīng)技術(shù)確認(rèn)，可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)。(2)風(fēng)險(xiǎn)控制措施盡量采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，或使用經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)方法；在使用新的或變更過(guò)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。2．樣品采集(1)食品和水樣等樣品采集①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材采樣剪刀或鑷子、密閉盛樣容器等。②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別食品和水樣等樣品中可能存在感染性病原體，采樣人員采樣不規(guī)范、盛裝容器密合不嚴(yán)、玻璃容器意外破損等，可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境；同時(shí)，玻璃容器意外破損和剪刀、鑷子的使用不當(dāng)，存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。③風(fēng)險(xiǎn)控制措施食品和水樣等樣品采集容器必須防水、防漏，容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便容器打破或泄漏時(shí)，能吸收溢出的所有液體。在使用剪刀、鑷子、玻璃容器等銳器時(shí)必須規(guī)范操作，做好防護(hù)，防止刺傷或劃傷。(2)糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物等樣本采集①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材PV螺旋蓋采便盒（管）、玻璃試管或培養(yǎng)皿、采樣棉簽等。②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物等樣本可能存在感染性病原體，采集過(guò)程中存在樣本濺出從而形成小顆粒氣溶膠進(jìn)而污染人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)；工作人員采樣不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位，導(dǎo)致環(huán)境污染和人員感染；破碎玻璃試管或培養(yǎng)皿存在刺傷或劃傷采樣人員的隱患。③風(fēng)險(xiǎn)控制措施采集糞便和嘔吐物等感染性樣品時(shí)，采樣人員應(yīng)戴手套、口罩，必要時(shí)戴防護(hù)眼鏡；采樣動(dòng)作輕柔，采樣容器盡量使用外螺旋蓋塑料管：發(fā)生污染時(shí)，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。(3)血液的采集①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材一次性采血針和塑料采血管、消毒棉簽及一次性利器盒。②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別血液樣品可能存在感染性病原體，采血管密封蓋意外脫落或注射器內(nèi)殘留血滴落，造成血樣濺灑從而污染人員或環(huán)境；采血針頭存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。③風(fēng)險(xiǎn)控制措施使用一次性采血針和真空采血管，采樣人員經(jīng)過(guò)正規(guī)采血培訓(xùn)，并熟練掌握采血技巧。采血前做好個(gè)人防護(hù)（防護(hù)服、乳膠手套、口罩）；認(rèn)真、仔細(xì)、謹(jǐn)慎操作，抽血后的針頭直接放入利器盒內(nèi)，禁止用手直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新套上針頭套；采好血后直立于試管架中，防止倒翻；消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一進(jìn)行消毒處理。3．樣品的包裝和運(yùn)送(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材真空密封采血管、外螺旋蓋玻璃瓶、PV螺旋蓋采樣罐（管）主容器、95千帕樣品運(yùn)輸罐、B類標(biāo)本運(yùn)輸箱（UN3373冷藏箱）、運(yùn)送車輛。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別盛樣容器不堅(jiān)固、密合不嚴(yán)，有可能存在樣品濺灑、溢出、滲漏；使用不合格運(yùn)輸包裝進(jìn)行樣本運(yùn)送，存在玻璃容器或包裝容器意外破損而刺傷或劃傷采送樣人員的隱患。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施盛裝樣品容器必須堅(jiān)固，不易破碎，盡可能選用塑料制品，采樣后必須檢查容器的密合性。樣品的運(yùn)輸需使用三層合格包裝材料。4．樣品接收和前處理(l)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材剪刀、鑷子、振蕩器、均質(zhì)器、均質(zhì)袋、離心機(jī)、生物安全柜、潔凈工作臺(tái)。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別樣品管理員未按實(shí)驗(yàn)室《樣品管理程序》(XJK/CX32)要求接收樣品；樣品前處理時(shí)，打開(kāi)糞便或嘔吐物等感染性樣品包裝的動(dòng)作過(guò)猛，會(huì)造成樣品側(cè)翻；對(duì)食品等圓形物樣品進(jìn)行剪切時(shí)，操作不慎發(fā)生手剪傷；均質(zhì)器均質(zhì)樣本時(shí)發(fā)生均質(zhì)袋破裂，離心操作時(shí)離心管破裂。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施①樣品接收必須在專用的區(qū)域進(jìn)行，合同評(píng)審人員和收樣人員嚴(yán)格按照《樣品管理程序》(XJK/CX32)要求交接樣品，不得擅自打開(kāi)樣品包裝，收樣后及時(shí)洗手。②開(kāi)始檢測(cè)前，對(duì)盛裝感染性材料樣品的容器，必須在生物安全柜中緩慢打開(kāi)，食品和水樣必須在潔凈工作室內(nèi)打開(kāi)，開(kāi)啟容器時(shí)管口不能對(duì)著操作者。③對(duì)食品等固體物樣品取樣，要小心使用剪刀和鑷子，盡可能剪取食物的可食部分，以防止樣品均質(zhì)時(shí)堅(jiān)硬物質(zhì)刺破均質(zhì)袋，造成樣液濺灑。對(duì)含有感染性的樣品進(jìn)行離心振蕩時(shí)，必須將離心蓋封嚴(yán)實(shí)，并關(guān)上離心機(jī)蓋。④實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備應(yīng)急藥箱，當(dāng)發(fā)生手剪傷、離心管或均質(zhì)袋意外破裂、濺出等意外事件時(shí)，及時(shí)對(duì)所有涉及污染的部位、場(chǎng)所進(jìn)行消毒處理。5．樣本檢測(cè)過(guò)程(l)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材培養(yǎng)箱、水浴箱、細(xì)菌鑒定和藥敏測(cè)試儀（ATB儀）、顯微鏡、生物安全柜、振蕩器、吸管和試管、移液器及吸頭、接種環(huán)、培養(yǎng)皿等。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別①對(duì)食品、水樣、糞便和嘔吐物等樣品進(jìn)行變形桿菌菌株分離鑒定、生化試驗(yàn)、血清分型、藥敏試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均涉及活菌操作。在檢測(cè)過(guò)程中移液或混勻震蕩等操作可能釋放的較大顆粒和小液滴，離心振蕩過(guò)程中容器的破碎或滲漏等意外事故，都可能造成感染性物質(zhì)污染操作者的手、操作臺(tái)面、器物表面及地面，從而污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和人，實(shí)驗(yàn)室人員通過(guò)皮膚接觸或黏膜接觸而意外食入。②實(shí)驗(yàn)過(guò)程中未正確操作銳器、玻璃實(shí)驗(yàn)器材意外破碎等，存在人員被割傷和刺傷而導(dǎo)致的接種感染隱患。③樣品檢測(cè)時(shí)試管開(kāi)啟、樣品轉(zhuǎn)移、稀釋混均吹打、劃線分離、涂片染色、離心等操作都可產(chǎn)生氣溶膠，但變形桿菌不通過(guò)吸入感染，實(shí)驗(yàn)室人員通過(guò)氣溶膠感染變形桿菌的風(fēng)險(xiǎn)非常小。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施①開(kāi)展檢測(cè)時(shí)檢測(cè)人員應(yīng)按照二級(jí)生物安全防護(hù)要求做好自身防護(hù)措施。②進(jìn)行食品、水樣等樣品制備、均質(zhì)等操作應(yīng)在潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行；糞便、嘔吐物等所有具有感染性材料的操作必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，必須保證潔凈實(shí)驗(yàn)室和生物安全柜處于正常運(yùn)行狀態(tài)。③進(jìn)行活菌操作時(shí)，應(yīng)在安全柜工作臺(tái)面上放置一塊浸有消毒液的紗布或吸有消毒液的紙，避免感染性物質(zhì)的擴(kuò)散；涉及高濃度或大體積的感染性的材料離心操作時(shí)，應(yīng)選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī)離心。若有意外污染，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒、沖洗并擦干飛濺出的液體。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必須對(duì)桌面、臺(tái)面及時(shí)進(jìn)行消毒處理。④必須使用移液器或吸球移取樣液，嚴(yán)禁用嘴吸液，移液時(shí)旋蓋及移液操作的動(dòng)作要輕緩，所有吸管應(yīng)用棉塞，移液頭盡可能使用帶濾芯的，以減少對(duì)移液器或吸球的污染。⑤為避免接種液從接種環(huán)上滴落，接種環(huán)的直徑應(yīng)為2-3mm并完全封閉，手柄的長(zhǎng)度應(yīng)小于6cm以最大限度減少振動(dòng)。盡可能使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，避免在酒精燈的明火上加熱從而引起感染性物質(zhì)的爆濺。⑥盡可能避免使用注射器及其他銳利的器具，嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液，更不可當(dāng)吸管用，用過(guò)的銳器應(yīng)直接放入利器盒，經(jīng)消毒后廢棄。禁止將使用后的針頭重新套上針頭套。盡可能以塑料器皿代替玻璃器皿，若必須使用玻璃器皿，只能用實(shí)驗(yàn)室級(jí)玻璃（硼硅酸鹽），且任何破碎或有裂紋的器皿都應(yīng)丟棄。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片、玻璃碎片等銳器。⑦在任何可能導(dǎo)致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過(guò)程中，應(yīng)保護(hù)好面部、眼睛和嘴；發(fā)生液體濺出、溢出等事故或明顯暴露于傳染源時(shí)，應(yīng)立即向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告，及時(shí)處理并對(duì)事故的發(fā)生與處理作記錄。6．菌株使用、保存和運(yùn)輸(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材接種針、菌株保存管、振蕩器、生物安全柜、移液器、95千帕樣品運(yùn)輸罐、生物安全運(yùn)送箱和專用運(yùn)送車。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別①工作人員保菌操作不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位、磁珠管等保存容器意外破損、磁珠掉落等會(huì)導(dǎo)致病原菌污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員。②變形桿菌使用和保存未按照《菌（毒）種管理規(guī)程》(XJK/CX37)要求實(shí)施管理，存在菌株被惡意使用及污染環(huán)境等生物安全隱患。③變形桿菌陽(yáng)性菌株上送等運(yùn)輸過(guò)程中，若使用不合格包裝進(jìn)行運(yùn)輸、容器密封不嚴(yán)或運(yùn)輸工具無(wú)安全保障，則可能導(dǎo)致運(yùn)輸過(guò)程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生病原體的擴(kuò)散，甚至樣本丟失的隱患。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施①變形桿菌分離純化及保菌操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，若發(fā)生磁珠管破損、磁珠掉落時(shí)，應(yīng)及時(shí)對(duì)臺(tái)面進(jìn)行消毒處理。②變形桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的使用、保存嚴(yán)格按照《菌（毒）種管理規(guī)程》(XJK/CX37)要求進(jìn)行操作，嚴(yán)格實(shí)行雙人雙鎖保管，嚴(yán)防菌株被惡意使用而造成生物危害。③變形桿菌陽(yáng)性菌株的上送應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行B類運(yùn)輸包裝，攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸許可證”，由專車運(yùn)送，并由專業(yè)人員全程護(hù)送。7．實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒(l)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材70%-75%的酒精、施康清洗消毒液=1\*ROMANI。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別工作完畢后，若不及時(shí)對(duì)工作臺(tái)面、生物安全柜進(jìn)行消毒，有可能會(huì)對(duì)下次操作人員造成污染或感染。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施工作完畢后，及時(shí)對(duì)檢測(cè)所涉及的工作臺(tái)面、地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用稀釋lOO倍的施康清洗消毒液I擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%-75%的酒精擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并正確用肥皂和流水洗手。8．廢棄物處置(l)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別①樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程產(chǎn)生的感染性廢棄物，如食品、水樣等剩余樣品；血液血清及排泄物標(biāo)本；病原菌的培養(yǎng)基、生化鑒定條件和菌種等所有實(shí)驗(yàn)過(guò)程涉及的用品，釋放前未按照規(guī)范要求處理，導(dǎo)致致病因子外泄從而污染環(huán)境或人員。②樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程產(chǎn)生的被病原微生物污染的損傷性廢棄物，如一次性使用采血用具、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿、培養(yǎng)皿等，未按照規(guī)范處理，存在意外刺傷或劃傷工作人員的隱患。(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理應(yīng)遵循《醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例》《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法》《醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)》等相關(guān)法規(guī)要求，分類收集，規(guī)范處置。所有損傷性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的硬質(zhì)、防漏、防銳器刺破的專用容器中。所有感染性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的專用醫(yī)療廢物包裝袋中，經(jīng)高溫高壓滅菌處理后，集中存放至中心指定的醫(yī)療廢棄室，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集，集中處置。同時(shí)，做好廢棄物處置交接記錄，所有相關(guān)記錄應(yīng)定期整理歸檔。（三）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中其他風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別和控制1．電力(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別變形桿菌的分離和鑒定對(duì)溫度有明確要求，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中突然間隙斷電或電力供應(yīng)不穩(wěn)定對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性帶來(lái)一定的影響。實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有布置雙路供電或者相關(guān)儀器未配備不間斷電源。當(dāng)電力供應(yīng)發(fā)生故障時(shí)，可導(dǎo)致設(shè)備突然停止工作，存在實(shí)驗(yàn)活動(dòng)被迫終止等所帶來(lái)的相關(guān)安全風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施盡可能在實(shí)驗(yàn)室布置雙路供電，若客觀條件受限制，則對(duì)變形桿菌檢測(cè)所用的關(guān)鍵儀器須配備不間斷電源。2．電氣操作(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及的電氣操作，包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉、安裝和維修；設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的肩動(dòng)、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過(guò)程可能存在觸電、電擊、造成電氣故障等風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施①電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)若有380V電源插座，需明確標(biāo)識(shí)，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行操作。②新的、改裝過(guò)的或修理過(guò)的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員（如有資質(zhì)的電工）完成電氣安全測(cè)試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。③電氣設(shè)備使用人員接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備中可能引起電氣故障的破損。只有專業(yè)人員可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。④采取措施對(duì)設(shè)備去污染，以降低維護(hù)人員感染的風(fēng)險(xiǎn)。3．實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。當(dāng)水管道意外破裂、排水管道阻塞時(shí)，感染性材料可能溢出，有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，洗消產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進(jìn)行消毒處理，嚴(yán)禁直接排放。按照GB18466中6.1污水取樣與監(jiān)測(cè)要求執(zhí)行。4．實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能存在密封不嚴(yán)的問(wèn)題，當(dāng)感染性材料溢出時(shí)，有污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴(yán)格密封，定期進(jìn)行檢查檢測(cè)，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。5．主要檢測(cè)儀器設(shè)備(1)細(xì)菌鑒定和藥敏測(cè)試儀（ATB儀）、顯微鏡等設(shè)備①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別對(duì)可疑變形桿菌進(jìn)行鑒定時(shí)，需要使用ATB儀、定量熒光PCR儀、核酸提取液、凝膠成像儀等設(shè)備，如果不按操作規(guī)程操作，則會(huì)導(dǎo)致病原體濺出、滲漏而污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。②預(yù)防控制措施嚴(yán)格按ATB儀等沒(méi)備操作規(guī)程操作和維護(hù)，每次使用完畢后對(duì)設(shè)備箱體及可能污染的實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行消毒。(2)離心機(jī)①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別在分離血清、濃縮菌液等檢測(cè)活動(dòng)中會(huì)使用到離心機(jī)，離心過(guò)程中可能存在離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心腔被污染的風(fēng)險(xiǎn)。②預(yù)防控制措施離心時(shí)配備耐離心壓力的外螺旋蓋的離心管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力。規(guī)范正確操作，定期維護(hù)，確保離心機(jī)性能正常，每次做好清潔消毒和使用記錄，定期進(jìn)行功能檢查。6．生物安全設(shè)施設(shè)備(1)生物安全柜①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別變形桿菌大量活菌操作必須在生物安全柜中進(jìn)行，若不按照安全柜操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)與年度監(jiān)測(cè)，其防護(hù)屏障作用會(huì)明顯降低，甚至消失，失去安全防護(hù)效果；若長(zhǎng)時(shí)間使用或未及時(shí)更換HEPA過(guò)濾膜，會(huì)使其功能喪失，造成工作窗口氣流速度降低或流向紊亂；使用后若不進(jìn)行徹底消毒處理，會(huì)造成使用和維護(hù)人員間接接觸污染。②預(yù)防控制措施正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受相關(guān)的操作、維護(hù)培訓(xùn)，日常操作和維護(hù)嚴(yán)格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說(shuō)明書進(jìn)行。每年請(qǐng)有檢測(cè)資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對(duì)生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、氣流、塵埃粒子、紫外線強(qiáng)度等關(guān)鍵要素的檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行沉降菌檢測(cè)，確保其正常性能。一旦生物安全柜的使用造成污染，應(yīng)及時(shí)消毒。(2)高壓滅菌器①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別變形桿菌檢測(cè)過(guò)程中被病原菌污染的玻璃、耐高壓的實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)廢棄物要進(jìn)行高壓滅菌消毒才可移出實(shí)驗(yàn)室，若不按照高壓滅菌器操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)，其效果會(huì)明顯降低，甚至失效，失去去污染與無(wú)害化的作用；若長(zhǎng)時(shí)問(wèn)使用又不定期檢測(cè)滅菌效果，對(duì)其滅菌效果無(wú)從考證，可能產(chǎn)生功能缺損，存在滅菌不徹底從而引起污染的隱患：在長(zhǎng)期關(guān)停期間，若內(nèi)部水分不及時(shí)排干，將會(huì)使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。②預(yù)防控制措施采用下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染；操作人員持證上崗，規(guī)范操作，定期維護(hù)，確保高壓滅菌器性能正常；定期進(jìn)行檢定與核查，做好使用記錄。日常進(jìn)行滅菌效果檢測(cè)，以保證滅菌質(zhì)量。(3)個(gè)人防護(hù)用品①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別個(gè)人防護(hù)用品若穿戴不規(guī)范、大小不合適或使用過(guò)期的防護(hù)用品等，則將會(huì)導(dǎo)致防護(hù)效果降低，甚至失效。②預(yù)防控制措施進(jìn)行變形桿菌大量活菌操作時(shí)，個(gè)人防護(hù)采取二級(jí)生物安全防護(hù)水平，選擇大小合適、有效的防護(hù)用品。(4)應(yīng)急救治設(shè)施和用品①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別若實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過(guò)期，則導(dǎo)致急用時(shí)無(wú)法發(fā)揮作用。②預(yù)防控制措施在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正確配備洗眼器，確保功能正常。配備的75%乙醇、碘伏或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)并在有效期內(nèi)使用，由專人負(fù)責(zé)管理，定期維護(hù)、清理和更新。(5)消毒滅菌劑①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別消毒劑產(chǎn)品無(wú)生產(chǎn)許可證、過(guò)期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，將會(huì)導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低或?qū)ξ锲犯g性增加、對(duì)皮膚造成刺激等問(wèn)題。②預(yù)防控制措施選擇符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時(shí)間、消毒濃度（劑量）進(jìn)行消毒，避免使用過(guò)期產(chǎn)品；消毒過(guò)程中消毒人員應(yīng)做好必要的個(gè)體防護(hù)，防止發(fā)生意外。根據(jù)變形桿菌特點(diǎn)，選用70%-75%酒精和稀釋10-25倍、50-100倍、200倍的施康消毒劑I（主要成分為次氯酸鈉）作為實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑。7．管理體系的風(fēng)險(xiǎn)(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別管理體系（包括應(yīng)急預(yù)案）是否健全和完善，是否符合實(shí)際管理要求，程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程是否科學(xué)和具有可操作性，是能否確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理，體系文件與實(shí)際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)?，就都可能帶?lái)安全風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施定期開(kāi)展對(duì)管理體系的評(píng)審，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)修訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效運(yùn)行。（四）工作人員的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施l．人員數(shù)量和素質(zhì)(1)人員數(shù)量①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別人員過(guò)少會(huì)因缺少相互提示監(jiān)督或因工作量增大而導(dǎo)致操作過(guò)程中工作失誤增加，風(fēng)險(xiǎn)增加。②預(yù)防控制措施采樣和檢測(cè)人員的數(shù)量應(yīng)與工作量相匹配，盡量有2名工作人員同時(shí)進(jìn)行采樣和檢測(cè)工作。(2)人員結(jié)構(gòu)①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室新進(jìn)人員沒(méi)有高資歷人員帶教操作，不能很好應(yīng)對(duì)意外事件，風(fēng)險(xiǎn)增加。②預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理，新進(jìn)人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。(3)職業(yè)操守①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別變形桿菌檢測(cè)存在一定的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，若責(zé)任心不強(qiáng)的人員參與該項(xiàng)工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會(huì)安定的可能性較大。②預(yù)防控制措施加強(qiáng)職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。2．健康管理(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。若實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相關(guān)人員出現(xiàn)呼吸道或者消化道感染癥狀、機(jī)體免疫力低下等其他不適合工作的狀況，職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)增加。(2)預(yù)防控制措施建立健康申報(bào)制度，遇有呼吸道或者消化道感染及其他不適合工作的情況時(shí)，應(yīng)及時(shí)向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告并暫停工作。3．人員資質(zhì)(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測(cè)人員不具備衛(wèi)生檢測(cè)相關(guān)學(xué)歷教育背景，不熟悉變形桿菌檢測(cè)方法及操作規(guī)范，未執(zhí)行相關(guān)的專業(yè)知識(shí)培訓(xùn)和考核，并未獲得上崗證，無(wú)法保證工作質(zhì)量和安全。(2)預(yù)防控制措施檢測(cè)人員必須是檢驗(yàn)或相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，經(jīng)過(guò)上崗培訓(xùn)和持證上崗。4．生物安全培訓(xùn)要求(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測(cè)人員、輔助人員、后勤保障人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)人員上崗前沒(méi)有接受嚴(yán)格的生物安全，以及相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易造成生物安全事故的發(fā)生。(2)預(yù)防控制措施檢測(cè)人員、輔助人員、后勤保障人員每年參加本中心組織的生物安全知識(shí)或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。上崗前熟練掌握生物安全儀器設(shè)備、設(shè)施操作技術(shù)，具備相關(guān)的安全防護(hù)能力。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員參與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)前必須進(jìn)行生物安全知識(shí)的培訓(xùn)，在帶教老師的監(jiān)督下工作。5．應(yīng)急事件處理能力(l)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室人員上崗前沒(méi)有接受實(shí)驗(yàn)室意外事故處理、職業(yè)暴露后預(yù)防等突發(fā)事件處置的培訓(xùn)，一旦發(fā)生意外事件，就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全事件。(2)預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照《實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度》和《病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急事件的處置，強(qiáng)化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力。（五）實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施1.主要的實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)(l)實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修、檢定／校準(zhǔn)、檢測(cè)驗(yàn)證（如主要設(shè)施設(shè)備的檢測(cè)驗(yàn)證）和更換（如高效過(guò)濾器等的更換）等。(2)實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境的保潔、實(shí)驗(yàn)器材的清洗消毒。(3)實(shí)驗(yàn)室外人員參觀實(shí)驗(yàn)室和上級(jí)部門對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢查。(4)任何其他人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)外的行為。2.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別(1)上述人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事相關(guān)活動(dòng)，特別是不慎打翻、打破標(biāo)本管或損壞儀器零部件等情況，可能存在實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)。(2)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過(guò)程中某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀，存在影響實(shí)驗(yàn)活動(dòng)正常運(yùn)行或者導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞的風(fēng)險(xiǎn)。3．預(yù)防控制措施(l)實(shí)行人員準(zhǔn)入、登記制度。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事檢測(cè)活動(dòng)前，必須先進(jìn)行生物安全和實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度的培訓(xùn)。若中心實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員確實(shí)需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)活動(dòng)，或上級(jí)部門需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)有中心實(shí)驗(yàn)室人員陪同。(2)實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員必須要有相應(yīng)的專業(yè)知識(shí)，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，提供安全指南，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)協(xié)助、指導(dǎo)和規(guī)范進(jìn)入人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的活動(dòng)并對(duì)其安全行為進(jìn)行監(jiān)督，進(jìn)入人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)管理規(guī)定，以確保人員和環(huán)境安全。(3)進(jìn)入人員未經(jīng)許可絕對(duì)不能私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)志的危險(xiǎn)品，絕不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。(4)在生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過(guò)程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)造成的事故進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)洋估，并采取應(yīng)對(duì)措拖。按專業(yè)技術(shù)要求進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備的維護(hù)維修時(shí)，不能私自動(dòng)用其他設(shè)施設(shè)備。若導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞時(shí)，應(yīng)及時(shí)報(bào)告。(5)當(dāng)需要更換HEPA過(guò)濾膜或高效過(guò)濾器時(shí)，應(yīng)先對(duì)高效過(guò)濾器、HEPA過(guò)濾膜等作原位消毒后，專業(yè)人員才能進(jìn)行更換。(6)為確保自己和他人的安全，禁止未穿防護(hù)服的人員隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。同時(shí)也禁止穿防護(hù)服的人員走出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。(7)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)工作時(shí)，動(dòng)作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶膠。(8)離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前，必須正確洗手。（六）被誤用和惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)防控制措施1．主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別陽(yáng)性標(biāo)本未明確標(biāo)識(shí)，未嚴(yán)格實(shí)行雙人雙鎖管理，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后不及時(shí)對(duì)操作場(chǎng)所進(jìn)行消毒，工作人員在不知情的情況下可能誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備等，導(dǎo)致人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、人員受傷或設(shè)施設(shè)備損壞等事故。2．預(yù)防控制措施(l)實(shí)行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。(2)所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備，以及其他一切實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，不得私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何不熟悉物品。(3)發(fā)生事故時(shí)必須及時(shí)報(bào)告并作必要的處理和記錄。(4)實(shí)驗(yàn)所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識(shí)。(5)陽(yáng)性標(biāo)本嚴(yán)格實(shí)施雙人雙鎖管理，上送的陽(yáng)性樣本必須經(jīng)中心蓋章批準(zhǔn)，攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸許可證”，由專車運(yùn)送，并由專業(yè)人員全程護(hù)送。（七）相關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示目前尚未檢索到變形桿菌檢測(cè)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室人員感染的相關(guān)報(bào)道，但仍然存在實(shí)驗(yàn)室人員在進(jìn)行采樣、檢驗(yàn)、廢棄物處置等工作過(guò)程中，因個(gè)人防護(hù)不到位或其他意外而導(dǎo)致感染的風(fēng)險(xiǎn)。三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及安全防護(hù)措施（一）紫外線l.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室、潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傳遞窗和生物安全柜均使用紫外線燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線波長(zhǎng)為250-280nm，主要影響眼睛和皮膚，引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開(kāi)啟時(shí)，人員在不知情的情況下進(jìn)入可受到傷害。2．預(yù)防控制措施在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面固定紫外線危害的標(biāo)識(shí)，提醒實(shí)驗(yàn)人員小心紫外線危害。在進(jìn)行紫外線消毒時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對(duì)人體的危害。（二）輻射1．主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室籌建選址時(shí)未對(duì)周圍輻射源進(jìn)行排查，使用含輻射的儀器未嚴(yán)格管理，存在輻射源或輻射事故間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。2．預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室籌建選址時(shí)對(duì)周邊建筑群可能存在的輻射源進(jìn)行嚴(yán)格排查，實(shí)驗(yàn)室不使用有輻射源的儀器設(shè)備，輻射造成的風(fēng)險(xiǎn)基本不予考慮。（三）施康清洗消毒劑I1．主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別施康清洗消毒劑工屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%-5.55%，次氯酸鈉為主要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液?huì)殘留在空氣中不揮發(fā)，長(zhǎng)期使用會(huì)使人感到頭疼、惡心，刺激黏膜，對(duì)于有體質(zhì)過(guò)敏的人，還容易引發(fā)過(guò)敏、哮喘疾病等。高濃度的含氯消毒劑對(duì)人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用，可使人流淚、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜，嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者出現(xiàn)躁動(dòng)、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2．安全防護(hù)措施按照使用說(shuō)明，根據(jù)消毒對(duì)象不同而配制不同的稀釋倍數(shù)，避免使用不必要的高濃度的消毒液，稀釋和使用時(shí)戴好手套，消毒后可及時(shí)開(kāi)窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對(duì)人體的危害。（四）其他1．作用風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強(qiáng)光和噪聲對(duì)人員造成損害。2．安全防護(hù)措施對(duì)實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，確保合格，避免強(qiáng)光和噪聲對(duì)人員的損害。四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施1．主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別(l)超負(fù)荷用電，電線過(guò)長(zhǎng)。(2)電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，例如電纜的絕緣層破舊或損壞。(3)用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。(4)儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)閉電源。(5)使用的儀器設(shè)備不是專為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)等。(6)易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。(7)不相容化學(xué)品沒(méi)有正確隔離。(8)在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。(9)通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。2．預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室采取以下預(yù)防控制措施以避免火災(zāi)發(fā)生，保證發(fā)生火災(zāi)后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室。(1)定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負(fù)荷，對(duì)易燃、易爆等危險(xiǎn)品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。(2)實(shí)驗(yàn)室配備滅火器。放置在易取的地點(diǎn)，擺放部位張貼滅火器標(biāo)識(shí)。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，幫助人員撤離火場(chǎng)；對(duì)滅火器進(jìn)行定期檢查和維護(hù)，確保其有效使用。(3)實(shí)驗(yàn)室需裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見(jiàn)的“緊急出口”標(biāo)識(shí)；當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時(shí)，實(shí)驗(yàn)室所有出口的鎖必須處于開(kāi)啟狀態(tài)，出口設(shè)計(jì)應(yīng)保證在經(jīng)過(guò)高危險(xiǎn)區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一個(gè)開(kāi)放空間。(4)走廊、流通區(qū)域不得放置障礙物，不受人員流動(dòng)和滅火設(shè)備移動(dòng)的影響。(5)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識(shí)。實(shí)驗(yàn)室每年對(duì)工作人員進(jìn)行消防知識(shí)培訓(xùn)，包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動(dòng)等。五、自然災(zāi)害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與安全防護(hù)措施自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。（一）水災(zāi)l.風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別水災(zāi)可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2.安全防護(hù)措施(l)在安全手冊(cè)中制訂《實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對(duì)所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。(2)實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報(bào)警時(shí)，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時(shí)采取對(duì)策，第一時(shí)間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施，并在受過(guò)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完成菌毒種和人員的安全轉(zhuǎn)移工作。（二）地震1．風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別發(fā)生地震等自然災(zāi)害會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，存在人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢的風(fēng)險(xiǎn)。2．安全防護(hù)措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，保證災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室，減少對(duì)人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次，對(duì)封鎖區(qū)進(jìn)行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個(gè)人防護(hù)的前提下對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理，清理到樣品保存地點(diǎn)。如果保藏樣品的容器沒(méi)有被破壞，可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實(shí)驗(yàn)室存放。如果保藏樣品的容器已有破壞和發(fā)生外溢，應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案（一）實(shí)驗(yàn)室生物安全事件（事故）處理措施(l)當(dāng)生物安全柜或潔凈實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)持續(xù)正壓時(shí)，室內(nèi)人員應(yīng)立即停止操作，通知運(yùn)行保障人員采取措施恢復(fù)負(fù)壓。如果不能及時(shí)恢復(fù)和保持負(fù)壓，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)，按規(guī)程退出。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電，造成具有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險(xiǎn)的事故和污染時(shí)，工作人員除了采取緊急措施外，立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。(2)離心過(guò)程中離心管破裂時(shí)，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機(jī)停止工作，并靜止30min。然后緩慢打開(kāi)離心機(jī)蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min，然后棄去消毒液和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。(3)發(fā)生污染物潑濺或溢出時(shí)，立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上10-25倍稀釋的施康消毒液，作用至少30min，方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所有這些操作過(guò)程中都應(yīng)戴手套。如發(fā)生大范圍污染物擴(kuò)散事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場(chǎng)。待其查清情況，確定消毒方案，組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。（二）其他緊急事件（事故）處理措施在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室人員要熟悉緊急撤離的情況及緊急撤離的路線標(biāo)識(shí)。在實(shí)驗(yàn)室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi)、爆炸或其他危險(xiǎn)情況時(shí)，為確保工作人員的安全，要進(jìn)行緊急撤離。所有實(shí)驗(yàn)室人員須了解緊急撤離的行動(dòng)計(jì)劃、撤離路線和緊急撤離的集合地點(diǎn)，每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備使用和采取相應(yīng)急救措施。（三）生物安全及其他緊急事件（事故）報(bào)告和記錄(l)發(fā)生生物安全及其他緊急事件時(shí)，在緊急處理的同時(shí)必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會(huì)報(bào)告。(2)對(duì)于生物安全事件必須進(jìn)行登記，記錄發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)、詳細(xì)經(jīng)過(guò)及處理方法等。七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險(xiǎn)管理（一）生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)、世界衛(wèi)生組織、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機(jī)構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南、標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。（二）危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)估(見(jiàn)表7-4)表7-4變形桿菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)估序號(hào)潛在危險(xiǎn)因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險(xiǎn)措施合理性殘留風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)可控程度1樣品運(yùn)輸過(guò)程中容器意外側(cè)翻、泄漏、破裂造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控2樣品的接收、開(kāi)啟及加樣等常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中產(chǎn)生的氣溶膠中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控3離心、加樣等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中意外事故造成盛裝標(biāo)本容器破裂、溢出瞬間產(chǎn)生的氣溶膠中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控4檢測(cè)未經(jīng)滅活的樣品對(duì)儀器與環(huán)境造成的污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控5標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)施設(shè)備等被誤用的風(fēng)險(xiǎn)中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控6陽(yáng)性標(biāo)本被惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)高度較小可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控7實(shí)驗(yàn)器材未經(jīng)規(guī)范消毒造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控8廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物擴(kuò)散中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控9滅菌裝置不符合要求，滅菌不徹底造成污染中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控10檢測(cè)人員和工勤人員被銳器誤傷造成職業(yè)暴露中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控11檢測(cè)人員個(gè)人防護(hù)